Summary
동시에 문화 네 개의 힘줄을 로딩에 대한 체외 시스템에 새로운가 설명되어 있습니다.
Abstract
과용으로 인한 힘줄 (예 : 손목 tendonitis, epicondyltis)에 부상은 스포츠 활동과 직장에서 흔히 있습니다. 대부분의 반복, 높은 힘 손으로 활동과 관련 있습니다. 순환 로딩으로 인해 세포 및 구조 손상의 메커니즘은 잘 알려져 있지 않습니다. 이 비디오의 목적은 동시에 조직 문화 네 개의 힘줄을 로드할 수있는 새로운 시스템을 제시하는 것입니다. 비디오 멸균 조직 수확 방법과 어떻게 힘줄이 후 미디어에 포장되어 37에서 관리하고 있습니다 클램핑 시스템 ° C.에로드됩니다 설명 다른 하나는 선형 액추에이터로 이동하는 동안 하나의 클램프를 고정됩니다. 힘줄 인장력은 모바일 클램프 시리즈로드 셀로 감시하고 있습니다. 액추에이터는 LabView 프로그램 제어됩니다. 네 개의 힘줄이 반복 하중, 반복 속도, 로딩의 속도와 기간을 다른 패턴으로 로드할 수 있습니다. 로딩은 48 시간에 몇 분 동안 계속할 수 있습니다. 로딩의 끝 부분에서 힘줄을 제거하고 중간 물질이 생화 학적 분석을위한 추출. 이 시스템은 유전자 발현과 힘줄의 구조적 변화에 대한 패턴을 로딩의 효과 조사를위한 수 있습니다. 궁극적으로, 과용으로 인한 부상의 메커니즘은 치료 및 예방에 적용되는 결과와 함께 공부하실 수 있습니다.
Protocol
- 태아 소 혈청, 난 - 글루타민, 항생제 및 아스코르비 산과 보충 미디어 CO 2 - 독립 미디어
- 50 ML 원심 분리기 튜브로 나누어지는 40 ML (각 힘줄 1)
- 15 ML의 원심 분리기 튜브로 나누어지는 10 ML (각 힘줄 1)
- 수술 도구, 압력솥 시트, 핀셋과 압력솥의 토크 렌치를 소독
- 숙박 70 % 에탄올에 몸을 담글 수에 의해 클램프 및 강제 마이크로 미터 도움말을 소독
- 토끼의 후면 발톱에서 수확 힘줄. 토끼는 더 이상 2보다 시간 전 euthanized되어 있어야합니다.
- 15 ML의 원심 관에 넣어 힘줄 미디어로 가득
- 멸균 분야를 확립하기 위해 소독 압력솥 시트를 배치
- 힘줄의 단면적을 측정
- 마이크로 미터의 장소 마이크로 미터 팁, 제대로 정렬
- 종료로 그립 힘줄
- 홈에 얇은 힘줄이 부분을 맞춤
- 조교 장소 50g 무게를 가지고
- 30 초 정도 기다려 (CSA = X 두께 1.3) 두께를 읽어
- 15 ML의 원심 분리기 튜브의 장소 힘줄 위로
- 읽어 각 힘줄로 반복
- 베이스에서 액추에이터를 제거
- 각각의 힘줄에 대한 멸균 거즈에서 5mm 조각으로 3mm 40mm 스트립 한하여 두 15mm 컷
- 말초 클램프의 홈 사이에 각 단단히 스트립과 장소를 롤
- 클램프, 근위 클램프의 말초 클램프와 힘줄의 fibrocartilage 지역에있는 힘줄의 말초 끝에 원심 분리기 튜브의 힘줄과 장소를 제거
- 플레이스 3x5 거즈 힘줄의 말초 끝에 위에 조각하고, 클램프를 확보
- 보안 근위 클램프, 힘줄을 보장하는 것은 클램프가 강화되면 그것이 긴장감 아래 아니라는 것을 클램프 사이에 충분한 이완에 부합 남아있다. 1N - M으로 클램프를 조여
- 플레이스 50ml 원심 튜브베이스에 미디어
- 자료 플레이스 액추에이터
- 읽어 각 힘줄로 반복
- 물 목욕을 통해 플레이스 기지
- 로딩 프로토콜
- 조건 힘줄
- 0.5N 부하 측정 힘줄의 길이를 (이것은 게이지의 길이)을 적용
- 주기적 로딩을 적용
- 베이스에서 액추에이터를 제거
- 클램프의 릴리스 힘줄
- 프로세스 힘줄
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Discussion
동영상은 조직 문화에서 네번이나 살고 힘줄 최대 동시 로딩을위한 새로운 시스템을 제공합니다. 일반 로딩 기간이이 2~48시간 있습니다. 로딩 후, 힘줄을 제거하고 유전자 발현을위한 처리. 시스템은 힘줄의 퇴행성 변화와 관련된 유전자의 변화에 로딩 패턴의 효과의 조사 수 있습니다. 이러한 실험은 반복 하중과 관련된 부상 메커니즘에 몇 가지 통찰력을 제공할 수 있습니다. 또한 조직의 손상을 일으킬 수 하중에 대한 통찰력을 제공합니다. 궁극적으로, 그 결과는 힘줄과 인대에 남용의 부상을 예방하고 치료하는 데 사용할 수 있습니다.
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References
- Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control. Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).
- Asundi, K. R., Rempel, D. M. Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model. Clin Biomech. , In Press Forthcoming.
- Asundi, K. R., Rempel, D. M. MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon. Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.