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Editorial

Ottobre 2012: Questo mese a JoVE

doi: 10.3791/5025 Published: October 1, 2012
1Department of Ophthalmology, Massachusetts Eye and Ear, 2JoVE Content Production

Summary

Ecco alcuni punti salienti della questione 2012 ottobre del Journal of Experiments Visualizzato (Giove).

Abstract

Ecco alcuni punti salienti della questione 2012 ottobre del Journal of Experiments Visualizzato (Giove).

Grønlund et al. Dimostrano come isolare e analizzare specifici tipi cellulari in foglie di piante che esprimono la proteina fluorescente verde (GFP) mediante fluorescenza selezione delle cellule attivate (FACS). Questo metodo supera la fluorescenza della clorofilla interferire trovato nelle foglie, e si distingue GFP che esprimono protoplasti da non-GFP protoplasti.

In JoVE Neuroscienze, Babona-Pilipos et al. dimostrare come costruire una camera di misurazione galvanotaxis o migrazione delle cellule all'interno di un campo elettrico. Attraverso il time-lapse imaging e analisi d'immagine, gli autori possono studiare il comportamento migratorio di cellule precursori neurali in un campo elettrico, che può portare all'impiego di stimolazione elettrica per diretti precursori neurali a siti di lesione o malattia.

Gli articoli che coinvolgono microflupiattaforme IDIC hanno una storia significativa pubblicazione JoVE. Harris et al . hanno pubblicato tre articoli, che comportano un dispositivo a microfluidi per separare gli assoni da corpi cellulari neuronali. Questo mese in JoVE Neuroscienze, Higashimori et al. utilizzare questa piattaforma microfluidica per studiare le interazioni tra assoni neuronali e cellule gliali, che sono critici per la funzione fisiologica del sistema nervoso.

In Bioingegneria JoVE, due gruppi di ricerca dimostrano le nuove proprietà bio-adesive di chitosano, un polimero derivato dalla chitina, che si trova nelle pareti delle cellule fungine o nei esoscheletri di crostacei e insetti. Il chitosano è utilizzato in molte applicazioni industriali e agricole, e bioingegneri sono anche di trovare un utilizzo per esso nelle applicazioni chirurgiche. Foster et al. hanno sviluppato un laser attivatopellicola chirurgica denominata Surgilux, che combina chitosano con indocianina ICG verde), un colorante fotosensibile. Questo film chirurgica lega fortemente ai tessuti, come i muscoli, dopo irradiazione laser. Lauto et al. ha sviluppato un film chirurgico che unisce chitosano con il colorante fotoattivo, rosa Bengala. Questo film romanzo si lega fortemente ai tessuti, come intestino, dopo che viene irradiato. Queste pellicole adesive sono biocompatibili e possono potenzialmente essere utilizzato in varie procedure chirurgiche al posto dei punti di sutura.

In JoVE Medicina clinica e traslazionale, Fiema et al. dare prova di una high-throughput per la validazione tecnica di biomarcatori in graft vs host disease, una complicanza comune e pericolosa per la vita della cellula o il trapianto di tessuti. Gli autori utilizzano ELISA commercialmente disponibili per analizzare le proteine ​​multiple in modo sequenziale.

In JoVE Immunologia e infezioni, Keyel et al. Dimostrano come misurare in tempo reale cinetica di imle risposte delle cellule immunitarie a tossine batteriche che utilizzano la microscopia ad alta velocità in tempo reale della cella. Questo metodo può essere usato per mostrare come le cellule immunitarie rispondere alle tossine batteriche. Combinato con alta velocità microscopia confocale 3D, questa tecnica può anche visualizzare la risposta cellulare riparazione.

In JoVE Fisica Applicata, Borisenko et al. determinare la struttura elettronica di materiali complessi con angolo-spettroscopia di fotoemissione risolta in un impianto di irradiazione synchotron. Combinando i recenti progressi nella radiazione synchotron, scienza delle superfici, e criogenia, questo metodo può avere un quadro preciso di energia e quantità di moto degli elettroni all'interno di un solido, e affrontare le questioni fondamentali nel campo della fisica della materia condensata.

Questa anteprima riassume solo alcune delle notevoli video-articoli disponibili nel numero di 2012 Ottobre di Giove. Per altri video, si prega di visitare il sito www.jove.com .

Protocol

Un Based Chitosano, Laser attivato sottile pellicola adesiva chirurgici, 'SURGILUX': Preparazione e dimostrazione.

L. John R. Foster, Elizabeth Karsten
Bio / Polymer Research Group, University of New South Wales

La fabbricazione di un romanzo, flessibile adesivo a film sottile chirurgico con ingredienti approvati dalla FDA, chitosano e verde indocianina è descritto. Incollaggio di questo adesivo al tessuto collagene attraverso un processo di attivazione semplice con una bassa potenza laser infrarosso è dimostrata.

Fabbricazione e applicazione di Rosa Bengala-chitosano Films in riparazione dei tessuti Laser

Antonio Lauto 1, Marcus Stoodley 2, Matthew Barton 1, John W. Morley 1, David A. Mahns 1, Leonardo Longo 3, Damia Mawad 1 Bioingegneria elettronica e Neuroscienze (BENS) gruppo di ricerca, University of Western Sydney, NSW Australia, 2 Australian School of Advanced Medicine, Macquarie University, NSW Australia, 3 Facoltà di Medicina, Università degli Studi di Siena, Italia

Le suture sono di solito necessari per riparare il tessuto durante gli interventi chirurgici. Tuttavia, la loro applicazione può essere problematico in quanto sono invasivi e possono danneggiare il tessuto. I metodi di fabbricazione e l'applicazione di un adesivo tessuto romanzo sono qui riportati. Questo film adesivo viene laser-attivata e non richiede l'uso di suture.

Un test Galvanotaxis Analisi della Cinetica precursori neurali migrazione cellulare in un campo applicato esternamente diretto Corrente elettrica

Robart Babona-Pilipos 1, R. Milos Popovic 2, Cindi M. Morshead 3
1Istituto di Biomateriali e Ingegneria Biomedica, Università di Toronto, 2 Lyndhurst Centre, Toronto Rehabilitation Institute, 3 Dipartimento di Chirurgia, Università di Toronto

In questo protocollo si dimostra come costruire camere personalizzate che consentono l'applicazione di un campo di corrente elettrica diretta a consentire time-lapse imaging del cervello adulto derivato neurale traslocazione cellula precursore durante galvanotaxis.

Cella analisi specifica delle foglie di Arabidopsis con fluorescenza cell sorting attivato

Jesper T. Grønlund 1, Alison Eyres 1, Sanjeev Kumar 1, Vicky Buchanan-Wollaston 1, 2, Miriam L. Gifford 1, 2
1 Scuola di Scienze della Vita, Università di Warwick, 2 Warwick Systems Biology, University of Warwick

LaMetodo per produrre foglia protoplasti di Arabidopsis che sono compatibili con selezione delle cellule attivate a fluorescenza (FACS), consentendo studi di specifiche popolazioni cellulari. Questo metodo è compatibile con qualsiasi linea di Arabidopsis che esprime GFP in un sottogruppo di cellule.

Visualizzazione delle risposte tossina batterica provocata con diretta microscopia a fluorescenza cellulare

Peter A. Keyel 1, Michelle E. Heid 1, Simon C. Watkins 2, Russell D. Salter 1
1 Dipartimento di Immunologia, Università di Pittsburgh School of Medicine, 2 Dipartimento di Biologia Cellulare e Fisiologia, Università di Pittsburgh School of Medicine

Metodi per purificare il colesterolo vincolante tossina streptolisina O ricombinante da E. coli e la visualizzazione della tossina vincolanti per vivere cellule eucariotiche sono descrivered. Erogazione localizzata di tossina induce cambiamenti rapidi e complessi nelle cellule bersaglio che rivelano nuovi aspetti della biologia tossina.

High Throughput sequenziale ELISA per la convalida dei biomarcatori di acuta Graft-versus-host disease

Bryan Fiema *, Andrew C. Harris *, Aurelie Gomez, Praechompoo Pongtornpipat, Kelly Lamiman, Mark T. Vander Lugt, Sophie Paczesny
Sangue Pediatrica e Trapianto di Midollo programma, University of Michigan
* Questi autori hanno contribuito in parti uguali

Convalida elevato throughput di biomarcatori candidati multipli può essere eseguita da ELISA sequenziale per minimizzare gelo / disgelo e l'uso di campioni di plasma preziosi. Qui, dimostriamo come eseguire in sequenza ELISA per sei diversi biomarcatori plasmatici convalidati 1-3 di graft-versus-host disease (GVHD) 4 sullo stesso plcampione asma.

Analisi Imaging di Neuron Interaction Glia in Platform Cultura Microfluidic (MCP)-Based Axon neurone e glia co-cultura di sistema

Haruki Higashimori 1, Yongjie Yang 1, 2
1 Dipartimento di Neuroscienze, Tufts University, 2 Programma di Neuroscienze, Tufts Sackler School of Graduate Scienze Biomediche

Questo studio descrive le procedure di creazione di un nuovo assone neuronale e (astro) glia co-coltura piattaforma. In questo sistema di co-coltura, la manipolazione di interazione diretta tra un singolo assone (e singole cellule gliali) diventa possibile, consentendo l'analisi meccanicistica del neurone reciproco segnalazione gliali.

Angolo-spettroscopia di fotoemissione risolta A ultra-basse temperature

Sergey V. Borisenko 1, Volodymyr B. Zabolotnyy 1, Alexander A. Kordyuk 1, 2, Danil V. Evtushinsky 1, Timur K. Kim 1, 3, Emanuela Carleschi 4, Bryan P. Doyle 4, Rosalba Fittipaldi 5, Mario Cuoco 5, Antonio Vecchione 5, Helmut Berger 6
1 Istituto per la ricerca sullo stato solido, IFW-Dresda, 2 Istituto di Fisica metallici di Accademia Nazionale delle Scienze dell'Ucraina, 3 Diamond Light Source LTD, 4 Dipartimento di Fisica, Università di Johannesburg, 5 CNR-SPIN, e Dipartimento di Fisica "ER Caianiello ", Università di Salerno, 6 Istituto di Fisica della Materia Complex, École Polytechnique Fédérale de Lausanne

L'obiettivo generale di questo metodo è quello di determinare la bassa energia struttura elettronica dei solidi a bassissime temperature con angolo-Resolved Spectrosc Photoemissionopia con luce di sincrotrone.

Realizzazione di un dispositivo a microfluidi per la compartimentazione dei Neuron Soma e assoni

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Christina Tu 2, David Cribbs 3, Noo Li Jeon 1, Carl Cotman 3
1 Dipartimento di Ingegneria Biomedica, Università di California, Irvine, 2 cellule staminali Centro di Ricerca, Università della California, Irvine, 3 Istituto per l'invecchiamento cerebrale e demenza, University of California, Irvine

In questo video una dimostrazione della tecnica della litografia morbido con polidimetilsilossano (PDMS) che usiamo per farbricate un dispositivo a microfluidi per i neuroni di coltura.

Preparazione E18 neuroni corticali del ratto di compartimentazione in un microfonoDispositivo rofluidic

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Christina Tu Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1
1 Dipartimento di Ingegneria Biomedica, Università di California, Irvine, 2 cellule staminali Centro di Ricerca, Università della California, Irvine, 3 Istituto per l'invecchiamento cerebrale e demenza, University of California, Irvine

In questo video mostriamo la preparazione di E18 neuroni corticali del ratto.

Non plasma Incollaggio di PDMS per fabbricazione economici e di dispositivi microfluidici

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Cristina Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1
1 Dipartimento di Biomedica Engineering, University of California, Irvine, 2 Stem Cell Research Center, University of California, Irvine, 3 Istituto per l'invecchiamento cerebrale e demenza, University of California, Irvine

In questo video viene illustrato come utilizzare il dispositivo a microfluidi neurone senza legame plasma.

Disclosures

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Ottobre 2012: Questo mese a JoVE
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Chao, W., Kolski-Andreaco, A. October 2012: This Month in JoVE. J. Vis. Exp. (68), e5025, (2012).More

Chao, W., Kolski-Andreaco, A. October 2012: This Month in JoVE. J. Vis. Exp. (68), e5025, (2012).

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