Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

الليزر Microdissection القبض على أنسجة الثدييات

Published: October 1, 2007 doi: 10.3791/309

Summary

Abstract

الليزر التقاط المجهري ، والمعروف أيضا باسم microdissection الليزر (LMD) ، تمكن المستخدم من عزل أعداد صغيرة من الخلايا أو الأنسجة من المجمدة أو الفورمالين الثابتة والمقاطع البارافين جزءا لا يتجزأ من النسيج. تقنيات LMD تعتمد على غشاء عطوب الحرارية وضعت إما في أعلى أو أسفل ، وقسم الأنسجة. في أسلوب واحد ، يتم استخدام طاقة الليزر مركزة لإذابة غشاء الخلايا على الكامنة ، التي يمكن بعد ذلك رفع للخروج من الباب الأنسجة. في الآخر ، وطاقة الليزر يبخر احباط على طول المسار "رسمها" على الأنسجة ، مما يسمح للخلايا محددة للوقوع في جهاز التحصيل. كل أسلوب يسمح للاختيار من الخلايا مع الحد الادنى من القرار ميكرون عدة. قد تكون معزولة DNA ، RNA والبروتين والدهون والعينات وتحليلها من تشريح عينات صغيرة. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح استخدام لايكا AS - LMD صك microdissection الليزر في سبع فئات ، بما في ذلك مقدمة لمبادئ LMD ، تهيئة أداة للاستخدام ، والاعتبارات العامة لإعداد العينات ، وتركيب العينة ووضع أنابيب التقاط والتوفيق بين المجهر ، وتعديل الضوابط الطبيعية ، والاستيلاء على عينات الأنسجة. الليزر التقاط الجزئي تشريح تمكن المحقق من عزل عينات من السكان الخلية نقية صغيرة مثل الخلية مكافئات قليلة. هذا يسمح تحليل خلايا الفائدة التي تكون خالية من الملوثات المجاورة ، الأمر الذي قد يشوش النتائج التجريبية.

Tags

المسألة 8 ، البروتوكولات الأساسية ، ليزر Microdissection لقطة ، تقنيات Microdissection ، ايكا
الليزر Microdissection القبض على أنسجة الثدييات
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Edwards, R. A. Laser CaptureMore

Edwards, R. A. Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue. J. Vis. Exp. (8), e309, doi:10.3791/309 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter