Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Isı Şoku Yöntemiyle E. coli içine Plazmid DNA Dönüşüm

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

Summary

Abstract

Dönüşüm ısı şok yöntemi kullanılarak E. coli içine plazmid DNA moleküler biyolojinin temel bir tekniktir. Bu bakteri yabancı bir plazmid veya ligasyonu ürün ekleme oluşur. Bu video protokolü Genlantis piyasada bulunan kimyasal yetkili bakteri kullanarak dönüşüm geleneksel yöntem açıklanır. Buz kısa bir inkübasyondan sonra, 45 saniye boyunca 42 ° C'de kimyasal yetkili bakteri ve DNA karışımı konur (ısı şok) ve ardından buz geri yerleştirilir. SOC medya eklenir ve dönüştürülmüş hücreleri ile 37 ° C de 30 dakika süreyle ajitasyon inkübe edilir. Dönüşüm verimliliği bağımsız koloniler izole emin olmak için, iki miktarlarda dönüştürülmüş bakteri kaplanmıştır. Bu geleneksel protokol ticari olarak satılan birçok yetkili bakterileri dönüştürmek için başarıyla kullanılabilir. Genlantis turbocells bir roman 3 dakika dönüşüm protokolü, kullanım kılavuzunda açıklanan de kullanılabilir.

Isı Şoku Yöntemiyle E. coli içine Plazmid DNA Dönüşüm
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter