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Biology

열 충격 방법을 사용 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

Summary

Abstract

열 충격 방법을 사용하여 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화 분자 생물학의 기본 기술입니다. 그것은 박테리아에 외국 플라스미드 또는 결합 제품을 삽입 구성되어 있습니다. 이 비디오 프로토콜은 Genlantis에서 상용 화학적으로 유능한 박테리아를 사용하여 변화의 전통적인 방법을 설명합니다. 얼음에 짧은 부화 후, 화학적 능력 박테리아와 DNA의 혼합물은 45 초 동안 42 ° C에 배치됩니다 (열충격) 후 얼음에 다시 배치. SOC 미디어가 추가되고 변형 세포 ° C 30 분 교반과 함께 37 incubated 수 있습니다. 관계없이 변환 효율의 식민지를 고립을 보장하기 위해서, 변형 박테리아의 두 수량은 도금 있습니다. 이것은 전통적인 프로토콜은 대부분의 상용 유능한 박테리아를 변환하기 위해 성공적으로 사용될 수 있습니다. Genlantis에서 turbocells이 설명서에 설명된 소설 3 분 변환 프로토콜에도 사용할 수 있습니다.

열 충격 방법을 사용 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화
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Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

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