Summary
Кишки комара и слюнных желез являются ключевыми точки входа и выхода для векторных патогенных микроорганизмов, как Plasmodium тропической лихорадки денге и вирусов. В этом видеоролике показано вскрытие методов для удаления кишки и слюнных желез из Aedes aegypti комаров.
Abstract
Кишки комара и слюнных желез являются ключевыми точки входа и выхода для патогенов, таких как паразиты Plasmodium и Вирусы денге. Это видео демонстрирует протокол вскрытия методы удаления кишки и слюнных желез из Aedes aegypti комаров.
Protocol
Препарирование кишки и слюнных желез тканей от комаров требует предварительной подготовки 1X фосфатным буферным солевым раствором (1X PBS) решение и обезболивания комаров, подвергая при температуре 4 ° С, пока не обездвижен. Комары остаются под наркозом, помещая в чашке Петри, которые хранятся в холоде на льду. Другие материалы, необходимые включают в себя: световой микроскоп оснащен 10-кратным цели, пипетки, с острым концом щипцов, стекло, иглы наконечник зонда.
Средняя кишка рассечение
- Место капли 1X PBS на предметное стекло монтируется под световым микроскопом.
- Передача комаров на подготовленную слайд, нанеся комаров грудной клетки с помощью иглы-наконечник зонда.
- Удерживая комаров с зондом, использование щипцов, чтобы понять второго до последнего сегмента брюшка и аккуратно снять комаров живота одним движением руки. Средняя кишка должна оставаться прикрепленной к иммобилизованным грудной клетки.
- Откажитесь от живота. Используйте пинцет, чтобы отделить кишки из грудной клетки.
Слюнные железы рассечение
- Место капли 1X PBS на предметное стекло монтируется под световым микроскопом.
- Возьмите комаров на stabbling грудной клетки с помощью иглы-наконечник зонда.
- Снимите комаров ноги с помощью пальцев.
- Передача комаров на слайде.
- Удалить глава комаров использованием щипцов.
- Удерживая комаров грудной клетки с зондом, использовать другой зонд осторожно надавите на грудную клетку.
- Слюнные железы расположены на передней части грудной клетки и может быть выделен с помощью иглы-наконечника зонда и разрыв вложения, которые соединяют железы к грудной клетке. Неповрежденная слюнных желез состоят из трех долей: двух боковых долей и медиальной доле.
