Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

וירוסי צמח באמצעות העברת Whiteflies

doi: 10.3791/4332 Published: November 8, 2013

Summary

שיפור ההבנה שלנו ואת היכולת שלנו לנהל רבים של הווירוסים המועברים בצמחי חרקים מחייב שימוש בווקטור. שידור חרקים של וירוסי צמחים הוא אינטראקציה tritrophic, ובתור שכזה דורש מניפולציה של חרקים, וירוסים, וצמחים. וקטורים חייבים להיות שגדלו במספרים גדולים ומניפולציות באופן שעל מנת להבטיח שיעור גבוה של העברת צמחים לבדיקה. את היסודות של גידול וטיפול בכנימות,

Abstract

Whiteflies, Hemiptera: Aleyrodidae, הכנימה tabaci, קומפלקס של מורפולוגית מיני indistinquishable 5, הם וקטורים של וירוסי צמחים רבים. כמה סוגים של וירוסים המועברים צמח כנימות אלו (Begomovirus, Carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) כוללים כמה מאה מינים של מתעורר ופתוגנים משמעותיים מבחינה כלכלית של מזון חשוב ויבולי סיבים (נסקר על ידי 9,10,16). וירוסים אלה לא לשכפל בווקטור שלהם, אבל בכל זאת הם עברו בקלות ממפעל למפעל על ידי הכנימות המבוגרים באמצעים שונים (בדיקה על ידי 2,6,7,9,10,11,17). עבור רוב הווירוסים אלה כנימות ההאכלה נדרשת לרכישה וחיסון, ואילו עבור אחרים נדרש רק החיטוט. רבים מוירוסים אלה אינם יכולים או אינם יכולים להיות מועברים בקלות באמצעים אחרים. לכן תחזוקה של תרבויות וירוסים, ביולוגיים ואפיון מולקולרי (זיהוי טווח מארח וסימפטומים) 3,13, אקולוגיה 2,12, דורשת כי הווירוסים להיות מועברים למארחים ניסיוניים באמצעות וקטור הכנימות. בנוסף לפיתוח גישות חדשות לניהול, כגון הערכה של כימיקלים חדשים 14 או 15, תרכובות חדשות גישות תרבותיות 1,4,19, או בחירה והפיתוח של זנים עמידים 7,8,18, מחייב שימוש בWhiteflies עבור העברת נגיף. השימוש בהילוכי כנימות של וירוסי צמחים לבחירה והפיתוח של זנים עמידים בתוכניות רבייה הוא מאתגר במיוחד 7. בחירה וסינון יעילה להתנגדות מעסיק מספר גדול של צמחים ויש צורך ב100% מהצמחים להיות מחוסן כדי למצוא כמה גנוטיפים אשר מחזיקים גנים עמידים. מחקרים אלה משתמשים במספר גדול מאוד של Whiteflies viruliferous, לעתים כמה פעמים בשנה.

תחזוקת whitefly המתוארת כאן יכולה לייצר מאות או אלפיWhiteflies של מבוגרים על צמחים בכל שבוע, כל שנה, ללא זיהום של וירוסים צמחיים אחרים. צמחים חופשיים של שני Whiteflies ווירוס חייבים להיות מיוצרים להכניס למושבת כנימות בכל שבוע. כנימות תרבויות חייבים להיות כל הזמן חופשי של פתוגנים, טפילים, כנימות וטפילים שיכולים להפחית את אוכלוסיות כנימות ו / או להפחית את יעילות העברת של הנגיף. מושבות המיוצרות באופן מתואר וניתן לשנות במהירות כדי להגדיל או להקטין את מספרי אוכלוסייה לפי צורך, ויכולות להיות מותאמים כדי להתאים את העדפות האכילה של כנימות המבוססים על צמח המארח של הנגיף.

ישנם שני סוגים בסיסיים של מושבות כנימות שאפשר לקיים: nonviruliferous ומושבת כנימות viruliferous. המושבה nonviruliferous מורכבת מWhiteflies גדל על צמחים נקיים מוירוסים ומאפשרת את הזמינות השבועית של Whiteflies אשר ניתן להשתמש בם כדי להעביר וירוסים מתרבויות שונות. המושבה כנימות viruliferous,מורכב מWhiteflies גדל על צמחים נגועים בנגיף, מאפשר זמינות שבועי של Whiteflies שרכש את הווירוס ובכך להשמיט צעד אחד בתהליך העברת הנגיף.

Protocol

1. תחזוקת מושבה כנימות

  1. תנאי סביבה: מושבות כנימות יש לשמור בחדר גידול מבוקר. בקרה של לחות היחסית, טמפרטורה, photoperiod, ועוצמת אור הן חיוניות לצמיחה אופטימלית מושבה (איור 1). טמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס, 30-50% לחות יחסית, והשעה photoperiod 14 תניב מושבה המתפתחת מביצית להופעה בוגרת ב18 ימים (זמן זה משתנה עם מארח הצמח). לחות היחסית צריכה להיות כל הזמן מתחת ל -70% כדי להרתיע את הצמיחה של חרקים וצמחי פתוגנים פטרייתי. מחירי דשן וההשקיה חייבים להיות מופחתים כדי להרתיע פתוגנים פטרייתי והצטברות מלח. עוצמת האור למושבה צריכה להיות גבוהה למדי. נורות ניאון VHO שימוש בכמות מספקת כדי לייצר כ 800-1,000 נרות רגל בגובה החופה מספיקים עבור רוב הצמחים (כלומר. כותנה, שעועית משותפת, לימה שעועית, עגבניות). ניקיון הוא חיוני במושבה כנימות כדי לשמור על תנאי גידול אופטימליים.
  2. כלובי מושבה: Whiteflies יש לשמור על צמחים בכלובים, ולא חופשי בחדר הצמיחה. ניתן לבנות כלובים מחומרים שונים, אבל חייב לאפשר ל: אוורור, גישה נוחה, יכולת למנוע בריחה או חדירת כנימות, ושל גודל מספיק כדי לשמור על מספיק צמחים כדי לייצר אוכלוסיית כנימות צורך. תוצאות טובות הושגו עם אורגנזה בתוספת הקרנת אלומיניום (לכוח), כמו גם הקרנת כנימות הוכחה (ראה טבלה של ציוד ואספקה ​​ספציפיים).
  3. הכנת צמח מושבה: המינים של צמחים שנבחרו הוא שיקול חשוב כאשר מתחילים מושבת כנימות. הצמח צריך להיות מסוגל לתמוך באוכלוסיית חרקים גבוהה מבלי להתמוטט. הצמח שנבחר למושבת nonviruliferous צריך להיות nonhost לוירוס או וירוסים שנועדו להיות משודרות כדי למנוע זיהום במושבה ואם שמירת viruliהמושבה ferous, זה חייב להיות מארח של הנגיף. הצמחים צריכים לצמוח די מהר כדי לתמוך בצמיחתה של מבוגרים החדשים בתוך 18 ימים מיום שהוצג למושבה, אך לא כל כך מהר כמו להיגמל הכלובים בתוך ארבעה שבועות. גמד, בוש, או זני פטיו מסוג הצמחים מומלצים כפי שהם לעתים קרובות לייצר שטח עלה דומה לזנים גבוהים יותר, אך ללא התארכות הגבעול.
  4. זה מאוד חשוב לצמחים אחוריים למושבה בחממות בכלובים שמדירים Whiteflies וחרקים אחרים. שימוש בצמחים כי הם שורצים Whiteflies, תריפסים, או קרדית לפני שהם נכנסים למושבה יכולה לגרום לקריסת המושבה. יש צמחים נגועים גם פוטנציאל להיות נגועים בוירוסים שמקורן בחרקים שמפריעים ללימודי העברת נגיף.

2. הקמת מושבה כנימות

  1. התחל מושבה בפעם הראשונה באמצעות Whiteflies נקי - אלה נקיים מוירוסים צמחים, חרקים ומזיקים אחרים, חרקים. אלה ניתן להשיגממשתפי פעולה או מהשדה. אם שדה שנאסף, Whiteflies צריך להיות גודלו לפחות 8 שבועות על צמחי nonhost של נגיף הצמח, ולבדוק העדר הסימפטומים צמחים כדי להיות בטוח שהם נקיים מוירוסים צמחיים.
  2. שבוע 1: הצג את Whiteflies נקי לכלוב הראשון של צמחים. יכול להיות הציג Whiteflies על ידי שאיפה של מספרים ידועים או על ידי בעדינות לוחץ Whiteflies מצמח מקור אחר בהתאם לדרישות על המושבה. במהלך השבוע 1, Whiteflies הם מטילים את הביצים בחלק התחתון של משטחי עלים צמח. גודל אוכלוסייה משוער ניתן לחזות עבור כל הופעה מבוססת על מספר המבוגרים המשמשים כדי להטיל את הביצים ואת המספר הממוצע של ביצים המוטלות על ידי נקבת הכנימות על הצמח הפונדקאי בשאלה.
  3. שבוע 2: התחל בכלוב אחר על ידי החדרת Whiteflies לצמחים מארחים חדשים כדי להטיל ביצים. את הצמחים בכלוב שנפתחו בשבוע 1 יהיו ביצים, וכמה whiteflies בשלים המכסה את החלק התחתון של העלים (איור 2). כמהWhiteflies הבוגרים הציג במהלך השבוע 1 עדיין יהיה בחיים.
  4. שבוע 3: בגין כלוב שלישי על ידי החדרת Whiteflies למפעלים חדשים כדי להטיל ביצים. את הצמחים בכלוב החל בשבוע 1 יהיו בשלה, כמו גם למבוגרים רבים Whiteflies חדש המתעוררים ולא צריכה להיות עלייה מאוד בולטת במבוגר כנימות האוכלוסייה. את הצמחים בכלוב שנפתחו בשבוע 2 יהיו הרבה ביצים וwhiteflies בשלים המכסה את החלק התחתון של העלים.
  5. שבוע 4: התחל כלוב רביעי על ידי החדרת Whiteflies למפעלים חדשים כדי להטיל ביצים. את הצמחים בכלוב שנפתחו בשבוע 1 יהיו לי Whiteflies מבוגרים רבים, כי הם כ הופעת הודעה בשבוע אחד. את הצמחים בכלוב שנפתחו בשבוע 2 יהיו רבים Whiteflies בוגרים החדשים מתפתחים ולא צריכה להיות עלייה מאוד בולטת באוכלוסיית כנימות. את הצמחים בכלוב שנפתחו במהלך השבוע 3 יהיו הרבה ביצים וwhiteflies בשלים המכסים את החלק התחתון של העלים.
  6. שבוע לאחר 4 הפיפי הראשוןKS: בכל שבוע, להתחיל כלוב חדש על ידי החדרת Whiteflies הבוגרים מהכלוב הוותיק הרביעי (הכלוב התחיל בשבוע 1) על גבי צמחים חדשים בכלוב חדש, נקי. הכלוב הישן יש להסיר ומפעליה מושלכים. Whiteflies אלה הם כ 1 שבוע שלאחר הופעתה. במקרה של המושבה viruliferous, Whiteflies אלה יעביר וירוס לצמחים החדשים, כמו גם מטיל ביצים לדור הבא של Whiteflies.
  7. ניסויי שידור מתכנן להשתמש בWhiteflies שיצא בכלוב של השבוע השלישי. אם יותר Whiteflies יש צורך, ניתן להגדיל מספרי צמחים וניתן להוסיף יותר Whiteflies לכלוב 1 בשבוע כדי להגדיל את אוכלוסיית כנימות.

3. שיטה להרכבה של צמחי מבחן

  1. כדי להבטיח שיעורים גבוהים שידור: 1) Whiteflies יש לטפל בם בעדינות רב ככל האפשר כדי למנוע נזק לחרק אשר יפחית את תעריפי הולכה, 2) חייב להיות אזור עלה נאות זמין עבור Whiteflies לEITבדיקתה או עדכון. עלייה בזמן רכישה או עלייה במספר הצמחים מארחים רכישה עשויה להגדיל את השיעורים נמוכים של infectivity בצמחים מבחן בשל צפיפות באו רכישה או תקופה גישה חיסון.
  2. אוסף של Whiteflies. הבא הוא הליך לאיסוף והתנועה של מספרים מדויקים של Whiteflies הנדרש לצורך ניסויים. כדי להעביר מספר גדול של Whiteflies, כפי שנדרש לצורך הקרנת התנגדות לדוגמה, יש צורך רק כדי לנער את צמחי כנימות שורצי בעדינות על צמחי הבדיקה או את מארחי הרכישה הנגועים בנגיף (ומאוחר יותר את צמחי מבחן). הקפד לנער את הצמחים על פני מקומות רבים כדי למזער את השפעות צבירה.
  3. זה עתה יצא Whiteflies בוגר (הופעת הודעה 1-3 ימים) הם מאוד פעיל ולהאכיל לעתים קרובות כל כך נוטה לתת את קצב השידור הגבוה ביותר 4. Whiteflies מבוגר עדיין לשדר אך בתדירות נמוכה יותר. Whiteflies מרובים לכל צמח מבחן (15-40 לPLANT) אמור לשמש לשיעור גבוה של שידור מאז יחס של 1 כנימות לכל צמח לעתים קרובות תוצאות בלתי מתקבל על דעת קצב שידור נמוך 3,4. המספר דרוש תלוי בווירוס והמינים של הצמחים ורכישת בדיקה.
  4. להרכיב מכשירי השאיפה ובקבוקוני גבייה. (איור 3)
  5. ביד אחת, מחזיק כרטיס פלסטיק צהוב בתוך כלוב המושבה המכיל את Whiteflies להיות שנאסף. לטפוח בעדינות את הצמחים כדי לעודד את הבוגרים Whiteflies לעוף. Whiteflies יימשך אליו את הכרטיס הצהוב ויעוף מהמפעל לכרטיס בו הם יכולים להיות שנאספו באמצעות aspirator ונשימה עדינה מאוד. אף פעם לא לשאוב Whiteflies שמזינים על צמחים. stylets מוטבעים במפעל בזמן האכלה כך מושך אותם מהצמחים ישברו stylets והופך אותם לא יכול גם לרכוש או להעביר וירוס (איור 4).
  6. לאסוף כ -20 Whiteflies בוגרים לColle אחתבקבוקון ction כדי למזער את נזק פיזי לחרקים משאיפות חוזרות ונשנות (איור 5).
  7. כדי לשנות את בקבוקון האוסף, לטפוח בעדינות את הבקבוקון על משטח קשה וכובע עם Parafilm בעוד Whiteflies הם מבולבלים מההקשה.
  8. שים בקבוקון לאסוף חדש על aspirator וחזור עד למספר Whiteflies הדרוש נאספים. Whiteflies יכול להישאר בצלוחיות האיסוף בטמפרטורת חדר במשך כמה שעות.
  9. הרכישה. Whiteflies מונחים על צמח נגוע בוירוס ואפשרו להאכיל על הצמחים הנגועים במשך 48-72 שעות. תקופות ארוכות יותר מאשר רכישת 72 שעות בדרך כלל לא להגדיל את קצב שידור. עבור אותם וירוסים המועברים במגע באופן nonpersistent או semipersistent, שעה 1 וכמה שעות, בהתאמה, הן תקופות גישה רכישה מספקות (טבלת 1). התוצאות הטובות ביותר מתקבלות כאשר ניתנים Whiteflies גישה חופשי לצמחים בכלובים כי להגביל את החרקים למפעל אחד אוצמחים רבים. עם זאת חלק מהניסויים דורשים רכישה מעלים ספציפיים שבו ניתן להשתמש בם כלובים קליפ מקרה. בעת שימוש בכלובי קליפ זה הוא חשוב כדי להתאים את ההעדפה להאכלת כנימות התחתונה של עלים. כמו כן, צפיפות בכלובים של Whiteflies קליפ יכול להפחית את תעריפי הולכה - מחירים מקובלים של העברת הושגו באמצעות 10 Whiteflies הנשי לכלוב קליפ בקוטר 2.5 ס"מ.
  10. חיסון. הכן כלוב מתאים לגודלו של החיסון ולמקם את צמחי הבדיקה פנימי. אם רק אחד צמח הוא להיות מחוסן לשקול כלוב צמח בודד. אם צמח אחד או יותר הוא להיות מחוסן לשקול כלוב קטן PVC מסגרת / אורגנזה שקית או כלוב אלומיניום (איור 6). גודלו של הכלוב המשמש לחיסון צריך להיות מעט גדול יותר בגודל של המפעל (ים) לקבל חיסונים. קצב שידור גבוה יותר מתקבלים כאשר Whiteflies נשמרים קרוב לחופת המפעל ולא נתן הרבה מקום פנוי.
  11. אוסף של Whiteflies ממארחי רכישה תלוי בצרכים של הניסוי. אם מספרים קטנים יש צורך, לשאוב Whiteflies כפי שתואר לעיל. מניחים את בקבוקוני גביית Whiteflies בתוך הכלוב בסמוך לצמחים ולהסיר את המכסה (איור 7). פתח את הבקבוקון ולשחרר את Whiteflies או להפוך ולטפוח בעדינות את הבקבוקון לשחרר את Whiteflies. אם יש צורך במספר גדול פשוט להעביר צמחים עם רכישת Whiteflies לכלובים שבו הצמחים והבדיקה נמצאים נער בעדינות את Whiteflies את הצמח פונדקאי הרכישה. לשני הסוגים של הקדמה, כדי להיות בטוח כדי להפיץ את Whiteflies על פני הצמחים כדי למזער את הצבירה ולבטח חיסון אחיד.
  12. לאפשר לWhiteflies לחקור או להאכיל בסכום המתאים של זמן, שוב תלוי בווירוס ובמידה מסוימת צמח הפונדקאי (טבלת 1).
  13. בדקו את Whiteflies לפחות פעם אחת במהלך תקופת גישה חיסון כדי להבטיח שהם Whitefliesחיטוט או האכלה על ידי פתיחת הכלוב ומתהפך כמה עלים על כל צמח.
  14. לתקופות ארוכות יותר הגישה לחיסון, להפריע לצמחים בעדינות (בעזרת מקל במבוק או שווה ערך) כדי לצחצח את צמרות הצמחים ולעודד את Whiteflies להפיץ על הצמחים. חלוקה מחדש של Whiteflies מסייע להבטיח קצב שידור גבוה יותר על ידי ההתמודדות עם הנטייה הטבעית של Whiteflies לצבירה.
  15. סיומת. תקופה הגישה החיסון הוא הסתיים על ידי הריגת Whiteflies עם כימיקלים שאושרו. החלת שתי חומרי הדברה בזה אחר זה: הדברה קשר לסיים Whiteflies מבוגרים והדברה מערכתית במהירות כדי לסיים את כל Whiteflies המתפתחים בשבועות הבאים ואלה לא נענו על ידי החרקים קשר (איור 8). קוטל חרקים קשר כגון סבון וחומרי הדברה חרקים מערכתיים כגון Imidacloprid או pymetrozine היו בשימוש עם הצלחה טובה.

Representative Results

שיטות אלה להקמת מושבה כנימות ותחזוקה, כמו גם מניפולציה כדי להעביר וירוסי צמחים היו בשימוש בהצלחה במספר המחקרים 4,11,12,14, כמו גם רבים אחרים שלא הוזכרו. שימוש בשיטות אלה עם וירוסים המועברים באופן עקבי, השגנו את השיעורים באופן שגרתי הרצויים של העברת של 100% לבחירה להתנגדות, מיון חומרי הדברה ביכולתם להפריע לשידור (והערכה של תרכובות ישכנעו התנגדות) 13,14,17,18 ( איור 9). ואת כבר יכולים להיות מותאמים לנהלים שתוארו כאן למקומות רבים במתקני מחקר ציבוריים ופרטיים.

סוג של שידור תקופת גישה רכישה (שעה) תקופת גישה חיסון (שעה) נ"צ.
Nonpersistent 1 2-24 10
Semipersistent 6-24 8-24 10, 16
מתמיד 48-72 48-72 3, 6, 8, 9

טבלת מס '1. פעמים הערכה היא כי ניתן להשתמש בם כדי לייצר שיעור גבוה של העברת וירוסים עם סוגים שונים של מערכות יחסים עימם פעמים וקטור מיני tabaci כנימה המורכבות. משוערות מבוסס על זמנים מינימאליים הנדרשים לפורסמו 80-100% ושידור שונה ובמקרים מסוימים לתת דין וחשבון לתקופות סמויות והשוני בין אוכלוסיות כנימות, וירוסים, וצמחים מארחים.

איור 1
איור 1. דוגמה למושבת כנימות viruliferous. חדר גידול זה מכילה כלובים של צמחים נגועים בbegomovirus וinfested עם Whiteflies viruliferous.

איור 2
איור 2. משמאל: Immatures שלבים של הכנימות, כנימת tabaci MEAM clade סנסו De Barro 6 כ 1 שבוע שלאחר הופעתה והימנית: מבוגר כנימות, וקטור יעיל של וירוסי צמחים רבים.

איור 3
איור 3. סוגים של מכשירי איסוף שניתן להשתמש בם כדי לאסוף Whiteflies להעברת נגיף צמח.

איור 4
איור 4. כרטיס פלסטיק צהוב משמש לאיסוף מבוגרים whitefly מראים Whiteflies מוכן לאוסף: שמאל . ימני: איסוף Whiteflies מכרטיס פלסטיק צהוב. ניתן לראות Whiteflies על הכרטיס ככתמים קטנים לבנים / אפור.

איור 5
איור 5. Whiteflies נאסף על ידי שאיפה (20 בבקבוקון) מהמושבה מוכנה לאו רכישה או חיסון.

איור 6
איור 6. שמאלי עליון:. כלובי צמח יחיד ששמשו לרכישה או חיסון או ימני עליון: כלובים גדולים יותר העשויים מצינור PVC ואורגנזה. תחתון: אלומיניום / מסך וכלובי אורגנזה בצמחים המכילים חממה המיועדים למושבת כנימות.

32fig7.jpg "/>
איור 7. Whiteflies מועבר למפעל אחד לחיסון (או רכישה).

איור 8
איור 8. תוספת של קוטל חרקים להציף מערכתי לסיים את תקופת הגישה חיסון הכנימות.

איור 9
איור 9. צמחי שדה תחת הערכה לעמידות לוירוס סלסול עלים צהוב עגבניות. כל הצמחים היו מחוסן כמו שתילים ישנים 5 בשבוע ולאחר מכן הושתלו בתחום להערכה. צמחים בחזית קו germplasm עמיד, צמחים ברקע הם קו germplasm רגיש.

Discussion

השיטות שתוארו כאן פותחו על פני תקופה של שני עשורים, ומבוססות על המידע הבסיסי הניתן על ידי מחקרים רבים של העברת כנימות, התנהגות וביולוגיה. מאחר שיש פרסומים רבים, כתב היד הזה מתייחס בעיקר לביקורות ולכמה פרסומים ספציפיים שנבחרו כדי להמחיש את סוג הנתונים ששמשו לפיתוח טכניקה זו. זה מאוד חשוב בהליך זה, כי Whiteflies מטופלות בעדינות מאז שבירת רגליים ואנטנות יכולים להוביל להתנהגויות חריגות ושיעורים נמוכים יותר של הילוכים. אוסף עם שואבי אבק ומכשירי יניקה מכאניים אחרים מעולם לא הניב תוצאות טובות. שיקול נוסף להצלחה הוא כי מספר Whiteflies המשמש להעברה להשיג 100% לצמחי בדיקה, צריך להיקבע עבור כל שילוב של מארח של צמח ווירוס. צריך יחס אופטימלי זה בלבד שיוקם ועונה אחת. התוצאות הטובות ביותר הושגו באמצעות Whiteflies בוגר צעיר (1-3 ימי הופעתה בעבר) מכיוון שהם גרםive השיעורים הגבוהים ביותר של שידור. יכולים לשמש אנשים מבוגרים אבל מספרים גדולים יותר של Whiteflies יהיה צורך לפצות על השיעורים המופחתים של שידור. נקבות ידועות כדי להעביר בשיעורים גבוהים יותר מאשר גברים, שכן הם להאכיל לעתים קרובות יותר מאשר גברים. עם זאת, הוא בדרך כלל לא שווה את הזמן כדי להפריד בין המינים לשידור. הליך זה יכול להיות שונה בדרכים רבות כדי להתאים את המשאבים והצרכים של החוקר.

כאשר עובד עם מספר רב של וירוסים הוא הטוב ביותר לשמור על מושבה אחת של Whiteflies גדל על צמחי nonhost של הנגיף. ניתן לאסוף Whiteflies אלה מונחים על צמחים נגועים בנגיף לרכישה ולאחר מכן לאחר רכישה ניתן להעביר את Whiteflies שוב לצמחי הבדיקה. צמחים המיועדים למושבה צריכים להיות מבוגרים בחממות בכלובים כדי למנוע את כניסתה של Whiteflies שעלול להדביק אותם בווירוס אחר. התפשטות של הצמחים האלה עם קרדית, תריפסים, ומזיקי צמחים אחרים יכולה לסכן את שעותסמל בריאות של המושבה ולגרום לקריסתו. לבסוף השקיה של צמחי המושבה צריכה להיעשות בזהירות. צמחים אלה הם נתונים ללחץ קיצוני על ידי ההאכלה של Whiteflies כל כך הרבה ותנאי האור הנמוכים מהרגילים. שורש ריקבון פטריות אשר הציגו בכבול בתערובות soilless יכול להיות בעיה אם הצמחים overwatered אפילו פעם אחת. טיפול מקדים של צמחים עם פטריות להציף יכול לבטל חלק מהבעיות.

בעוד שידור כנימות של וירוסי צמחים יכול להיות זמן רב ודורש משאבים יקרי ערך (כגון חדרי צמיחה) הוא חיוני להעברת וירוסים מסוימים שעבורו אין לנו אמצעים אחרים של שידור. זהו גם אמצעי חשוב של צמחי הקרנה להתנגדות לוירוסים, כפי שהוא משתמש באותו סוג של שידור שהצמחים בתחום תהיו צפוי להתנגד. השימוש באמצעים מלאכותיים יותר של הילוכים לא תמיד יניבו את התוצאות הטובות ביותר בהערכות של germplasm לviruS-התנגדות.

Disclosures

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name of the Item Company Catalogue No. Comments (optional)
Whitefly proof screening Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel --- BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen
Whitefly proof screening Hummert International (www.hummert.com) 27-4050-1 - 27-4062-1 BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen
Whitefly Collection Devices BioQuip 1135A Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth
Collection vials BioQuip 8909 Vials used depend on which aspirator is used.
Yellow plastic cards any company --- Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places.
Whitefly Cages --- --- These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Antignus, Y., Mor, N., Ben Joseph, R., Lapidot, M., Cohen, S. UV absorbing plastic sheets protect crops from insect pests and from virus diseases vectored by insects. Environ. Entomol. 25, 919-924 (1996).
  2. Cohen, S. Epidemiology of whitefly-transmitted viruses. Whiteflies: Their Bionomics, Pest Status and Management. Gerling, D. Intercept. 211-225 (1990).
  3. Cohen, S., Antignus, Y. Tomato yellow leaf curl virus, a whitefly-borne geminivirus of tomatoes. Adv. Dis. Vector Res. 10, 259-288 (1994).
  4. Csizinszky, A., Schuster, D. J., Polston, J. E. Effect of UV-reflective mulches on tomato yields and on the silverleaf whitefly. HortSci. 34, 911-914 (1999).
  5. De Barro, P. J., Liu, S. -S., Boykin, L. M., Dinsdale, A. B. Bemisia tabaci: A statement of species status. Annu. Rev. Entomol. 56, 1-19 (2011).
  6. Duffus, J. E. Whitefly-borne viruses. Bemisia: 1995 Taxonomy, Biology, Damage, Control and Management. Gerling, D., Mayer, R. Intercept Limited. United Kingdom. 255-288 (1996).
  7. Lapidot, M. Screening for TYLCV-resistant plants using whitefly-mediated inoculation. Tomato Yellow Leaf Curl Virus Disease. Czosnek, H. 329-342 (2007).
  8. Lapidot, M., Friedmann, M. Breeding for resistance to whitefly-transmitted geminviruses. Ann. Appl. Biol. 140, 109-117 (2002).
  9. Lapidot, M., Polston, J. E. Biology and epidemiology of Bemisia-vectored viruses. Bemisia: Bionomics and Management of a Global Pest. Stansly, P. A., Naranjo, S. E. Springer. 227-231 (2010).
  10. Navas-Castillo, J., Fiallo-Olive, E., Sanchez-Campos, S. Emerging virus diseases transmitted by whiteflies. Annu. Rev. Phytopathol. 49, 219-248 (2011).
  11. Ng, J. C. K., Falk, B. W. Virus-vector interactions mediating nonpersistent and semipersistent transmission of plant viruses. Ann. Rev. Phytopathol. 44, 212-21 (2006).
  12. Polston, J. E., Cohen, L., Sherwood, T. A., Ben-Joseph, R., Lapidot, M. Capsicum species: Symptomless hosts and reservoirs of Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV). Phytopathology. 96, 447-452 (2006).
  13. Polston, J. E., Hiebert, E., McGovern, R. J., Stansly, P. A., Schuster, D. J. Host range of Tomato mottle virus, a new geminivirus infecting tomato in Florida. Plant Dis. 77, 1181-1184 (1993).
  14. Polston, J. E., Sherwood, T. A. Pymetrozine interferes with transmission of Tomato yellow leaf curl virus by the whitefly Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae. Phytoparasitica. 31, 490-498 (2003).
  15. Schuster, D. J., Thompson, S., Ortega, L. D., Polston, J. E. Laboratory evaluation of products to reduce settling of sweetpotato whitefly adults. J. Econ. Ento. 102, 1482-1489 (2009).
  16. Virus Taxonomy, Ninth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. King, A. M. Q., Adams, M. J., Carstons, E. B., Lefkowitz, E. J. Elvesvier, Academic Press. (2012).
  17. Wintermantel, W. M. Transmission efficiency and epidemiology of Criniviruses. Bemisia: Bionomics and Management of a Global Pest. Stansly, P. A., Naranjo, S. E. Springer. 319-332 (2010).
  18. Yang, Y., Sherwood, T. A., Patte, C. P., Hiebert, E., Polston, J. E. Use of Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) Rep gene sequences to engineer TYLCV resistance in tomato. Phytopathology. 94, 490-496 (2004).
  19. Zehnder, G. W., Yao, C., Murphy, J. F., Sikora, E. R., Kloepper, J. W., Schuster, D. J., Polston, J. E. Microbe-Induced Resistance Against Pathogens and Herbivores: Evidence of Effectiveness in Agriculture. Induced Plant Defenses Against Pathogens. APS Press. St. Paul, MN. 335-355 (1999).
וירוסי צמח באמצעות העברת Whiteflies
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Polston, J. E., Capobianco, H. Transmitting Plant Viruses Using Whiteflies. J. Vis. Exp. (81), e4332, doi:10.3791/4332 (2013).More

Polston, J. E., Capobianco, H. Transmitting Plant Viruses Using Whiteflies. J. Vis. Exp. (81), e4332, doi:10.3791/4332 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter