Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Преобразование плазмидной ДНК в E.coli, с использованием метода теплового шока

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

Summary

Abstract

Преобразование плазмиды ДНК в E.coli, методом теплового шока основную технику молекулярной биологии. Она состоит из вставки иностранных плазмиды или перевязки продукта на бактерии. Это видео протокол описывает традиционный метод преобразования с использованием коммерчески доступных химически компетентных бактерий из Genlantis. После короткой инкубации в лед, смеси химически компетентных бактерии и ДНК находится на 42 ° С в течение 45 секунд (тепловой шок), а затем помещен обратно в лед. SOC СМИ добавляется и трансформированные клетки инкубируют при 37 ° С в течение 30 мин при перемешивании. Чтобы быть уверенным в изоляции колоний, независимо от эффективности трансформации, две величины трансформированных бактерий покрытием. Этот традиционный протокол может быть успешно использован для преобразования самых коммерчески доступных компетентных бактерий. Turbocells от Genlantis также может быть использован в романе 3-х минутах преобразование протоколов, описанных в инструкции по эксплуатации.

Преобразование плазмидной ДНК в E.coli, с использованием метода теплового шока
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter