Summary
På grund af enkelheden af kirurgi og robust adfærdsmæssige mål, kronisk konstriktion af iskiasnerven er en af de fremtrædende dyremodeller for neuropatisk smerte. Inden for 24 timer efter kirurgi, smerte overfølsomhed etableret og kan måles kvantitativt ved hjælp af en von Frey aesthesiometer (mekanisk test) og plantar analgesi meter (termisk test).
Abstract
Kronisk neuropatisk smerte, der skyldes skade på det centrale eller perifere nervesystem, er et fremherskende og invaliderende lidelse, der påvirker 7-18% af befolkningen 1,2. Symptomerne omfatter spontan (prikken, brændende, elektrisk stød lignende) smerter, dysæstesi, paræstesi, allodyni (smerter som følge af normalt ikke-smertefulde stimuli) og hyperalgesi (øget respons på smertefulde stimuli). De sensoriske symptomer er co-morbide med adfærdsmæssige handicap, såsom søvnløshed og depression. At studere kronisk neuropatisk smerte adskillige dyremodeller efterligner perifer nerveskade blevet udviklet, et af de benyttede mest er Bennett og Xie s (1988) ensidig ischiasnerven kronisk konstriktion skade (CCI) 3 (figur 1). Her præsenterer vi en metode til at udføre CCI og test smerte overfølsomhed.
CCI udføres under bedøvelse, med iskiasnerven på den ene side udsættes for ved at gøre somkin indsnit, og skære gennem bindevæv mellem gluteus superficialis og biceps femoris muskler. Fire krom gut ligaturer er bundet løst omkring iskiasnerven på 1 mm mellemrum, bare occlude, men ikke arrestere epineural blodgennemstrømning. Såret lukkes med suturer i muskel og hæfteklammer i huden. Dyret får derefter lov at komme sig kirurgi for 24 timer før smerten overfølsomhed testning påbegyndes.
For adfærdsmæssig testning rotterne placeret i testapparatet, og får lov til at vænne sig til testproceduren. Det testede område er midt-plantar overflade bagpote (figur 2), der falder inden for iskiasnerven distribution. Mekanisk tilbagetrækning tærskel vurderes ved mekanisk at stimulere både sårede og skadede bagpoter ved hjælp af et elektronisk dynamisk plantar von Frey aesthesiometer eller manuel von Frey hår 4. Den mekaniske tilbagetrækning tærskel er det maksimale pression(I gram), der udløser tilbagetrækning af poten. Til måling af termisk tilbagetrækning latens, først beskrevet af Hargreaves et al (1988), er bagpote udsættes for en stråle af strålevarme gennem et transparent glas-overfladen med en plantart analgesi meter 5,6. Tilbagetrækningen latenstid for varme stimulus registreres som tidspunktet for potetilbagetrækning både skadede og ubeskadiget bagpoter. Efter CCI, mekanisk tilbagetrækning tærskel, samt termisk tilbagetrækning latenstid i den skadede pote er både væsentligt reduceret i forhold til baseline målinger og skadede pote (Figur 3). CCI-modellen af perifer nerveskade kombineret med smerte overfølsomhed test tilvejebringer et modelsystem til at undersøge effektiviteten af potentielle terapeutiske midler til at modificere kronisk neuropatisk smerte. I vores laboratorium, benytter vi CCI sammen med termisk og mekanisk følsomhed af de bagpoter at undersøge betydningen af neuro-immune interaktioner i patogenesenog behandling af neuropatisk smerte.
Protocol
1. Iskiasnerven Kronisk Konstriktion
Aseptiske skal anvendes til den kirurgiske procedure. Desinficer den kirurgiske arbejde overfladen med 70% ethanol og på forhånd forberede sterile instrumenter (f.eks fine saks, pincet og retraktor), gazer, hæfteklammer og podninger ved autoklavering. For flere operationer, rengøre og resterilise instrumenter med 70% ethanol eller en tør perle sterilisator mellem rotter. En kirurgisk maske, hår motorhjelm og sterile handsker bør anvendes.
For konstriktion af nerven, forberede chromsyre tarmen suturen ved at skære det i små stykker på ca 3 cm længde nedsænket i sterilt saltvand, for at forhindre udtørring. Til at lukke såret, kommercielt tilgængelige sterile silkesuturer.
- Bedøve rotten i en induktion kammer med 5% isofluran i O 2, og derefter levere 2% isofluran i O 2 via en skræddersyet ansigtsmaske, og overvåge bedøvet dyret under proceduren. Almindelige alternative anæstetika inhaleres halothan eller intraperitoneal natriumpentobarbital. Ketamin, som en N-methyl-D-aspartat (NMDA) receptor-antagonist, bør undgås, da disse receptorer er vigtige i udviklingen af neuropatisk smerte.
- Barbering venstre bagben for rotte. Derefter placere dyret på en termo-reguleret varmemåtten ved 37 ° C og anvendelse smørende ophthalmisk salve til øjnene.
- Sterilisere det barberede område med tre alternative anvendelser af 70% isopropylalkohol og iodopløsning.
- Med rotten liggende på sit bryst / brystkasse, løfte venstre bagben og hold i stilling med den femor ved 90 ° i forhold til rygsøjlen ved hjælp af malertape på foden.
- Lave et snit i huden parallelt, men 3-4 mm under femor, og frigøre huden fra musklen omkring snittet ved at skære gennem bindevæv.
- Brug stumpe saks, skærer sig gennem bindevævet mellem gluteus superficialis og bicepsfemoris muskler.
- Brug en retraktor til at udvide kløften mellem de to muskler, så klar visualisering af iskiasnerven.
- Anvendelse krumme stump-munding forceps og mikro-sakse, forsigtigt fri cirka 10 mm i ischiasnerven (proksimalt til sciatic trifurcation) fra det omgivende bindevæv.
- Under mikroskopet og en god lyskilde binde fire ligaturer (chromsyre tarmen 4,0, Ethicon, USA) med en dobbelt knude, 1 mm fra hinanden, proksimalt til trifurcation af iskiasnerven. For hver ligatur, med en enkelt løs løkke starte, så gribe de to ender tæt på løkken og stram indtil sløjfen kun meget lidt stramt og ligaturen ikke glider langs nerve. At holde løkken i sin korrekte position ved at anbringe en anden sløjfe oven på den første for at fuldføre knude. Endelig skæres de løse ender ligatur på omkring 1 mm. Konstriktion af nerven bør være minimal, og standses omgående, hvis et kort trækning ses, for at forhindre hæmning af the epineural blodgennemstrømning. Over stramninger ligaturer fører til axotomi, og autotomy (selv-lemlæstelse), begge uønskede bivirkninger, som udelukker vellykket smerte overfølsomhed test.
- Anvendes suturer (Mersilk 5,0, Ethicon) for at lukke muskellaget og hæfteklammer (Autoclip, 9 mm) til fastgørelse på huden. Dernæst anvendes iodopløsning (Riodine) at sterilisere såret.
- Overhold rotten tæt under bedøvelsen tilbagebetalingsperioden, og tillader den at komme i en separat bur med fladt papir sengetøj (ikke standard dyrehold strøelse), for at forhindre det ubevidste dyret kvælning.
Før at give nogen postoperative analgesi efterforskere bør overveje det faktum, dette kan interferere med smerter overfølsomhed test. I virkeligheden er der tegn på, at lokal påføring af bedøvelsesmiddel, lidocain, på tidspunktet for skade kan ændre udviklingen af neuropatisk smerte og formindske graden af hyperalgesi i de foregående uge 7. For yderligere diskussion om dette mAtter ser gennemgang af Bennett et al 8.
2. Målinger af Pain Adfærd
- Daglig håndtering af rotter i flere dage, før du starter eksperimentet anbefales for at vænne rotterne til deres handleren, reducere stress og risikoen for at bide.
- Forud for adfærdsmæssig testning, rotter skal vænnet til testprocedure og anlægget. Det testmiljø bør holdes roligt og velkontrolleret, med konstant temperatur og luftfugtighed, og udført på et tilsvarende tidspunkt på dagen hver test session.
- Smerter overfølsomhed test skal udføres flere gange, før CCI (baseline) og på forskellige tidspunkter efter CCI, som ønsket.
3. Mekanisk Tilbagetrækning Threshold
- På dagen for test, i sted rotter forhøjede mesh floored test bur 15-30 minutter før måling tilbagetrækning tærskler, hvilket giver bur efterforskning og grooMing aktiviteter ophøre og rotter til at blive afslappet og stationære.
- Ved hjælp af en dynamisk plantar von Frey aesthesiometer (Ugo Basile, Italien), position touch-stimulator enhed med glødetråden direkte under midten-plantar overflade bagpote, undgå metal mesh, og tryk på start-tasten. Dette løfter filamentet til mekanisk stimulering af plantare overflade af bagpote med en stigende kraft.
Manuelle von Frey-hår er en række af stigende diameter filamenter, som er kalibreret til at fremkalde en specifik kraft, når den påføres på huden. De kan anvendes som et alternativ til en elektronisk dynamisk plantar von Frey aesthesiometer til måling af potetilbagetrækning tærskelværdi, som tidligere beskrevet fire. Der er også flere alternative producenter af elektronisk Von Frey aesthesiometers (f.eks IITC, USA og Somedic, Sverige).
- Optag mekaniske tilbagetrækning tærsklen fra både sårede og skadede hindpaws, i en kontravægte rækkefølge. Denne anordning påfører tryk på poten og efter tilbagetrækning reaktion systemet automatisk registrerer og viser den maksimale kraft, som påføres (i gram). Hvis en tvetydig reaktion forekommer (dvs. i tilfælde af mobilisering eller grooming), gentage stimulus og optage tærsklen igen. Slikke eller ryste af bagpote efter stimulering er et tegn på adfærd i forbindelse med smerte.
- Gentag den mekaniske stimulation 3 gange med et interval på omkring 5 minutter mellem stimuli, optage tærskler, og derefter beregne middelværdien af potetilbagetrækning tærskler.
4. Termisk Tilbagetrækning Latency
Den infrarøde (IR) varmeintensitet af sålen testinstrument bør tilpasses før forsøget. I vort laboratorium, justere vi infrarøde intensitet for at give en gennemsnitlig potetilbagetrækning latensen af omkring 10 sekunder i naive rotter, og man indstiller cut-off latenstid på 20 sekunder for at undgå væv dæmningenalder i tilfælde af manglende fjerne en pote.
- På dagen for test, at placere rotter ind i glasset floored test bur 15-30 minutter før måling latency, hvilket giver bur efterforskning og grooming aktiviteter til at ophøre og rotter bliver afslappet og stationære.
- Ved hjælp af en termisk plantar analgesi instrument (Ugo Basile, Italien), position infrarød kilden direkte under midten-plantar overflade bagpote, og tryk på start-tasten. Dette udsætter den plantare overflade af bagpote for en stråle af strålevarme gennem et transparent glasoverflade. Der er også alternative producenter af termiske plantar analgesi instrumenter (f.eks IITC, USA og Stoelting, USA).
- Optag tilbagetrækning latenstid fra både sårede og skadede bagpoter, i en kontravægte rækkefølge. Enheden automatisk registrerer den tid (i sekunder) fra starten af den termiske stimulus til tilbagetrækning af poten fra varmekilden. Hvis en flertydig respons forekommer (dvs. i tilfælde af ambulation eller grooming), gentage stimulus og optage ventetid igen. Slikke eller ryste af bagpote efter stimulering er et tegn på adfærd i forbindelse med smerte.
- Gentages varme stimulering mindst 3 gange med et interval på omkring 5 minutter mellem stimuli, optage latenstider, og derefter beregne middelværdien af potetilbagetrækningslatenser.
4. Repræsentative resultater
Et eksempel på mekanisk tilbagetrækning tærskel og termisk tilbagetrækning latens i den ipsilaterale (skadede) og kontralaterale (ubeskadiget) poter af Wistar-rotter er vist før (basislinje) og 2-12 dage efter CCI i figur 3A og 3B. Fra disse figurer kan det ses, at CCI forårsager en signifikant reduktion i både mekaniske tilbagetrækning tærskler og termiske tilbagetrækning latenstider i den ipsilaterale bagpote, hvilket indikerer tilstedeværelsen af mekanisk og termisk smerte hypersensitivitet, begge funktioner af kronisk neuropatisk smerte .
Figur 1. En skematisk illustration af placeringen af ligaturer i CCI-modellen. Denne dyremodel af neuropatisk smerte omfatter anbringelse af fire løse chromsyre-tarm ligaturer i ischiasnerven, midt på låret niveau. Det resulterer i skade kun en del af de afferente går til foden og efterfølgende smerter overfølsomhed af bagpote.
Figur 2. Diagram over bagpote areal bruges til smerter test. Den mid-plantare overflade umiddelbart bag de footpads, som indikeret ved den røde stiplede cirkel, der anvendes til smerte testning. Dette område innerveres meste af terminale grene af iskiasnerven. Hælen og footpads bør undgås på grund af forskellen hudens følsomhed.
3.jpg "/>
Figur 3. Pain overfølsomhed efter kronisk konstriktion af iskiasnerven hos rotter. Efter CCI, er der en signifikant reduktion i potetilbagetrækning tærsklen til mekaniske stimuli (A) og potetilbagetrækning latenstid til termiske stimuli (B) i den skadede (ipsilateral) bagpote i forhold til den skadede (kontralaterale) bagpote (p <0,01 gentagne målinger 2 ANOVA). Dataene viser middelværdier ± SEM, n = 7 Wistar-rotter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CCI er en almindeligt anvendt perifer nerveskade model for kronisk neuropatisk smerte. Det er forholdsvis enkelt at udføre, og producerer robust og stabil smerte hypersensitivitet i mindst en måned efter skade. Efter CCI udviser rotter unormal kropsholdning af tilskadekomne bagpote (tæer holdt sammen og plantar-bøjet og pote vendt), såvel som gentagen rystning, bevogtning og slikke af de sårede bagpote tyder på tilstedeværelsen af spontan smerte 9. Ud over sensorisk dysfunktion, har adskillige forskere påvist, at CCI fremkalder adfærdsmæssige handicap, såsom sprængte social interaktion, søvnforstyrrelser, depressiv-lignende og angst-lignende adfærd 10-13, men dette er i modsætning til den manglende mulighed for at finde sådanne adfærdsmæssige handicap af andre 14,15. CCI derfor almindeligt anvendt til at undersøge både patofysiologi, og potentielle terapeutiske midler til behandling af neuropatisk smerte.
Vi descrIbe ensidig konstriktion af den venstre iskiasnerven, men det skal bemærkes, at mange eksperimentatorerne har udført CCI højre ischiasnerven med lignende smerte og adfærdsmæssige resultater. Nogle forskere kan finde det nemmere at udføre kirurgi på en bestemt side på grund af håndethed, mens andre har skiftet side inden for eksperimenter, for at udelukke enhver skævhed. Det er bemærkelsesværdigt, at adskillige variationer i den oprindelige procedure er blevet rapporteret, herunder ved hjælp af kun to ligaturer omkring nerve 16,17 og ved hjælp af suturmateriale end chromsyre tarmen, såsom almindeligt tarmen og polyglactin (Vicryl) 18,19 i rotter. Desuden har CCI-modellen også blevet modificeret til brug i mus, hvor proceduren er identisk, bortset fra anvendelsen af 2-3 ligaturer med forskellige suturmaterialer, herunder chromsyre tarmen, nylon og prolene 15,20,21.
En begrænsning ved denne model er graden af variation blandt rotter underkastet CCI grund variabiliTy i trykken af de forsnævringer fremstilles ved at binde knuder med suturer. Dette kan delvist overvindes ved at have en erfaren forsker at udføre kirurgi på en sammenhængende måde. Endvidere kan type suturmaterialet, der anvendes til ligering af nerve bidrager også til variabilitet, og det menes, at kemikalier fra chromsyre tarmen medierer nogle af de adfærdsmæssige og neurokemiske virkninger observeret i denne model 19,22. Særlig opmærksomhed bør gives til valg af rotte køn (mænd kontra kvinder) 23, alder (ung versus gammel) 24,25, kost 26 og stamme 27, som kan influere betydeligt på udviklingen af smerte overfølsomhed efter CCI.
Smerter overfølsomhed test, ved hjælp af en elektronisk Von Frey aesthesiometer eller manuelle von Frey hår for mekanisk tilbagetrækning tærskel og en plantar analgesi (Hargreaves) meter for termisk tilbagetrækning ventetid, er veletablerede og reansvarlige kvantitative mål for smerte overfølsomhed i små dyr. Deres anvendelse i kombination med modeller af neuropatisk smerte, er udbredt og giver mulighed for direkte sammenligninger af pote følsomhed over for mekaniske og termiske stimuli på tværs af forskellige behandlingsmuligheder, og mellem forskellige stammer af rotter. Det bør bemærkes, at andre adfærdsmæssige assays, såsom stiften priktest og koldt allodyni, også anvendes til afprøvning CCI-induceret smerte overfølsomhed 8.
Mens brugen af refleksive tilbagetrækning fra mekaniske eller termiske stimuli er det vigtigste mål for neuropatisk smerte i denne model og andre, er det for nylig blevet kritiseret for sin ringe sammenhæng med menneskelige symptomer og inddragelse af betydelige forsøgslederen partiskhed 28. Derfor vil brug af yderligere paradigmer, såsom operant mål for smerte 29 og spontant udsendt adfærd 30 være gavnligt.
Alligevel desPite disse begrænsninger, CCI-modellen og de potetilbagetrækning test til måling smerter overfølsomhed er afgørende for at forstå mekanismerne i neuropatisk smerte og identificere nye smertestillende mål. I vores laboratorium, rutinemæssigt vi udfører CCI og måle mekaniske potetilbagetrækning tærskler og termiske potetilbagetrækningslatenser, med henblik på at forstå, hvordan neuro-immune interaktioner bidrage til neuropatisk smerte 31, og vurdere potentialet for at modulere immunsystemet til at mindske smerter overfølsomhed.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forsøg på dyr blev godkendt af Animal Care and Ethics Udvalg University of New South Wales, Australien, og efterfulgt retningslinier udstedt af International Association for Study of Pain.
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne anerkende den oprindelige beskrivelse af de fælles konsulære instrukser model af Bennett og Xie (1988).
Dette arbejde blev støttet delvist af tilskud fra National Health og Medical Research Council of Australia (ID # 568.637) og NSW Kontoret for videnskab og medicinsk forskning til GMT.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chromic gut | Ethicon Inc. | G-211 | 4-0 thickness |
| Isoflurane | Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW | n/a | |
| Mersilk | Ethicon Inc. | W-580 | 5-0 thickness |
| Autoclip | BD Biosciences | 427631 | 9 mm stainless steel |
| Riodine | Orion | R1000802F | 1% w/v iodine |
| Thermal plantar analgesia instrument | Ugo Basile | 37370 | |
| Dynamic plantar aesthesiometer | Ugo Basile | 37400 |
References
- Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
- Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population. Pain Med. 10, 918-929 (2009).
- Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).
- Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
- Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat. Pain. 59, 85-94 (1994).
- Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat. Brain Research. 570, 109-115 (1992).
- Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. Models of neuropathic pain in the rat. Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).
- Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. Further evidence for 'pain-related' behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy. Pain. 41, 235-251 (1990).
- Hu, B., Doods, H., Treede, R. -D., Ceci, A. Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833. Pain. 143, 206-212 (2009).
- Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion. Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).
- Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury. Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).
- Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin. Pain. 139, 349-357 (2008).
- Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy. Pain. 80, 341-346 (1999).
- Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity. Pain. 152, 990-1000 (2011).
- Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia. Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).
- Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).
- Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury (CCI) produced with different suture materials. Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).
- Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat. Pain. 64, 503-509 (1996).
- Sommer, C., Schafers, M. Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity. Brain. Res. 784, 154-162 (1998).
- Walczak, J. S., Beaulieu, P. Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique. Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).
- Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 54, 57-69 (1993).
- Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain. Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).
- Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model. Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).
- Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats. Pain. 51, 313-316 (1992).
- Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats. Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).
- Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors. Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).
- Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. The necessity of animal models in pain research. Pain. 151, 12-17 (2010).
- Mogil, J. S. Animal models of pain: progress and challenges. Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).
- Langford, D. J. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).
- Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines. J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).
