Мы демонстрируем в видео способе получения окклюзии средней мозговой артерии у взрослых мышей использования внутрипросветного мононити. Мы также показываем, как оценить степень инфаркт мозга по 2,3,5-triphenyltetrazolium хлорида (ТТК) окрашивания.
Инсульт является наиболее распространенным фатальной неврологической болезни в США 1. Большинство ударов (88%) в результате блокирования сосудов головного мозга (ишемический инсульт) 2. Так как большинство ишемических инсультов (~ 80%) имеют место на территории средней мозговой артерии (СМА) 3, многих животных инсульта моделей, которые были разработаны сосредоточили свое внимание на этой артерии. Внутрипросветный модель мононити средней мозговой артерии (MCAO) включает вставки из хирургической нити в наружной сонной артерии и резьбы его вперед на внутренней сонной артерии (ВСА) до кончика закрывает происхождения MCA, что приводит к прекращению кровотока и последующего инфаркта мозга в 4 территории MCA. Метод может быть использован для моделирования постоянной или транзиторной окклюзии 5. Если шов удаляется через определенный интервал (30 мин, 1 час, или 2 ч), реперфузия достигается (переходные MCAO), если нить остается на месте (24 ч) процедура может быть использован как модель непрерывного MCAO . Этот метод не требует удаление фрагментов костей черепа, нейрохирургические процедуры для удаления части черепа, которые могут повлиять на внутричерепное давление и температура 6. Она стала наиболее часто используемый метод, чтобы имитировать постоянное и временное координационного ишемии головного мозга у крыс и мышей 7,8. Для оценки степени инфаркт мозга, мы пятна мозга ломтики с 2,3,5-triphenyltetrazolium хлорид (ТТС) для выявления ишемической ткани мозга 9. В этом видео, мы демонстрируем MCAO метод и определение размера инфаркта окрашиванием ТТК.
MCAO у мышей обычно используется для модели фокальной ишемии мозга у людей. Использование мыши для хода исследования стало более частым из-за наличия трансгенных и нокаут штаммов. Есть несколько ответственных деталей отметить в протоколе:
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана NIH грант NS057195, UCSF REAC награду, и Kent State University запуска фонда WH Чжоу.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Isoflurane | Chemical | Aerrane, Baxter | 95045-588 | |
V-10 Anesthesia system | Equipment | VetEquip | 901807 | |
TR-200 Temp Controller | Equipment | Fine Science Tools | 21060 | |
Electric clipper | Equipment | Braintree | CLP-9931 | |
Dissecting microscope | Equipment | Nikon | SMZ745T | |
Retractor system | Equipment | Braintree | ACD-014 | |
Bipolar coagulator | Equipment | Howard Instrument | 64000 | |
Silk suture | Material | Harvard Apparatus | 510479 | |
Monofilament suture | Material | Harvard Apparatus | 723351 | |
Vascular clamp | Equipment | Fine Science Tools | 00396-01 | |
Vannas scissor | Equipment | Fine Science Tools | 15000-08 | |
Brain matrix | Equipment | Braintree | BS-2000C | |
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Chemical | Sigma-Aldrich | T8877 | |
10% neutral buffer formalin | Chemical | Sigma-Aldrich | HT5011 |