1. परिचय लबादा प्रयोगशाला कई वर्षों के लिए किया गया है औसत दर्जे का gastrocnemius मांसपेशी तैयारी का उपयोग कर, और इससे पहले कि, पूरे gastrocnemius मांसपेशी तैयारी के रूप में डॉ. फिल गार्डिनर के साथ विकसित 1. 2. संज्ञाहरण वयस्क Sprague-Dawley चूहों (200-300 ग्राम) आम तौर पर बगल में सिकुड़ा गुणों के अध्ययन के लिए कर रहे हैं, हमारी प्रयोगशाला में प्रयोग किया जाता है. चूहे एक plexiglass डिवाइस में विवश किया जा सकता है, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध है, या एक तौलिया के साथ कवर, और पकड़े. हम / ketamine xylazine (100 मिलीग्राम · मिलीलीटर -1, प्रत्येक) 85:15 में मिश्रित उपयोग करते हैं, और चूहा 2,3 वजन intramuscularly के 100 ग्राम प्रति 0.1 मिलीग्राम प्रशासन. (50-60 मिलीग्राम · किलो -1, intraperiteneal) pentobarbital या isoflurane सोडियम 4 (2-3.5%, साँस) भी किया जा सकता है. जबकि चतनाशून्य करनेवाली औषधि प्रभाव ले जा रहा है, एक सटीक वजन और प्राप्त किया जा सकता है और छोड़ दिया हिंद – अंग मुंडा. यह भी एक अच्छा टिमई करने के लिए सुनिश्चित करें कि सभी इलेक्ट्रॉनिक्स पर बदल रहे हैं और तैयार हो. यह कंप्यूटर, तनाव गेज एम्पलीफायर, तेल हीटर और अन्य शामिल हैं. पलटा प्रतिक्रिया की समय – समय पर वापसी के लिए जाँच करें और संज्ञाहरण के पूरक के रूप में की जरूरत (0.05 100 ग्राम प्रति 0.1 मिलीग्राम). 3. सर्जरी की शुरुआत हम पर जो शल्य चिकित्सा के लिए चूहे स्थिर plexiglass मंच का उपयोग करें. सरल मास्किंग टेप काम करता है. यकीन है कि पशु बाईं hindlimb से सही forelimb तक फैला है. आंखों के लिए स्नेहक की एक बूंद जोड़ें. हम पैराफिन तेल का उपयोग करें. अन्यथा, आँखें ketamine संज्ञाहरण के साथ बाहर सूख जाएगा. एक छोटी सी शल्य चिकित्सा प्रकाश उपयोगी है. यह एक पर्याप्त पशु गर्म रखने में मदद के लिए गर्मी का उत्सर्जन करता है. वैकल्पिक रूप से, एक पानी हीटिंग कंबल इस्तेमाल किया जा सकता है. यकीन है कि corneal या पैर के अंगूठे चुटकी सजगता अनुपस्थित रहे हैं इससे पहले कार्यवाही होने की जाँच करें. बाँझ तकनीक के लिए आवश्यक नहीं है, क्योंकि इस प्रक्रिया तीव्र है. जानवर संज्ञाहरण से नहीं ठीक हो जाएगी. हम चतनाशून्य करनेवाली औषधि के साथ चूहे euthanizeजरूरत से ज्यादा (0.2 मिलीलीटर intracardiac) जब सभी प्रक्रियाओं को पूरा कर रहे हैं. 1 चीरा कशेरुका स्तंभ के लिए एड़ी से त्वचा के माध्यम से है. हम कैंची का प्रयोग, क्योंकि कटौती की गहराई और नियंत्रित किया जा सकता है कैंची अंतर्निहित ऊतकों से त्वचा को अलग करने के लिए उपयोग किया जाता है. चूहे उत्कृष्ट haemostasis है, इतने लंबे समय के रूप में आप बड़े रक्त वाहिकाओं से बचने के, खून बह रहा है सीमित हो जाएगा. उजागर isotonic धुंध खारा लथपथ सतहों को कवर, जब भी संभव रखें. अंतर्निहित संयोजी ऊतक के बाद त्वचा से अलग है, सतही मांसपेशी परत में कटौती है. नहीं जाना भी गहरी सुनिश्चित रहें, आप sciatic तंत्रिका या रक्त वाहिकाओं, या ब्याज की मांसपेशियों को नुकसान नहीं करना चाहती. शुरू gastrocnemius मांसपेशी और proximally में कटौती, त्वचा चीरा के रूप में एक ही रेखा के साथ. पता लगाने और sciatic तंत्रिका से बचने झांकना नीचे. एक बार जब आप तंत्रिका देखते हैं, तो आप अपने चीरा के साथ अपने पथ का अनुसरण कर सकते हैं, लेकिन तंत्रिका अच्छी तरह से ऊपर रहते हैं. संगीत के बीच एक स्पष्ट सीवन हैcles. यह पता लगाएँ, और घुटने की ओर है कि सीवन के साथ काटा. लिए देखो और रक्त वाहिकाओं से बचने. 4. फीमर हड्डी पिन के लिए पायलट छेद तैयार फीमर की दुम का पहलू पर मांसपेशियों की पतली परत के माध्यम से काटें, नंगे हड्डी को उजागर. एक हाथ से आयोजित रोटरी उपकरण, ड्रिल, या पिन उपाध्यक्ष (0.9 मिमी कार्बन इस्पात बर) का उपयोग करना, प्रांतस्था के माध्यम से एक छोटे पायलट छेद बना, और सिर्फ मज्जा में. ड्रिल, नहीं भी गहराई या अत्यधिक रक्तस्राव परिणाम होगा. इस छेद बाद में इस्तेमाल किया जाएगा एक हड्डी पिन जगह myograph आधार पर फीमर स्थिर. 5. Innervation पृथक करें औसत दर्जे का gastrocnemius की मांसपेशी के अगले कदम एक विदारक माइक्रोस्कोप की आवश्यकता है. जगह जहां जानुपृष्ठीय तंत्रिका औसत दर्जे का gastrocnemius मांसपेशी के पीछे गायब हो जाता है पता लगाएँ. धीरे बाहर फैल विभिन्न शाखाओं, और सभी कटौती है कि औसत दर्जे का gastrocnemius पेशी नहीं अंदर आना. Microstimulation innervation के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है. थी परमंच है, यह भी सुनिश्चित करें कि sciatic तंत्रिका की सतही शाखाओं में कटौती कर रहे हैं. अब संयोजी ऊतक दूर sciatic तंत्रिका से साफ है, तो यह तंत्रिका कफ (बाद में) में फिसल गया हो सकता है. तंत्रिका धीरे से इलाज करने के लिए सुनिश्चित करें कि. तंत्रिका के किसी भी खिंचाव inexcitability करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं, और अपने प्रयोग को समय से पहले खत्म. 6. स्नायुजाल और gastrocnemius मांसपेशी को अलग कैंची से सामयिक मदद से कुंद विच्छेदन, अन्य ऊतकों से gastrocnemius मांसपेशी को अलग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. के कण्डरा plantaris स्नायुजाल के नीचे से बाहर खींच सकते हैं, बंधा हुआ है और काट दिया. टाई केवल पट्टा पकड़ में मदद करने के लिए प्रयोग किया जाता है और दूर काटा जा सकता है सही होने के बाद पट्टा और कटौती plantaris gastrocnemius पेशी से एक पर्याप्त लंबाई के लिए अलग है. स्नायुजाल चारों ओर एक # 1 रेशम संयुक्ताक्षर, और एक वर्ग गाँठ में टाई रखें. खींच, नहीं भी कस या कण्डरा क्षतिग्रस्त हो जाएगा. हम हड्डी rongeurs का उपयोग करने के लिए calcan में कटौती EUS, हड्डी का एक छोटा सा टुकड़ा अभी भी स्नायुजाल से जुड़ी छोड़ने. काटने यकीन है कि हड्डी, कण्डरा कटौती नहीं होने क्षैतिज सतहों रखें. यह सुनिश्चित करता है स्नायुजाल myograph चिपका बाद में किया जा सकता है. Gastrocnemius के underside साथ, soleus देखा जा सकता है. फिर, कुंद विच्छेदन soleus मांसपेशी gastrocnemius पेशी से अलग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हम औसत दर्जे का gastrocnemius को अलग करने के लिए करना चाहते हैं, तो यह केवल अभी भी स्नायुजाल से जुड़ी मांसपेशियों है. Soleus कण्डरा कट, बाहर का अंत करीब है. तो आप औसत दर्जे का है और पार्श्व gastrocnemius मांसपेशियों को अलग कर सकते हैं, और पार्श्व कण्डरा में कटौती, सिर्फ औसत दर्जे का gastrocnemius स्नायुजाल से जुड़ी मांसपेशियों छोड़ने. पार्श्व gastrocnemius मांसपेशी औसत दर्जे से दूर अपनी लंबाई के बारे में 50% के साथ, खींचो. इस लंबाई के अलावा, फाइबर एक दूसरे को काटना और क्षति आगे खींच से परिणाम होगा. यकीन है कि मांसपेशी संयोजी ऊतक से मुक्त है की जाँच करें. ई "> 7 टिबिअ कट जूते के तल्ले का मध्य भाग के चारों ओर एक संयुक्ताक्षर midpoint बस के ऊपर रखें. इस ऊतक में काटने के बिना, के लिए तंग हो की जरूरत है. बांधने से पहले एक दूसरे लूप फिसल को रोकने में मदद करता है. फिर एक वर्ग गाँठ का उपयोग करने के लिए सुरक्षित है. एक छोटे से देखा का उपयोग, कम पैर दूर कटौती. इस कटौती के बारे में टिबिअ साथ बीच में होना चाहिए. टिबिअ की मज्जा में एक तेज जांच डालें. यह जांच myograph आधार पर टिबिअ स्थिर करने के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. त्वचा को 2 elastics संलग्न, मिशेल क्लिप का उपयोग कर रहे हैं. ये और अतिरिक्त elastics त्वचा पकड़ ऊपर की मांसपेशी के आसपास के लिए एक कंटेनर है कि गर्म पैराफिन तेल से भरा जाएगा फार्म के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. [वैकल्पिक] 8. Sonometric (वैकल्पिक कदम) क्रिस्टल 5 डालें कम सेटिंग में एक हीटिंग पैड पर पशु रखें. एक गुदा जांच, इस समय में यदि पहले से ही डाला नहीं डाला जा सकता है. पैराफिन तेल की एक छोटी सी बूंद चिकना का प्रयोग करें. Microstimulation का प्रयोग, मांसपेशियों के भीतर एक गुच्छा के सिरों की पहचान. दोनों मूल और मांसपेशियों की प्रविष्टि के साइट में एक 21 गेज सुई प्रहार. सुई, और पशु चिकित्सक बांड शल्य गोंद के साथ सील द्वारा किए गए छेद में एक sonometric क्रिस्टल स्लाइड. गोंद का एक बहुत छोटी सी बूंद का उपयोग, यकीन है कि यह सही क्रिस्टल पर रखा गया है. कागज काटने का एक टुकड़ा के लिए एक तीव्र कोण के साथ गोंद लागू गोंद सही ढंग से लागू करने में मदद करता है. हम पूलिका कि microstimulation द्वारा की पहचान की थी की प्रविष्टि पर एक अतिरिक्त क्रिस्टल दे रहे हैं. [बनी रहेंगी] 9. तंत्र में माउंट (1 चित्र देखें) Myograph आधार पर चूहे tibial लीवर की ओर उन्मुख जांच के साथ, स्थिति. धारक में जांच प्लेस, पैर स्थिर. त्वचा खींचो पक्ष में करने के लिए एक कंटेनर के रूप में और elastics साथ सुरक्षित. फीमर में ड्रिल बिट (1/16 वें इंच) सेट, पायलट का उपयोगछेद है कि शल्य चिकित्सा की तैयारी के दौरान बनाया गया था. सुनिश्चित करें कि आप अग्र भाग पर फीमर का समर्थन के रूप में आप फीमर का टूटना के रूप में ड्रिल बिट (एक पिन उप में) जगह परिणाम, प्रयोग समय से पहले समाप्त हो सकता है. प्रत्यय पिन फीमर स्थिर अर्गला उपाध्यक्ष. Sciatic तंत्रिका की डिस्टल स्टंप तंत्रिका उत्तेजक (कैथोड मांसपेशी की ओर) कफ और टक वापस मांसपेशी की मूल के करीब के माध्यम से रखें. इन तारों को उत्तेजक औधधि कनेक्ट. लीवर, जो उस पर तनाव गेज सेंसर स्नायुजाल संलग्न. Snuggly टाई, लेकिन बाद में समायोजन के लिए कुछ कमरे में छोड़ दें. सुनिश्चित करें कि पेशी के संरेखण लीवर के साथ सीधा है. गर्म पैराफिन तेल के साथ त्वचा द्वारा गठित कंटेनर भरें. गर्मी दीपक और स्थिति जानवर के सिर पर टिनफ़ोइल से बना ढाल, और बल transducer पर मुड़ें. अतिरिक्त पन्नी ढाल आवश्यक सुनिश्चित करने के लिए जानवर की कोर तापमान exce नहीं करता है हो सकता हैएड 38 ° सी. जब तक स्ट्रिंग के सुस्त औसत दर्जे का gastrocnemius और बल transducer के बीच कनेक्शन से निकाल दिया जाता है मांसपेशियों की लंबाई को समायोजित किया जा सकता है. 10. अधिक से अधिक वोल्टेज और संदर्भ लंबाई सेट जबकि मांसपेशियों को वार्मिंग है, उत्तेजक औधधि सेट और उत्तेजना वोल्टेज परीक्षण. यह महत्वपूर्ण है यकीन है कि उत्तेजना बहुत संक्षिप्त स्पंद अवधि में सेट कर दिया जाता है. हम 50 μs का उपयोग करें. अधिकतम वोल्टेज कम से कम 1 वी. 0.5 वी पर शुरू हो सकता है, वोल्टेज में वृद्धि जब तक चिकोटी आयाम वृद्धि नहीं करता है चाहिए. अधिकतम वोल्टेज के सबसे कम वोल्टेज कि सभी मोटर इकाइयों सक्रिय है. हम आम तौर पर डबल अधिक से अधिक वोल्टेज में प्रोत्साहित करने के लिए, या 3 वी जो भी अधिक हो. आमतौर पर, प्रयोगों मांसपेशियों साथ लंबाई कि सबसे बड़ा चिकोटी संकुचन देता में शुरू हो जाएगा. एक चिकोटी एक एकल उत्तेजक नाड़ी के साथ प्राप्त की है. मांसपेशियों की लंबाई के बारे में एक और चिकोटी के लिए 1 मिमी की वृद्धि हुई है. यह चिकोटी आयाम के रूप में लंबे समय के रूप में दोहराया हैबढ़ रही है. एक बार आयाम घट जाती है चिकोटी, एक है कि सबसे बड़ा आयाम चिकोटी दिया लंबाई को लौटा दी जाएगी. लंबाई के इस प्रारंभिक स्थापना के बाद, हम क्या हम एक "कंडीशनिंग धनुस्तंभीय संकुचन" के रूप में उल्लेख के साथ इस प्रणाली का परीक्षण. उत्तेजक औधधि 200 हर्ट्ज पर 500 MS के लिए दालों देने को तैयार है. इस उत्तेजना के प्रसव के एक पूरी तरह से में जुड़े हुए धनुस्तंभीय संकुचन में परिणाम देगा. पेशी द्वारा उत्पन्न बल पेशी पर समुद्री मील सहित सभी कनेक्शनों को सख्त करेगा. 4 potentiation की लंपटता के लिए एक उपयुक्त आराम के बाद, मांसपेशियों के संदर्भ लंबाई रीसेट है (9.2 भाग देखें). आमतौर पर, कंडीशनिंग धनुस्तंभीय संकुचन कुछ पूलिका लंबाई को छोटा करने की अनुमति दी है, तो मांसपेशी लंबाई है कि सबसे बड़ा आयाम चिकोटी संकुचन देता वापस पाने के लिए एक छोटे से बढ़ाया जा होगा. 11. प्रयोग आरंभ एक ठेठ प्रयोग लंबाई adjustm शामिल होंगेent और / या उत्तेजना के पैटर्न की एक किस्म के साथ उत्तेजना. डेटा संग्रह सिर्फ बल, या बल, लंबाई, पूलिका लंबाई और विद्युतपेशीलेख साथ शामिल हो सकता है. [वैकल्पिक] 12. सेना आवृत्ति 2 संबंध सेट ट्रेन लंबी अवधि के लिए ब्याज की किसी भी आवृत्ति पर बल का एक पठार तक पहुँचने के लिए पर्याप्त है. अधिकतम isometric बल औसत दर्जे का gastrocnemius मांसपेशी में 200 हर्ट्ज पर उपलब्ध हो जाता है. रेल अवधि में कम से कम 200 एमएस होना चाहिए, लंबे समय तक कम आवृत्तियों के लिए बेहतर है, लेकिन कुछ थकान में परिणाम अगर कई संकुचन बल आवृत्ति रिश्ते की पूरी रेंज का निर्धारण करने के लिए उपयोग किया जाता है. हम आम तौर पर, 0, 20, 40, 60, 80, 100, और 200 हर्ट्ज संकुचन का उपयोग करें. आवृत्तियों की यह सीमा बल आवृत्ति रिश्ते की पूरी रेंज में वर्णित किया जा करने की अनुमति देगा. संकुचन के बीच एक उपयुक्त आराम करने के लिए थकान से बचने के (1-10 मिनट) की अनुमति दी जानी चाहिए. 13. सेना लंबाई relationsh6 आईपी अनुमानित इष्टतम लंबाई के साथ पहले से स्थापित है, एक रिश्ता बल लंबाई व्यवस्थित -4 मिमी से 4 मिमी एक इमदादी मोटर तंत्र का उपयोग करने के लिए मांसपेशियों की लंबाई का समायोजन करके निर्धारित किया जा सकता है. यह अधिक से अधिक प्रोत्साहन (200 हर्ट्ज) का उपयोग किया जाना चाहिए, लेकिन हमने पाया है कि बहुत संक्षिप्त संकुचन वही सच इष्टतम लंबाई 7 निकलेगा. Twitches तरह Submaximal संकुचन, इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन यह एक अलग बल 8 की लंबाई निर्भरता निकलेगा. संबंध बल लंबाई के दृढ़ संकल्प का एक महत्वपूर्ण पहलू पूलिका लंबाई जिस पर मापा बल होता है पर निष्क्रिय बल का आकलन करने की जरूरत है. सक्रिय बल कुल बल और उपयुक्त निष्क्रिय बल के बीच के अंतर के रूप में गणना की है. चूंकि समानांतर लोचदार संरचनाओं निष्क्रिय बल सहन और इन श्रृंखला लोचदार संरचनाओं के साथ श्रृंखला में कर रहे हैं, निष्क्रिय बल कुल बल योगदान श्रृंखला इला के रूप में कम चाहिएstic संरचनाओं एक 3 संकुचन के दौरान फैला रहे हैं. एक बार निष्क्रिय बल सभी प्रासंगिक मांसपेशियों की लंबाई के लिए जाना जाता है, उचित निष्क्रिय शक्ति, या माप प्रणाली के अनुपालन और मांसपेशी पट्टा इकाई में श्रृंखला संरचनाओं का आकलन करके पूलिका sonomicrometry लंबाई का उपयोग कर के निरंतर माप के साथ अनुमान लगाया जा सकता है. अगर ऐसा नहीं किया जाता है, तैयारी और शिखर बलों के इष्टतम लंबाई, कम करके आंका जाता है. 14. सेना वेग 9 संबंध यदि आप बल वेग संबंध निर्धारित करना चाहते हैं, तो आप एक प्रणाली है, जो या तो लंबाई परिवर्तन के लोड दर के नियंत्रण की अनुमति देता है बल transducers संलग्न करना होगा. सबसे आसान और सबसे अधिक लागत प्रभावी तरीका हवा के दबाव का उपयोग करने के लिए एक नियंत्रित लोड करने के लिए छोटा करने को प्रतिबंधित करने के लिए है. हमारी प्रणाली में, मांसपेशियों धलंब के एक पक्ष पर लीवर के लिए जुड़ा हुआ है और दूसरी तरफ हवा के दबाव लंबाई परिवर्तन में बाधा उत्पन्न करती है. एक लंबाई सेंसर पूर्वोत्तरएड्स नियोजित किया जा इतनी है कि आप isotonic संकुचन के दौरान मांसपेशियों की लंबाई में परिवर्तन का पता लगाने में सक्षम हैं. यह व्यवस्था वायवीय प्रतिरोध के साथ afterloaded संकुचन परमिट. दोहरी टैंक एक isotonic लोड करने के लिए जारी करने के साथ isometric संकुचन की अनुमति कर सकते हैं. 15-20 संकुचन की कुल लगभग उतार से अधिकतम isometric बल को लेकर भार के साथ प्राप्त की जानी चाहिए. जब एक समीकरण डेटा फिटिंग, isometric की 90% से ऊपर भार 9 नहीं किया जा इस्तेमाल किया जाना चाहिए. 15. प्रतिनिधि परिणाम: नमूना संकुचन चित्रा 2 में प्रस्तुत कर रहे हैं. ये संकुचन बल आवृत्ति रिश्ते को वर्णन करने के लिए प्राप्त किया गया. इन संकुचन की चोटी सक्रिय शक्ति की गणना, और आवृत्ति के खिलाफ सक्रिय बल की साजिश रचने, पैदावार चित्रा 3, बल आवृत्ति संबंध. चित्रा 2 में प्रस्तुत आंकड़ों समीकरण को फिट किया जा सकता है: वायुसेना = c / (1 + ई (वायुसेना) (/ b) + घ), वायुसेना सक्रिय बल है, एफ आवृत्ति है और एक, ख, ग और घ स्थिरांक हैं. चूहे औसत दर्जे का gastrocnemius पेशी के लिए, उत्तेजना के आधा अधिकतम आवृत्ति आम तौर पर गैर – थका 2 मांसपेशी में 50-60 हर्ट्ज है. परिणाम निकट उपरोक्त समीकरण द्वारा वर्णित लाइन के लिए फिट होगा. चित्रा 1 उपकरण और सेट अप मांसपेशी: वायवीय सेट अप बाईं तरफ दिखाया गया है, सही पर isometric. लीवर बाईं तरफ दिखाया प्रणाली अनुवाद तालिका से जुड़ा हुआ है, जब गतिशील संकुचन से अनुकूलित 13 वांछित हैं. stepper मोटर एक कंप्यूटर (से अनुकूलित 14) के द्वारा नियंत्रित किया जाता है. . चित्रा 2 आरोपित isometric संकुचन: 20, 40, 60, 100, 80 और 200 हर्ट्ज. 200 हर्ट्ज संकुचन के आयाम एन 8.13 / les/ftp_upload/3167/3167fig3.jpg "> . चित्रा 3 सेना आवृत्ति संबंध: आंकड़ा 2 में संकुचन की सक्रिय शक्ति योजना बनाई है और लाइन सबसे अच्छा फिट की लाइन का प्रतिनिधित्व करता है.