Summary
פרוטוקול לחליטות כרוניות של גלוקוז וIntralipid בחולדות מתואר. מודל זה יכול לשמש כדי לחקור את ההשפעה של עודף חומרי מזון על תפקוד איברים ופרמטרים פיסיולוגיים.
Abstract
חשיפה כרונית לרמות מופרזות של חומרים מזינים הנחה היא להשפיע על הפונקציה של מספר איברים ורקמות ולתרום להתפתחות של סיבוכים רבים הקשורות להשמנה ותסמונת המטבולית, כולל סוכרת מהסוג 2. כדי לחקור את המנגנונים שבאמצעותם רמות עודפות של גלוקוז וחומצות שומן משפיעות על התא בטא בלבלב ואת הפרשת האינסולין, הקמנו מודל עירוי תזונתי כרוני בעכברים. ההליך מורכב מcatheterizing וריד הצוואר הימני ועורק הצוואר שמאלי תחת הרדמה כללית, המאפשר תקופת החלמה של 7 ימים; חיבור צנתרים למשאבות באמצעות מערכת המאפשרת משקל נגד בעלי החיים לנוע בחופשיות בכלוב ומסתובב, ויציקה גלוקוז ו / או Intralipid (תחליב שמן סויה שיוצר תערובת של כ -80% unsaturated/20% חומצות שומן רוויים, כאשר חדורים עם הפרין) ל72 שעות. מודל זה מציע כמה AdvantaGES, כולל אפשרות דק לווסת את רמות הגלוקוז ביעד של מחזור וחומצות שומן; האפשרות לשתף להחדיר תרכובות תרופתיות, ומסגרת הזמן הקצרה יחסית, בניגוד למודלים תזונתיים. ניתן להשתמש בו כדי לבחון את המנגנונים של תפקוד הנגרם תזונתי במגוון רחב של איברים ולבדוק את היעילות של תרופות בהקשר זה.
Introduction
רמות גבוהות כרוני של גלוקוז ושומנים במחזור הדם הוצעו לתרום לפתוגנזה של סוכרת מהסוג 2 על ידי שינוי הפונקציה של מספר איברים המעורבים בשמירה על הומאוסטזיס הגלוקוז לרבות, אך לא רק, התא בטא בלבלב (הנסקרת ב 1). יוצא מתוך ההנחה שההשערה glucotoxicity היפרגליקמיה כרונית מחמירה את פגם התא בטא שהוליד היפרגליקמיה במקום הראשון, ובכך יוצרים מעגל אכזרי ותורם להידרדרות של בקרת הגלוקוז בחולי סוכרת מהסוג 2. כמו כן, מוצעת כי השערת glucolipotoxicity גבהים קשורים של רמות הגלוקוז ושומנים בדם, כפי שנצפו לעתים קרובות בסוכרת מהסוג 2, הם מזיקים לתאי בטא.
פענוח המנגנונים התאיים ומולקולריים של ההשפעות המזיקות של חומרים מזינים כרוני גבוהים על תפקוד תא בטא בלבלב הוא מפתח לunderstanding של פתוגנזה של סוכרת מהסוג 1 2. לשם כך, מספר רב של מחקרים שבחן את המנגנונים של vivo לשעבר העודף התזונתי הכרוני באיים לנגרהנס מבודדים או במבחנה בשורות תאים משובטות, אינסולין. עם זאת, התרגום של הממצאים שהתקבלו במערכות מודל אלה כדי האורגניזם כולו הוא מורכב, בפרט משום שהריכוזים של חומצות שומן המשמשות בתאים או באיים בתרבית לעתים רחוקות להתאים את הרמות במחזור בקרבת תאי הביתא בvivo 2. מצד השני, את המנגנונים של כישלון תא בטא בתגובה לעודף חומרי מזון נבדקו במודלים של מכרסמים של סוכרת, כפי שהודגם על ידי צוקר חולדת 3,4 שומן סוכרתי, הגרביל Psammomys obesus 5 ועתיר שומן הדיאטה הפד עכבר 6. מודלים אלה, לעומת זאת, מאופיינים בהפרעות מטבוליות פנימיות ולא בקלות נוחה למניפולציות של גלוקוז בדםו / או רמות שומנים בסביבה יותר מבוקרת ופחות כרונית. כדי להיות מסוגל לשנות את רמות חומרים המזינים במחזור בפרק זמן של ימים בבעלי חיים נורמלים בדרך כלל, פיתחנו מודל עירוי כרוני בחולדות נורמליות אשר מאפשר לנו לבחון את ההשפעות של שומנים וסוכר, לבד או בשילוב, על פרמטרים ותפקוד פיסיולוגיים 7,8.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
סקירה: ההליך מורכבת catheterizing וריד הצוואר הימני ועורק הצוואר שמאלי תחת הרדמה כללית, המאפשר תקופת החלמה של 7 ימים; חיבור צנתרים למשאבות באמצעות מערכת המאפשרת משקל נגד בעלי החיים לנוע בחופשיות בכלוב מסתובב ו; ויציקת גלוקוז ו / או Intralipid (תחליב שמן סויה שיוצר תערובת של כ -80% unsaturated/20% חומצות שומן רווי, כאשר חדור הפרין 9) עבור 72 שעות.
1. Canulation של עורק הצוואר הימני ועורק צוואר השמאלי
- לעקר מכשירי ניתוח. צינורות Canulation גם חייבים להיות קר עיקור באמצעות סוכן נוזל חיטוי (2.6% glutaraldehyde) לפני ההליך. לטבול את הצינור במכל autoclaved ל16-24 שעות. יש לשטוף ולשטוף ביסודיות במים מזוקקים סטריליים כדי להסיר את כל העקבות של glutaraldehyde לפני השימוש.
- לשקול את החולדה לחישובמינוני תרופות:
Carprofen 5 מ"ג / ק"ג: דילול 1/10 = משקל גוף (g) x 0.001 מ"ל SC (משכך כאבים)
Glycopyrrolate 0.01 מ"ג / ק"ג: דילול 1/10 = BW (ז) X 0.0012 מ"ל SC (אנטיכולינרגיות) - הרדימי עכברוש באמצעות isoflurane וחמצן.
- מניחים את החולדה על הבטן שלה. לגלח את האזור שמאחורי האוזניים לבסיס של הכתפיים. הנח את העכבר על גבו. לגלח את האזור מתחת לצוואר לרגליו הקדמיות.
- הכינו את האתר כירורגית עם כלורהקסידין, אלכוהול, ויוד. לנהל תרופות.
- העבר את העכבר לשדה הניתוח.
- באמצעות טכניקת aseptic, canulate וריד הצוואר הימני ועורק הצוואר השמאלי וPE-50 canula מצורף מזרק 1 מ"ל מלא 5 U של מלח heparinized. לשטוף את canulas עם 50 U של מלח heparinized כדי למנוע קרישה במהלך תקופת ההחלמה. משתמש במחטי 23G קהות. סגור את כל canula עם סיכת 23G.
- לאחר הניתוח, לקצץ כ 2.5 מ"מ מעלחותכות תחתונות ומניח את החולדה במעייל עירוי כדי למנוע את canulas מנאכל.
- לספק חמצן (1 ליטר / דקה למשך 10 דקות) כדי לסייע בפינוי isoflurane.
- מניחים את החולדה בכלוב מחומם עד שהוא ער לחלוטין.
- פועל ארבע חולדות לשימוש אחד לכל מצב עירוי (טבלת 1).
2. טיפול שלאחר הניתוח (טיפול לאחר הניתוח וחיבור של צנתרים)
- לשקול את החולדות ביום 1 ויום 2 שלאחר ניתוח.
- לנהל glycopyrrolate (BW (g) x .00048 מ"ל) SC פעמיים ביום שלאחר הניתוח 1 ופעם אחת ביום שלאחר הניתוח 2.
- יכולים להינתן טיפולים תומכים נוספים במידת צורך: נוזלים, כרית חימום, תזונה רטובה, טיפול בחמצן, משככי כאבים, anticholinergics.
- ביום שלאחר ניתוח 7, לשקול את החולדות כדי לחשב את ספיקות לעירוי.
- חברו כל חולדה למערכת באמצעות עירוי לקשור ומסתובב רכוב על גבי גריל כלוב (איור 1).
- לשטוף את canulas עם 5 U של מלח heparinized להסיר קרישים. לשטוף את canulas פעם נוסף עם 50 U של מלח heparinized כדי למנוע קרישה.
- לאפשר לחולדות להסתגל לרצועה ומסתובבת במשך לפחות 24 שעות לפני תחילת העירוי.
3. אינפוזיה
- צייר 0.15 מ"ל של דם מצווארו של כל glycemia חולדה ולמדוד. לשטוף את canulas הצוואר. השתמש 50 U של מלח heparinized למניעת קרישה בשני canulas של כל חולדה.
- להעביר את דגימת הדם לצינור איסוף 0.5 מ"ל מכיל 2% EDTA. צנטריפוגה ב 10,000 סל"ד במשך 2 דקות ולהקפיא את הפלזמה ב -20 ° C.
- מלא שני מזרקים 60 מ"ל לכל אחד מהתנאים המפורטים להלן העירוי. מקום 1 מזרק בעמדה הקדמית של המשאבה ומזרק המקום 2 בעמדה האחורית של המשאבה.
- הצטרפות כל זוג של פתרונות יחד עם y-מחברים וצינורות T22 CO-EX שכבר מעוקר. מניחים את המזרקים ברווארד 33משאבת מזרק כפולה.
- שנה את תחתית הכלוב ולהסיר את כל האוכל מלמעלה כלוב הגריל.
- שוקל 150 גרם של רמת אוכל ומניח על גבי גריל הכלוב.
- לחבר את המזרקים למסתובבים על גריל הכלוב. לשטוף את המזרקים כמו שצריך להסיר את האוויר שנלכד מהקווים.
- לחשב את ספיקות העירוי תוך שימוש במשקל הגוף שנלקח לפני חיבור העכבר למערכת העירוי. מחירים מחושבים עם קובץ Excel של מיקרוסופט שממיר קצב עירוי גלוקוז (Gir) למ"ל / שעה.
- הגדר את המשאבה לנהל ספיקות עבור 60 מ"ל מזרקים בהתאם להגדרות היצרן. הזן את השיעור למזרק 1 (מזרק קדמי) והמחיר למזרק 2 (חזרה מזרק).
- התחל את המשאבה.
4. ניטור
- לאחר הפעלת המשאבה, לוודא שאין דליפה ממסתובבת או מcanulas וצינורות עירוי שאינו מעוות. כמו כן לוודא שאין בועות אוויר בצינורות.
- לאחר 3 שעות של עירוי, לקחת דגימת דם כדי לפקח glycemia. חזור אחרי 6, 24, 48, ו -72 שעות של עירוי. כאמצעי זהירות, glycemia גם מעקב אחרי 30, 34, 54, ו -60 שעות של העירוי. רמת סוכר בדם ניתן למדוד באמצעות טיפה אחת של דם כל שימוש במסך גלוקוז נייד. זה מגביל את כמות הדם שנלקחה במהלך העירוי, ולכן נמנע משינוי באופן משמעותי נפח דם ו / או המטוקריט.
- השיעור למזרק 1 הוא שונה המבוסס על ערכי glycemia כדי לשמור על רמת סוכר בדם ב220-250 מ"ג / ד"ל. השיעור למזרק 2 אינו משתנה במהלך שעות 72 של עירוי כי חומצות שומן חופשיות נשמרות במילימול 1 / ל '
- תנאי עירוי הם לזווג כך שהנפח קיבל לפקד החיים הוא שווה ערך להיקף קיבל לבעלי החיים הבדיקה (טבלת 1).
- לאחר 24 שעות של עירוי, לשנות את תחתית הכלוב ולשקול את המזון שנותר בגריל הכלוב. לחזור לא חלק שלא נאכלo גריל הכלוב. חזור אחרי 48 שעות.
- מזרקים מילוי יומיים כנדרש בשעה 72 בעירוי.
- במהלך העירוי, תמיד לבחון את החולדה לכל סימנים של דלקת או אי נוחות. לנהל טיפול מתאים במידת צורך.
5. המתת חסד לאחר העירוי
- לאחר 72 שעות של עירוי, חולדות מורדמים הווריד עם 0.5 מ"ל של קוקטייל קטמין / xylazine (182 מ"ג / ק"ג של קטמין ו11.6 מ"ג / ק"ג של xylazine דילול 01:02 עם 0.9% NaCl).
- רפלקס הבוהן קמצוץ משמש כדי לוודא את רמת ההרדמה. חומר הרדמה נוסף מנוהלת בהתאם לצורך.
- כאשר החולדה הוא הרדים, חלל הבטן נפתח עם מספריים כירורגיות. חולדת exsanguinated על ידי ציור 10-15 מ"ל של דם במזרק מאב העורקים או הווריד הנבוב.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
מתוך סדרה של 42 חולדות שעברו ניתוח, 5 חולדות איבד במהלך התקופה שלאחר הניתוח והעכברוש 1 אבד במהלך העירוי, המייצג את שיעור הצלחה כולל של 86%. משקל הגוף הממוצע של 37 חולדות שסופו של דבר היה חדור 608 ± 5 גרם לפני הניתוח ו588 ± 6 גרם ביוזמתו של העירוי (ממוצע ± SE, n = 37, P <0.0001 ידי לזווג מבחן t). התוצאות המייצגות הבאות התקבלו ב2 קבוצות: עירוי תמיסת מלח. (SAL), וגלוקוז + Intralipid (Glu + IL) 2A ורמת סוכר בדם ורמות תכנית 2B חומצות שומן דמויות, בהתאמה, בתקופה של 72 שעות העירוי. לפי תכנון, את רמות הגלוקוז נשמרות סביב 220-250 מ"ג / ד"ל במהלך העירוי, המבוססות על מדידות והתאמות של קצב עירוי גלוקוז (Gir) כפי שמוצג באיור 3 רגילות. יש מכרסמים יכולת חזקה כדי לפצות על עירוי גלוקוז על ידי הגדלת אנדוגני האינסולין secretion. לכן, GIR חייב להיות מוגבר במהלך העירוי לרמות הגלוקוז בדם להישמר במצב יציב יחסי. עם זאת, רמות הגלוקוז בדם נוטות לרדת לקראת סוף העירוי, כפי שניתן לראות באיור 2 א. מאחר שבעלי החיים הם חדורים עם חומרים מזינים הקלוריים, הם באופן ספונטני להקטין את צריכת המזון שלהם (איור 4).
| מצב עירוי | מזרק 1 (עמדה קדמית) | מזרק 2 (עמדה אחורית) |
| 1 | דקסטרוז 70% | מלוח |
| 2 | מלוח | מלוח |
| 3 | דקסטרוז 70% | Intralipid 20% + הפרין 20U/ml |
| 4 | מלוח | % 20% Intralipid + הפרין 20U/ml |
טבלת מס '1. משטרי עירוי.
איור 1. תצלום של מערכת העירוי מראה את העכברוש עם צנתרים במקום ואת הרצועה, מסתובב, והזרוע לאזן רכוב על גריל הכלוב.
איור 2. . רמות פלזמה של גלוקוז () וחומצות שומן חופשיות (ב) בעירוי של מי מלח (SAL) או עמית לעירוי של גלוקוז וIntralipid (Glu + IL) בחולדות Wistar בן 6 חודשי נתונים הן ממוצע ± SEM של 3 - 4 בעלי חיים בכל קבוצה.
איור 3 "src =" / files/ftp_upload/50267/50267fig3.jpg "/>
איור 3. התאמה של קצב עירוי גלוקוז במהלך שיתוף העירוי של גלוקוז וIntralipid (Glu + IL) בחולדות Wistar בן 6 חודשים. הנתונים הם ממוצעים ± SEM של 4 בעלי חיים.
איור 4. צריכת מזון יומית ממוצעת של חולדות Wistar בן 6 חודשים רווי עם מי מלח (SAL) או שיתוף חדור גלוקוז וIntralipid (Glu + IL). הנתונים ממוצע ± SEM של חיות 3-4 בכל קבוצה. ** P <0.01.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
למרות שמספר מחקרים קודמים הועסק חליטות כרוניות של גלוקוז (לדוגמא 10-15) או שומנים (למשל 16,17) במכרסמים, למיטב ידיעתנו העירוי המשולב של שני הדלקים דווח רק בעכברי 18. מודל העירוי הכרוני המוצג כאן מציע מספר יתרונות כדי לחקור את ההשפעות על עודפים תזונתיים על מגוון רחב של תפקודים ביולוגיים בחולדות. ראשית, היא אינה כרוכה במכרסמים גנטי סובלים מהשמנת יתר, ומאחר שההשמנה נפוצה בבני האדם היא polygenic 19, הממצאים ולכן סיכוי גבוה יותר להיות רלוונטי להשפעות של עודף היצע תזונתי באוכלוסייה הכללית. שנית, מודל זה מציע את האפשרות לבדוק את ההשפעות של חומרים מזינים שונים (בעיקר סוכרים או שומנים) ברמות שונות במחזור, על ידי שינוי הטבע שלהם ואת קצב זרימת העירוי. שלישית, המסלול הרביעי של ממשל מאפשר שיתוף העירוי של תרכובות או תרופות יחד עם Nutrients 20. לבסוף, פרק הזמן הקצר יחסית של הניסוי (72 שעות לעומת שבועות עבור דגמים המושרה תזונה עתיר שומן) הוא עלות וזמן יעיל למחקרים פרה.
מודל זה יש גם כמה חסרונות ומגבלות. ראשית, כפי שכל מודל כירורגים דורש כוח אדם מיומן ומיומן בניתוחים מזוהם. שנית, כאמור בסעיף נציג תוצאות החיות נוטות לפצות על עירוי גלוקוז על ידי הגברת הפרשת אינסולין אנדוגני, הדורשת ניטור תכוף של רמות הגלוקוז בדם והתאמות של GIR כדי לשמור על רמות הגלוקוז בדם לאורך כל יעד העירוי. שלישית, ההליך אינו ישים בקלות לעכברים, אשר יידרשו על מנת להשתמש בו בבעלי חיים מהונדסים גנטי. מניסיוננו, צנתור של שניהם וריד הצוואר ועורק תרדמה בעכברים במאתגר מבחינה טכנית והגישה הקלה ביותר בבעלי החיים הקטנים האלה הוא להציב ג'וקטטר gular לעירוי ולמדגם מכולים היקפיים. זה, עם זאת במידה ניכרת מגביל את ההיקף ותדירות הדגימה בעירוי.
בהתחשב במוקד של המעבדה שלנו, יש לנו להשתמש במודל זה כדי ללמוד את המכניזם של glucolipotoxicity בתא בטא 7,8 הלבלב. עם זאת, זה יכול להיות מיושם על מנת לחקור את ההשפעות של עודף חומרי מזון בכל רקמות ואיברים כגון, אך לא רק, לב 21, שרירי שלד, 22, 23 ובכבד.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
וינסנט Poitout הוא מייסד שותף של וקיבל חוזי מחקר מBêtagenex Inc, ארגון מחקר חוזה אשר מציע מודל העירוי שהוצג במאמר זה כשירות מסחרי.
Acknowledgments
עבודה זו נתמכה על ידי המכונים הלאומי לבריאות (R01DK58096 לוינסנט Poitout). וינסנט Poitout מחזיק קתדרה למחקר בקנדה בסוכרת ותפקוד תא בטא לבלב. בדר Zarrouki קיבל מלגות לפוסט דוקטורט מהמרק ואלי לילי. פונטה Ghislaine נתמכה על ידי מלגת פוסט דוקטורט מאיגוד הסוכרת הקנדית.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Saline 0.9% | BD | JB1324 | |
| Dextrose 70% | McKesson | ||
| Intralipid 20% | Fresenius Kabi | JB6023 | |
| Metricide (Glutaraldehyde 2.6%) | Metrex | 11-1401 | |
| Heparin Sodium 10,000 USP u/ml | PPC | ||
| Carprofen | Metacam | ||
| Glycopyrrolate | Sandoz | ||
| Isoflurane | Abbott | ||
| Chlohexidine 2% | |||
| Alcohol 70% | |||
| Iodine | |||
| PE-50 | BD | 427411 | |
| CO-EX T22 | Instech Solomon | BCOEX-T22 | |
| Connector 22G | Instech Solomon | SC22/15 | |
| Swivel 22G | Instech Solomon | 375/22PS | |
| Y-Connector 22G | Instech Solomon | ||
| Counterbalance and arm | Instech Solomon | CM375BP | |
| 23 G blunted needles | Instech Solomon | LS23 | |
| 23 G canulation pins | Instech Solomon | SP23/12 | |
| Tethers (12 inch) | Lomir | RT12D | |
| Infusion jackets | Lomir | RJ01, RJ02, RJ03, RJ04 | |
| (SM-XL) | |||
| Tether attachment piece | Lomir | RS T1 | |
| 60 ml syringe | BD | 309653 | |
| 1 ml syringe | BD | 309602 |
References
- Poitout, V., Robertson, R. P. Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction. Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).
- Poitout, V., et al.
- Unger, R. H. Minireview: weapons of lean body mass destruction: the role of ectopic lipids in the metabolic syndrome. Endocrinology. 144, 5159-5165 (2003).
- Harmon, J. S., Gleason, C. E., Tanaka, Y., Poitout, V., Robertson, R. P. Antecedent hyperglycemia, not hyperlipidemia, is associated with increased islet triacylglycerol content and decreased insulin gene mRNA level in Zucker diabetic fatty rats. Diabetes. 50, 2481-2486 (2001).
- Bachar, E., Ariav, Y., Cerasi, E., Kaiser, N., Leibowitz, G. Neuronal nitric oxide synthase protects the pancreatic beta cell from glucolipotoxicity-induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis. Diabetologia. 53, 2177-2187 (2010).
- Peyot, M. L., et al. Beta-cell failure in diet-induced obese mice stratified according to body weight gain: secretory dysfunction and altered islet lipid metabolism without steatosis or reduced beta-cell mass. Diabetes. 59, 2178-2187 (2010).
- Hagman, D. K., et al. Cyclical and alternating infusions of glucose and intralipid in rats inhibit insulin gene expression and Pdx-1 binding in islets. Diabetes. 57, 424-431 (2008).
- Fontes, G., et al. Glucolipotoxicity age-dependently impairs beta cell function in rats despite a marked increase in beta cell mass. Diabetologia. 53, 2369-2379 (2010).
- Stein, D. T., et al. Essentiality of circulating fatty acids for glucose-stimulated insulin secretion in the fasted rat. J. Clin. Invest. 97, 2728-2735 (1996).
- Leahy, J. L., Cooper, H. E., Weir, G. C. Impaired insulin secretion associated with near normoglycemia. Study in normal rats with 96-h in vivo glucose infusions. Diabetes. 36, 459-464 (1987).
- Hager, S. R., Jochen, A. L., Kalkhoff, R. K. Insulin resistance in normal rats infused with glucose for 72 h. The American Journal of Physiology. 260, 353-362 (1991).
- Laybutt, D. R., Chisholm, D. J., Kraegen, E. W. Specific adaptations in muscle and adipose tissue in response to chronic systemic glucose oversupply in rats. The American Journal of Physiology. 273, E1-E9 (1997).
- Jonas, J. C., et al. High glucose stimulates early response gene c-Myc expression in rat pancreatic beta cells. The Journal of Biological Chemistry. 276, 35375-35381 (2001).
- Tang, C., et al. Glucose-induced beta cell dysfunction in vivo in rats: link between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress. Diabetologia. 55, 1366-1379 (2012).
- Alonso, L. C., et al. Glucose infusion in mice: a new model to induce beta-cell replication. Diabetes. 56, 1792-1801 (2007).
- Magnan, C., Gilbert, M., Kahn, B. B. Chronic free fatty acid infusion in rats results in insulin resistance but no alteration in insulin-responsive glucose transporter levels in skeletal muscle. Lipids. 31, 1141-1149 (1996).
- Goh, T. T., et al. Lipid-induced beta-cell dysfunction in vivo in models of progressive beta-cell failure. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 292, 549-560 (2007).
- Pascoe, J., et al. Free fatty acids block glucose-induced beta-cell proliferation in mice by inducing cell cycle inhibitors p16 and p18. Diabetes. 61, 632-641 (2012).
- Bell, C. G., Walley, A. J., Froguel, P.
- Fontes, G., Hagman, D. K., Latour, M. G., Semache, M., Poitout, V. Lack of preservation of insulin gene expression by a glucagon-like peptide 1 agonist or a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor in an in vivo model of glucolipotoxicity. Diabetes Res. Clin. Pract. 87, 322-328 (2010).
- Crawford, P. A., Schaffer, J. E. Metabolic stress in the myocardium: Adaptations of gene expression. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. , (2012).
- Kewalramani, G., Bilan, P. J., Klip, A. Muscle insulin resistance: assault by lipids, cytokines and local macrophages. Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab Care. 13, 382-390 (2010).
- Cusi, K. Role of obesity and lipotoxicity in the development of nonalcoholic steatohepatitis: pathophysiology and clinical implications. Gastroenterology. 142, 711-725 (2012).
