Summary
硝子体内注射、眼の疾患のためのまたは局所治療の直接的な応用として、視覚科学の研究に広く使用されている技術です。このビデオでは、ガラスピペットで1ミリリットル注射器を使用して硝子体内注射のためのプロトコルを示した。大量出血し、レンズの損傷を避けることについての有用なヒントが与えられている。
Abstract
硝子体内注射は、視覚科学の研究に広く使用されている技術です。それは、眼疾患、または局所治療の直接的な応用として動物モデルを確立するために使用することができます。このビデオでは、硝子体内注射の手順を完了するためのシンプルで安価なツールを使用する方法を紹介します。 、代わりにhemiltonシリンジの、1 mlの注射器の使用が使用されます。実用的な完璧なヒントをガラスピペットを用いて適切な注射針を作る方法のヒント、そしてどのように簡単にしっかりと一緒にガラスピペットと注射針を接続するためには、与えられている。
良い硝子の注入を行うために、観察される3つの側面があります：1）注射部位は、網膜の構造を破壊しないでください。2）出血は、感染のリスクを減らすために避けるべきである、3）レンズは、外傷性白内障を避けるために触れられすべきである。簡単に言えば、最も重要なポイントは、通常の眼の構造の中断を減らすことです。網膜の中断を避けるために、ラットの眼の優れた鼻の領域が選択されました。また、針の穿刺のポイントは、ラットの眼の角膜輪部地域から約1.5 mmであるパー平面、にあった。硝子体の少量を穏やかに注入する前に眼圧を軽減するために穿刺孔から押し出される。 45 °の射出角と、それはこのように、レンチキュラー要因から関連する合併症と影響を避け、ラットの眼の外傷性白内障が発生する可能性が低くなります。この操作では、結膜や眼筋のないカット、出血はありませんでした。迅速で軽傷で、成功した硝子体内注入は数分で行うことができます。
注入この特定のプロトコルに記載されている設定は、硝子体内注射のための固有のものです。しかし、ここで紹介する方法および材料はまた、脳、脊髄または小型哺乳類の他の臓器への薬物送達における他の注射の手順については、使用することができます。
Protocol
- ピペットプラーを使用してガラスピペットを準備し、1ミリリットル注射器に接続し、パラフィルムで接続をシール。ピペットの先端に溶液2 mlを撤回し、注射の準備をする。
- ケタミン（80mg/kg）とキシラジン（8mg/kg）（2:1体積比）の腹腔内注射によってラットをAnaesthetize。
- 硝子体内注射の前に局所麻酔薬としてラットの眼に0.5％alcaineの一滴を適用します。
- ラットを配置し、眼の優れた鼻の領域を公開する。
- 優れた鼻強膜はパープラナのレベルでの穿刺に30ゲージの針を使用してください。眼の筋肉や血管に触れないようにしてください。
- 後房からの穿刺孔から硝子体の少量を取り除くために眼球穏やかな圧力を与える。
- 硝子体内に強膜を介して45 °の角度で穿刺孔を介してガラスピペットの先端を挿入します。後チャンバーに溶液2 mlを注入し、数秒程度の場所に保管して、そっと針を取り除く。レンズや眼内血管に触れないようにしてください。
- 硝子体内注射後、感染を防ぐために、ラットの目に点眼Tobrexの軟膏を塗る。
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Discussion
良い硝子注射は、動物モデルだけでなく、直接眼の治療を確立するのに便利です。最初に、注射部位は、網膜の構造を破壊するではありません。第二に、出血、感染のリスクを減らすために避けるべきである。第三に、レンズは、外傷性白内障を避けるために触れられすべきである。最も重要なのは、通常の眼の構造の中断を減らすことです。
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Disclosures
動物は、ビジョンと眼科文で、香港の大学の教育と研究に生きている動物の使用（CULATR）に委員会で承認された研究における動物の使用と研究のための協会のためのプロトコルに従って処理されていました眼科とビジョン研究における動物の使用。
Acknowledgments
この研究室で緑内障の研究は、アメリカの健康アシスタント財団からの国立緑内障の研究によってサポートされています。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Microscope | Olympus Corporation | OME | |
| Glass Pipettes | World Precision Instruments, Inc. | ||
| Pipette Puller | David Kopf Instruments | ||
| 1ml syringes | single use | ||
| 30G needles | single use | ||
| Ketamine | Aldasan | anesthetic | |
| Xylazine | Aldasan | anesthetic | |
| Alcaine | Alcon | 0.5% proparacaine hydrochloride | |
| Tobrex | Alcon | ointment, 3% tobramyxin. |
References
- Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
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