Kirurgisk trauma inducerer en inflammatorisk respons. Cytokiner og endogene ligander vides at modulere myocardial infarktstørrelse efter iskæmi og reperfusion. Vi præsenterer en modificeret lukket bryst model af murint iskæmi og reperfusion under anvendelse hængende vægt på at minimere virkningerne af torakotomi.
Kirurgisk trauma af thorakotomi med åbne bryst modeller af koronar ligatur inducerer en immunrespons, som modificerer forskellige mekanismer involveret i iskæmi og reperfusion. Immunrespons omfatter cytokinekspression og frigivelse eller sekretion af endogene ligander af medfødte immunforsvar receptorer. Aktivering af medfødte immunitet kan potentielt modulere infarktstørrelse. Vi har ændret en eksisterende murine lukket kiste model ved hjælp af hængende vægte, som kunne være nyttige for at studere myokardie præ-og postconditioning og den rolle medfødte immunitet i myokardie iskæmi og reperfusion. Denne model tillader dyrene at komme sig kirurgisk traume, før indtræden af myocardial iskæmi.
Flygtige anæstetika er intenst undersøgt, og deres forkonditionering virkning for iskæmisk hjertesygdom, er velkendt. Men denne beskyttende virkning udelukker dens anvendelse i åbne bryst modeller af kranspulsåreombinding. Således kunne en anden fordel være anvendelsen af the godt kontrollerbare flygtige anæstetika til instrumentering i en kronisk lukket brystet model, idet deres klargøring, effekten varer op til 72 timer. Kroniske hjertesygdomme med intermitterende iskæmi og flere ramte modeller er andre mulige anvendelser af denne model.
Den kroniske lukkede bryst model undergår intuberet og ventileret mus en lateral stump torakotomi via 4. intercostale rum. Efter identifikation af den venstre forreste nedadgående en ligatur føres under fartøjet, og begge sutur ender er ført gennem en okkluder. Derefter er begge sutur ender føres gennem brystvæggen, knyttet til dannelse af en løkke, og efterladt i det subkutane væv. Efter brystet lukning og genopretning i 5 dage, er mus bedøves igen, brystet hud og genåbnet hængende vægte hooked op til loop under EKG-kontrol.
Ved slutningen af iskæmi / reperfusion protokollen, kan hjerter farves med TTC for infarktStørrelsen vurdering eller underkastes perfusion fiksering for at tillade morfometriske undersøgelser foruden histologi og immunhistokemi.
Vi har ændret en murin lukket kiste model ved at gå ind i hjertet gennem en venstre lateral interkostale torakotomi og lede de LAD suturer til brystet i venstre midclavicular linje. Forlader knoklede brystkassen intakt vil minimere traumer, har brug for smertestillende medicin, kirurgiske sårinfektioner og dermed lette inddrivelsen. Ved at bevare den venstre indre pattedyret arterie der ikke er behov for elektrokauterisation. Vi forlader suturen loop i det subkutane væv til senere nem adgang og bruge en hængende v?…
The authors have nothing to disclose.
Vi takker Daniel Duerr for hans rådgivning vedr perfusion-fiksering teknik.
Name of the reagent | Company | Catalogue number |
Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
Microscope | Leica | M80 |
Light source | Schott | KL 1500 LCD |
Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
Phthalo blue | Heucotech LTD | |
PowerLab | ADInstruments |