Summary
Intravitreous 주사는 안구 질환 또는 현지 치료의 직접적인 응용 프로그램으로 시각 과학 연구에 널리 사용되는 기법입니다. 이 동영상은 유리 피펫과 1ml 주사기를 사용하여 intravitreous 사출을위한 프로토콜을 보여주었다. 과다 출혈 및 렌즈 손상을 피하에 대한 유용한 팁은 주어집니다.
Abstract
Intravitreous 주사는 시각 과학 연구에 널리 사용되는 기법입니다. 이것은 안구 질환이나 현지 치료의 직접적인 응용 프로그램으로 동물 모델을 확립하는 데 사용할 수 있습니다. 이 동영상은 intravitreous 사출 절차를 완료하기 위해 간단하고 저렴한 도구를 사용하는 방법을 소개합니다. 대신 hemilton의 주사기의 1 ML 주사기의 사용이 사용됩니다. 적절한 사출 완벽한 팁을 유리 pipettes를 사용하는 바늘, 얼마나 쉽게 단단하게 함께 유리 피펫과 주사기 바늘을 연결을하는 방법에 대한 실용 팁이 제공됩니다.
한 주사 사이트는 망막 구조를 방해해서는 안) 2) 출혈은 감염의 위험을 줄이기 위해 피해야한다, 3) 렌즈는 외상 백내장을 피하기 위해 온전히되어야합니다 좋은 intravitreous 주사를 실시하기 위해 관찰하는 세 가지 측면이 있습니다. 간단히, 가장 중요한 포인트는 일반적인 안구 구조의 중단을 줄일 수 있습니다. 망막의 중단을 방지하려면, 쥐 눈 우수한 비강 지역은 선정되었습니다. 또한, 바늘의 바늘 포인트는 쥐 눈 limbal 지역에서 약 1.5 mm 있었던 파 평면에서했다. 유리체의 소량을 부드럽게 주입하기 전에 intraocular 압력을 줄이기 위해 바늘 구멍을 통해 밖으로 밀고있다. 45 ° 분사 각도로, 따라서 렌즈형 요인의 관련 합병증 및 영향을 피하기 위해, 쥐의 안구에서 외상성 백내장을 일으킬 가능성이 적습니다. 이 작업에서는 결막과 안구 근육에 대한 절단, 아니 출혈이 없었습니다. 신속하고 가벼운 부상으로 성공적인 intravitreous 분사는 분 안에 수행할 수 있습니다.
사출이 특정 프로토콜에 설명된 설정하면 intravitreous 주사에만 적용됩니다. 그러나, 여기에 제시된 방법과 자료는 또한 뇌, 척수 또는 작은 포유류의 다른 장기에 약물 전달의 다른 주입 절차에 사용할 수 있습니다.
Protocol
- pipettes의 풀러를 사용하여 유리 pipettes 준비, 1ml 주사기에 연결하고 parafilm와 연결을 밀봉. pipettes 끝에 솔루션 2 ML을 철회하고 사출을위한 준비.
- 케타민 (80mg/kg)과 xylazine (8mg/kg) (2시 1분에서 볼륨 비율)의 내부 복막 주사로 쥐 마취시키다.
- intravitreous 주입하기 전에 국소 anesthetics으로 쥐 눈 0.5 % alcaine 한방울을 적용합니다.
- 쥐 위치와 안구의 우수한 비강 지역을 쉽게받을 수 있습니다.
- 파 플라나의 수준에 찔린 우수한 비강 공막엔를 30 게이지 바늘을 사용합니다. 안구 근육과 혈관을 만지는 것을 피하십시오.
- 뒷부분 챔버에서 바늘 구멍을 통해 유리의 작은 금액을 없애 눈에 볼 가벼운 압력을주세요.
- 유리체 몸으로 공막엔을 통해 45 ° 각도로 바늘 구멍을 통해 유리 피펫의 팁을 넣습니다. 후부 챔버로 솔루션 2 ML을 주사하고 몇 초 약 장소에 보관 후, 부드럽게 바늘을 제거합니다. 렌즈 intraocular 선박을 만지는 것을 피하십시오.
- intravitreous 주입 후 감염을 방지하기 위해 쥐의 안구에 안과 Tobrex의 연고를 적용합니다.
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Discussion
좋은 intravitreous 사출 직접 intraocular 치료뿐만 아니라, 동물 모델을 수립하는 데 유용합니다. 첫째, 주사 사이트는 망막 구조를 중단해서는 안됩니다. 둘째, 출혈은 감염의 위험을 줄이기 위해 피해야한다. 셋째, 렌즈 외상성 백내장을 피하기로 온전히해야합니다. 가장 중요한 것은 정상적인 안구 구조의 중단을 줄일 수 있습니다.
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Disclosures
동물에 대한 비전과 안과 제표 연구에 대한 홍콩의 대학과 협회의 교육 및 연구에 살아있는 동물의 사용 (CULATR)의위원회에 의해 승인된 연구에 동물의 사용을 위해 프로토콜에 따라 처리되었습니다 안과 및 비전 연구에 동물 사용합니다.
Acknowledgments
이 실험실에서 녹내장의 연구는 미국의 건강 보조 재단 국립 녹내장 연구에 의해 지원됩니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Microscope | Olympus Corporation | OME | |
| Glass Pipettes | World Precision Instruments, Inc. | ||
| Pipette Puller | David Kopf Instruments | ||
| 1ml syringes | single use | ||
| 30G needles | single use | ||
| Ketamine | Aldasan | anesthetic | |
| Xylazine | Aldasan | anesthetic | |
| Alcaine | Alcon | 0.5% proparacaine hydrochloride | |
| Tobrex | Alcon | ointment, 3% tobramyxin. |
References
- Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
- Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).
- Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
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