Overview
이 비디오는 생체 내 전기 포라기에서 설명, 이는 성인 제브라피시에 ependymoglial 세포로 DNA 전달을위한 기술이다.
Protocol
1. 전기 포기
- 스폰지에 보관하면서 주사 설정에서 물고기를 제거합니다.
- 초음파 젤에 전극의 끝의 내부 측면을 침수.
- 소량의 초음파 젤로 생선 텔뇌스팔론을 덮습니다.
- 물고기 머리를 전극 사이에 배치하고, 물고기의 머리의 복부 측에 양극을 배치하고 등쪽(그림1C)에음극을 배치하면서 여전히 물고기의 몸을 스폰지에 고정시합니다. 이것은 심실 영역에 위치한 ependymoglia를 전기화하는 데 필요한 전류의 흐름의 방향을 설정합니다.
- 전극을 텔렌스팔론(도1 C)에대해 부드럽고 정확하게 누릅니다. 발 페달로 전류를 관리합니다. 5개의 펄스가 모두 끝날 때까지 전극을 제자리에 고정합니다.
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Representative Results
그림 1: 에버릿제 브라위스 텔뇌스팔론의 관상 동맥 절의 회로도 표현. (A)제브라피쉬 텔뇌스팔론의 관상 부단의 계획, 심실 표면을 일렬로 세우고 심실 심실 벽을 구축하는 에펜디몰리올 세포의 위치를 강조한다. 등산 연골 층은 두 반구를 연결하고 심실 (V)을 덮고 있으며, 두 개의 세포 층 사이에 위치한 ependymoglial 및 ependymal. (B)왼쪽에서 위에서 찍은 제브라피쉬 헤드의 사진이 흰색 파선으로 텔렌스팔론의 위치를 강조합니다. 유리 모세관은 모세관 삽입을 위한 표적 사이트와 함께 빨간색으로 묘사됩니다. 오른쪽에 사진은 빨간색 플라스미드 주사의 위치를 보여주는 제브라피쉬 뇌의 회로도입니다. 유리 모세관은 텔렌스팔론을 만지지 않으며 플라스미드가 뇌막에 텔렌스팔론 바로 위에 주입된다는 점에 유의해야합니다. T = 텔렌스팔론, OT = 광학 텍텀. (C)왼쪽에 묘사된 제브라피쉬 헤드(side view)의 사진은, 오른쪽에는 텔렌세팔론을 표적으로 하기 위해 전극의 위치를 보여주는 헤드(side view)의 묘사이다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ultrasound gel | SignaGel, Parker laboratories INC | 15-60 | Electrode Gel |
| BTX Tweezertrodes Electrodes | Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus | 45-0486 | 1mm diameter |
| Electroporation device | BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus | 45-0662 |
