产卵分析：量化C.elegans产卵行为的方法

Overview

C. 卵 子产卵行为可以为发育、生殖和解剖学研究提供重要信息。 该视频介绍了产卵检测的重要步骤，并展示了一个样本实验，其中药物被测试生殖毒性。

Protocol

李和康，测量化学物质对卡诺哈布迪炎电子教徒生长和繁殖的影响，J.维斯Exp。(2017).

1.C 伊莱甘斯蛋产分析

1. 在含有 DMSO 或 etoposide 的 NGM 板上孵育年龄同步的卵子，持续 64 小时（第一次出生前），直到 20 °C 的年轻成人阶段。
   注： 使用生长测量实验中的蠕虫是可选的。一起做生长测量和产卵检测很方便。
2. 将5个成年蠕虫转移到新的NGM板中，不含化学品（条件1，在一定时间内进行化学处理，从卵子到年轻的成人阶段）或含有相同化学预处理的新NGM板（条件2，在整个实验期间连续接触化学品），然后孵育它们24小时。
   注： 建议每次处理使用 3-5 个 NGM 板进行复制：这些复制品可用于统计分析。
3. 转移到新的NGM板，如上所述，每天计算鸡蛋的数量。数一数爬走、死亡和内部孵化的蠕虫。
4. 重复这些步骤，直到蠕虫不再产卵，通常在5天内。
5. 计算每个盘子中每只蠕虫产卵的数量，并每天计算这些值5天，以确定产卵总数。
   注：排除从计算中爬出并在内部孵化的蠕虫数量。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Caenorhabditis elegans N2	Caenorhabditis Genetics Center (CGC)		Wild type
Dimethyl sulfoxide	Sigma, USA	D2650
Escherichia coli OP50	Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Etoposide	Sigma, USA	E1383
35 × 10 mm Petri dish	SPL Life Sciences, South Korea	10035
Stereo microscope	Nikon, Japan	SMZ800N