在这里,我们目前快速和高分辨率荧光详细的神经元活动的螃蟹stomatogastric节电压敏感染料成像的方法。
电压敏感染料成像神经元是神经网络是如何组织的理解的一个关键方法,以及如何参与神经元的同步活动出现的网络中不可或缺的的功能。在这里,我们目前的应用这种技术鉴定的格局产生蟹stomatogastric节神经元的方法。我们展示的电压敏感的荧光染料迪8 ANEPPQ这些神经元的装载和我们展示了如何形象染料使用的MiCAM02高速和高分辨率CCD相机的成像系统加载的神经元活动。我们证明使用BVAna MiCAM02成像系统的图像处理软件所记录的成像数据的分析。 stomatogastric蟹节的多个神经元的详细活动同步电压敏感染料成像应用与传统的电生理技术(细胞内和细胞外录音)打开从根本上为中枢模式发生器神经网络工作的理解了新的机遇。
电压敏感染料成像8,9 STG神经元相结合,与传统的电方法(内和外电极录音),可以更好地了解如何小,众所周知,仍然复杂的神经系统的工作原理。 STG是一个中枢模式发生器(CPG)神经网络(包括和胃幽门磨节奏网络)10,11,从而更好地了解一个新兴的功能特性的STG也将有助于了解如何在一般的原型中央人民政府网络生成自己的网络级的功能。 CPG网络发挥关键作用在电机控制12,并在较高的认知功能13,从而更好地理解其紧急性质可能有一个在神经科学的许多领域产生重大影响。
The authors have nothing to disclose.
我们承认和纽卡斯尔大学的科学,农业与工程学院计算机科学学院的支持下,由乌尔姆大学,由SciMedia有限公司(日本东京)。
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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MiCAM02 | SciMedia Ltd, Tokyo, Japan | Imaging system | ||
BVAna v.10.08 | SciMedia, Tokyo, Japab | Data analysis software for the MiCAM 02 imaging system | ||
HL-151 | Moritex, Tokyo, Japan | Ultra-low ripple halogen light source | ||
BX51 WI | Olympus, Tokyo, Japan | Upright microscope for epifluorescence imaging | ||
20x imaging objective | Olympus Corporation, Tokyo, Japan | XLUMPLFL20XW/0.95 | NA 0.95, WD 2.0mm | |
10x imaging objective | Olympus Corporation, Tokyo, Japan | UMPLFL10XW | NA 0.30, WD 3.3mm | |
Filter cube with 480-550 nm excitation filter and 590nm emission filter | Olympus Corporation, Tokyo, Japan | MSWG2 | ||
Antivibration table | Scientifica Ltd, Uckfield, UK | 63-534 | ||
PatchStar electrode manipulator | Scientifica Ltd, Uckfield, UK | PS-7000C | Micro-electrode manipulator | |
CED Power 1401 | Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK | Data acquisition board | ||
DL708E Oscilloscope | Yokogawa, Tokyo, Japan | Intracellular amplifier | ||
AC differential amplifier | University of Kaiserslautern, Germany | Extracellular amplifier | ||
P-97 Flaming – Brown type electrode puller | Sutter Instruments, Novato, CA, USA | Electrode puller | ||
Sigma Microcentrifuge 1-14 | Sigma, Osterode, Germany | Centrifuge | ||
Genex Pipettors Mline | Scientific Laboratory Supplies, UK | PIP7774 | PIP7774 | |
Glass micropipette with filament | Science Products, Hofheim, Germany | GB100TF 8P | Glass for microelectrodes | |
MicroFil – 34G | World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | Microfil needle | ||
Spike 2 v6.10 | Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK | Electrophysiology software | ||
Di-8-ANEPPQ | Cambridge Bioscience Ltd, Cambridge, UK | BT61014 | Fluorescent voltage sensitive dye | |
F-127 Pluronic Acid, DMSO | Invitrogen, Paisley, UK | P-3000MP | Solvent | |
NaCl | Sigma – Aldrich, Poole, UK | S9888 | Crab saline component | |
CaCl2 . 2H2O | Sigma – Aldrich, Poole, UK | C3881 | Crab saline component | |
KCl | Sigma – Aldrich, Poole, UK | P3911 | Crab saline component, electrolyte solution | |
MgCl2 . 6H2O | Sigma – Aldrich, Poole, UK | M9272 | Crab saline component | |
Trizma base | Sigma – Aldrich, Poole, UK | T1503 | Crab saline component | |
Maleic acid | Sigma – Aldrich, Poole, UK | M0375 | Crab saline component | |
Elastosil RT-601 | Wacker, Munich, Germany | Lining of Petri dishes |