私たちは、毛状根複合植物が困難な変換種で植物 – 根粒菌の相互作用と根粒形成を研究するために使用することができる方法を示しています<em>ウマゴヤシtruncatula</em>。
アグロバクテリウムのtumerfaciensと同様に、アグロバクテリウムリゾゲネスは、自律的なルート誘導(Ri)のプラスミド。A.に基づいて植物細胞に外来DNAを転送することができますリゾゲネスは、植物組織やフォームの変換後の複合植物の毛状根の形成を引き起こす可能性があります。芽はまだ非トランスジェニックいる間、エネルギーや成長支援を提供するために提供する、これらの複合の植物で、再生された根の一部は、野生型T – DNAと人工バイナリーベクターを有するトランスジェニック、です。これらの毛状根の複合植物が遺伝子組み換え種子を生成しませんが、植物の研究でこれらの複合植物は非常に便利なように重要な機能がいくつかあります。最初に、広い宿主範囲を持つ、A.リゾゲネスは 、様々な種の遺伝子工学を可能にする、特に多くの植物種、双子葉植物を変換することができます。第二に、A.リゾゲネスは、直接組織し、外植片に感染、形質転換前には組織培養では手に負えない植物種の形質転換に最適です、複合植物を得るためには必要ありません。また、トランスジェニックルートの組織は、数週間のうちに生成することができます。 ウマゴヤシtruncatulaの場合、我々は正常な花のディップシロイヌナズナ形質転換よりも速く、短く3週間でトランスジェニックルーツを取得することができます。全体的に、毛状根の複合プラントテクノロジーは、遺伝子の機能とルートに関連する、表現型を研究するために汎用性と有用なツールです。ここでは、毛状根複合植物が困難な変換種M.の植物-根粒菌の相互作用と根粒形成を研究するために使用することができる方法を示していますtruncatula。
毛状根の複合プラントを生成すると、多くの双子葉植物の種のトランスジェニック材料を大量に得るために迅速かつ容易な方法です。このメソッドは、トランスジェニック種子を生産することはできませんが、それは数週間でトランスジェニック材料を生成することができます。方法は困難組織培養の確立や、安定した形質転換体を生成している植物に特に適しています。長年にわたり、我々は、遺伝子機能、プロモーターの機能、マイクロRNA、根と側根の発達、防御と非生物的ストレス応答、根粒形成および他の共生のプロセス、ホルモン応答、メタボリックプロファイリング、遺伝子プロファイリング、プロテオーム解析の研究にこの技術を使用している、と他の生物学的プロセス。プロトコルは、堅牢で複製可能です。
The authors have nothing to disclose.
著者は、私たちの研究室と博士に毛状根の技術を導入するための博士クリステイラー(オハイオ州立大学)に感謝したいと思います。 Senthil Subramanianは(サウスダコタ州立大学)、プロトコルを改善するためのファン張(魯東大学、中国山東省)。我々はまた、このビデオを作るのに役立つために博士ハオチェン(南京農業大学を)感謝。この作品は、OYにDOE(DE – SC0001295)、NSF(MCB – 0923779)とUSDA(2010-65116-20514)からの助成金によって部分的にサポートされています