Summary
ووصف النظام الجديد في المختبر للتحميل في وقت واحد four الأوتار في الثقافة.
Abstract
اصابة في وتر (مثل التهاب الأوتار في المعصم ، epicondyltis) بسبب الإفراط شائعة في الأنشطة الرياضية وأماكن العمل. وترتبط معظم مع ارتفاع المتكررة الأنشطة ناحية القوة. ليست آليات تلف الخلايا والهيكلية بسبب التحميل الدوري معروفة جيدا. الغرض من هذا الفيديو هو أن يقدم النظام الجديد الذي يمكن تحميل في وقت واحد four الأوتار في مجال زراعة الأنسجة. فيديو يصف أساليب الحصاد الأنسجة المعقمة وكيف يتم تحميلها على الأوتار على نظام التثبيت الذي يغمر لاحقا في وسائل الإعلام والحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية. هو ثابت واحد المشبك بينما تم نقل الآخر مع المحرك الخطي. ويتم رصد قوة الشد وتر مع تحميل خلية في سلسلة مع الشبك المتحرك. يتم التحكم في المحركات مع برنامج LABVIEW. ويمكن تحميل الأوتار four متكررة مع أنماط مختلفة من التحميل ، ومعدل التكرار ، ومعدل التحميل ، ومدتها. ويمكن تحميل يستمر لبضع دقائق إلى 48 ساعة. في نهاية التحميل ، ويتم إزالة الأوتار ومنتصف مادة مشتقة للتحاليل الكيميائية الحيوية. هذا النظام يسمح للتحقيق في آثار على تحميل أنماط التعبير الجيني والتغيرات الهيكلية في الوتر. وفي نهاية المطاف ، يمكن لآليات الإصابة بسبب الاستخدام المفرط يكون مع نتائج الدراسات التطبيقية للعلاج والوقاية.
Protocol
- استكمال وسائل الاعلام CO 2 وسائل الإعلام المستقلة مع مصل بقري جنيني ، ل الجلوتامين ، والمضادات الحيوية ، وحمض الأسكوربيك
- قسامة 40 مل إلى 50 مل أنابيب الطرد المركزي (1 لكل وتر)
- قسامة 10 مل إلى 15 مل أنابيب الطرد المركزي (1 لكل وتر)
- تعقيم الأدوات الجراحية ، وصحائف الأوتوكلاف ، ملاقط ووجع عزم الدوران في الأوتوكلاف
- تعقيم المشابك ونصائح ميكرومتر قوة من جانب تمرغ في الايثانول 70 ٪ بين عشية وضحاها
- الأوتار الحصاد من الكفوف الخلفي من الأرانب. كان ينبغي أن يكون الأرنب الموت الرحيم لا يزيد عن 2 ساعة.
- الأوتار مكان في 15 مل أنبوب الطرد المركزي ملأت مع وسائل الاعلام
- وضع ورقة الأوتوكلاف معقم لإنشاء حقل معقمة
- قياس مستعرضة مجال وتر
- نصائح حول مكان ميكرومتر ميكرومتر ، تؤيد بشكل صحيح
- وتر قبضة من تاريخ إنتهاء
- أنحف تناسب القسم وتر في الأخدود
- وقد مساعد الوزن مكان 50G
- انتظر 30 ثانية ، قراءة سماكة (CSA س = سمك 1.3)
- مكان العودة وتر في 15 مل أنبوب الطرد المركزي
- أكرر مع كل وتر ليتم تحميلها
- إزالة المحرك من قاعدة
- قطع اثنين 15mm 40mm بواسطة شرائط واحد 3mm 5mm قطعة من الشاش المعقم لكل وتر
- كل لفة الشريط بإحكام وقعت بين أخاديد المشبك القاصي
- إزالة أنبوب وتر من أجهزة الطرد المركزي ومكان على المشبك ، ونهاية البعيدة للوتر على المشبك القاصي ومنطقة مليف في وتر على المشبك الداني
- قطعة شاش 3x5 مكان على رأس نهاية البعيدة للوتر ، وتأمين المشبك
- المشبك القريبة آمنة ، وضمان وتر لا تزال محاذاة بين المشابك والركود مع ما يكفي من أنه ليس في إطار التوتر عندما يتم شد المشابك. المشابك لتشديد 1N م
- أنبوب مكان 50ml الطرد المركزي مع وسائل الاعلام في القاعدة
- مكان المحرك في قاعدة
- أكرر مع كل وتر ليتم تحميلها
- قاعدة أكثر من مكان حمام ماء
- تحميل بروتوكول
- مسبق الأوتار
- تطبيق 0.5N تحميل وتر قياس ، وطول (وهذا هو مقياس طول)
- تحميل تطبيق دوري
- إزالة المحرك من قاعدة
- وتر الإفراج عن المشابك
- عملية وتر
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
شريط فيديو يعرض نظام جديد للتحميل في وقت واحد لمدة تصل إلى أربع الأوتار يعيشون في زراعة الأنسجة. فترات التحميل النموذجية هي 2 إلى 48 ساعة. بعد التحميل ، ويتم إزالة الأوتار وتجهيزها للتعبير الجينات. يسمح النظام للتحقيق في تأثير نمط التحميل على التغيرات في الجينات المرتبطة التغيرات التنكسية في الوتر. هذه التجارب يمكن أن توفر بعض التبصر في آليات الإصابة المرتبطة التحميل المتكررة. كما أنها توفر نظرة ثاقبة الأحمال التي يمكن أن تسبب تلف الأنسجة. في نهاية المطاف ، قد يتم استخدام النتائج لمنع وعلاج الإصابات الإفراط في الأوتار والأربطة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
References
- Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control. Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).
- Asundi, K. R., Rempel, D. M. Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model. Clin Biomech. , In Press Forthcoming.
- Asundi, K. R., Rempel, D. M. MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon. Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.
