Summary
Abstract
Dieses Video beschreibt die Herstellung und Verwendung eines mikrofluidischen Vorrichtung zur Kultur des zentralen Nervensystems (ZNS) Neuronen. Dieses Gerät ist kompatibel mit Live-cell optische Mikroskopie (DIC und Phasenkontrast), sowie konfokale und Zwei-Photonen-Mikroskopie Ansätze. Diese Methode verwendet Präzisions-Spritzguss-Polymer Teile Miniatur Multi-Kompartiment-Zellkultur mit fluidischen Trennung zu schaffen. Die Abteile sind von winzigen Kanälen mit Abmessungen, groß genug, um Kultur Neuronen in gut kontrollierten fluidische Mikroumgebungen gemacht werden. Neuronen können für 2-3 Wochen im Gerät kultiviert werden, nach denen sie befestigt werden kann und gefärbt Immunzytochemie. Axonal und Somal Fächer kann beibehalten strömungstechnisch voneinander mit einem kleinen hydrostatischen Druckdifferenz isoliert werden; dieser Funktion können Sie lokalisieren löslichen Beleidigungen zu einem Fach für bis zu 20 h nach jedem Medium ändern. Fluidic Isolation ermöglicht das Speichern von reinem axonalen Fraktion und biochemische Analyse von PCR. Die mikrofluidischen Gerät bietet eine sehr anpassungsfähige Plattform für die neurowissenschaftliche Forschung und können die Anträge bei der Modellierung ZNS-Verletzung und Neurodegeneration zu finden.
