في المقاطع التالية، ونحن الخطوط العريضة إجراءات لإعداد المجهرية الجينات لاستخدامها في التطبيقات الطبية الحيوية. نحن على وجه التحديد توضيح أسلوب متعدد الطبقات لخلق المجهرية الجينات لغرض مزدوج من خلية والتغليف البروتين كعلاج محتمل لمرض السكري من النوع 1.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
جيل من المجهرية الجيني للتطبيقات الطبية الحيوية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وقد تلقى الجينات القائم على المواد اهتماما كبيرا للتطبيقات الطبية الحيوية نظرا لطبيعتها المائية، توافق مع الحياة، والهندسة المعمارية المادية. وتشمل التطبيقات التغليف الخلية، تسليم المخدرات، زراعة الخلايا الجذعية، والسقالات هندسة الأنسجة. في الواقع، ويجري حاليا تجارب سريرية التي يجري تنفيذها في الجزر التي يتم تغليف في منظمة التحرير الفلسطينية microbeads الجينات المغلفة كعلاج لمرض السكري النوع الأول. ومع ذلك، يتعين على أعداد كبيرة من الجزر لفعالية بسبب سوء بقاء زرع التالية. قد القدرة على تحفيز الاوعية الدموية الدقيقة محليا تشكيل شبكة حول الخلايا مغلفة زيادة قدرتها على الاستمرار من خلال تحسين نقل الأوكسجين والجلوكوز والمواد المغذية الحيوية الأخرى. عامل نمو الخلايا الليفية-1 (جمعية جيل المستقبل-1) هو عامل نمو طبيعيا أن يكون قادرا على تحفيز الدم تشكيل السفينة وتحسين مستويات الأوكسجين في الأنسجة الدماغية. ومما يعزز من فعالية FGF-1 عندما يتم تسليمها في sustained أزياء بدلا من إدارة واسعة بلعة واحدة. ويمكن المحلية على المدى الطويل الإفراج عن عوامل النمو من أنظمة التغليف جزيرة تحفيز نمو الأوعية الدموية مباشرة نحو الخلايا المزروعة، وتحسين نتائج محتملة الكسب غير المشروع وظيفي. في هذه المقالة، نحن يحدد الإجراءات اللازمة لإعداد المجهرية الجينات لاستخدامها في التطبيقات الطبية الحيوية. وبالإضافة إلى ذلك، ونحن تصف طريقة التي قمنا بتطويرها لتوليد microbeads الجينات متعدد الطبقات. ويمكن تغليف الخلايا في الجينات الأساسية الداخلية، والبروتينات عائية في طبقة الجينات الخارجي. والافراج عن البروتينات من هذه الطبقة الخارجية حفز تشكيل شبكات الاوعية الدموية الدقيقة المحلية مباشرة نحو الجزر المزروع.
البروتوكول
بروتوكول هنا وصفا لإجراء ثلاث خطوات لتوليد microbeads الجينات متعددة الطبقات (الشكل 1). أولا، يتم تشكيلها microbeads الجينات (الشكل 2A). يتم وصف هذا الإجراء في القسم 1 أدناه. يمكن إضافة خلايا أو البروتينات إلى microbeads في هذه الخطوة من أجل بمثابة نظام التسليم. الخطوة التالية ينطوي على تشكيل طبقة permselective على microbeads، ويوصف في القسم 2. الخطوة النهائية ينطوي على تشكيل طبقة إضافية والجينات الموصوفة في القسم 3. ويمكن استخدام هذه الأشكال طبقة على السطح الخارجي للسطح من الخرز (الشكل 2B) لتغليف وتقديم الجزيئات العلاجية (الشكل 2C) لتوجيه استجابة الخليوي الى ز....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الجينات هي الطبيعية، والسكاريد الحمضية المستخرج من الطحالب، وتتكون من وحدات من 1،4 '-β-D-mannuronic حامض (M) و α-L-guluronic حامض (G) 2،3. دبق بسيط يحدث عندما الكاتيونات ثنائي التكافؤ، مثل الكالسيوم 2 +، 2 + الأب، أو با 2 + التفاعل مع G-مونومرات تشكيل الجسور الأيونية بين سلاسل الجينات المجاورة. وقد استخدمت Microbeads من الجينات لتقديم مجموعة متنوعة من البروتينات، بما في ذلك عامل نمو الخلايا الليفية-1 (جمعية جيل المستقبل-1)، عامل نمو الأعصاب، عا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
وأيد هذه الدراسة من قبل وزارة الخارجية الامريكية لشؤون المحاربين القدامى (واشنطن دي سي)، ومنح 0852048، 0731201، 0854430 و من المؤسسة الوطنية للعلوم (أرلينغتون، فيرجينيا)، ومنح RO1 DK080897 من المعاهد الوطنية للصحة (بيثيسدا، MD) . تلقى السيد خانا الدعم من التبرع السخي من السيد إدوارد روس والدكتور مويا مونيكا من مؤسسة بيل وميليندا غيتس (سياتل، واشنطن).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | تعليق (اختياري) |
| Pronova الجينات النقاوة LVG | نوفا-مصفوفة | 4200006 | مجموعة متنوعة من المستحضرات الجينات المتاحة. اختيار الجينات يؤثر على خصائص نهاية microbeads، بما في ذلك حجم، الخواص الميكانيكية، والنقل. وينبغي أن يكون الأمثل لتكوين تستخدم لتطبيق معين. |
| Pronova الجينات النقاوة LVM | نوفا-مصفوفة | 4200206 | مجموعة متنوعة من المستحضرات الجينات المتاحة. اختيار الجينات يؤثر على خصائص نهاية microbeads، بما في ذلك حجم، الخواص الميكانيكية، والنقل. وينبغي أن يكون الأمثل لتكوين تستخدم لتطبيق معين. |
| بولي-L-الأورنيثين هيدروكلوريد | سيغما الدريخ | P2533 |
المراجع
- Darrabie, M. D., Kendall, W. F., Opara, E. C. Characteristics of Poly-L- Ornithine-coated alginate microcapsules. Biomaterials. 26, 6846-6852 (2005).
- Yamagiwa, K., Kozawa, T., Ohkawa, A. Effects of alginate composition an....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
