اختبارات بيولوجية على مقاومة المبيدات الحشرية الرصد

Summary

هذه المخطوطة يوضح ويناقش التقنيات المستخدمة لمسح والكشف عن حساسية المبيدات المقاومة للاتصال ومبيدات الآفات المفصلية في المنهجية.

Abstract

مقاومة الآفات للمبيدات هو مشكلة متزايدة بسبب المبيدات هي جزء لا يتجزأ من الإنتاج الزراعي ذات العائد المرتفع. عندما وصفت بعض المنتجات لمكافحة الآفات الفردية ضمن نظام محصول معين ، تقتصر الخيارات المكافحة الكيميائية. لذلك ، يتم استخدام نفس المنتج (ق) مرارا وتكرارا ويوضع الضغط المستمر على اختيار الآفات المستهدفة. هناك على حد سواء التكاليف المالية والبيئية المرتبطة بتطوير مقاومة للسكان. وقد قدرت تكلفة مقاومة مبيدات الآفات على ما يقرب من 1.5 مليار دولار سنويا في الولايات المتحدة. وتصف هذه الورقة البروتوكولات المستخدمة حاليا لرصد المفصليات (الحشرات على وجه التحديد) السكان لتطوير المقاومة. تم استخدام اختبار فيال الكبار لقياس سمية المبيدات الحشرية للاتصال ويستخدم هذا الاختبار تعديل لمبيدات الحشرات ، النظمية النبات. في هذه اختبارات بيولوجية ، تتعرض الحشرات للمبيدات الحشرية الدرجة التقنية والاستجابات (فيات) التي سجلت في الفترة ما بعد التعرض محددة. تخضع البيانات إلى تسجيل وفيات الجرعة تحليل الاحتمالية لتوليد تقديرات تركيز القاتلة ، والتي توفر 50 ٪ من الوفيات إلى (LC ₅₀₎ من السكان المستهدفين ، وسلسلة من حدود الثقة (CL ل) وتقديرات تقلب البيانات. عندما يتم جمع هذه البيانات لمجموعة من السكان ، عرضة الحشرات ، ويمكن استخدام LC ₅₀ كبيانات خط الأساس لأغراض الرصد في المستقبل. بعد أن يكونوا قد تعرضوا لمنتجات السكان ، يمكن مقارنة النتائج إلى ₅₀ LC التي سبق تحديدها باستخدام نفس المنهجية.

Protocol

1. مقدمة

وقد أصبح الإنتاج الغذائي أهمية قصوى مع إدراك أن العالم بحلول عام 2025 سيصل عدد سكان 8040000000 الشعب ^1. وسوف تكون هناك حاجة لتوفير كمية أكبر من المحاصيل الغذائية مما تنتج حاليا. وسوف توفر الغذاء الكافي لا تكون قادرة من دون استخدام منتجات وقاية النباتات مثل المبيدات الحشرية لزيادة كمية المحاصيل الزراعية والمحافظة على الجودة. استنادا إلى الاعتماد التاريخي والحالي في المبيدات الحشرية ، وحالات مقاومة المبيدات لا تزال تحدث ، ويكون أبلغ في الأدبيات العلمية.

مقاومة الآفات للمبيدات هو مشكلة لأن المنتجات هي جزء لا يتجزأ من ذات العائد المرتفع ، وارتفاع جودة الانتاج الزراعي. ومع ذلك ، يمكن الإفراط و / أو سوء استخدام المبيدات يؤدي إلى تطوير المقاومة والتي يمكن أن تكون ضارة لإنتاج المحاصيل. الآفات (أي والحشرات والأعشاب الضارة ، ومسببات الأمراض ، الخ.) تطوير المقاومة من جانب مجموعة متنوعة من الآليات ولكن أحد العوامل الرئيسية لتطوير المقاومة هو عدم وجود مبيدات الآفات المسجلة في ¹ مع وسائل مستقلة للعمل متوفرة للاستخدام. عندما وصفت بعض المنتجات لمكافحة الآفات الفردية ضمن نظام محصول معين ، تقتصر الخيارات المكافحة الكيميائية. لذلك ، يتم استخدام نفس المادة الكيميائية (ق) مرارا وتكرارا ويوضع الضغط المستمر الاختيار على هذه الآفة. وتتفاقم هذه المشكلة عند الآفات وأجيال متعددة في سنة واحدة ويتعرض كل جيل لمبيدات الآفات.

هناك على حد سواء والتكاليف المالية المرتبطة enrivornmental المقاومة ^2. مقاومة الآفات ويؤدي إلى ارتفاع معدلات والتطبيقات بشكل متكرر أكثر من المبيدات اللازمة لتحقيق سيطرة مرضية. خسائر المحصول من المرجح أن يحدث حتى بعد زيادة استخدام مبيدات الآفات بسبب الفشل في السيطرة على الآفات المستهدفة. ² بيمنتل تقديرات هذه التكاليف مقاومة مبيدات الآفات في الولايات يتحد ليكون ما يقرب من 1.5 مليار دولار سنويا.

استطلاعات قابلية مبيدات الآفات بين السكان هو نهج استباقي لاكتشاف أي تغير في أداء الحشرات وتوفير الإنذار المبكر لتعديل استراتيجيات المكافحة الكيميائية. عن طريق تعديل استراتيجيات المكافحة المتكاملة للآفات الشاملة ، يجوز تمديد صلاحية للآفات معينة ، والذي بدوره المهم في الزراعة إلى مواصلة تقديم ما يكفي من الغذاء والألياف للعالم. وتصف هذه الورقة على بروتوكول التي يمكن استخدامها لرصد وكشف قابلية الحشرات تطور مقاومة الحشرات باستخدام اختبار السكان البالغين فيال ³ للاتصال المبيدات الحشرية ، وتعديل هذا الاختبار لمصنع المبيدات الحشرية الجهازية ^4.

2. طرق

2.1 بيان سلامة

استخدام احتياطات السلامة المناسبة المهم عند التعامل مع المبيدات الحشرية. الاطلاع على ورقة بيانات سلامة المواد (MSDS) لمعدات الوقاية الشخصية المناسبة (PPE) قبل التعامل مع المبيدات. وينبغي أن تكون هناك حاجة محددة للتدريب على التعامل مع مختبر المبيدات في المختبرات من قبل أفراد قبل محاولة أي اختبارات بيولوجية.

2.2 الحل جعل سوق الأسهم

وضع حل المخزون من تركيز معروف من مصدر من المكون النشط الحشرات (منظمة العفو الدولية). وشملت جميع التركيزات على النحو المرغوب فيه وسوف تتاح العلاجات في الأحيائي من محلول المخزون الأصلي. لمصلحة من هذه الورقة ، وسيتم تطوير 100mls حل ميكروغرام / 100 مل كحل الأسهم ، ومع ذلك ، يمكن أن تضعف أي تركيز من هذا التركيز الأولي. ضبط كمية من الدرجة التقنية لمنظمة العفو الدولية أن يكون وزنه على أساس النقاء في المئة.

أن يكون وزنه المبلغ = (حجم الادلاء) X ([# ميكروغرام / مل حل] / [٪ purity/100])

على سبيل المثال ، فإن ذلك يتطلب 10152.284 ميكروغرام من منظمة العفو الدولية التقنية لجعل 100 مليليتر من حل ميكروغرام / 100 مل من مبيد حشري الدرجة التقنية للنقاء 98.5 ٪ :

(100 مل) X ([100μg/ml] / 0،985) = 10152.284 ميكروغرام

2.2.1 اختبار فيال الكبار للمبيدات حشرية الاتصال

ملء قارورة حجمية جزئيا مع الأسيتون وتزن المبلغ المعدل لمنظمة العفو الدولية من المبيدات الحشرية. شطف القارب الوزن مع الأسيتون في قارورة لإزالة جميع الحشرات من وزن القارب. ملء قارورة حجمية إلى خط التخرج مع الأسيتون. فإن معظم الحلول التي عقدت في ظروف مبردة الحفاظ على النشاط مع عدم فقدان ملحوظ من الفعالية لمدة شهر واحد.

2.2.2 تعديل فيال الكبار لاختبار المبيدات الحشرية الجهازية

التسمم بالمبيدات الحشرية من الحشرات منهجية تختلف اختلافا واضحا من تلك المنتجات للإتصال به. المنتجات النظامية يجب تناولها من قبل وعادة ما تكون الحشرة لتصبح نشطة بدلا من وجود الحشرات exposur المباشره على المنتج كما هو الحال مع المبيدات الحشرية للإتصال به. لذلك ، تم تعديل قنينة اختبار الكبار من أجل المبيدات الجهازية لفحصها. يتم حساب الوزن من منظمة العفو الدولية اللازمة من أجل حل الأسهم مماثلة لتلك المذكورة في القسم 2.2. منهجية مماثلة ، إلا أن يحل منظمة العفو الدولية في 10 ٪ بالعسل الوزن : المحلول المائي. وينبغي بذل هذا الحل في غضون 24 ساعة من بدء الاختبار الأحيائي. اذا كانت المادة الدرجة التقنية ليست للذوبان في الماء ، يمكن تركيز عال من حل مثل هذه الحشرات مع الأسيتون أنه ليس هناك سوى كمية صغيرة من المبيد الحشري : يضاف الخليط إلى الأسيتون العسل : محلول ^4.

2.3 تركيزات تحديد نطاق من تركيزات والبلدان النامية

يمكن تحديد التركيزات الملائمة اللازمة لإنشاء مجموعة من الاستجابات لالأحيائي قد يكون صعبا. قد تكون هناك حاجة لتكرار العديد من تحديد مجموعة من التركيزات ويتم ذلك عن طريق التجربة والخطأ. بالإضافة إلى ذلك ، قد تتغير مع مرور الوقت طائفة إذا كان السكان التغييرات مستويات الحساسية. وينبغي النظر في عوامل أخرى عديدة في إنشاء تركيزات النهائية ، وتشمل : عائلة من الحشرات ، وفئة من الحشرات ، وحجم انتشار الحشرات وغيرها نشرت سابقا نتائج الاختبارات فيال أخلاقي يمكن أن تساعد في اختيار الأولي للتركيزات المبيدات الحشرية. وقد نشرت لاختبارات بيولوجية : نصفيات الجناح : Aleyrodiidae ^5-6 ، Aphididae ⁷ ، Pentatomidae ^8-10 و ^11-14 Miridae ؛ Thysanaptera : البعوضيات : Thripidae ¹⁵ ؛ : ؛ مغمدات الأجنحة ذوات الجناحين Brentidae ¹⁶ ، السدر ¹⁷ ، ^18-19 Coccinellidae وCybocephalidae ^{19 20} ؛ قشريات الجناح : Tortricidae ²¹ و Noctuidae ³ ، ^22-26 ؛ غشائية الأجنحة : Braconidae ^7،18 ، Ichneumonidae ^26-27 ، Aphidiidae ¹⁸ ، Encyrtidae ⁷ و ¹⁸ Aphelinidae.

مصنوعة التركيزات تنبني على ميكروغرام "X" / مل حل. ومع ذلك ، عندما يتم إعداد قنينة للاختبار فيال الكبار ، ستضاف 0.5ml فقط على كل قارورة ، وبالتالي فإن تركيز القارورة نصف تركيز المحرز. مرة واحدة ويتم اختيار التركيزات ، المعادلة التالية يمكن أن تساعد في تحديد كمية وأضاف حل لجعل التركيز المطلوب.

(C1) (V1) = (C2) (V2)
حيث C1 هو تركيز محلول المخزون ؛ V1 هو حجم المخزون اللازم لجعل تركيز جديدة ؛ C2 هو التركيز يجري إعدادها ، وV2 هو حجم التركيز الجديد. على سبيل المثال ، لا بد من حل 5mls الأسهم 100μg/ml لجعل 100mls من 5μg/ml. وهذا الحل 5μg/ml النتيجة في قارورة مغلفة في تركيز 2.5μg/vial.

5mls = [(5μg/ml) (100mls)] / (100μg/ml)

2.3.1 اختبار فيال الكبار للمبيدات حشرية الاتصال

ملء جزئيا flaks الحجمي ، وقسامة المبلغ المحسوب من محلول المخزون اللازم لجعل التركيز المطلوب. ملء قارورة حجمية مع الأسيتون إلى خط التخرج ، والشروع في المقطع 2.4 أو ختم مع M Parafilm (ألكان المؤتمر الوطني العراقي ، Neenah ، WI) للتخزين في الثلاجة لاستخدامها لاحقا. معظم حلول جيدة لشهر 1.

2.3.2 تعديل فيال الكبار لاختبار المبيدات الحشرية الجهازية

هذه العملية هي نفسها التي سبق ذكرها في 2.3.1 سوى ٪ 10 من وزن العسل : يتم استبدال المحلول المائي لالأسيتون. مزيج العسل بما فيه الكفاية : المحلول المائي لجعل جميع التركيزات المطلوبة. وينبغي أن تستخدم هذه الحلول في غضون 24 ساعة من التحضير.

2.4 إعداد قوارير

2.4.1 اختبار فيال الكبار للمبيدات حشرية الاتصال

إذا كانت مخزنة التركيزات في الثلاجة ، لتسمح لدرجة حرارة الغرفة الدافئة. حجم التغييرات الأسيتون على أساس درجة الحرارة التي يمكن أن تؤثر على تركيز المبيدات الحشرية. لون رمز الزجاج 20 مل قارورة (المجهزة للقبعات المسمار) لتركيزات باستخدام الطلاء أو علامات.

ضبط مجموعة pipettor تكرار لتسليم 0.5ml/concentration. الشروع في العمل مع مراقبة الأسيتون ، وبعد أقل مع التركيز والاستمرار في زيادة تركيزات حتى استخدمت جميع التركيزات. يتدفق ما يقرب من نصف حجم الحل كما أن العدد الفعلي للقوارير أن يعامل (أي لمدة 40 20mls قارورة) في كوب صغير. عندما الحل لا يكمن في استخدام وتغطية ذلك لتقليل التبخر الذي يمكن أن يسبب تغيرات في التركيز. رسم الحل الحشرات في pipettor تكرار والاستغناء حل 0.5ml في قوارير زجاجية الفردية.

مباشرة بعد العلاج ، ويتم وضع قوارير الزجاج على الأسطوانة هوت دوج التجارية. وبدوره بكرات ، قوارير الزجاج وتدوير يتبخر الأسيتون ، وترك داخل القارورة المغلفة مع الحشرات الصف التقنية. يمكن الحرارة (د)egrade الحشرات ، وبالتالي ، فمن المهم للحرارة إلى أن تكون خارج. يمكن القيام بذلك إما عن طريق فصل عنصر التسخين على النموذج الذي يسخن وفات وقت واحد ويسيطر عليه التبديل نفسه أو باستخدام نموذج للأسطوانات هوت دوج الذي يعمل بشكل مستقل عن تبديل عنصر التدفئة وبكرات. تجنب معاملة أكثر من قوارير تحمل الأسطوانة ، والاسيتون قد تتبخر قبل ان القنينات الزجاجية يتم تناوب وأنها قد لا تتلقى حتى الطلاء على جدران القارورة.

السماح لتدوير القوارير حتى عن الاسيتون قد تبخرت. ربما هناك طبقة رقيقة من التكثيف ، الأسيتون على الجدران فيال ، وبالتالي ، قوارير من الضروري أن تفحص بشكل فردي. الوقت اللازم للفة قارورة يختلف استنادا إلى الظروف المختبرية. مرة واحدة في قارورة جافة ، وكأب وتخزينها إما في ظروف مبردة أو مظلمة. وقد لوحظ الحشرات يستريح على الأغطية مع المتشددين المخروطية أو احباط المتشددين الممزقة التي يتعطل تحت الشفة القارورة (أي تجنب الأسطح المعالجة) ، وبالتالي ، فإنه من المهم استخدام الامم المتحدة واصطف الأغطية.

يجب التخلص من أي حل لا الباقية تستخدم لإعداد قنينة بشكل صحيح. يمكن أن تكون مختومة الحل المتبقية في القارورة الحجمية مع Parafilm وتخزينها في الثلاجة. تاريخ قارورة عند إعدادها ، لأن المبيدات الحشرية المختلفة الجرف حياة مختلفة. على سبيل المثال ، بيريثرويد المغلفة قوارير جيدة لشهر واحد تقريبا ، في حين قارورة مغلفة مع الحشرات أكثر اضطرابا ، مثل الفوسفات العضوي ، وحياة الرف لمدة أسبوعين أو أقل.

2.4.2 فيال الكبار التعديل لاختبار المبيدات الحشرية الجهازية

وهناك حاجة رغوة الأزهار ليكون بمثابة الركيزة لتقديم الحل الحشرات للحشرات ^4. قطع الرغوة الأزهار (X 12mm 12mm) باستخدام قطعة الفلين حفار. مكان واحد قطعة من المادة العازلة من الزهور في قوارير الزجاج وصفه سابقا. ملء pipettor تكرار تعديلها لتوفير حل 0.5ml والاستغناء على الرغوة نباتية. هذا ينبغي أن حجم السائل تشبع قطعة من المادة العازلة من الزهور ، ولكن لا ينبغي أن يتجاوز مستوى الرغاوي في القارورة. العمل مرة أخرى في تسلسل من سيطرة (10 ٪ من وزن العسل : الحل الوحيد للمياه) وأدنى إلى أعلى التركيزات.

2.5. تخزين قوارير

2.5.1 اختبار فيال الكبار للمبيدات حشرية الاتصال

عند تخزين قوارير الحشرات المغلفة ، ومعرفة خصائص المبيدات الحشرية. المبيدات الحشرية المختلفة لها متطلبات التخزين المختلفة مثل : البيريثرويد خفيفة حساسة ويمكن تخزينها في درجة حرارة الغرفة ولكن في الظلام ، ولكن المبيدات الحشرية الفوسفات العضوي ودرجة الحرارة حساسة وتحتاج إلى تخزينها في الثلاجة. إذا كانت هناك حاجة لمبيدات الحشرات يتم تخزينها في الثلاجة ، يجب أن تكون درجة حرارة أنهم لدرجة حرارة الغرفة قبل تعريض الحشرات.

2.6 الأحيائي

جمع الحشرات التي سيتم اختبارها. ويمكن القيام بهذه العملية باستخدام فرمون - اصطاد الفخاخ ، واكتساح شباك ، أو أي وسائل أخرى لالتقاط الشامل. ينبغي أن تعقد الحشرات ل24H - 8 للسماح الوفيات الطبيعية تحدث عن المصابين خلال عملية جمع وتوفير الغذاء لهم ومصدر الرطوبة خلال هذه الفترة. اختبار 10-25 الحشرات في تركيز (10 كحد أدنى) ، وأكبر عدد من الحشرات اختبارها ، وأكثر قوة في مجموعة البيانات وسوف. عند اختيار الحشرات لالأحيائي ، واختيار صحية ، والأفراد الناشطين وتجاهل الأفراد السبات العميق ، أو غير طبيعية. الحشرات في مكان قارورة بحيث يتعرضون للمجموعة الكاملة لتركيزات وليس فقط تركيز واحد في وقت واحد. وسوف يضع هذا الإجراء منع الأفراد الأكثر صحية ونشطة في واحدة أو تركيزات قليلة. بالإضافة إلى ذلك ، إذا لم يكن من الممكن إجراء تجربة مع حد أدنى من 10 في الحشرات التركيز ، وكشف أكبر عدد ممكن إلى كل التركيز. ثم جمع الحشرات أكثر من منطقة نفس العينة في غضون فترة زمنية قصيرة (2-3 أسابيع) وتكرار التجربة. يمكن أن تفقد بعض الحشرات حساسية (بناء المقاومة) كما تقدم محصول الموسم ، وبالتالي ، فإن الاستجابة للأفراد التي تم جمعها في أوائل الربيع قد تكون مختلفة عن تلك التي تم جمعها في خريف ^28.

وضع معايير لتقدير معدل الوفيات. المعايير الأكثر شيوعا المستخدمة لتصنيف الحشرات والمحتضرة أو الميتة هي عدم وجود تحرك منسق. قد تتضمن هذه الملاحظات وعدم القدرة على الحق نفسه إذا وضعت على سطحه الظهري ، غير قادر على مواصلة رحلة المنسق 1M أو عدم وجود تحرك منسق عندما حث بلطف مع أداة غير حادة. إذا كان يمكن للفرد الحق في حد ذاته ولكن يقع على ، ليس هناك حركة منسقة ، وينبغي النظر في حشرة ميتة. قد تواجه صعوبات الحشرات تصحيح نفسها على سطح أملس ، وبالتالي ، من الضروري ربما لإمداد الحشرات على سطح بحيث يكون قادرا على كسب الجر اللازمة لنفسها الحق. تسجيل عددالناجين والقتلى الأفراد لحساب البقاء على قيد الحياة لكل تركيز.

2.6.1 اختبار فيال الكبار للمبيدات حشرية الاتصال

مكان الحشرة (ق) في قارورة وتأمين غطاء فضفاض. غطاء الاحتياجات لمنع الحشرات من الهرب ، ولكن تكون فضفاضة بما يكفي للسماح بتدفق الهواء. اختبارات بيولوجية لمعظم الحشرات ، ويتم وضع واحد فقط في كل قارورة الحشرات ، ولكن قد يتعرض الحشرات الصغيرة ، مثل الذباب الأبيض أو التربس ، بمعدل يصل الى 30 شخصا في قارورة ^{6 و 15.} ضع قارورة تستقيم في درجة حرارة الغرفة حتى يتم تقييم هذه الحشرات وفيات في النهاية من الأحيائي. يمكن أن تختلف أوقات التعرض لأنواع الحشرات وربما ^3،5-27. في عملية تحديد مستويات السمية الأولية مع حشرة جديدة أو الكيميائية ، ورصد الموضوعات في عدة نقاط الوقت المحدد بعد التعرض. يمكن إنهاء الامتحانات عندما فيات على أعلى تركيز 100 ٪ مع الحفاظ على البقاء على قيد الحياة لا تزال عالية (<وفيات 10 ٪) في السيطرة غير المعالجة بالمبيدات الحشرية. إذا لم يتحقق 100 ٪ في معدل وفيات أعلى تركيز مع البقاء على قيد الحياة عالية في التحكم ، ينبغي تكرار الأحيائي باستخدام مجموعة من تركيزات أعلى. من الناحية المثالية ، ينبغي زيادة معدلات الوفيات كما يزيد تركيز المبيدات الحشرية.

بعض الحشرات ، وعندما تتعرض لمدة 24 ساعة ، تتطلب مصدرا للرطوبة (أي قطعة صغيرة من المواد النباتية) ^12. عند العمل مع حشرة دقيقة ، فإنه مفيد لتحديد كم من الوقت يمكن أن تعيش الحشرة في قارورة من دون مصدر للرطوبة قبل التعرض للمبيدات الحشرية في قنينة اختبار الكبار. ويمكن تحديد هذه المعلومات عن طريق وضع الحشرات في قارورة مع وبدون مصدر الرطوبة ورصد بقائها على مر الزمن قبل إجراء المسوحات الحشرية الفعلية.

2.6.2 فيال الكبار التعديل لاختبار المبيدات الحشرية الجهازية

قبل الشروع في الأحيائي ، تحديد ما إذا كان يمكن أن تغذي الحشرة والبقاء على رغوة الأزهار المشبعة مع العسل : المحلول المائي في غياب المبيدات الحشرية. الحشرات في مكان قارورة مع رغوة الأزهار المشبعة مع العسل : الماء فقط (أو العسل : المياه مع حجم أكبر من الأسيتون المستخدمة في إعداد تركيزات مع المنظمات غير ذوبان في الماء الحشرات الصف التقنية) ورصد البقاء على قيد الحياة لعدة أيام. وقد تم هذا التعديل فقط للاختبار فحص قارورة الكبار مع Miridae ⁴ وPentatomidae ²⁹ ، وبالتالي ، تحديد مدة الاختبار يتطلب المزيد من التجريب من أجل الاتصال الأحيائي الحشرات. على سبيل المثال ، تم تقييم Lygus lineolaris (Palisot Beauvois دي) وفيات في 24 ساعة بعد التعرض للثيامثوكسام ، ولكن لمدة 72 ساعة ايميداكلوبريد ⁴ وفيات Oebalus pugax F. وجرى تقييم في 96 ساعة عندما تتعرض لdinotefuran ^29. لذلك ، يجب البقاء على قيد الحياة الحشرات في قارورة السيطرة تكون عالية باستمرار لعدة أيام قبل على تصنيف وفيات دقيقة من التسمم بمبيدات الحشرات يمكن تقديمها.

مكان الحشرة (ق) في قارورة التلألؤ مع رغوة والأزهار المشبعة. بدلا من ختم القوارير ذات الأغطية ، وختم القنينات مع كرة القطن. ضع قارورة تستقيم في درجة حرارة الغرفة حتى يتم تقييم هذه الحشرات عن الوفيات. كما ذكرنا سابقا معدل وفيات ، على فترات منتظمة. يمكن إنهاء الفحص عندما يكون هناك وفيات 100 ٪ في البقاء على قيد الحياة مع أعلى تركيز عالية (<وفيات 10 ٪) في السيطرة عليها. قد يكون من الضروري اختبار تركيزات إضافية.

2.6.3 تحليل البيانات

الصحيح للوفيات في علاج باستخدام صيغة تحكم وفقا لابوت ^30.

تصحيح الوفيات (٪) = ((٪ بقاء السيطرة -- البقاء على قيد الحياة ٪ المعالجة) البقاء ٪ / التحكم) × 100

تحليل البيانات باستخدام المفتاح لتحديد الجرعة وحدة احتمالية التركيز المطلوب الفتاكة لقتل 50 ٪ من عدد السكان (LC ₅₀₎ ووضع فواصل الثقة 95 ٪ (CL). البرامج متعددة متوفرة لتحديد LC ₅₀ (SAS : PROC الاحتمالية ³¹ ، بولو زائد ^32).

3. تلاحظ

1. العمل مع الأسيتون والمبيدات الحشرية تحت غطاء جوي سلبية التدفق.
2. عند تعبئة قوارير حجمية ، فمن الأفضل أن يكون غسل الزجاجات اثنين من الأسيتون. زجاجة واحدة يغسل التي تم تكييفها لتسليم سريع للسوائل واحد لبطء التسليم. إزالة جزء من الذراع التسليم لإنشاء أكبر الافتتاح ويمكن استخدام هذه القارورة لتسليم كمية كبيرة بسرعة. بمجرد أن تقترب من الأسيتون إلى خط التخرج ، واستخدام الزجاجات تغيير غسل الزجاجة مع التسليم أبطأ بحيث يكون لديك المزيد من السيطرة على المبلغ الذي يتم الاستغناء. إذا تم ملء قارورة فوق خط التخرج ، وترك الجزء العلوي قبالة الأسيتون والسماح تتبخر إلى خط التخرج.
3. لاحظ المبلغ نيدائرة التنمية الاقتصادية في حل الأوراق المالية ، وهناك حاجة لإعداد تركيز ، أي ، إذا كنت ملء قارورة ¾ الطريق ولكن تحتاج إلى إضافة 30mls ، قد تتجاوز خط التخرج.

Discussion

يمكن استخدام قيمة LC ₅₀ لتجريم التعرض الأساسية للسكان الهدف (ق). يمكن للقيمة من هذه البيانات يكون في استطلاعات الرصد في المستقبل أو لغرض الفوري لمقارنة النتائج الحالية إلى أن من ₅₀ LC التي سبق تحديدها لتحديد قابلية للتحول السكان المستهدفين. ويمكن مقارنة القيم الفعلية LC ₅₀ بين السكان من خلال دراسة فترات الثقة 95 ٪ ، وإذا كان الحدين الأدنى والأعلى لا تتداخل ، فمن المرجح أن السكان قد شهدت تغيرا كبيرا في حساسية في بعض الحالات وهذا مؤشر على المقاومة ^33. يمكن أيضا أن ₅₀ ق LC أن تستخدم لدراسة التغيرات الموسمية في ²⁸ esusceptibilitye الحشرات ، أو مقارنة بين ردود الأنواع أو الحشرات ثانية لمنظمة العفو الدولية عمل كبير وأيضا استخدام هذه البيانات للمقارنة الاستجابات بين الذكور والإناث ¹⁰ أو بين الكبار ومراحل غير ناضجة ، ^10،34. أحيانا فترات الثقة واسعة أو غير قادرة على أن تكون محسوبة. لكسب ثقة فترات تشديد إجراء الأحيائي مع المزيد من الحشرات وتركيزات / أو أكثر.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
50-100 ml glass beaker
Volumetric flask with stoppers (can use the amber colored flasks for light sensitive pesticides such as pyrethroids)
20ml glass scintillation vials with un-lined lids
A method for color coating vials (paint or markers)
Acetone
Commercial hotdog roller (heat element disconnected)
2 wash bottles (one modified such that the opening is large for fast delivery of the liquid and one so that the spout opening is small for slow delivery of the liquids)
Small weigh boat (make sure all plastic materials acetone safe)
Access to a balance with 0.001g readability or a higher precision.
Parafilm M
Repeater pipettor
Appropriate tips
Glass pipettes that fit in the volumetric flask.
Hood (used to remove the acetone smell)
A place to store insecticide solutions and vials [refrigerator (solutions), dark room or freezer depending on the chemical (vials)]