Summary
Abstract
Cette vidéo décrit la fabrication et l'utilisation d'un dispositif microfluidique à la culture du système nerveux central (SNC) des neurones. Cet appareil est compatible avec les cellules vivantes microscopie optique (contraste DIC et phase), ainsi que confocale et microscopie photonique deux approches. Cette méthode utilise la précision des pièces moulées par polymère pour créer une culture cellulaire en miniature plusieurs compartiments avec isolation fluidiques. Les compartiments sont constitués de minuscules canaux dont les dimensions sont assez grandes pour la culture dans les neurones bien contrôlée microenvironnements fluidiques. Les neurones peuvent être cultivées pendant 2-3 semaines au sein de l'appareil, après quoi ils peuvent être fixés et colorés pour l'immunocytochimie. Compartiments axonal et chromosomiques peuvent être maintenus fluidique isolés les uns des autres en utilisant une différence de pression hydrostatique petits; cette fonction peut être utilisée pour localiser les insultes solubles à un compartiment pour jusqu'à 20 h après chaque changement de milieu. L'isolement fluidique permet la collecte de la fraction axonale pure et analyse biochimique par PCR. Le dispositif microfluidique offre une plateforme hautement adaptable pour les recherches en neurosciences et peuvent trouver des applications dans la modélisation de lésion du SNC et la neurodégénérescence.
