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Biology

Whiteflies का प्रयोग हस्तांतरित संयंत्र वायरस

doi: 10.3791/4332 Published: November 8, 2013

Summary

के बारे में हमारी समझ और कीट प्रेषित संयंत्र वायरस के कई प्रबंधन करने की क्षमता में सुधार वेक्टर के उपयोग की आवश्यकता है. संयंत्र वायरस के कीट संचरण एक tritrophic बातचीत है, और इस तरह के रूप में कीड़े, वायरस, और संयंत्र के हेरफेर की आवश्यकता है. वैक्टर बड़ी संख्या में पाला और परीक्षण पौधों को प्रसारण की उच्च दर का बीमा करने के लिए इस तरह के रूप में चालाकी से किया जाना चाहिए. whitefly पालन और छेड़खानी की मूल बातें,

Abstract

Whiteflies, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, आकृति विज्ञान indistinquishable प्रजातियों 5 का एक जटिल, कई संयंत्र वायरस की वैक्टर हैं. इन whitefly संक्रमित संयंत्र वायरस (Begomovirus, Carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) की कई पीढ़ी उभर रहा है और महत्वपूर्ण भोजन और फाइबर फसलों (9,10,16 द्वारा समीक्षा) के आर्थिक रूप से महत्वपूर्ण रोगजनकों के कई सौ प्रजातियों में शामिल हैं. ये वायरस अपने वेक्टर में दोहराने नहीं है, लेकिन फिर भी विभिन्न साधनों (2,6,7,9,10,11,17 द्वारा समीक्षा) द्वारा वयस्क whitefly द्वारा संयंत्र से संयंत्र के लिए आसानी से स्थानांतरित कर रहे हैं. दूसरों के लिए ही जांच कर आवश्यक है थोड़ी देर के लिए whitefly खिला इन वायरस के अधिकांश, अधिग्रहण और टीकाकरण के लिए आवश्यक है. इन वायरस के कई लोग असमर्थ हैं या आसानी से अन्य साधनों के माध्यम से प्रेषित नहीं किया जा सकता. वायरस संस्कृतियों, जैविक और आणविक लक्षण वर्णन (मेजबान रेंज और लक्षणों की पहचान) 3,13 की इसलिए रखरखाव, पारिस्थितिकी 2,12, वायरस whitefly सदिश का उपयोग प्रयोगात्मक मेजबान को प्रेषित किया है कि आवश्यकता होती है. इसके अलावा इस तरह के नए रसायनों 14 या यौगिकों 15, नए सांस्कृतिक दृष्टिकोण 1,4,19, या चयन और प्रतिरोधी किस्मों 7,8,18 के विकास के मूल्यांकन के रूप में प्रबंधन के लिए नए तरीकों, के विकास के लिए whiteflies के उपयोग की आवश्यकता वायरस के संचरण. चयन और प्रजनन कार्यक्रम में प्रतिरोधी किस्मों के विकास के लिए संयंत्र वायरस की whitefly संचरण का उपयोग विशेष रूप से 7 चुनौती दे रहा है. प्रतिरोध के लिए प्रभावी चयन और स्क्रीनिंग पौधों की बड़ी संख्या को रोजगार और प्रतिरोध जीनों के अधिकारी जो कुछ जीनोटाइप खोजने के लिए टीका होने के लिए पौधों की 100% के लिए एक की जरूरत है. ये अध्ययन अक्सर विषाक्त बनाने वाला whiteflies, प्रति वर्ष कई बार की बहुत बड़ी संख्या का उपयोग करें.

Whitefly रखरखाव यहाँ वर्णित सैकड़ों या हजारों उत्पन्न कर सकते हैंअन्य संयंत्र वायरस के संक्रमण के बिना पौधों प्रत्येक सप्ताह, वर्ष दौर, पर वयस्क whiteflies की. Whiteflies और वायरस दोनों का नि: शुल्क पौधे प्रत्येक सप्ताह whitefly कॉलोनी में पेश करने का उत्पादन किया जाना चाहिए. Whitefly संस्कृतियों whitefly रोगजनकों, परजीवी, और whitefly आबादी और / या कम करने के वायरस का संचरण क्षमता को कम कर सकते हैं कि parasitoids से मुक्त रखा जाना चाहिए. वर्णित तरीके से उत्पादित कालोनियों जल्दी जरूरत के रूप में आबादी की संख्या बढ़ाने या कम करने के लिए बढ़ाया जा सकता है, और वायरस के संयंत्र मेजबान पर whitefly आधारित के भोजन वरीयताओं को समायोजित करने के लिए समायोजित किया जा सकता है.

एक nonviruliferous और एक विषाक्त बनाने वाला whitefly कॉलोनी: बनाए रखा जा सकता है कि whitefly कालोनियों के दो बुनियादी प्रकार हैं. nonviruliferous कॉलोनी वायरस मुक्त पौधों पर पाला whiteflies से बना है और विभिन्न संस्कृतियों से वायरस संचारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है जो whiteflies की साप्ताहिक उपलब्धता की अनुमति देता है. विषाक्त बनाने वाला whitefly कॉलोनी,वायरस से संक्रमित पौधों पर पाला whiteflies की रचना की है, इस प्रकार वायरस संचरण प्रक्रिया में एक कदम omitting वायरस प्राप्त कर लिया है जो whiteflies की साप्ताहिक उपलब्धता की अनुमति देता है.

Protocol

1. Whitefly कालोनी रखरखाव

  1. पर्यावरण की स्थिति: whitefly कालोनियों एक नियंत्रित विकास कक्ष में रखा जाना चाहिए. सापेक्षिक आर्द्रता, तापमान, photoperiod, और प्रकाश की तीव्रता का नियंत्रण इष्टतम कॉलोनी विकास (चित्रा 1) के लिए आवश्यक हैं. 28 के एक डिग्री सेल्सियस के तापमान, 30-50% सापेक्ष आर्द्रता, और एक 14 घंटे photoperiod अंडे से 18 दिनों में वयस्क उद्भव (इस समय संयंत्र मेजबान के साथ बदलती रहती है) को विकसित करता है कि एक कॉलोनी निकलेगा. सापेक्ष आर्द्रता कीट और संयंत्र कवक रोगजनकों के विकास को हतोत्साहित करने के लिए 70% से नीचे रखा जाना चाहिए. उर्वरक दरों और पानी कवक रोगजनकों और नमक संचय हतोत्साहित करने के लिए कम किया जाना चाहिए. कॉलोनी के लिए प्रकाश की तीव्रता काफी अधिक होना चाहिए. चंदवा ऊंचाई पर लगभग 800-1000 फुट मोमबत्ती उत्पन्न करने के लिए पर्याप्त संख्या में इस्तेमाल किया VHO फ्लोरोसेंट बल्ब ज्यादातर पौधों के लिए पर्याप्त हैं (यानी. कपास, आम सेम, लाइमा सेम, टमाटर). सफाई में आवश्यक हैएक whitefly कॉलोनी इष्टतम पालन की स्थिति बनाए रखने के लिए.
  2. कालोनी पिंजरों: whiteflies बल्कि विकास कक्ष में नि: शुल्क से, पिंजरों में पौधों पर बनाए रखा जाना चाहिए. पिंजरों विभिन्न सामग्रियों का निर्माण किया जा सकता है, लेकिन के लिए अनुमति चाहिए:, वेंटिलेशन उपयोग में आसानी, जरूरत whitefly आबादी उत्पन्न करने के लिए पर्याप्त पौधों को बनाए रखने के लिए whitefly भागने या घुसपैठ, और पर्याप्त आकार से रोकने की क्षमता. अच्छा परिणाम organza प्लस एल्यूमीनियम स्क्रीनिंग (शक्ति के लिए) के रूप में भी whitefly प्रूफ स्क्रीनिंग (विशिष्ट उपकरण और आपूर्ति की तालिका देखें) से प्राप्त किया गया है.
  3. कालोनी प्लांट तैयारी: एक whitefly कॉलोनी शुरू जब चयनित संयंत्र की प्रजातियों में एक महत्वपूर्ण विचार है. संयंत्र के ढहने के बिना एक उच्च कीट आबादी का समर्थन करने में सक्षम होना चाहिए. एक nonviruliferous कॉलोनी के लिए चुना संयंत्र एक viruli बनाए रखने वायरस या कॉलोनी में संक्रमण से बचने के लिए प्रेषित किया जा इरादा कर रहे हैं कि वायरस के लिए और अगर एक nonhost होना चाहिएferous कॉलोनी, यह वायरस का मेजबान होना चाहिए. पौधों कॉलोनी के लिए पेश किया जा रहा है की 18 दिनों के भीतर नई वयस्कों के उद्भव का समर्थन करने के लिए काफी तेजी से बढ़ने चाहिए, लेकिन नहीं इतनी जल्दी के रूप में चार सप्ताह के भीतर पिंजरों विकसित हो जाना. वे अक्सर लम्बे खेती करने के लिए इसी तरह की एक पत्ती क्षेत्र का उत्पादन लेकिन स्टेम बढ़ाव बिना ही बौना, झाड़ी, या आँगन प्रकार संयंत्र किस्मों की सिफारिश की है.
  4. यह whiteflies और अन्य कीड़ों को बाहर कि पिंजरों में ग्रीनहाउसों में कॉलोनी के लिए पीछे के पौधों के लिए बहुत महत्वपूर्ण है. वे कॉलोनी कॉलोनी पतन का कारण बन सकता है में प्रवेश से पहले whiteflies, कीटों, या कण से पीड़ित हैं कि पौधों का प्रयोग करें. प्रभावित पौधों को भी वायरस संचरण पढ़ाई के साथ हस्तक्षेप करेगा जो कीट जनित वायरस से संक्रमित होने की क्षमता है.

2. Whitefly कालोनी स्थापना

  1. साफ whiteflies का उपयोग करने के लिए पहली बार एक कॉलोनी शुरू - पौधे वायरस, अन्य कीड़े, और कीट रोगजनकों के लोगों को मुफ्त. ये प्राप्त किया जा सकता हैसहयोगियों से या क्षेत्र से. क्षेत्र एकत्र हैं, whiteflies संयंत्र वायरस की nonhost संयंत्रों पर कम से कम 8 सप्ताह के लिए पाला, और वे संयंत्र वायरस से मुक्त हैं सुनिश्चित करने के लिए संयंत्र के लक्षण के अभाव के लिए जाँच की जानी चाहिए.
  2. सप्ताह 1: पौधों के पहले पिंजरे को साफ whiteflies परिचय दें. Whiteflies ज्ञात संख्या की आकांक्षा से या धीरे कॉलोनी पर मांग के आधार पर एक अन्य स्रोत संयंत्र से whiteflies झटकों से पेश किया जा सकता है. सप्ताह के दौरान 1, whiteflies संयंत्र पत्ती सतहों के नीचे पर अंडे दे रहे हैं. एक अनुमानित जनसंख्या के आकार के अंडे और सवाल में मेजबान संयंत्र पर महिला whitefly द्वारा रखी अंडे की औसत संख्या बिछाने के लिए इस्तेमाल किया वयस्कों की संख्या के आधार पर प्रत्येक उद्भव के लिए भविष्यवाणी की जा सकती.
  3. 2 सप्ताह: अंडे देना नए मेजबान पौधों को whiteflies शुरू करने से एक और पिंजरे शुरू करो. सप्ताह 1 में शुरू पिंजरे में पौधों अंडे, और पत्तियों के undersides (चित्रा 2) को कवर कुछ अपरिपक्व whiteflies होगा. कुछ1 सप्ताह के दौरान पेश वयस्क whiteflies अभी भी जीवित हो जाएगा.
  4. 3 सप्ताह: अंडे देना नए संयंत्रों के लिए whiteflies शुरू करने से एक तिहाई पिंजरे शुरू करो. सप्ताह 1 में शुरू पिंजरे में पौधों अपरिपक्व के रूप में भी उभर रहा है कई नए वयस्क whiteflies होगा और वयस्क whitefly आबादी में एक बहुत ध्यान में वृद्धि होनी चाहिए. 2 सप्ताह में शुरू कर दिया पिंजरे में पौधों कई अंडे और पत्तियों के undersides को कवर अपरिपक्व whiteflies होगा.
  5. सप्ताह 4: अंडे देना नए संयंत्रों के लिए whiteflies शुरू करने से एक चौथाई पिंजरे शुरू करो. सप्ताह 1 में शुरू पिंजरे में पौधों लगभग एक सप्ताह के बाद उद्भव हैं कि कई वयस्क whiteflies होगा. 2 सप्ताह में शुरू कर दिया पिंजरे में पौधों उभरते कई नए वयस्क whiteflies होगा और whitefly आबादी में एक बहुत ध्यान में वृद्धि होनी चाहिए. 3 सप्ताह के दौरान शुरू पिंजरे में पौधों के पत्तों के undersides को कवर कई अंडे और अपरिपक्व whiteflies होगा.
  6. पहले 4 मूत के बाद साप्ताहिकएस: हर सप्ताह, एक नए, साफ पिंजरे में नए संयंत्रों पर चौथी सबसे पुराने पिंजरे (पिंजरे सप्ताह 1 में शुरू किया था) से वयस्क whiteflies शुरू करने से एक नया पिंजरे शुरू. पुराने पिंजरे हटा दिया है और अपने संयंत्रों खारिज किया जाना चाहिए. ये whiteflies लगभग 1 सप्ताह के बाद उद्भव हैं. विषाक्त बनाने वाला कॉलोनी के मामले में, इन whiteflies नए पौधों के साथ ही whiteflies की अगली पीढ़ी के लिए अंडे देना वायरस प्रसारित होगा.
  7. योजना प्रसारण प्रयोगों के तीसरे सप्ताह के पिंजरे में उभरेगा कि whiteflies उपयोग करने के लिए. अधिक whiteflies की जरूरत है, संयंत्र संख्या बढ़ाई जा सकती है और अधिक whiteflies whitefly आबादी बढ़ाने के लिए सप्ताह 1 पिंजरे में जोड़ा जा सकता है.

3. टेस्ट संयंत्रों का टीका के लिए विधि

  1. उच्च संचरण दर का बीमा करने के लिए: 1) whiteflies संचरण दर कम हो जाएगा जो कीट के नुकसान को रोकने के लिए धीरे के रूप में संभव के रूप में नियंत्रित किया जाना चाहिए, 2) ईआईटी को whiteflies के लिए उपलब्ध पर्याप्त पत्ती क्षेत्र होना चाहिएउसकी जांच या फ़ीड. अधिग्रहण के समय या अधिग्रहण मेजबान पौधों की संख्या में वृद्धि में वृद्धि अधिग्रहण या टीका उपयोग अवधि में या तो भीड़ के कारण परीक्षण पौधों में संक्रामकता की कम दरों में वृद्धि हो सकती है.
  2. Whiteflies का संग्रह. निम्नलिखित प्रयोगात्मक प्रयोजनों के लिए आवश्यक whiteflies की सटीक संख्या का संग्रह और आंदोलन के लिए एक प्रक्रिया है. Whiteflies की बड़ी संख्या को स्थानांतरित करने के लिए, के रूप में उदाहरण के लिए प्रतिरोध स्क्रीनिंग के लिए आवश्यक है, यह धीरे परीक्षण पौधों या वायरस से संक्रमित अधिग्रहण मेजबान (और बाद में परीक्षण पौधों) पर whitefly से भरे पौधों को हिला ही आवश्यक है. एकत्रीकरण प्रभाव को कम करने के लिए कई स्थानों पर पौधों को हिला यकीन है.
  3. नवनियुक्त वयस्क whiteflies (1-3 दिनों के बाद उद्भव) अत्यधिक सक्रिय हैं और कई बार तो उच्चतम संचरण दर 4 दे देते हैं फ़ीड उभरा. वृध्द whiteflies अभी भी संचारित लेकिन एक कम आवृत्ति पर. परीक्षण संयंत्र प्रति एकाधिक whiteflies (पीएलए प्रति 15-40NT) संयंत्र प्रति whitefly 1 के अनुपात के बाद से प्रसारण की उच्च दर के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए अक्सर unacceptably कम संचरण दर 3,4 में परिणाम है. संख्या के अधिग्रहण और परीक्षण पौधों के वायरस और प्रजातियों पर निर्भर की जरूरत है.
  4. आकांक्षा उपकरणों और संग्रह शीशियों को इकट्ठा करो. (चित्रा 3)
  5. एक हाथ से, whiteflies एकत्र होने के लिए होता है कि कॉलोनी पिंजरे के अंदर एक पीले रंग की प्लास्टिक कार्ड पकड़. धीरे वयस्क whiteflies उड़ान भरने के लिए प्रोत्साहित करने के लिए पौधों का दोहन. Whiteflies पीले कार्ड के लिए आकर्षित किया जाएगा और संयंत्र से एक Aspirator और एक बहुत कोमल सांस का उपयोग कर वे एकत्र किया जा सकता है जहां कार्ड के लिए उड़ जाएगा. पौधों पर खिला रहे हैं कि whiteflies महाप्राण कभी नहीं. खिला ताकि पौधों उनके stylets टूट जाएगा उन्हें खींच और या तो अधिग्रहण या (चित्रा 4) वायरस संचारित करने के लिए उन्हें असमर्थ प्रतिपादन करते हुए उनके stylets संयंत्र में एम्बेडेड रहे हैं.
  6. एक भी कॉले में लगभग 20 वयस्क whiteflies लीजिएदोहराया आकांक्षाओं (चित्रा 5) से कीड़ों को शारीरिक क्षति को कम करने के लिए ction शीशी.
  7. Whiteflies दोहन से disoriented कर रहे हैं, जबकि संग्रह शीशी को बदलने के लिए, धीरे से Parafilm के साथ एक सख्त सतह और टोपी पर शीशी नल.
  8. वातशोषक पर एक नया इकट्ठा शीशी रखो और जरूरत whiteflies की संख्या एकत्र कर रहे हैं जब तक दोहराएँ. Whiteflies कई घंटे के लिए कमरे के तापमान पर संग्रह शीशियों में रह सकते हैं.
  9. अधिग्रहण. Whiteflies एक वायरस संक्रमित संयंत्र पर रखा जाता है और 48-72 घंटे के लिए संक्रमित पौधों पर फ़ीड करने के लिए अनुमति दी जाती है. 72 घंटे से अधिक समय के अधिग्रहण की अवधि आम तौर पर संचरण दरों में वृद्धि नहीं करते. क्रमशः एक nonpersistent या semipersistent ढंग, 1 घंटा और कई घंटे, में प्रेषित उन वायरस के लिए पर्याप्त अधिग्रहण उपयोग अवधि (1 टेबल) कर रहे हैं. Whiteflies एक भी संयंत्र के लिए या करने के लिए कीड़ों सीमित कि पिंजरों में पौधों के लिए स्वतंत्र पहुँच दी जाती है जब सबसे अच्छा परिणाम प्राप्त कर रहे हैंकई पौधों. हालांकि कुछ प्रयोगों के मामले क्लिप पिंजरों में इस्तेमाल किया जा सकता है, जिसमें विशिष्ट पत्तियों से अधिग्रहण की आवश्यकता होती है. क्लिप पिंजरों का उपयोग करते समय यह पत्तियों के undersides के लिए whitefly खिला वरीयता समायोजित करने के लिए महत्वपूर्ण है. इसके अलावा, क्लिप पिंजरों में whiteflies की भीड़ संचरण दरों को कम कर सकते हैं - प्रसारण के स्वीकार्य दरों में 2.5 सेमी व्यास का क्लिप पिंजरे प्रति 10 महिला whiteflies का प्रयोग कर प्राप्त किया गया है.
  10. टीका. टीका के आकार के लिए उपयुक्त एक पिंजरे तैयार है और अंदर परीक्षण पौधों जगह. केवल एक संयंत्र टीका करना है तो एक ही पौधे पिंजरे पर विचार करें. एक से अधिक पौधे एक छोटे पीवीसी फ्रेम / organza बैग पिंजरे या एक एल्यूमीनियम पिंजरे (चित्रा 6) पर विचार inoculated किया जा रहा है. टीका के लिए इस्तेमाल किया पिंजरे का आकार टीका होने के लिए संयंत्र (ओं) का आकार थोड़ा बड़ा होना चाहिए. Whiteflies करीब संयंत्र चंदवा को रखा और मुक्त अंतरिक्ष के एक बहुत कुछ नहीं दिया जाता है जब उच्च संचरण दर प्राप्त कर रहे हैं.
  11. अधिग्रहण के मेजबानों से whiteflies का संग्रह प्रयोग की जरूरतों पर निर्भर करता है. कम संख्या की जरूरत है, जैसा कि ऊपर वर्णित whiteflies aspirate. पौधों के पास पिंजरे के अंदर whiteflies का संग्रह शीशियों प्लेस और ढक्कन (चित्रा 7) को हटा दें. शीशी खोलें और whiteflies रिहाई या पलटना और धीरे whiteflies रिलीज करने शीशी नल. बड़ी संख्या में जरूरत है तो बस परीक्षण पौधों स्थित हैं जहां पिंजरों में whiteflies साथ अधिग्रहण के पौधों को बढ़ने के लिए और धीरे अधिग्रहण मेजबान संयंत्र बंद whiteflies हिला. परिचय के दोनों प्रकार के लिए, एकत्रीकरण को कम करने और एक समान टीका बीमा करने के लिए पौधों के पार whiteflies वितरित करने के लिए सुनिश्चित करें.
  12. Whiteflies मेजबान संयंत्र (तालिका 1) की जांच या, समय की उचित राशि के लिए फ़ीड वायरस पर फिर से निर्भर है और कुछ हद तक करने की अनुमति दें.
  13. कि whiteflies हैं बीमा करने के लिए टीका उपयोग की अवधि के दौरान कम से कम एक बार whiteflies जाँच करेंपिंजरे खोलने और प्रत्येक संयंत्र पर कुछ पत्तियों पर बदल से जांच कर रही है या खिला.
  14. अब टीका उपयोग अवधि के लिए, पौधों की सबसे ऊपर है ब्रश और पौधों पर फिर से विभाजित करने के लिए whiteflies प्रोत्साहित करने के लिए (एक बांस की छड़ी या बराबर का उपयोग करके) धीरे पौधों को परेशान. Whiteflies के पुनर्वितरण कुल करने whiteflies की स्वाभाविक प्रवृत्ति का मुकाबला द्वारा एक उच्च संचरण दर सुनिश्चित करने में मदद करता है.
  15. समाप्ति. टीका उपयोग अवधि अनुमोदित रसायनों के साथ whiteflies हत्या से समाप्त हो गया है. एक संपर्क कीटनाशक जल्दी से निम्नलिखित सप्ताह और संपर्क कीटनाशक (8 चित्रा) से चूक गए उन में विकसित है कि किसी भी whiteflies समाप्त करने के लिए वयस्क whiteflies और एक प्रणालीगत कीटनाशक समाप्त करने के लिए: दो कीटनाशकों एक दूसरे के बाद लागू करें. ऐसे कीटनाशक साबुन और ऐसे imidacloprid या pymetrozine के रूप में प्रणालीगत कीटनाशकों के रूप में एक संपर्क कीटनाशक अच्छी सफलता के साथ इस्तेमाल किया गया है.

Representative Results

Whitefly कॉलोनी स्थापना और रखरखाव, साथ ही संयंत्र वायरस संचारित करने के लिए जोड़ - तोड़ के लिए इन तरीकों में उद्धृत नहीं पढ़ाई 4,11,12,14 के साथ ही कई अन्य लोगों की एक संख्या में सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया गया है. लगातार संचारित वायरस के साथ इन विधियों का प्रयोग, हम नियमित रूप से प्रसारण के मामले में हस्तक्षेप करने की क्षमता (और प्रतिरोध उत्प्रेरण यौगिकों का मूल्यांकन) 13,14,17,18 (के लिए कीटनाशकों स्क्रीनिंग, प्रतिरोध के लिए चयन के लिए 100% के प्रसारण के वांछित दरें प्राप्त किया है 9 चित्रा). यहाँ वर्णित प्रक्रियाओं और सार्वजनिक और निजी दोनों अनुसंधान सुविधाओं में कई स्थानों के लिए अनुकूलित किया गया है सकते हैं.

पारेषण के प्रकार अधिग्रहण पहुँच अवधि (घंटे) टीका पहुँच अवधि (घंटे) रेफरी.
Nonpersistent 1 2-24 10
Semipersistent 6-24 8-24 10, 16
ज़िद्दी 48-72 48-72 3, 6, 8, 9

तालिका 1. उनके वेक्टर Bemisia tabaci प्रजातियों जटिल. अनुमानित समय के साथ संबंधों के विभिन्न प्रकारों के साथ वायरस के संचरण की उच्च दर का उत्पादन किया जा सकता है कि अनुमानित बार 80-100% प्रसारण के लिए आवश्यक है और कुछ मामलों में संशोधित प्रकाशित न्यूनतम समय के आधार पर कर रहे हैं अव्यक्त उस समय और whitefly आबादी, वायरस, और मेजबान पौधों के बीच मतभेद के लिए खाते.

चित्रा 1
चित्रा 1. एक विषाक्त बनाने वाला whitefly कॉलोनी का एक उदाहरण है. यह वृद्धि कमरे में एक begomovirus और infe से संक्रमित पौधों के पिंजरों शामिलविषाक्त बनाने वाला whiteflies साथ sted.

चित्रा 2
चित्रा 2. वाम: whitefly, Bemisia tabaci MEAM क्लेड sensu डी Barro 6 लगभग 1 सप्ताह के बाद उद्भव और अधिकार के चरणों Immatures: whitefly एक वयस्क, कई संयंत्र वायरस का एक प्रभावी वेक्टर.

चित्रा 3
चित्रा 3. संयंत्र वायरस संचरण के लिए whiteflies इकट्ठा करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि संग्रह उपकरणों के प्रकार.

चित्रा 4
4 चित्रा. वाम: संग्रह के लिए तैयार whiteflies दिखा whitefly वयस्कों इकट्ठा किया पीला प्लास्टिक कार्ड . अधिकार: एक पीले रंग की प्लास्टिक कार्ड से whiteflies संग्रह. Whiteflies छोटे ग्रे / सफेद धब्बे के रूप में कार्ड पर देखा जा सकता है.

चित्रा 5
चित्रा 5. Whiteflies अधिग्रहण या टीका या तो के लिए तैयार कॉलोनी से (एक शीशी में 20) आकांक्षा द्वारा एकत्र की.

चित्रा 6
6 चित्रा. ऊपरी वाम:. अधिग्रहण या टीका या तो के लिए इस्तेमाल एकल संयंत्र पिंजरों ऊपरी सही: पीवीसी पाइप और organza के बने बड़े पिंजरों. लोअर: एल्यूमिनियम / स्क्रीन और एक whitefly कॉलोनी के लिए उद्देश्य से एक ग्रीनहाउस युक्त पौधों में organdy पिंजरों.

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चित्रा 7. Whiteflies टीका के लिए एक ही पौधे (या अधिग्रहण) को हस्तांतरित किया जा रहा है.

8 चित्रा
चित्रा 8. एक प्रणालीगत कीटनाशक सराबोर करने के अलावा whitefly टीका उपयोग अवधि समाप्त करने के लिए.

9 चित्रा
9 चित्रा. टमाटर पीला पत्ता कर्ल वायरस के प्रतिरोध के लिए मूल्यांकन के तहत फील्ड पौधों. सभी पौधों 5 सप्ताह पुरानी पौध के रूप में टीका और फिर मूल्यांकन के लिए क्षेत्र में प्रत्यारोपित किया गया. अग्रभूमि में पौधों की एक प्रतिरोधी जर्मप्लाज्म लाइन कर रहे हैं, पृष्ठभूमि में पौधों अतिसंवेदनशील जर्मप्लाज्म लाइन कर रहे हैं.

Discussion

यहाँ वर्णित विधि दो दशकों की अवधि में विकसित किए गए और whitefly संचरण, व्यवहार, और जीव विज्ञान के कई अध्ययनों द्वारा प्रदान की बुनियादी जानकारी पर आधारित हैं. कई प्रकाशनों के बाद से वहाँ, इस पांडुलिपि इस तकनीक को विकसित करने के लिए इस्तेमाल किया डेटा के प्रकार का वर्णन करने के लिए समीक्षा करने के लिए और कुछ चयनित विशिष्ट प्रकाशनों के लिए मुख्य रूप से संदर्भित करता है. यह whiteflies पैर और एंटेना के टूटने के बाद से धीरे से नियंत्रित किया जाता है कि इस प्रक्रिया में बहुत महत्वपूर्ण है, असामान्य व्यवहार और संचरण की दर कम हो सकती है. Vacuums और अन्य यांत्रिक चूषण उपकरणों के साथ संग्रह अच्छा परिणाम का उत्पादन नहीं किया है. सफलता के लिए एक और विचार परीक्षण पौधों के लिए 100% प्रसारण प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया whiteflies की संख्या, संयंत्र मेजबान और वायरस के प्रत्येक संयोजन के लिए निर्धारित किया जाना चाहिए. इस इष्टतम अनुपात केवल एक बार स्थापित करने की आवश्यकता है. वे जी के बाद से सबसे अच्छा परिणाम युवा वयस्क whiteflies (1-3 दिन पिछले उद्भव) का उपयोग कर प्राप्त किया गया हैसंचरण की दर सबसे अधिक ive. पुराने वयस्कों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है लेकिन whiteflies के बड़ी संख्या में प्रसारण के अपने कम दरों के लिए क्षतिपूर्ति करने के लिए आवश्यक हो जाएगा. महिलाओं वे अधिक बार पुरुषों की तुलना में खिलाने के बाद से, पुरुषों की तुलना में उच्च दरों पर प्रसारित करने के लिए जाना जाता है. हालांकि यह प्रसारण के लिए लिंगों अलग करने के लिए समय की कीमत आम तौर पर नहीं है. यह प्रक्रिया शोधकर्ता के संसाधनों और आवश्यकताओं के अनुरूप करने के लिए कई मायनों में संशोधित किया जा सकता है.

कई वायरस के साथ काम कर रहे हैं जब यह वायरस की nonhost पौधों पर पाला whiteflies का एक ही कॉलोनी रखने के लिए सबसे अच्छा है. ये whiteflies अधिग्रहण के लिए वायरस से संक्रमित पौधों पर रखा एकत्र किया जा सकता है और फिर अधिग्रहण के बाद whiteflies परीक्षण पौधों को फिर से ले जाया जा सकता है. कॉलोनी के लिए करना संयंत्रों एक और वायरस के साथ उन्हें संक्रमित हो सकता है कि whiteflies की शुरूआत को रोकने के लिए पिंजरों में ग्रीनहाउस में विकसित किया जाना चाहिए. कण, कीटों, और अन्य संयंत्र कीट के साथ इन पौधों की infestation ज समझौता कर सकते हैंकॉलोनी की ealth और यह पतन के कारण. अंत में कॉलोनी पौधों की पानी सावधानी से किया जाना है. इन पौधों को तो कई whiteflies को खिलाने और की तुलना में कम सामान्य प्रकाश की स्थिति से अत्यधिक तनाव के अधीन हैं. पौधों को भी एक बार overwatered रहे हैं बेदाग़ मिक्स में पीट पर पेश कर रहे हैं जो कवक सड़ रूट एक समस्या बन सकता है. एक कवकनाशी सराबोर करने के साथ पौधों की pretreatment समस्याओं में से कुछ को समाप्त कर सकते हैं.

संयंत्र वायरस की whitefly प्रसारण समय लगता हो और बहुमूल्य संसाधनों (जैसे विकास के कमरे के रूप में) की आवश्यकता होती है सकते हैं यह हम संचरण का कोई अन्य साधन है, जिसके लिए कुछ वायरस का संचरण के लिए आवश्यक है. यह क्षेत्र में पौधों का विरोध करने की उम्मीद की जाएगी कि प्रसारण के एक ही प्रकार का उपयोग करता है, क्योंकि यह भी वायरस के लिए प्रतिरोध के लिए स्क्रीनिंग पौधों का एक महत्वपूर्ण साधन है. संचरण की अधिक कृत्रिम साधन का उपयोग हमेशा वीरू के लिए जर्मप्लाज्म के मूल्यांकन में सबसे अच्छा परिणाम उपज नहीं हैएस प्रतिरोध.

Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name of the Item Company Catalogue No. Comments (optional)
Whitefly proof screening Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel --- BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen
Whitefly proof screening Hummert International (www.hummert.com) 27-4050-1 - 27-4062-1 BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen
Whitefly Collection Devices BioQuip 1135A Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth
Collection vials BioQuip 8909 Vials used depend on which aspirator is used.
Yellow plastic cards any company --- Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places.
Whitefly Cages --- --- These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening.

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References

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Whiteflies का प्रयोग हस्तांतरित संयंत्र वायरस
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Polston, J. E., Capobianco, H. Transmitting Plant Viruses Using Whiteflies. J. Vis. Exp. (81), e4332, doi:10.3791/4332 (2013).More

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