Summary
Die Lunge wird sowohl durch die systemische bronchiale Arterie und Lungenarterien perfundiert. In den meisten Lunge Pathologien, ist es umso kleiner systemische Gefäßsystem, die robust Neovaskularisierung zeigt. Einstellung der pulmonalen Blutfluss fördert regen bronchiale Angiogenese. Wir bieten chirurgische Details zu induzieren linken Lungenarterie Ischämie, die bronchiale Neovaskularisation fördert.
Abstract
Das adulte Lunge wird sowohl durch die systemischen Arterie bronchiale und der gesamten venösen Rückstrom Durchströmen der Lungenarterien perfundiert. In den meisten Lunge Pathologien, ist es umso kleiner systemische Gefäßsystem, die einen Bedarf an verbesserten Lungenperfusion reagiert und zeigt robuste Neovaskularisation. Pulmonalen vaskulären Ischämie durch Lungenarterie Obstruktion induziert wurde gezeigt, dass im schnellen systemischen arteriellen Angiogenese im Menschen sowie in mehreren Tiermodellen führen. Obwohl die histologische Beurteilung des zeitlichen Verlaufs der bronchialen Arterie Proliferation in Ratten wurde sorgfältig von Weibel 1 beschrieben, sind Mechanismen, die für diese organisierte Wachstum neuer Gefäße nicht klar. Wir bieten chirurgische Details zu induzieren linken Lungenarterie Ischämie bei der Ratte, die bronchiale Neovaskularisation führt. Quantifizierung des Ausmaßes der Angiogenese stellt eine zusätzliche Herausforderung aufgrund der Anwesenheit der zwei Gefäßbetten innerhalb der Lunge. Methodenum funktionelle Angiogenese von markierten Mikrokügelchen Injektionen zu bestimmen sind.
Introduction
Systemische Angiogenese in der Lunge ist gut erkannt. Bei Krankheitszuständen wie Asthma 2, interstitielle Lungenfibrose 3, Krebs 4 und chronischer pulmonaler Thromboembolie 5, die systemische Gefäßsystem in und rund um die Lunge proliferiert und dringt Lungenparenchym. Allerdings sind Tiermodelle diese differentielle Aktivierung der systemischen anstatt den Lungenkreislauf zu studieren wenige. Vielleicht ist die am besten reproduzierbare Modell systemische Neovaskularisierung in der Lunge des erwachsenen Säuger, was auftritt, nachdem Induzieren chronischer Ischämie Lungenarterie. Die Reaktion auf linken Lungenarterie Obstruktion beim Menschen 5-7, Hunde 8, 9 ist Schweinen, Schafen 10, 11 Meerschweinchen, Ratten 1, 12, 13, 14 und Mäusen die rasche Vermehrung der Arterie bronchiale sowie interkostalen Arterien. Die Mechanismen, die für die systemische neovascularisierung der Lunge nach pulmonalen Ischämie sind weitgehend unbekannt und wurden nicht umfassend untersucht. Der zeitliche Verlauf der bronchialen Angiogenese in der Ratte nach der linken Lungenarterie Obstruktion wurde sorgfältig in der Arbeit von histologischen Weibel 1 beschrieben. Erweiterung dieser Arbeit in der Ratte hat sich unser Labor auf beiden Wachstumsfaktoren wichtig in diesem Prozess sowie die physiologischen Ergebnis dieser Neovaskulatur in der Lunge konzentriert. Die Ergebnisse zeigen die CXC-Chemokin CINC-3 früh nach Ischämie und Behandlung von Ratten mit einem neutralisierenden Antikörper gegen CXCR2 erhöht ist, dämpft der Rezeptor für CINC-3, Angiogenese 13. Die neu eingerichtete bronchiale Vaskulatur 14 Tage nach dem Einsetzen der pulmonalen Ischämie wurde gezeigt, dass abnormale Protein mit erheblich erhöhter Permeabilität 15. Linken Lungenfunktion nicht normal war showing verringerte Diffusionskapazität und eine Abnahme Lungenvolumen 15. Obwohl die Neovaskulatur können contributed zum Erhalt von Lungengewebe bei chronischer pulmonaler Ischämie, erscheint es nicht normal zu sein und kann auf eine anhaltende Abnahme der Lungenfunktion bei.
Vielleicht ist einer der merkwürdigsten Aspekte dieses Modells bezieht sich auf die räumliche Verteilung der proliferierenden Blutgefäße. Trotz der Freisetzung von Wachstumsfaktoren im Lungenparenchym durch Ischämie stammt das Neovaskulatur in relativ großen stromaufwärts Bronchialarterien. Die normale bronchiale Arterie entsteht so einem kleinen Zweig aus der Aorta und dringt in die Atemwege Baum am carina. So der Mechanismus, durch den Wachstumsfaktoren induzieren die Anfangsphase der Arteriogenese ist nicht klar. Wir schlagen vor, dass die Ratte mit einem Gefäßanatomie ähnlich wie beim Menschen, bietet eine einzigartige Gelegenheit, um die Mechanismen, die für die systemische Angiogenese während pulmonalen Ischämie zu studieren. Obwohl komplette Obstruktion der linken Lungenarterie ist ein seltenes Ereignis in der menschlichen Subjekte,erhöhte bronchiale Vaskularität scheint ähnlich bei Patienten induziert werden unabhängig von der Lage und Größe der Lungenarterie Behinderung 16. Somit stellen wir eine detaillierte Beschreibung der chirurgischen Ansatz zur linken Lungenarterie bei Ratten und ein Mittel, um die Größe der Angiogenese quantifizieren ligieren.
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Protocol
Alle Protokolle an Ratten durchgeführt wurden von der Johns Hopkins University Animal Care und Use Committee und im Einklang mit NIH-Richtlinien zugelassen. Wenn möglich, sollte das Tier chirurgisch präpariert in einem Bereich getrennt von dem chirurgischen Gebiet zu Kontamination des chirurgischen Stelle zu minimieren.
Ein. Anästhesie / Schmerztherapie
- Ort Ratte (Sprague Dawley männlichen Ratten, 125-150 g; Harlan, Indianapolis, IN) in einer Ansaugkammer mit 3% Isofluran infundiert.
- Zeigen narkotisierten Ratte über Chirurgie Bord an Bugspitze und Ventilator mit 3% Isofluran Narkose. Verwenden Sie sterile Technik für alle Verfahren. Hängen Ratte sterile OP-Feld zu gewährleisten.
2. Intubation
- Immobilisieren Anhängsel in Rückenlage mit chirurgischen Band.
- Entfernen Ratte aus Nasenkonus, erweitern Zunge mit gepolsterten Zange.
- Verwenden Sie 14 gauge intracath mit abgestumpften Metall Stilett als Guide. Schieben hinter denNgue in Luftröhre.
- Entfernen Metall Stilett verlassen weißem Kunststoff intracath in der Luftröhre. Sicherstellen, dass die Ratte atmet und die Luft wird durch das Rohr fließt.
- Ersetzen Nasenkonus mit direktem Adapter Katheters verbinden Ratte zu Beatmungsgerät (90 Atemzüge / min; 8 ml / kg Atemzugvolumen; Nager Ventilator Modell 683, Harvard Apparatus, Holliston, Massachusetts).
- Bewerben Puralube (Butler Schein, Dublin, OH) Veterinär-Salbe auf die Augen.
3. Thorakotomie
- Ort rat rechten Seite nach unten, immobilisieren Anhängsel mit chirurgischen Band.
- Shave linken Brustkorb-Bereich.
- Entfernen Sie überschüssiges Fell mit kleinen Vakuum.
- Machen sterilen Bereich durch Abwischen mit Alkohol durch Povidon-Jod swabstick (Dynarex Corporation, Orangebur, NY) gefolgt. Wiederholen Sie diesen Vorgang zwei weitere Male (für insgesamt drei Peelings).
- Machen Querinzision mit steriler Präparierscheren oder sterilen Skalpell in der Mitte des Feldes.
- Blunt sezieren durch layers von Gewebe und Fett auf Rippen (letzte Schicht ist dünn Membran, die Rippen).
- Graf Rippen 3 rd Interkostalraum bestimmen.
- Mit einer sterilen 45 ° Graefe Pinzette machen stumpfen Schnitt zwischen 3. und 4 th Rippe.
- Legen Sie Rippe Separatoren, ziehen Sie vorsichtig die Schaffung offener Hohlraum mit voller Visualisierung von Lunge, statt Klebeband auf Nähte offen zu halten.
4. Left Pulmonary Artery Ligation
- Mit 90 ° Graefe Pinzette bewegen linken Lunge wieder mit der rechten Hand.
- Mit Dumont Muster # 5 gerade Pinzette greifen linken Lungenarterie und Atemwege mit der linken Hand. Linken Lungenarterie wird auf der Oberseite der Atemwege verlegen. Stellen Sie sicher, dass Pinzette direkt senkrecht auf den Tisch. Zusätzlich ist es am effektivsten, holen die linken Lungenarterie / linken Hauptbronchus am meisten distalen Position (am nächsten an Parenchym). Drücken Sie die Belüftung der linken Lunge beiseite mit dieser linken Hand manövrieren.
- Verwenden DumontMuster Nr. 5 45 ° gebogenen Pinzette, um den linken Lungenarterie von den linken Hauptbronchus an ihrer natürlichen Grenzen trennen. Diese Trennlinie wird dünn und weiß zwischen den beiden einzelnen Strukturen.
- Trennen Sie direkt unter Arterie ohne Umweg über das Schiff, sanft gleiten die Pinzettenspitzen zusammengehalten entlang der Trennung.
- Weiter, bis die Spitzen der Pinzette sichtlich der linken Lungenarterie und die linke Hauptbronchus getrennt haben. Nur ein kleiner Punkt der Spitze muss vollständig durch sein. Wenn Blut auf der Spitze der Zange visualisiert werden, dann ist es nicht vollständig durch und Ligation nicht versucht werden. Sobald durch den Raum, wird die linke Pulmonalarterie auf der Kurve der Zange zu legen. In dieser Stellung halten.
- Lösen Sie vorsichtig gerade stumpfen Pinzette Griff (links) und greifen Stück von einem Pre-Cut Naht (~ 2-3 Zoll, Polypropylen Nahtgröße 6-0; Myco Medical, Cary, NC).
- Öffnen gebogenen Pinzette wiegte linken Lungenarterie und grab Naht. Ziehen Nahtmaterial durch den Raum zwischen der linken Lungenarterie und linken Hauptbronchus in einer Aufwärtsbewegung relativ zu der Kurve der Zange.
- Binden Sie Verschließen der linken Lunge mit einem quadratischen Knoten, sorgfältig snip Rest des Fadens.
- Schließen Rippen mit stumpfen Pinzette Rippe und Faden zweimal zu halten mit Polypropylen (blau Monofilament) Größe 4-0 an einem 19 mm, 3/8 Kreis umgekehrter Schneiden Nadel (Myco Medical, Cary, NC) in einer Gefäßklemme, man aufpassen, nicht Naht der Haut (nur Rippen).
- Füllen Sie eine lockere Kreuzknoten, blasen die Lunge, am positiven endexspiratorischen Druck (PEEP; 2-5 cmH 2 O), hyperinflate Lungenkrebs dann sicher Knoten fest und eine weitere volle Knoten vor Schnippeln Rest des Fadens. Entfernen PEEP und visualisieren für 30 Sek., um sicherzustellen, dass die Lunge nicht zusammenfällt. Bewerben 5 Tropfen Bupivacain (APP Pharmaceuticals, Schaumbur, IL).
- Schließen Haut, indem Gewebekleber auf Wunde und drücken Haut zusammen mit Back end Wattestäbchen. Geben Bupivacain (2,0 mg / kg subkutan) an der Stelle des Einschnitts anschließend alle 8 Stunden für 24 Stunden oder bis das Tier wieder in den normalen Aktivität. Da die subkutane Schicht in diesem Bereich sehr dünn ist, ist es nicht einfach auf eigenen vernähen. Wenn der Gewebekleber aufgetragen wird und die Haut wird zusammen schob es schließt auch die subkutane Schicht.
- Schalten Sie Isofluran-Gas, aber weiterhin die Ratte für 1-2 min bei Raumluft bis freiwillige Bewegung kehrt zu lüften. Trennen Sie das Trachealtubus vom Beatmungsgerät und sicherzustellen, dass die Ratte spontan atmenden bevor Sie sie entfernen.
- Wischen Sie Puralube von Augen mit Wattestäbchen und Monitor-Bewegung und Erholung. Inject Buprenorphinhydrochlorid (0,05 mg / kg intraperitoneal, Butler Schein, Dublin OH). Weiter Lieferung analgetische alle 12 Stunden für 48 Stunden nach der Operation.
5. Linke Halsschlagader Kanülierung
Um die Größe der bronchialen perfus beurteilenIonen des ischämischen linken Lungenflügel an gewünschten Zeitpunkten nach linken Lungenarterie Ligation injizieren markierten Mikrokügelchen durch die linke Arteria Carotis in den Aortenbogen. Bereiten Ratten wie oben 1-2.
- Cut Mittellinie entlang Hals, stumpf sezieren Luftröhre und linke Halsschlagader (Mikrosphären an der Injektionsstelle) offenbaren.
- Legen Katheter mit heparinisierter Kochsalzlösung, stumpfen Spitze PE20-Schlauch (Becton Dickinson, Sparks MD) in den Behälter verbunden zu 25 g Nadel, 4-Wege-Hahn, 1 ml Spritze gefüllt.
- Ort Flasche Mikrokugeln (15 um hochrot Polystyrol fluoreszierenden Mikrokugeln, 1 x 10 6 Kügelchen / ml; Invitrogen, Eugene, OR) in Wasser Sonicator während 30 sek.
- Entfernen Flasche, Wirbel und erarbeiten 0,5 ml (500.000 Mikrosphären) in eine 1 ml Hamilton Glasspritze (Hamilton Company, Reno, NV) durch eine 20 g Nadel.
- Bringen Hamilton Spritze 4-Wege-Hahn und ziehen Mikrosphären mit Spritzenpumpe (Rate: 500 ul / min; Genie Plus, Kent Scientific, Torringtauf, CT).
- Entfernen Hamilton-Spritze und Spülvorrichtung mit 1 ml Kochsalzlösung heparized bei 500 pl / min.
- Führen voller Brust Thorakotomie und exsanguinate die Ratte durch Abtrennen der unteren Hohlvene.
- Entfernen Sie die linke Lunge und anderen Geweben von Interesse.
- Um Mikrosphären aus Gewebe extrahiert, nehmen die gesamte linke Lunge der Ratte nach Ausbluten und es in 2 M KOH (4-6 ml). In einem 55 ° C Wasserbad und lassen Sie über Nacht für Tissue Verdauung. Fügen Tween 80 (0,25%), um die Perlen zu waschen, Vortex (10 sec) und Zentrifuge (2.000 UpM, 20 ° C für 10 min). Entfernen Sie den Überstand, fügen 2-Ethoxyethylacetat (1 ml), Vortex und lassen Sie stehen für 1 Stunde. Vortex die Suspension und dann zentrifugiert (2000 rpm; (20 ° C für 10 min) Entfernen Sie die 2-Ethoxyethylacetat wässrige Schicht, die die Fluoreszenz in einer Küvette und messen unter Verwendung eines Hitachi F-2500 Fluoreszenz-Spektralphotometer (Anregung 612/emission 618. ; Digilab, Holliston, MA).
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Representative Results
Vaskuläre Druckguss: Ergebnisse der Wirkungen der linken Lungenarterie Ischämie in der Ratte sind in Abbildung 1 dargestellt. Dargestellt ist ein Methacrylat Besetzung der Bronchien Gefäßsystem und das umfangreiche Vaskularität des linken Atemwege Baum 28 Tage nach lpal. Um dieses gegossenen erhalten, wurde die systemische Gefäßsystem mit einer Methacrylat-Gemisch (rot) injiziert, retrograd in der absteigenden Aorta und die Trachea kanüliert wurde injiziert und mit einem weißen Silizium basierendes Material ist. Diese vaskulären gegossenen bietet einen bemerkenswerten Visualisierung bronchiale Angiogenese in der Lunge. Besonders hervorzuheben sind die großen, gewundenen vor bronchialen Gefäße der linken Lunge. Obwohl nicht in diesem Bild gezeigt, ist die rechte Bronchus im Wesentlichen frei von großen Schiffen, ausgenommen der normalen, einsamen, rechts bronchiale Arterie.
Histologie: Änderung im Atemweg Vaskularisierung visualisiert linken Lunge histologischen Schnitten in Abbildung 2 gezeigt. Bronchial Gefäße beobachtet 3 Tage und 14 Tage nach lpal gezeigt. 2A zeigt einen Luftweg Ausschnitt aus der linken Lunge 3 Tage nach lpal. Hinweis prominente bronchiale Schiffen innerhalb der Atemwege Wand befindet. Der Einschub ist von einem seriellen Abschnitt 2A gebeizt für PCNA (proliferating cell nuclear antigen). Man beachte die PCNA positive Endothelzellen die bronchiale Gefäß. 2B zeigt eine linke Lunge Abschnitt aus einer Ratten 14 Tage nach lpal. Beachten Sie die zunehmende Größe der Bronchien Schiffe zu diesem Zeitpunkt und der verdorrte Lungenarterie.
Funktionelle Angiogenese: Um die Größenordnung der systemischen Perfusion der linken Lunge durch die Bronchialarterien beurteilen, wurden fluoreszierenden Mikrosphären in der verschlossenen linke Halsschlagader, so dass alle Mikrokugeln im Aortenbogen als Teil der Herzleistung gemischt infundiert. Fluoreszenz von dieser Größe von Mikrosphären (15 um) betrug praktisch unbemerkt in der linken Lunge der naivenRatten. Allerdings gab es eine deutliche, signifikante und konsistente Ebene in der linken Lunge von Ratten gemessen studierte von 14 Tagen nach lpal.
Abbildung 1. Red Methacrylat Besetzung des gewundenen Neovaskulatur mit den linken Bronchus (weiß) 28 Tage nach linken Lungenarterie Ligation (lpal) assoziiert.
2A. Airway Abschnitt von links Rattenlunge 3 Tage nach linken Lungenarterie (PA) Ligation zeigt bronchiale Schiffe neben einem größeren Lungenarterie. Inset zeigt einen seriellen Abschnitt mit PCNA gefärbt zu identifizieren proliferierenden Endothelzellen der Bronchien Arterie (BA). Entfernung Balken zeigt 200 um.
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2B. Linke Lunge Abschnitt von Ratten 14 Tage nach lpal genommen. Beachten Sie die deutliche Steigerung der Größe der Bronchialarterien. Entfernung Balken zeigt 500 um.
Figur 3: Analyse von fluoreszierenden Mikrosphären in der linken Lunge von naiven Ratten (n = 2 Ratten) und 14 Tage nach der linken Lungenarterie Ligation eingelegt. (Lpal, n = 3 Ratten).
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Discussion
Linken Lungenarterie Ligation in allen untersuchten Spezies führt zu robusten systemische Neovaskularisation des ischämischen Lunge. Wir haben die Details des chirurgischen Ansatz in einem Ratten-Modell dargestellt. Unsere Ergebnisse durch vaskuläre Gießen, Histopathologie produziert und in vivo-Markierung zeigen, dass Bronchialarterien proliferieren und die Lungenparenchym perfundieren. Somit können die Mechanismen der bronchialen Angiogenese in einem Tiermodell, das den menschlichen Zustand chronischer pulmonaler Thromboembolie parallel untersucht werden. Darüber hinaus liefert diese klinisch relevanten kleinen Tiermodell die Möglichkeit, die Form und Funktion der Gefäßneubildung, wo Experimente mit Menschen ist nicht haltbar zu studieren.
Die chirurgischen Verfahren bieten ausreichend detailliert, so dass ein Tier Techniker mit chirurgischen Erfahrungen sollte in der Lage, schnell mit dieser Techniken. Obwohl unsere Beobachtungen haben überwiegend in Sprague Dawley male seitRatten (75-100 g), andere Stämme gleichermaßen geeignet für das Studium. Wir haben nicht systematisch das Alter-Abhängigkeit des Ausmaßes der bronchialen Angiogenese ausgewertet. Wir haben auch zu den Kanülierung der linken Halsschlagader vorgesehen. Wir haben die Messung von fluoreszierender Mikrokugeln retrograden in die linke Halsschlagader infundiert eingesetzt, die Mischung in der Aorta und in der Folge lodge in der linken Lunge als Marker für die systemische Perfusion des ischämischen Lunge und damit funktionelle Angiogenese. Wir erkennen, dass diese Messung kann variabel sein aufgrund von Veränderungen der Herzleistung während der Zeit der Infusion. Jedoch deuten die gleichzeitige Messung des systemischen Blutdrucks kontinuierlich in Ratten vor und während dieser Messprozedur keine Veränderungen in kardiovaskulären Zustand. Weiterhin zeigen die Ergebnisse in 3 dargestellt eine kleine akzeptablen Bereichs der Variabilität innerhalb einer Gruppe von Ratten. Interessanterweise zeigten die naive Tiere eine minimally nachweisbares Niveau der Fluoreszenz was auf eine sehr geringe bronchiale Perfusion bei normalen Ratten. Verwendung von Mikrosphären einer kleineren Größe kann zur Detektion eines unterschiedlichen Grundniveau der Perfusion ermöglicht.
Unsere Ergebnisse zeigen eine gut ausgebaute Gefäßsystem innerhalb von 28 Tagen nach lpal. Das Methacrylat Besetzung der Bronchien Schiffe mit dem linken Bronchus verbundenen bietet eine bemerkenswerte Aussicht auf die umfangreichen und gewundenen Neovaskulatur dass Formen in Reaktion auf pulmonale Ischämie. Vielleicht weniger dramatisch, aber im Einklang mit der vaskulären Besetzung sind die Bilder von histologischen Schnitten der linken Lunge von 14 Tagen nach lpal (2B) erhalten. Die Ratten wurden vor Gewebes Ernte für den Abschnitt gezeigt, ausgeblutet. Allerdings ist das Wachstum der bronchialen Gefäße besonders deutlich, wenn man die Größe der bronchialen Gefäße histologischen Schnitten der linken Lunge 3 Tage nach lpal (2A) erhalten. Bronchial Endothel zeigt deutliche Anzeichen vonProliferation beurteilt mit PCNA Färbung. Der Prozess der Angiogenese beginnt früh nach Einsetzen pulmonalen Ischämie.
Unsere Verfahren, um das Ausmaß des Neovaskulatur bestimmen haben vom frühen histologische Beurteilung der proliferierenden Endothels zu bronchiale Mikrokugel Messung voll funktionsfähiges, Perfundieren bronchiale Schiffen und vaskulären Gießen reichten. Unsere Absicht ist es, eine Perspektive des Prozesses der Bronchien Angiogenese im Laufe der Zeit geben. Proliferierende Schiffes Zählung erfordert Präzision des Evaluators, angemessene Stichprobengröße und die Annahme, dass Schiffe mit den Atemwegen assoziiert der primäre Ort der frühen Angiogenese sind. Beurteilung der Mikrosphären Hotels in der Lunge erfordert eine ausgereifte angiogenen Blutgefäße, damit eine späte Erscheinung. Außerdem wird vorausgesetzt, wobei das Verfahren eine ausreichende Durchmischung von Kugeln während der Infusion, keine Veränderungen in der Herzleistung während des Verfahrens, und dass Änderungen in der Zahl der eingereichten Kugelgraphites hat Änderungen in der Zahl der Gefäße und Perfundieren nicht Änderungen in Vasoreaktivität. Wir erkennen die ständige Herausforderung besser zu definieren, den Prozess der systemischen Angiogenese in einem Organ, das normalerweise zwei verschiedene Gefäßbetten und pulmonaler Netzwerke angezeigt zu bleiben Patents während Ischämie. Endothelial Etiketten in der Ratte nicht eine einzigartige angiogenen Phänotyp zwischen den beiden Blutgefäßverteilungen histochemisch demonstriert. In-vivo-Bildgebung sowohl Beatmung und Herz-Bewegung behindert. Wir weiterhin zusätzliche Methoden gesucht, um das Ausmaß der Neovaskularisation mit größerer Genauigkeit zu quantifizieren. Die Herausforderung bleibt, um eine kleine, aber wachsende systemischen vaskulären Bett unter anderem nicht perfundierenden pulmonalkapillären Netzwerken zu identifizieren.
Die Mechanismen, die für die Ischämie-induzierte Angiogenese sind noch nicht vollständig verstanden. Frühere Arbeiten impliziert die CXC-Chemokine als eine Rolle spielen zu irgendeinem Zeitpunkt in den gesamten Prozess 13. BecAuSe die linke Lunge ist in diesem Modell ischämischen aber voll belüftet sind Hypoxie-induzierbaren Faktoren kaum eine Rolle in der systemischen Neovaskularisation stattfindet spielen. Es sollte betont werden, dass dies im Gegensatz zu anderen Organen Situation, wo Ischämie durch Gewebehypoxie begleitet wird ist. So sind die Wachstumsfaktoren für die komplette bronchiale Gefäßwachstum innerhalb der Lunge müssen vollständig definiert werden. Obwohl das Wachstum der neuen Gefäße zu sein scheint wesentlich für die Erhaltung von ischämischem Gewebe haben angiogene Gefäße bronchiale konnte gezeigt werden dilatiert, proinflammatorische und hyperpermeable 15, 17. Die chronischen Folgen dieser abnormen Gefäße sind persistent Verengung der Atemwege durch Vasodilatation und Atemwege Ödeme 18.
Weitere Fragen zu diesem Modell beziehen sich auf dem Gelände des Wachstumsfaktors Freisetzung und der antwortenden Schiffe. Trotz pulmonalen Ischämie, ist es die systemischen bronchiale Schiffe, die Verantwortungd der ischämischen Reiz und nicht andere Lungengefäße innerhalb der Lunge. Es ist nicht klar, wie der ischämischen Reiz zu vorgelagerten bronchiale Schiffen transportiert wird. Trotz einer Vielzahl von Wachstumsfaktoren wahrscheinlich durch ischämische Parenchymgewebe, wie Schiffe, die von der Aorta induziert werden, um eindeutig proliferieren der linken Lunge freigegeben ist nicht klar. Zukünftige Experimente ist erforderlich, um diese Fragen anzugehen.
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Disclosures
Keine Interessenskonflikte erklärt.
Acknowledgments
Wir erkennen die Arbeit von Dr. Adlah Sukkar, MD bei der Unterstützung mit dem Gießen der Lunge. Diese Arbeit wurde von NHLBI, HL088005 finanziert.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| buprenorphine hydrochloride, Puralube | Butler Schein | ||
| bupivicaine | APP Pharmaceuticals | ||
| Povidone-Iodine swabstick | Dynarex Corporation | ||
| polypropylene suture size 6-0, 3/8 circle reverse cutting needle | Myco Medical | ||
| PE20 tubing | Becton Dickinson | ||
| 15 μm crimson polystyrene fluorospheres | Invitrogen | ||
| 1 ml Hamilton glass syringe | Hamilton Company | ||
| Equipment: | |||
| Genie Plus syringe pump | Kent Scientific | ||
| Fluorescence Spectrophotometer | Digilab | ||
| Rodent Ventilator Model 683 | Harvard Apparatus | ||
| Table 1. Table of specific reagents and equipment. | |||
References
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