रिवर्स आनुवंशिक दृष्टिकोण मच्छरों में वेक्टर रोगजनकों के लिए जो जीन underly प्रतिरोध का निर्धारण करने के लिए अत्यंत उपयोगी सिद्ध कर दिया है. यह वीडियो एक Dimopoulos प्रयोगशाला द्वारा प्रयोग किया जाता विधि एनोफ़ेलीज़ gambiae, मच्छरों, जो मलेरिया परजीवी बंदरगाह में dsRNA इंजेक्षन प्रोटोकॉल दिखाता है. इंजेक्शन सेटअप छेड़खानी और छाती में dsRNA इंजेक्शन तकनीक सचित्र है.
Abstract
रिवर्स आनुवंशिक दृष्टिकोण मच्छरों में वेक्टर रोगजनकों के लिए जो जीन underly प्रतिरोध का निर्धारण करने के लिए अत्यंत उपयोगी सिद्ध कर दिया है. यह वीडियो एक Dimopoulos प्रयोगशाला द्वारा प्रयोग किया जाता विधि एनोफ़ेलीज़ gambiae, मच्छरों, जो मलेरिया परजीवी बंदरगाह में dsRNA इंजेक्षन प्रोटोकॉल दिखाता है. इंजेक्शन सेटअप छेड़खानी और छाती में dsRNA इंजेक्शन तकनीक सचित्र है.
Protocol
मच्छरों में आरएनएआई की मध्यस्थता जीन मुंह बंद पूर्व और विशिष्ट dsRNAs है कि ब्याज की जीन लक्ष्य की तैयारी शुद्धि की आवश्यकता है. DsRNA संश्लेषण के लिए, हम Ambion Megascript किट जो इन विट्रो प्रतिलेखन प्रतिक्रिया म…
Discussion
जीन मुंह बंद करने की क्षमता अत्यधिक परिवर्तनशील है और प्रतिलेख और मोड़ पर दरों प्रोटीन, कोशिकाओं और अंगों द्वारा और dsRNA तेज दक्षता सहित कारकों की एक संख्या पर निर्भर करता है. हमने पाया है कि मुंह बंद करने के रूप ?…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Megascript
kit
Ambion
for dsRNA synthesis; T7 RNA polymerase-mediated in vitro transcription reaction
RNeasy
Qiagen
For dsRNA purification
dsRNA
should be quantified and adjusted to 3 μg/ μL in water