Summary
रहने वाले जानवरों में जीवाणु संक्रमण के bioluminescence इमेजिंग के लिए तरीके का वर्णन कर रहे हैं. रोगज़नक़ों luciferase व्यक्त जीवित पशुओं में संक्रमण के ऑप्टिकल पूरे शरीर इमेजिंग की अनुमति के लिए संशोधित कर रहे हैं. पशु मॉडल luciferase व्यक्त रोगज़नक़ों के साथ संक्रमित हो सकता है और इस रोग के परिणामस्वरूप पाठ्यक्रम bioluminescence इमेजिंग द्वारा वास्तविक समय में visualized.
Protocol
1. Intratracheal इंटुबैषेण द्वारा फेफड़े के संक्रमण
- चूहों का वजन और, वैकल्पिक, आसान पहचान के लिए कान पर निशान बनाया जा सकता है है.
- Intraperitoneal टीका (माउस के वजन के 100 ग्राम प्रति μg) ketamine और xylazine (माउस के वजन के 10 ग्राम प्रति μg) के साथ चूहों anesthetize.
- जब तक पूरी तरह से anesthetized पिंजरों में प्लेस चूहों. अपने पैरों के पैड निचोड़ करने के लिए पेडल पलटा की जांच करने के लिए. चूहे या कम नहीं पलटा प्रतिक्रिया प्रदर्शित करना चाहिए.
- इंटुबैषेण अपनी पीठ पर झूठ बोल स्टैंड पर माउस रखें.
- इंटुबैषेण खड़ा करने के लिए एक रबर बैंड फिक्स और तो यह माउस की ऊपरी incisors के तहत जगह है. टेप का प्रयोग करें इंटुबैषेण स्टैंड पर पैर और हथियारों को ठीक.
- धीरे संदंश का उपयोग कर मुँह से बाहर tougue चाल है.
- मुँह के अंदर octoscope के साथ वीक्षक डालें और oropharynx में देखो गला खोलने तक दिखाई देता है.
- अग्रिम गाइड ट्रेकिआ में cathether साथ catether हब तक कवर तार incisors पर है. गाइड तार निकालें. Cathether हवा में रखो सीने में विस्तार का निरीक्षण करने के लिए और सही इंटुबैषेण की पुष्टि.
- बैक्टीरिया के 50 μL 1 एमएल सिरिंज का उपयोग कर cathether के माध्यम से समाधान (दिखाया हम दण्डाणु Calmette Guerin (बीसीजी) का इस्तेमाल व्यक्त क्लिकबीटल लाल (CBRLuc) luciferase, हमारी प्रयोगशाला में निर्माण, लेकिन किसी भी luminescent बैक्टीरियल तनाव इस्तेमाल किया जा सकता है छवियों में) इंजेक्षन.
- एक पिंजरे में माउस प्लेस और संज्ञाहरण से वसूली के दौरान निरीक्षण.
2. पशु Anesthetization और bioluminescence इमेजिंग के लिए तैयार
चूहे isoflurane XGI 8 गैस Aneshesia प्रणाली का उपयोग के साथ anesthetized हैं.
- XGI 8 संज्ञाहरण प्रणाली के संचालन से पहले, प्रत्येक लकड़ी का कोयला फ़िल्टर कनस्तर वजन और वजन और उस पर तारीख लिखने. यदि प्रारंभिक वजन के 50 से अधिक ग्राम वजन है, यह एक नया कनस्तर के साथ की जगह.
- Vaporizer में isoflurane स्तर की जाँच करें और यदि आवश्यक भरने.
- XGI-8 संज्ञाहरण प्रणाली के सामने निकासी पंप पर मुड़ें और 8 LPM (minuite प्रति लीटर) के लिए सेट.
- उच्च दबाव सिलेंडर से ऑक्सीजन की आपूर्ति पर मुड़ें और यह 55 psig करने के लिए सेट.
- XGI 8 संज्ञाहरण प्रणाली के मोर्चे पर टॉगल ऑक्सीजन (हरा) पर मुड़ें.
- इमेजिंग कक्ष में गैस के प्रवाह पर मुड़ें गैस के प्रवाह के स्तर सेट. LPM 0.25 पर सेट करें और फिर से गैस प्रवाह की बारी है.
- गैस प्रवाह पर संज्ञाहरण प्रेरण चैम्बर के लिए मुड़ें गैस के प्रवाह के स्तर सेट. 1.5 LPM करने के लिए सेट करें और फिर से गैस प्रवाह की बारी है.
- Vaporizer और 2-2.5 प्रतिशत करने के लिए सेट के साथ isoflurane पर मुड़ें. isoflurane स्तर पर इस्तेमाल किया जा रहा है जानवरों और वजन की संख्या के आधार पर समायोजित किया जा सकता है.
- प्रेरण चेंबर में जगह चूहों और ढक्कन बंद करें. प्रेरण कक्ष में गैस के प्रवाह पर मुड़ें. 5 के लिए चैम्बर में रखें चूहों - 10 minuites जब तक वे पूरी तरह से anesthetize कर रहे हैं.
- आंखों के लिए ऑप्टिकल मरहम लागू इमेजिंग के दौरान माउस आंखों की रक्षा और संज्ञाहरण कई गुना पर नाक शंकु में इमेजिंग कक्ष में चूहों जगह. चूहों के बीच प्रकाश भ्रमित का उपयोग करने के लिए आसन्न पशु विषयों पर प्रकाश का प्रतिबिंब को रोकने के.
- Intraperitoneal टीका luciferin (150 μg / शरीर के वजन के ग्राम) इंजेक्षन.
3. Bioluminescence इमेजिंग
- लिविंग इमेजिंग सॉफ्टवेयर शुरू करो.
- यदि यह प्रणाली नहीं initialized है, IVIS इमेजिंग प्रणाली इनिशियलाइज़.
- IVIS अधिग्रहण नियंत्रण कक्ष में अनुक्रम सेटअप क्लिक करके इमेजिंग के लिए पैरामीटर सेट.
Luminescence और इमेजिंग मोड में तस्वीर का चयन करें. यदि DLIT 3D पुनर्निर्माण के लिए बाहर ले विकल्प वांछित है, फ़ोटो, luminescent और संरचनात्मक छवि अनुक्रम के भाग के रूप में प्रकाश छवियों का चयन करें.
जोखिम 0.5 सेकंड से 10 मिनट के लिए समय निर्धारित करें.
Binning और एफ सेट / नमूने की उम्मीद की चमक के आधार पर रोक.
ब्लॉक और फिल्टर उत्सर्जन को खोलने के लिए फिल्टर उत्तेजना सेट है, जब तक केवल विशिष्ट प्रकाश की तरंग दैर्ध्य के अधिग्रहण की योजना बना. DLIT 3D संविधान के मामले में, कई विभिन्न तरंगदैर्य के उत्सर्जन फिल्टर स्थापित करने के लिए स्रोत का सटीक स्थानीयकरण की अनुमति.
A से FOV विकास के लिए चूहों की संख्या या जानवर के क्षेत्र imaged किया जा के आधार पर सेट करें. 4-5 चूहों के लिए ए और बी 1 माउस, 2-3 चूहों के लिए, सी और डी के लिए चयन करें. - अधिग्रहण नियंत्रण कक्ष अनुक्रम सेटअप जोड़ने में छवि विज़ार्ड में जोड़ने के लिए क्लिक करें.
- क्लिक अधिग्रहण इमेजिंग अनुक्रम द्वारा शुरू करो.
DLIT 3D निर्माण के मामले में, luminescent छवियों को विभिन्न तरंगदैर्य पर एकाधिक उत्सर्जन फ़िल्टर के लिए अधिग्रहीत किया जाएगा. फोटोग्राफिक और संरचित प्रकाश छवियों को भी हासिल हो जाएगा. - अधिग्रहण के दौरान छवि और छवि स्तर पैनलों संपादित दिखाई जाएगी. संपादित करें बाद में समय पर छवियों के आसान ट्रैकिंग सुनिश्चित करने और अपनी छवियों को बचाने की छवि में प्रत्येक प्रयोग के लिए संभव के रूप में विस्तृत जानकारी के रूप में भरें.
- IVIS इमेजिंग कक्ष से चूहों ReRemove और उन्हें अपने पिंजरों में लौटने. एक से वसूली निरीक्षणचूहों सुनिश्चित esthesia काफी प्रक्रिया से प्रभावित नहीं थे. पशु लगातार निगरानी की जानी चाहिए जब तक वे पूरी तरह से संज्ञाहरण (आमतौर पर 1-2 मिनट) से उबरने.
4. पूर्व vivo इमेजिंग और जीवाणु की मात्रा के लिए फेफड़ों में CFU विश्लेषण
- एक ही तरीके से luciferin intraperitoneally के साथ चूहों के रूप में इमेजिंग के लिए सुई बस इच्छामृत्यु के लिए पहले.
- 100 मिलीग्राम / किग्रा luciferin इंजेक्शन के बाद pentobarbitol 5 मिनट के intraperitoneal इंजेक्शन द्वारा चूहों euthanize.
- बाँझ बाँझ संदंश और कैंची का उपयोग पेट्री - व्यंजन में चूहों और जगह से फेफड़ों Explant.
- पेट्री पकवान प्लेस इमेजिंग कक्ष में explanted अंग युक्त और पूरे माउस के लिए के रूप में एक ही तरीके से bioluminescence छवियों अधिग्रहण.
- इमेजिंग के बाद, बाँझ संदंश का उपयोग पेट्री डिश से explanted अंग निकालने और 1 एमएल पीबीएस में homogenize.
- उपयुक्त चयनात्मक मीडिया पर थाली और ऊतक dilutions बनाओ. Homogenized ऊतक फिर से चढ़ाना के लिए -80 डिग्री सेल्सियस संग्रहीत कर सकते हैं यह आवश्यक होना चाहिए. वैकल्पिक रूप से, homogenized ऊतक शाही सेना या डीएनए निष्कर्षण द्वारा qPCR बैक्टीरियल संख्या यों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
5. Luminescence इमेजिंग के विश्लेषण
- "लिविंग इमेजिंग सॉफ्टवेयर" प्रारंभ और छवि फ़ाइलों को ब्राउज़ करें.
- "उपकरण पट्टी का उपयोग करने के लिए छवियों को समायोजित छवि पर क्लिक करें. सुधार / सेटिंग्स और अलग - अलग रंग तराजू के लिए अधिकतम / मिनट फ़िल्टरिंग को संशोधित करने के लिए समायोजित करें.
- पुलडाउन सूची में प्रकाश की तीव्रता की मात्रा का ठहराव के लिए रॉय उपकरण का प्रयोग करें. चुनें आरओआई आकार, संख्या, और आकार. खींचें आरओआई छवि पर ब्याज के क्षेत्र के लिए फ्रेम. सभी रॉय एक ही आकार और आकार रहे हैं सुनिश्चित करें. पर क्लिक करें आरओआई माप और बचाने के लिए, कॉपी और / या मात्रात्मक डेटा निर्यात.
- DLIT 3D पुनर्निर्माण के मामले में, संरचित प्रकाश छवि सहित छवि अनुक्रम लोड. उपकरण में सतह स्थलाकृति पर क्लिक करें Platte. पुलडाउन सूची में है, टैब फिर से संगठित करने के लिए सतह स्थलाकृति उत्पन्न क्लिक करें. एक सतह गंदगी तो विंडो में दिखाई देगा.
- DLIT उपकरण Platte में 3 डी पुनर्निर्माण का चयन करें. पुलडाउन सूची में, ऊतक गुण और स्रोत स्पेक्ट्रम सेट गुण टैब क्लिक करें. बलवान सबसे परिस्थितियों के तहत की सिफारिश की है. पुलडाउन सूची में, टैब पर विश्लेषण के विश्लेषण के लिए तरंग दैर्ध्य का चयन करने के लिए क्लिक करें. पैरामीटर टैब क्लिक करें और डिफ़ॉल्ट मान की पुष्टि या यदि आवश्यक हो तो DLIT पैरामीटर समायोजित. टैब फिर से संगठित 3D विश्लेषण शुरू करने के लिए क्लिक करें.
- जब 3D पुनर्निर्माण समाप्त हो गया है, 3D दृश्य 3 डी पुनर्निर्माण के परिणाम प्रदर्शित करेगा. फोटॉन घनत्व, voxels और DLIT एल्गोरिथ्म मापदंडों के लिए विश्लेषण डेटा देखने के परिणाम टैब क्लिक करें.
- सहेजें और / या 3D पुनर्निर्माण विश्लेषण के परिणामों के आंकड़े और डेटा फ़ाइलों में निर्यात.
6. प्रतिनिधि परिणाम:
एक असंक्रमित माउस नियंत्रण के साथ साथ bioluminescent बैक्टीरिया से संक्रमित चूहों के bioluminescence छवियाँ चित्र 1 में दिखाया जाता है. bioluminescent बैक्टीरिया के साथ संक्रमित चूहों फुफ्फुसीय फेफड़ों (चित्रा 1) से महत्वपूर्ण संकेत उपज. Luminescence तीव्रता रॉय के भीतर कुल प्रवाह (रुचि का क्षेत्र) (चित्रा 2) के रूप में मात्रा निर्धारित है. प्रकाश की तीव्रता के लिए मात्रात्मक डेटा कॉलोनी फेफड़ों से प्राप्त की पुष्टि करते हैं कि संकेत bioluminescent बैक्टीरिया से उत्पादित है और नकारात्मक नियंत्रण की तुलना में किया जा सकता है बैक्टीरिया के गठन इकाइयों (CFU) के लिए सामान्यीकृत है. स्थान और संकेत की तीव्रता आगे DLIT luminescence माउस सतह के 11 टोमोग्राफी पर आधारित स्रोत के 3D पुनर्निर्माण से विश्लेषण किया जा सकता है . ये विश्लेषण bioluminescent संकेत के उत्पादन मात्रा का ठहराव और स्थानीयकरण अनुमति देते हैं. संक्रमित चूहों में एक luminescent स्रोत के 3D पुनर्निर्माण के परिणाम यह दर्शाता है कि प्रकाश माउस के फेफड़ों (चित्रा 3) से उत्पादन किया है. उस luminescence की पुष्टि परिणामस्वरूप माउस फेफड़ों के पूर्व vivo छवियों फेफड़ों से उत्सर्जित होता है, बजाय कुछ अन्य बारीकी से juxtaposed ऊतक या अंग (चित्रा 2C ).
चित्रा 1. Bioluminescent CBRluc साथ टैग बैक्टीरिया के साथ फेफड़े संक्रमित चूहों के luminescence इमेजिंग uninfected नियंत्रण माउस छोड़ दिया है और दो संक्रमित चूहों सही पर हैं . चूहे CBRluc (n = 2) व्यक्त बैक्टीरिया से संक्रमित थे intratracheal मार्ग के माध्यम से. पृष्ठीय, उदर, बाईं ओर और सही पक्ष: luciferin इंजेक्शन के बाद 10 मिनट, luminescence छवियों 4 पदों पर 10 मिनट के लिए हासिल किया गया.
चित्रा 2. मात्रात्मक CBRluc व्यक्त जीवाणु से संक्रमित चूहों से प्रकाश की तीव्रता (ए, बी). आरओआई विश्लेषण और आरओआई से पृष्ठीय और उदर पदों में प्रकाश की मात्रा निर्धारित कुल प्रवाह के Luminescence छवियों क्रमशः. Uninfected चूहों बाईं तरफ के हैं और दो संक्रमित चूहों सही पर हैं. Luminescence छवियों फेफड़ों ओ से हासिल किया गयाच चूहों असंक्रमित और CBRlux से संक्रमित (n = 2). फेफड़ों के आसपास प्रकाश तीव्रता आरओआई विश्लेषण द्वारा मात्रा निर्धारित किया गया था. सी) पूर्व असंक्रमित (ऊपर) और संक्रमित चूहों (फेफड़ों के दो सेट नीचे) से फेफड़ों के vivo छवियाँ. Luciferin 5 miniuts इंजेक्शन तो इच्छामृत्यु और छवियों के पहले से हासिल किया गया था. मात्रा निर्धारित मूल्यों CFU सामान्यीकृत कर रहे हैं.
चित्रा 3. एक फेफड़े संक्रमित माउस से bioluminescence स्रोत (ओं) के 3D पुनर्निर्माण माउस intratracheal इंजेक्शन द्वारा CBRluc व्यक्त बैक्टीरिया से संक्रमित किया गया था. छवि अनुक्रम 540 एनएम से 700 एनएम के लिए धारावाहिक तरंगदैर्य के विभिन्न उत्सर्जन फिल्टर का उपयोग अधिग्रहण कर लिया था. एक छवि अनुक्रम जानवर विषय है कि एक संरचित imag निहित में luminescence स्रोत के लिए 3 डी पुनर्गठन के लिए इस्तेमाल किया गया था. ए) टोमोग्राफी माउस के लिए अलग अलग स्थितियों में दिखाया गया है: सामने, पीठ, बाएँ और दाएँ. प्रकाश स्रोतों (3 डी माउस के भीतर लाल बक्से) voxels है कि फेफड़ों के भीतर स्थित हैं के रूप में पुनर्निर्माण द्वारा निर्धारित रूप में दिखाए जाते हैं. बी) मापा और नकली डेटा के फोटॉन densiy नक्शा. तुलना मापा और नकली फोटॉन घनत्व घटता पुनर्निर्माण की गुणवत्ता की जानकारी प्रदान करते हैं. इसी तरह मापा और नकली फोटोन घनत्व में अच्छी गुणवत्ता पुनर्निर्माण परिणाम.
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Discussion
हालांकि इन प्रोटोकॉल का पालन आमतौर पर उच्च गुणवत्ता छवियों में परिणाम देगा, यह महत्वपूर्ण है के लिए कुछ महत्वपूर्ण मुद्दों पर विचार के क्रम में इमेजिंग अध्ययन से सटीक और लगातार डेटा प्राप्त. Luminescence छवियों को प्राप्त किया जा है कि 600 से 60,000 तक गिनती के लिए सुनिश्चित करें कि संकेत पृष्ठभूमि से ऊपर है और कैमरा संतृप्त नहीं है चाहिए. यदि संकेत प्राप्त 600 से भी कम है जोखिम स्थितियों के लिए मायने रखता है बढ़ाने के लिए समायोजित किया जाना चाहिए. यदि संकेत प्राप्त 60,000 से अधिक है कैमरा कुछ क्षेत्रों में संतृप्त है. जब कैमरा संतृप्त है, मात्रा का ठहराव संतृप्त क्षेत्रों में प्रयास नहीं करना चाहिए, हालांकि यह अभी भी संभव है और कभी कभी गैर संतृप्त क्षेत्रों में आवश्यक है. इसके अलावा, 3 डी पुनर्निर्माण के बाहर होना सही नहीं किया जा सकता है जब संतृप्त एक क्षेत्रों के पुनर्निर्माण के लिए मुखौटा के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है क्षेत्र के भीतर शामिल है. समय जोखिम का समायोजन, binning और छवि के अधिग्रहण के लिए एफ / बंद के रूप में के रूप में अच्छी तरह इमेजिंग क्षेत्र या जानवर की स्थिति के संशोधन संकेत प्राप्त नियंत्रण और डेटा के मात्रात्मक विश्लेषण की अनुमति कर सकते हैं. इस प्रकार, कई प्रयोगों में यह लगातार कई जोखिम शर्तों के तहत छवि पशुओं के लिए उपयोगी है सुनिश्चित करें कि छवियों के कम से कम एक सेट आवश्यक सीमा के भीतर होना करने के लिए मात्रात्मक विश्लेषण की अनुमति देगा.
यह महत्वपूर्ण है कि किसी भी रिपोर्टर जीन की अभिव्यक्ति याद डाह को प्रभावित करता है, यह आवश्यक बाहर ले जाने के लिए पायलट अध्ययन recombinants उपभेदों है कि इमेजिंग के लिए इस्तेमाल किया जा में फिटनेस पर संभावित प्रभावों का मूल्यांकन कर सकते हैं. यह bioluminescent इमेजिंग की सीमाओं में से एक है, क्योंकि यह बैक्टीरिया में विदेशी जीन की अभिव्यक्ति की आवश्यकता है. यह अक्सर अनुकूलित constructs कि बैक्टीरियल प्रजातियों के लिए उपयुक्त codon उपयोग का उपयोग करने के लिए अध्ययन, रिपोर्टर जीन की अभिव्यक्ति के स्तर के अनुमापन चयापचय या एकाधिक luminescent संवाददाता सिस्टम की परीक्षा पर प्रभाव है कि उनके प्रभाव में अलग हो सकता को कम करने के उपयोग के माध्यम से दूर किया जा सकता है है फिटनेस पर.
संक्रामक एजेंटों के साथ एक और इमेजिंग अध्ययन के लिए प्राथमिक चर जा रहा है imaged एजेंट द्वारा उत्पादित संकेत का स्तर है. के बाद से वहाँ का पता लगाने की दहलीज में प्रत्येक एजेंट के लिए के रूप में इन विट्रो में की तुलना में पशुओं में मतभेद हैं, यह अनुशंसित है कि पायलट कई संक्रामक खुराक का उपयोग एजेंट संख्या पहले अनुकूलन अध्ययन से बाहर ले जाने के लिए और अधिक व्यापक प्रयोग. bioluminescent खुद संवाददाताओं भी ट्रांसक्रिप्शन, अनुवाद, और कम विषाक्तता के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए, यह सुनिश्चित करें कि उत्पादन संकेत के स्तर के रूप में संभव के रूप में में उच्च है. संवाददाताओं के अनुकूलन इन विट्रो में ज्यादातर मामलों में पूरा किया जा सकता है, लेकिन प्रकाश उत्सर्जन की तरंग दैर्ध्य भी क्षमता इष्टतम संवाददाताओं द्वारा उत्पादित स्तनधारी ऊतक घुसना प्रकाश प्रभाव होगा, यह महत्वपूर्ण भी अलग संवाददाताओं का मूल्यांकन करने के लिए सीधे पशुओं में बना है. हालांकि प्रत्येक व्यक्तिगत जानवर पीछा किया जा सकता है, जो पशुओं के बीच परिवर्तनशीलता के एक महान सौदे के लिए नियंत्रण, यह अभी भी पर्याप्त जानवरों को शामिल के समूहों के बीच सांख्यिकीय महत्व को निर्धारित किया जा करने की अनुमति आवश्यक है. आमतौर पर, जानवरों की संख्या 4 होना चाहिए - 6 प्रति समूह, कम के रूप में के रूप में दो समूहों के बीच कई मामलों में मनाया जा गुना मतभेद की अनुमति. अन्त में, टीका मार्ग और उपयुक्त ऊतकों को प्रसव की सटीकता और सटीक एजेंट संख्या के पशुओं के बीच समग्र परिवर्तनशीलता को कम करने से अनुरूप परिणाम सुनिश्चित करने में मदद करेगा.
उत्पादन bioluminescence के वर्णक्रमीय गुण भी एक महत्वपूर्ण कारक vivo में छवि संक्रमण के लिए करने की क्षमता को प्रभावित है. स्तनधारी ऊतकों में, कम से कम 600 एनएम के तरंग दैर्ध्य के प्रकाश मोटे तौर पर हीमोग्लोबिन द्वारा अवशोषित कर रहे हैं, स्तनधारी ऊतक के एक प्रमुख घटक है. bioluminescence तरंग दैर्ध्य के लिए प्रवेश की गहराई काफी 600 से अधिक लंबी तरंग दैर्ध्य के लिए 8,12 एनएम बढ़ जाती है . दोनों CBRluc और FFluc एनएम सहित 600 से अधिक एक व्यापक तरंगदैर्ध्य के साथ bioluminescence उत्पादन के लिए vivo इमेजिंग में इन luciferases लगभग आदर्श संवाददाताओं बनाने फेफड़ों और जिगर 7-8 सहित गहरी ऊतकों में भी .
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Disclosures
पशु अध्ययन संस्थागत पशु देखभाल और टेक्सास ए एंड एम विश्वविद्यालय का प्रयोग समिति द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार में प्रदर्शन किया गया.
Acknowledgments
लेखक इस अध्ययन के दौरान बहुमूल्य विचार - विमर्श और सहायता के लिए Cirillo प्रयोगशाला के सदस्यों को धन्यवाद. हम इस प्रोटोकॉल के फिल्मांकन के दौरान डा. यहोशू हिल और के साथ सहायता के लिए डॉ. जेम्स शमूएल की प्रयोगशाला धन्यवाद. इस काम को 48523 अनुदान द्वारा बिल एंड मेलिंडा गेट्स फाउंडेशन और स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान से अनुदान AI47866 से वित्त पोषित किया गया था.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Isoflurane | VETONE | 501027 | |
| Ketamine | Butler Animal Health Supply | ||
| Xylazine | MP Biomedicals | 158307 | |
| Luciferin | GMT | LUCK-100 | |
| Fetal plus solution | Vortech Pharmaceutical Ls, Ltd | ||
| Cathether (22G x 1”) | Terumo Medical Corp. | OX2225CA | |
| Guide wire | Hallowell EMC | 210A3491 | |
| Octocope with speculum | Hallowell EMC | 000A3748 | |
| Xenogen IVIS system | Caliper Life Sciences | ||
| XGI-8-gas Anesthsia System | Caliper Life Sciences | ||
| Living Imaging Software | Caliper Life Sciences | ||
| Transparent nose cones | Caliper Life Sciences | ||
| Light baffle divider | Caliper Life Sciences |
References
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