Summary
Intravitreous इंजेक्शन नेत्र रोगों के लिए या स्थानीय उपचार के सीधे आवेदन के रूप में एक दृश्य विज्ञान अनुसंधान के क्षेत्र में व्यापक रूप से प्रयोग किया जाता तकनीक है. यह वीडियो intravitreous कांच विंदुक के साथ एक 1ml सिरिंज का उपयोग इंजेक्शन के लिए एक प्रोटोकॉल का प्रदर्शन किया. बड़े पैमाने पर खून बह रहा है और लेंस नुकसान से बचने के बारे में उपयोगी सुझाव दिए हैं.
Abstract
Intravitreous इंजेक्शन दृश्य विज्ञान अनुसंधान में एक व्यापक रूप से प्रयोग किया जाता तकनीक है. यह नेत्र रोगों के साथ या स्थानीय उपचार के सीधे आवेदन के रूप में पशु मॉडल स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस वीडियो का परिचय कैसे सरल और सस्ती उपकरणों का उपयोग करने के लिए intravitreous इंजेक्शन प्रक्रिया खत्म. 1 मिलीलीटर सिरिंज का प्रयोग, एक hemilton सिरिंज के बजाय प्रयोग किया जाता है. कैसे उपयुक्त इंजेक्शन सही सुझावों के साथ कांच pipettes का उपयोग सुइयों, और कैसे करने के लिए आसानी से ग्लास विंदुक के साथ सिरिंज सुई कसकर एक साथ कनेक्ट करने के लिए व्यावहारिक सुझावों, दिया जाता है.
एक अच्छा intravitreous इंजेक्शन का संचालन करने के लिए, वहाँ तीन पहलुओं करने के लिए मनाया जा रहे हैं: 1) इंजेक्शन साइट रेटिना संरचना को बाधित नहीं किया जाना चाहिए; 2) खून बह रहा संक्रमण के जोखिम को कम करने से परहेज किया जाना चाहिए;) 3 लेंस दर्दनाक मोतियाबिंद से बचने अछूता होना चाहिए. संक्षेप में, सबसे महत्वपूर्ण बात सामान्य नेत्र की संरचना की रुकावट को कम है. रेटिना की रुकावट से बचने के लिए, चूहा आंख की बेहतर नाक क्षेत्र में चुना गया था. इसके अलावा, सुई पंचर बिंदु के बराबर planar है, जो चूहे आँख की अंगीय क्षेत्र से के बारे में 1.5 मिमी था पर था. कांच की एक छोटी राशि धीरे पंचर छेद के माध्यम से बाहर धक्का दे दिया इंजेक्शन से पहले intraocular दबाव को कम. 45 ° इंजेक्शन कोण के साथ, यह चूहे की आंखों में दर्दनाक मोतियाबिंद के कारण, इस प्रकार lenticular कारकों से संबंधित जटिलताओं और प्रभाव से बचने की संभावना कम है. इस आपरेशन में, वहाँ कंजाक्तिवा और आंख की मांसपेशियों का कोई काटने, कोई खून बह रहा था. त्वरित और मामूली चोट के साथ, एक सफल intravitreous इंजेक्शन मिनट में किया जा सकता है.
इंजेक्शन इस विशेष प्रोटोकॉल में उल्लिखित सेट intravitreous इंजेक्शन के लिए विशिष्ट है. हालांकि, विधियों और सामग्री यहाँ प्रस्तुत भी दवा वितरण में अन्य इंजेक्शन प्रक्रियाओं के लिए मस्तिष्क, रीढ़ की हड्डी या छोटे स्तनधारियों में अन्य अंगों के लिए कर सकते हैं इस्तेमाल किया जा.
Protocol
- तैयार कांच pipettes pipettes खींचने का उपयोग करने के लिए, यह एक 1ml सिरिंज के लिए कनेक्ट, और parafilm साथ कनेक्शन सील. Pipettes की टिप में समाधान के 2 मिलीलीटर वापस लेने और इंजेक्शन के लिए तैयार हो जाओ.
- (80mg/kg) ketamine और xylazine (8mg/kg) (2:01 पर मात्रा अनुपात) के अंतर peritoneal इंजेक्शन द्वारा चूहा चतनाशून्य करना.
- एक 0.5% alcaine की intravitreous इंजेक्शन से पहले सामयिक anesthetics के रूप में चूहे आंखों के लिए ड्रॉप लागू करें.
- चूहे स्थिति और आँख की बेहतर नाक क्षेत्र बेनकाब.
- बराबर प्लाना के स्तर पर बेहतर नाक श्वेतपटल पंचर करने के लिए एक 30 गेज सुई का प्रयोग करें. नेत्र मांसपेशियों और जहाजों को छूने से बचें.
- आँख गेंद हल्के पीछे कक्ष से पंचर छेद के माध्यम से कांच की एक छोटी राशि से छुटकारा पाने के दबाव दे.
- श्वेतपटल के माध्यम से एक 45 ° कोण पर कांच शरीर में पंचर छेद के माध्यम से ग्लास विंदुक टिप सम्मिलित. पीछे चेंबर में समाधान के 2 मिलीलीटर इंजेक्षन और कुछ सेकंड के बारे में लिए जगह में रखने के लिए, फिर धीरे से सुई हटायें. लेंस और intraocular वाहिकाओं को छूने से बचें.
- Intravitreous इंजेक्शन के बाद, चूहे के लिए संक्रमण को रोकने के आंखों पर नेत्र Tobrex मरहम लागू होते हैं.
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Discussion
अच्छा intravitreous इंजेक्शन प्रत्यक्ष intraocular उपचार के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पशु मॉडल की स्थापना के लिए उपयोगी है. सबसे पहले, इंजेक्शन साइट रेटिना की संरचना को बाधित नहीं करना चाहिए. दूसरा खून बह रहा, संक्रमण के जोखिम को कम करने के लिए बचा जाना चाहिए. तीसरा लेंस दर्दनाक मोतियाबिंद से बचने अछूता होना चाहिए. सबसे महत्वपूर्ण सामान्य नेत्र की संरचना की रुकावट को कम है.
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Disclosures
अनुसंधान में जानवर का उपयोग शिक्षण और अनुसंधान में लाइव पशु का उपयोग करें (CULATR) हांगकांग विश्वविद्यालय और एसोसिएशन के अनुसंधान के लिए के लिए विजन और नेत्र विज्ञान वक्तव्य में समिति द्वारा अनुमोदित के लिए प्रोटोकॉल के अनुसार पशुओं संभाला गया ऑप्थाल्मिक और विजन रिसर्च में जानवरों का उपयोग.
Acknowledgments
इस प्रयोगशाला में मोतियाबिंद का अध्ययन अमेरिकी स्वास्थ्य सहायक फाउंडेशन से राष्ट्रीय रोग अनुसंधान द्वारा समर्थित है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Microscope | Olympus Corporation | OME | |
| Glass Pipettes | World Precision Instruments, Inc. | ||
| Pipette Puller | David Kopf Instruments | ||
| 1ml syringes | single use | ||
| 30G needles | single use | ||
| Ketamine | Aldasan | anesthetic | |
| Xylazine | Aldasan | anesthetic | |
| Alcaine | Alcon | 0.5% proparacaine hydrochloride | |
| Tobrex | Alcon | ointment, 3% tobramyxin. |
References
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