Orthotopic djurmodeller av äggstockscancer replikera bättre mänskliga sjukdomar och därmed öka vår förståelse av cancer progression och tumörens svar på behandling. En musmodell får en intrabursal injektion av luciferas-uttryckande celler äggstockarna tumör. Behandling ges via oral sondmatning. Tumörtillväxt övervakas av<em> In vivo</em> Imaging System.
Cancer hos människor, liksom terapisvaret är bättre representerade i orthotopic djurmodeller. Detta dokument beskriver utvecklingen av en orthotopic musmodell av äggstockscancer, behandling av cancer via oral leverans av läkemedel och uppföljning av tumörceller reaktioner på missbruksbehandling i realtid med hjälp av in vivo imaging system. I denna orthotopic modell är äggstockarna tumörceller som uttrycker luciferas appliceras lokalt genom att injicera dem direkt i musen Bursa där varje äggstock bifogas. Vid injektion av D-luciferin, ett substrat för eldfluga luciferas, luciferas-uttryckande celler som genererar bioluminescens signaler. Denna signal detekteras av in vivo imaging-system och tillåter en icke-invasiv sätt att övervaka tumörtillväxt, distribution och inskränkningar i det enskilda djur. Drug administration via oral sondmatning tillåter en maximal dosering volym på 10 ml / kg kroppsvikt som ska levereras direkt till magen och liknar leverans av läkemedel i klinisk behandling. Därför beskrivs tekniker här, utveckling av en orthotopic musmodell av äggstockscancer, muntliga leverans av läkemedel, och in vivo-avbildning, är användbara för att bättre förstå mänsklig äggstockscancer och behandling och kommer att förbättra målinriktningen denna sjukdom.
Äggstockscancer är den vanligaste dödsorsaken bland alla gynekologiska maligniteter 1. Den höga dödligheten i denna sjukdom beror till stor del sin sena diagnos och bristen på tillförlitliga diagnostiska metoder 2. Dessutom möter konventionell kemoterapi ofta chemoresistance och återfall av cancer 3. Därför är nya behandlingar krävs för att effektivt rikta denna sjukdom. Vid utveckling av nya terapi riktar mänskliga äggstockscancer är det viktigt att utveckla en representativ djurmodell.
En orthotopic djurmodell har fördelar jämfört med konventionell xenograft modeller (t.ex. subkutan eller intraperitoneal injektion av tumörceller) genom att 1) den återger den primära platsen för tumörbildning, 2) den representerar vanliga platsen för metastaser, och 3) den ger tumörceller till interagera med lämplig mikromiljö 4, 5, 6, 7, 8. Gnagare har en unik bursal membran som omger äggstocken och är kontinuerlig med äggledare. Denna unika anatomi gnagare kan injektion av celler äggstockarna tumör orthotopically. Intrabursally sprutas äggstockarna tumörceller beter liknar mänskliga sjukdomar, och därigenom växer inom intrabursal membranet och sprids till bukhålan som tumören fortskrider. Injektion av celler som stabilt uttrycka luciferases eller fluorescerande proteiner kan också spåra beteendet hos tumörceller i realtid. Bioluminescent och / eller fluorescerande bildteknik gör det möjligt att upprepade gånger bilden tumörceller under en längre tid och studera tumörtillväxt, distribution och inskränkningar i det icke-invasiv sätt 9, 10, 11.
Vid fastställandet av orthotopic modellen, är det viktigt att snabbt ta bort nålen från Bursa efter injektionen. Abrupt bort nålen tätar punktionsstället och förhindrar läckage av injicerade cellerna. Men på samma gång bör rörelsen vara varsam att inte slita Bursa. Om läckage uppstår under injektion kan det orsaka celler till utsäde i buken och eventuellt förvirra studien, dvs tidig sprider sig utanför äggstocken. I detta fall bör de särskilda djur ska registreras och följas för utvecklingen av flera olika tumörerna i bukhinnan före behandlingen alternativt elimineras från den efterföljande analyser. Innan du utför oral sondmatning, är det viktigt att kontrollera längden på sondmatning röret genom att mäta från toppen av djurets huvud till sista revbenet. Det är bra att markera röret vid djurets nos och inte passerar röret förbi detta märke. Införande av röret förbi denna märkning kan leda till en perforation till magen. Fastställa längden på röret är särskilt viktigt med unga djur eller djur som väger under 20 g. Vid insättning av sondmatning nålen ner i matstrupen bör det inte finnas något motstånd eller kamp från djuret. Det är viktigt att inte administrera lösning eller suspension för snabbt då detta kan leda till reflux och därefter leverera felaktiga dosen volym, samt lagt stress djuret. För jämförbara avbildning resultat från gång till gång är det önskvärt att hålla tiden konsekvent mellan injektion av luciferas substrat och bildhantering. Tidsinställd kan bestämmas genom att ta serie bilder efter substrat injektion och observera kinetik av signaler. Utveckling av en orthotopic musmodell av äggstockscancer, muntliga leverans av läkemedel, och in vivo-avbildning är nödvändiga tekniker för bättre förståelse av utvecklingen och spridningen av äggstockscancer och bedöma nya terapeutiska regimer som i slutändan kan förbättra resultatet av patient med denna dödliga sjukdom.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Ketamine Hydrochloride | Vedco, Inc. | Not Available | ||
Xylazine Hydrochloride | Lloyd, Inc. | Not Available | ||
Acepromazine | Vedco, Inc. | Not Available | ||
D-Luciferin Potassium Salt | Caliper Life Sciences | 122796 |