계란 누워 분석 : C. 예인자의 계란 누워 행동을 정량화하는 방법

Overview

C. 알 낳는 행동은 발달, 생식 및 해부학 연구에서 중요한 정보를 제공 할 수 있습니다.  이 비디오는 계란 누워 분석의 중요한 단계를 소개하고 약물이 생식 독성에 대한 테스트되는 샘플 실험을 보여줍니다.

Protocol

이이경과 강형구, 케노하비디스 아레건의성장과 재생산에 대한 화학물질의 효과 측정, 제이비스 익스펙트. (2017).

1.C. 예레간 계란 누워 분석

1. 20°C에서 젊은 성인 단계까지 64h(첫 출생 전)에 대한 DMSO 또는 에토포사이드를 포함하는 NGM 플레이트상에 연령 동기화 된 계란을 배양한다.
   참고: 성장 측정 실험에서 웜을 사용하는 것은 선택 사항입니다. 성장 측정과 계란 누워 분석법을 함께 하는 것이 편리합니다.
2. 5 명의 성인 웜을 화학 물질 (조건 1, 계란에서 젊은 성인 단계까지 일정 기간 내에 화학 처리) 또는 동일한 화학 적 전처리 (상태 2, 전반적인 실험 기간을 통해 화학 물질의 지속적인 노출)를 포함하는 새로운 NGM 플레이트로 전송한 다음 24 시간 동안 배양합니다.
   참고: 각 치료에 대해 3-5 NGM 플레이트를 사용하여 복제하는 것이 좋습니다. 이러한 복제는 통계 분석에 사용할 수 있습니다.
3. 위에서 설명한 대로 새로운 NGM 플레이트로 옮기고 매일 계란 수를 계산합니다. 기어 다니고, 죽었으며, 내부적으로 부화된 벌레를 세워보라고 한다.
4. 벌레가 일반적으로 5 일 안에 더 이상 알을 낳지 때까지 이 단계를 반복하십시오.
5. 각 접시에서 벌레 당 누워 계란의 수를 계산하고, 누워 계란의 총 수를 결정하기 위해 5 일 동안 매일 이러한 값을 합산.
   참고: 계산에서 크롤링하고 내부적으로 부화한 웜 수를 제외합니다.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Caenorhabditis elegans N2	Caenorhabditis Genetics Center (CGC)		Wild type
Dimethyl sulfoxide	Sigma, USA	D2650
Escherichia coli OP50	Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Etoposide	Sigma, USA	E1383
35 × 10 mm Petri dish	SPL Life Sciences, South Korea	10035
Stereo microscope	Nikon, Japan	SMZ800N