Summary
Fermentors bioengineered कोशिकाओं की संस्कृति उपज और उत्पादकता बढ़ाने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं. शेक बोतल में कई सूक्ष्म जीवाणु या पशु सेल संस्कृति के उम्मीदवारों की स्क्रीनिंग के बाद, अगले तार्किक कदम FERMENTOR साथ चयनित संस्कृति के बायोमास को बढ़ाने के लिए है. यह वीडियो एक ठेठ benchtop bioreactor प्रणाली की स्थापना और संचालन को दर्शाता है.
Abstract
किण्वन प्रणालियों सेल संस्कृतियों के कई अलग अलग प्रकार के लिए एक इष्टतम विकास वातावरण प्रदान करने के लिए उपयोग किया जाता है. ध्यान से तापमान, पीएच, और विशेष रूप से भंग ऑक्सीजन सांद्रता को नियंत्रित करने के fermentors द्वारा सकती क्षमता कुशल बड़े पैमाने पर विकास और किण्वन उत्पादों की अभिव्यक्ति के लिए उन्हें आवश्यक बनाता है. इस वीडियो संक्षिप्त हिला कुप्पी से अधिक FERMENTOR के फायदे के बारे में बताएगी. यह भी एक ठेठ benchtop किण्वन प्रणाली के प्रमुख घटक की पहचान और इसकी जांच के पोत और अंशांकन की स्थापना पर बुनियादी शिक्षा दे देंगे. दर्शक नसबंदी प्रक्रिया से परिचित और संस्कृति के साथ बर्तन में मध्यम विकास टीका लगाना कैसे दिखाया जाएगा. आपरेशन, नमूने, और कटाई की बुनियादी अवधारणाओं भी प्रदर्शन किया जाएगा. सरल डेटा विश्लेषण और सिस्टम सफाई भी चर्चा की जाएगी.
Introduction
बेसिक किण्वन प्रौद्योगिकी संस्कृतियों से बढ़ के लिए सरल हिला कुप्पी तकनीक का ही विस्तार है. यह एक और अधिक पूर्ण और मात्रात्मक तरीके से जीना संस्कृतियों के लिए विकास के वातावरण नियंत्रित करने की इच्छा से बाहर हो गया. बैच संस्कृति हिला बोतल आमतौर पर तापमान के imprecise नियंत्रण द्वारा सीमित हैं. एक incubated प्रकार के बरतन या गर्म कमरे में तापमान एकरूपता कभी कभी 5 डिग्री सेल्सियस भटक या इरादा setpoint से अधिक, अत्यधिक चर रहा है. शेक कुप्पी सामान्य रूप से एक निश्चित गति से उत्तेजित किया जाता है, ऑक्सीजन तेज और गैस विनिमय सीमित है. उपलब्ध परिवेश ऑक्सीजन समाप्त हो जाने के बाद, ज्यादातर संस्कृतियों को कामयाब करने में विफल. शेक बोतल में कोई पीएच नियंत्रण नहीं है. संस्कृति फीड स्टॉक द्वारा ही सीमित नहीं है, तो कई मामलों में, यह संस्कृति को हानि के मुद्दे पर अम्लीय हो जाता है और श्वसन नाटकीय रूप से धीमा कर देती है. अधिकांश हिला कुप्पी संस्कृतियों भी वे inoculatio पर या संस्कृतियों की शुरुआत के पास केवल एक बार तंग आ चुके हैं जिसका मतलब है कि एक 'बैच', के रूप में चला रहे हैंएन. इस प्रारंभिक कार्बन स्रोत का सेवन किया है, के बाद संस्कृति से बढ़ बंद हो जाता है. कुछ मामलों में अपने चयापचय पारी और संस्कृति शोरबा में अन्य मेटाबोलाइट्स उपभोग के लिए शुरू, कभी कभी परिणामी बायोमास या प्रोटीन की विशेषताओं को बदलने सकता है. शेक बोतल भी 37 डिग्री सेल्सियस पर गर्म संस्कृति के वातावरण, 24 घंटा प्रति मात्रा के आम तौर पर 10% में मीडिया बाष्पीकरणीय नुकसान के लिए आम तौर पर कर रहे हैं विषय इस नुकसान संस्कृति के घनत्व में परिवर्तन और सिस्टम की लंबी अवधि के संचालन पर प्रतिबंध लगाता है. अंत में, उपयोगकर्ता आंदोलन के बाद मीडिया से झाग आ सकती है. संस्कृति ऊपर headspace में फोम की घटना को गैस विनिमय और आगे दबाना वृद्धि को सीमित कर देगा.
बुनियादी किण्वन प्रणाली इन सीमाओं के सभी को बनाया गया है. सावधान तापमान नियंत्रण प्ररित करनेवाला आंदोलन और एक हीटिंग जैकेट के प्रयोग के द्वारा किण्वन वाहिकाओं में हासिल की है. आमतौर पर इस जैकेट की हीटिंग और ठंडा करने के पोत और प्रतिक्रिया नियंत्रण में डाला सेंसरsetpoint के आसपास 0.1 डिग्री सेल्सियस ± तापमान नियंत्रण में परिणाम है. Benchtop fermentors आम तौर पर एक पंप के माध्यम से तरल अभिकर्मक इसके माध्यम से पीएच का नियंत्रण प्रदान करते हैं. पीएच मूल्य लगातार सेल के विकास के लिए वातावरण इष्टतम रखने के प्रयास में निगरानी रखी जाती है. उचित वातन aforementioned मिश्रण उत्तेजित देनेवाला द्वारा या सीधे संस्कृति में हवा या ऑक्सीजन पूरक गैस की जान फूंकना द्वारा बनाए रखा है. कतरनी के प्रति संवेदनशील संस्कृतियों के साथ, ऑक्सीजन पूरक गैस संस्कृति में ऑक्सीजन का स्तर बनाए रखने के लिए प्राथमिक तंत्र है. समाधान में ऑक्सीजन का मापन आमतौर पर हिला बोतल में इस्तेमाल के लिए सामान्य रूप से उपलब्ध नहीं है, जो एक polarographic जांच करके हासिल की है. यह लगातार या समय समय पर एक रेखीय या घातीय फैशन में विकास को बनाए रखने के लिए पोत के लिए फ़ीड जोड़ने के लिए भी संभव है. बाहर निकलने गैस कंडेनसर इस प्रकार संस्कृति मात्रा और घनत्व के संरक्षण, गाढ़ा करने के लिए निकास गैस प्रवाह में भाप के लिए एक ठंडी सतह प्रदान करता है. Antifoam surfactant की आवधिक अलावा actuated हैसतह पर फोम को कम करने और गैस विनिमय की अनुमति संस्कृति में एक चालकता जांच, से.
पोत, सभी जांच के साथ, फिटिंग, impellers, फसल पाइप, और ट्यूब, इकट्ठा होता है और एक मानक आटोक्लेव में निष्फल. अंतिम जांच calibrations और परिचालन में पर्यावरण के लिए स्थिरीकरण के बाद, संस्कृति पोत के लिए जोड़ा है. सिस्टम तो एक हिला कुप्पी विधि के साथ अधिक से अधिक मात्रात्मक और सटीक है कि एक तरह से संस्कृति विशेषताएँ इस्तेमाल किया जा सकता है. तापमान, पीएच, ऑक्सीजन सामग्री, दूध की खपत, तरल वाष्पीकरण, और फोम के स्तर की तंग नियंत्रण सब एक बहुत अधिक बायोमास और बेहतर प्रोटीन उपज के लिए योगदान करते हैं.
Protocol
- पोत स्थापना के साथ आपरेशन शुरू. एक पारंपरिक FERMENTOR (चित्रा 1) स्थापित करने की आवश्यकता है कि निम्न घटक होते हैं:
- पीएच जांच - लाइव संस्कृति में पीएच की माप के लिए. स्थापना से पहले जांच जांचना और पोत के साथ बाँझ. Headplate में जांच को स्थापित करें.
- पीओ 2 जांच - किण्वन के दौरान पोत के अंदर भंग ऑक्सीजन सामग्री की माप के लिए. Headplate में स्थापित करें.
- संस्कृति नमूना लेने के लिए हार्वेस्ट पाइप. Headplate में इस समायोज्य ऊंचाई घटक स्थापित करें.
- गैस सींचनेवाला - पोत के तल पर रहता है और संस्कृति के लिए गैस अर्क प्रदान करता है. FERMENTOR पर गैस स्रोत को सींचनेवाला को हुक और headplate में माउंट.
- उत्तेजित देनेवाला शाफ्ट और उत्तेजित देनेवाला - प्ररित करनेवाला संस्कृति stirs और पोत में संस्कृति एकरूपता बनाए रखने के लिए महत्वपूर्ण है.
- निकास गैस कंडेनसर - निकास गैस पथ ठंडा करके पोत में बाष्पीकरणीय नुकसान को रोकने के लिए.
- पीएच नियंत्रण या फ़ीड इसके लिए अभिकर्मक पंप लाइनों.
- पोत साफ और साबुन और पानी से headplate. एक नरम ब्रश पोत और headplate scrubbing के लिए सिफारिश की है. क्लोरीन के साथ ब्लीच या क्लीनर पोत को साफ करने के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता.
- मीडिया अस्थिर गर्मी नहीं है, तो साफ पोत में जोड़ें. अधिकतम काम मात्रा तक पहुँच जाता है केवल जोड़ने. इस उदाहरण में, अधिकतम काम मात्रा एक 5 एल कुल मात्रा पोत के लिए 3.3 एल है.
- O-अंगूठी सील ठीक से बैठा है यह सुनिश्चित करना कि पोत headplate माउंट.
- निकास गैस कंडेनसर स्थापित करें.
- अपने 10 मिमी पोर्ट में Antifoam जांच को स्थापित करें.
- अपने 10 मिमी पोर्ट में फसल पाइप स्थापित करें. यह की चोटी पर ट्यूबिंग का एक टुकड़ा रखो और इसे बंद दबाना.
- सींचना इनलेट पर ट्यूबिंग और एक 0.20 माइक्रोन फिल्टर स्थापित करें और फिर इस बंद दबाना.
- पीएच जांच जांचना:
- 2 छोटे बीकर में संदर्भ बफ़र्स, एक धोने की बोतल, और एक अतिरिक्त वा इकट्ठाश बीकर.
- FERMENTOR पीएच जांच को हुक और FERMENTOR पर बारी.
- पीएच पैरामीटर पर स्क्रॉल करें और मेनू बटन का उपयोग कर, 'काल' विकल्प के लिए स्क्रॉल, और प्रेस 'दर्ज'.
- 2 बिंदु अंशांकन के लिए '2 'का चयन करें.
- जांच टिप बंद धो लें और कम संदर्भ बफर में डूब. FERMENTOR पर मूल्य स्थिर होगा. + का उपयोग और - चाबियाँ, पीएच संदर्भ बफर के मूल्य मैच के लिए प्रदर्शित मान समायोजित करें. यह पलक बंद हो जाता है एक बार, 'प्रेस दर्ज करें'.
- बंद जांच धो लें और दूसरा संदर्भ बफर में डालें. मूल्य को स्थिर करने और फिर प्रदर्शित मूल्य उच्च संदर्भ बफर मूल्य से मेल बनाने के लिए कीपैड का उपयोग करने की अनुमति दें. प्रेस पुष्टि करने के लिए 'एंटर'.
- बंद टिप जांच धोएं और FERMENTOR से काट. कनेक्शन पर सुरक्षात्मक टोपी रखो और headplate में इसे स्थापित करें.
- पीओ 2 टिप जांच खोलें और वहां यह सुनिश्चित करने के लिए जाँचटिप को कवर करने के लिए पर्याप्त इलेक्ट्रोलाइट है. यदि नहीं, तो जलाशय को कुछ जोड़ सकते हैं और इसे वापस बंद.
- Headplate में पीओ 2 जांच स्थापित करें और आटोक्लेव टोपी अपने बिजली के कनेक्शन की रक्षा करने के लिए लगाया जाता है कि सुनिश्चित करें. यह नसबंदी के बाद calibrated किया जाएगा.
- एक डुबकी ट्यूब और हवा फिल्टर के साथ अभिकर्मक फ़ीड के लिए एक बोतल प्राप्त करते हैं. डुबकी ट्यूब बंदरगाह के लिए पंप टयूबिंग जोड़ें और FERMENTOR पर इनलेट पोर्ट से दूसरे छोर देते हैं.
- सभी अप्रयुक्त बंदरगाहों पर प्लेस ट्यूबिंग तो दूर ट्यूबिंग दबाना.
- निकास गैस कंडेनसर पर एक 0.45 माइक्रोन फिल्टर स्थापित करें. इस फिल्टर पोत आटोक्लेव में दबाव नहीं है सुनिश्चित करती है.
- मीडिया के स्तर से नीचे जाना है कि सभी ट्यूबों बाहर आने से मीडिया को रोकने के लिए बंद clamped रहे हैं कि जाँच करें.
- 121 डिग्री सेल्सियस, तरल चक्र पर 30 मिनट - 25 के लिए आटोक्लेव में पोत रखो. सावधानी: जब वह बाहर आता है यह बहुत गर्म हो जाएगा.
- FERMENTOR आधार पर पोत को स्थापित करें.
- पीएच को हुककेबल की जांच.
- पीओ 2 जांच केबल संलग्न.
- गैस अलावा rotameter को सींचनेवाला को यह मिला.
- Sterilely डुबकी ट्यूब के साथ बोतल के लिए 1 एम NaOH अभिकर्मक जोड़ने और आधार पंप सिर धुरी पर पंप सिर स्थापित करें.
- Headplate पर Thermowell में तापमान संवेदक रखो. यह Thermowell की तह तक रास्ते से सब हो जाता है कि यह सुनिश्चित करें.
- जहाजों प्ररित करनेवाला युग्मन पर आंदोलन भुजा कम करें.
- FERMENTOR पर है कि सुनिश्चित करें.
- पानी FERMENTOR के लिए उपलब्ध है कि जाँच करें.
- FERMENTOR के लिए हवा की आपूर्ति चालू करें.
- तापमान पैरामीटर पर स्क्रॉल करें और 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान सेट तापमान नियंत्रण शुरू करने के लिए 'एंटर' बटन दबाएँ. पोत 15 मिनट या उससे कम समय में गर्मी होगी.
- मिनट या उससे कम प्रति मीडिया के 1 पोत मात्रा में गैस का प्रवाह चालू करें. इस सेट अप के लिए, गैस प्रवाह 3 एल / मिनट है. बुलबुले तल पर दिखाई देनी चाहिए.
- आंदोलन करने के लिए पी स्क्रॉलarameter और 300 rpm के लिए निर्धारित किया है. प्रेस आंदोलन को चालू करने के लिए 'एंटर'.
- तापमान 37 डिग्री सेल्सियस तक पहुँच गया है, पीएच पैरामीटर के लिए स्क्रॉल और 6.8 के लिए यह निर्धारित किया है. 'एंटर' बटन दबाकर पीएच नियंत्रण पर मुड़ें.
- रन के लिए 1,000 आरपीएम की अधिकतम गति के लिए आंदोलन सेट करें.
- पीओ 2 जांच उचित मूल्यों को प्रदर्शित करने के लिए ठीक से polarized है कि सुनिश्चित करें. 2 घंटे के बाद, पुलिस के 2 पैरामीटर के लिए स्क्रॉल और 'जांच फंक्शन' का चयन करें और 1 बिंदु अंशांकन चयन करने के लिए 'मेनू' बटन का उपयोग करें.
- 15 मिनट के बाद, 100 और प्रेस करने के लिए मूल्य निर्धारित करने के लिए कर्सर का उपयोग 'लिखें.' इस पीओ 2 जांचना होगा.
- आंदोलन के लिए स्क्रॉल और 300 rpm के लिए निर्धारित किया है.
- 'मेनू' बटन का प्रयोग, में आंदोलन मेनू 'पर' के लिए 'झरना' की बारी है. इस हवाई बुलबुले को काटना और वृद्धि की मांग बढ़ जाती है के रूप में समाधान में और अधिक ऑक्सीजन के लिए मजबूर करने के प्रयास में आंदोलन की गति में वृद्धि होगी. पीओ 2 पैरामीटर के लिए स्क्रॉल और 30 के लिए मूल्य निर्धारित किया है. पीओ 2 शुरू करने के लिए 'एंटर' बटन दबाएँ.
- पीसी पर नियंत्रण सॉफ्टवेयर पैकेज शुरू करो.
- जांच calibrated हैं एक बार, आंदोलन 300 rpm पर स्थिर है, तापमान 37 डिग्री सेल्सियस और 6.8 पीएच के करीब है, यह टीका लगाना करने के लिए समय है. शराब का प्रयोग, टीका के लिए उपयोग किया जाएगा जो बंदरगाह बाँझ.
- एक सिरिंज में inoculum ड्रा और निष्फल पोर्ट में जोड़ें. बंदरगाह बंद करें.
- एक लॉग बुक में टीका के समय निशान.
- यह नसबंदी समय में एक नमूना लेने के लिए भी महत्वपूर्ण है. शराब के साथ फसल पाइप ट्यूब के अंत जीवाणुरहित.
- फसल बंदरगाह को कवर दबाना खोलें और एक नमूना आकर्षित करने के लिए एक सिरिंज का उपयोग करें. यह पाइप में बैठा दिया गया है क्योंकि यह पहला नमूना आमतौर पर खारिज कर दिया है.
- एक और नमूना खींचने के लिए एक और सिरिंज का प्रयोग करें.
- एक तिहाई सिरिंज के साथ, के रूप में ज्यादा मृत मात्रा निकालने के लिए पाइप के माध्यम से वापस हवा धक्कारेखा से और लाइन से दबाना.
- सेल घनत्व और पीएच का निर्धारण करते हैं और मूल्यों रिकॉर्ड. माइक्रोबियल संस्कृतियों के साथ, यह मान हर घंटे के लिए लॉग इन करने के लिए उपयोगी है. अंतराल संस्कृति निर्भर है.
- विकास पूरा होने के बाद फसल पद्धति संस्कृति के लिए मंशा पर निर्भर करता है. इस मामले में, संस्कृति सेल घनत्व और गीला सेल वजन के संभावित पीएच या माप के लिए समापन बिंदु मान प्राप्त करने के लिए एक अंतिम समय नमूना. ब्लीच या अन्य रोगाणुरोधी एजेंटों के साथ एक नामित "किल टैंक" में सामग्री का निपटारा headplate खोलें.
Representative Results
बायोरिएक्टर आईआरआईएस सॉफ्टवेयर के साथ या बिना चलाए जा सकता है. हालांकि डेटा पर कब्जा करने के लिए, यह सॉफ्टवेयर का उपयोग करने के लिए सबसे अच्छा है. बैक्टीरिया के अलावा पहले, पीएच और ऑक्सीजन सेंसर, प्ररित करनेवाला गति सेट और तापमान सेट calibrated किया जाना चाहिए. चित्रा 2 में, एक बायोरिएक्टर रन के लिए डेटा उत्पादन में प्रस्तुत किया है. तापमान 30 डिग्री सेल्सियस, 200 rpm पर उत्तेजित देनेवाला गति के लिए स्थापित किया गया था. मापदंडों के एक प्रयोग के लिए अलग हो सकता है लेकिन बैक्टीरिया के अलावा पहले, प्रणाली स्थिर अवस्था में होना चाहिए. चित्रा 3 में, जीवाणु संस्कृति के अलावा के साथ ऑक्सीजन एकाग्रता में परिवर्तन दिखाया गया है. इस प्रयोग के लिए सेट अंक 37 डिग्री सेल्सियस, 70% से कम 200 आरपीएम, ओ 2 में दोषी हैं. समय 19:20, फ़ीड पंप एक तुरंत ओ 2 स्तर में गिरावट के कारण 0.1 के एक आयुध डिपो में बैक्टीरियल बीज संस्कृति बचाता है. बायोरिएक्टर airflow और प्ररित करनेवाला गति में वृद्धि के साथ बदल रहा हे 2 स्तर का जवाब. टीवृद्धि के लिए वह सेट अंक झरना (चरण 35) में स्थापित कर रहे हैं. रिएक्टर पीएच पीएच समय के साथ पीएच लाइन उतार - चढ़ाव (चित्रा 4) के द्वारा प्रदर्शन के रूप में बढ़ रही है तो कम से वास्तविक समय में नजर रखी थी. पूरे चलाने का विश्लेषण किया जा सकता है और मापदंडों के बाद के प्रयोगों के लिए समायोजित.
चित्रा 1. लेबल और जुड़े सभी भागों के साथ benchtop बायोरिएक्टर. यह आंकड़ा एक रन की शुरुआत में हड़कंप मच टैंक रिएक्टर से पता चलता है. रिएक्टर के कुछ हिस्सों लेबल और सेंसर, प्ररित करनेवाला, तापमान गेज, दूध और नमूना बोतलें, निकास बंदरगाह, हवा के दबाव गेज, हीटिंग जैकेट, कंडेनसर टॉवर, और नियंत्रण पैनल में शामिल कर रहे हैं.
चित्रा 2. बायोरिएक्टर sof की स्क्रीन छविरन की शुरुआत में tware. एक उभारा टैंक चलाने के शुरू में, तापमान 30 डिग्री सेल्सियस (पीली लाइन) में स्थापित किया गया था, 200 आरपीएम (लाल रेखा), 6.5 (ग्रीन लाइन) में पीएच, और पुलिस 2 पर उत्तेजित देनेवाला गति 57.2% (ब्लू लाइन) पर. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
चित्रा 3. ऑक्सीजन के रूप में चलाने के दौरान बायोरिएक्टर सॉफ्टवेयर की स्क्रीन छवि संस्कृति सक्रिय विकास के चरण में है, यह ऑक्सीजन की खपत और रिएक्टर में ऑक्सीजन की मात्रा (ब्लू लाइन) में कमी आई है. कम हो जाती है. प्ररित करनेवाला गति बढ़ाने से, अधिक ऑक्सीजन संस्कृति (लाल रेखा) को जोड़ा जा सकता है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
चित्रा 4. संस्कृति के समय के साथ पीएच परिवर्तन दिखा बायोरिएक्टर सॉफ्टवेयर. पीएच की स्क्रीन छवि लगातार निगरानी कर रहा है और समय के साथ यह लैक्टिक एसिड का उत्पादन किया है के रूप में कम हो जाती है और उसके बाद बेस बायोरिएक्टर (ब्लू लाइन) में जोड़ा जाता है के रूप में बढ़ जाती है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए क्लिक करें .
Discussion
उभारा टैंक बायोरिएक्टर जैव प्रौद्योगिकी उद्योग में मानक हैं और 40 साल के 1 के लिए इस्तेमाल किया गया है. छोटे उभारा टैंक पैमाने अप, पैमाने नीचे, तनाव अनुकूलन, लक्षण, और विकास की प्रक्रिया के लिए महत्वपूर्ण हो गया है. यह भी व्यक्तिगत चिकित्सा 2 के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका हो सकती है. यह नजर रखी और एक रन भर में अनुकूलित किया जा सकता, क्योंकि छोटे पैमाने बायोरिएक्टर सेल के विकास के लिए सीटू की स्थिति में करने के लिए सबसे समान है. ज्यादातर अक्सर, प्रारंभिक प्रयोगों हिला बोतल का उपयोग कर प्रदर्शन कर रहे हैं लेकिन छोटे पैमाने बायोरिएक्टर में स्थितियां हिला कुप्पी से काफी भिन्न होते हैं. एक प्रयोग में हमने पाया कि ई. के इष्टतम विकास के लिए शर्तों कोली और शेक कुप्पी में हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) के उत्पादन उभारा टैंक (अप्रकाशित डेटा) के लिए अनुवाद नहीं किया.
बड़े पैमाने में बढ़ कोशिकाओं के अन्य तरीकों रोलर की बोतलें, एक यू में शामिलएसई प्रत्येक विधि 50 से 5000 एल के लिए काम कर संस्करणों के साथ मंच बायोरिएक्टर 3 और बड़ा एकल उपयोग बायोरिएक्टर कमाल पैमाने अप के लिए चुनौतियों प्रदान करता है, लेकिन उत्पादन में जगह मिल गई है. मंच बायोरिएक्टर कमाल एकल उपयोग उभारा टैंक के समान है, और एक विनियमित वातावरण प्रदान करता है. यह सेल निपटाने को रोकने और oxygenation प्रदान करने के लिए तरंगों को उत्पन्न करने के कारण एक कमाल की गति से होता है कि मिश्रण में हड़कंप मच टैंक से अलग है. इस विधि के लिए हाइड्रोइनेमिकस उभारा टैंक से अलग और अधिकतम मात्रा मतभेद सेल के विकास और उत्पाद के उत्पादन को प्रभावित कर सकते हैं 1,000 एल तक ही सीमित है. अन्य एकल उपयोग प्रणाली, बुनियादी ढांचे और जुड़े भूमि के ऊपर का एक न्यूनतम के साथ एक मंच प्रदान करने के लिए डिस्पोजेबल रिएक्टर के साथ उभारा टैंक गठबंधन, और उच्च throughput के लिए क्षमता 4 bioprocessing.
Benchtop Bioreactors के नए उपयोगकर्ताओं मुसीबत पीएच, पुलिस के 2 और मंदिर के लिए प्रारंभिक setpoints का निर्धारण हो सकता हैतापमान, लेकिन, प्रकाशित अनुसंधान में इस जानकारी 5, 6, 7, 8, 9 के लिए संदर्भित किया जा सकता. विशेष रूप से बैक्टीरियल संस्कृतियों के साथ, यह एक प्रकार के बरतन कुप्पी और एक ही setpoint में तापमान के रूप में एक ही गति से आंदोलन शुरू करने की सिफारिश की है. पिछले हिला बोतल रन से संस्कृति पीएच भी एक प्रारंभिक बिंदु के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है. पीओ 2 मूल्य की स्थापना और अधिक कठिन है और आम तौर पर अनुभव से निर्धारित होता है. हालांकि, 50% पीओ 2 के साथ शुरुआत एक सिफारिश की शुरुआती बिंदु है.
Disclosures
लेखक ए Magno इस लेख में इस्तेमाल किया अभिकर्मकों और उपकरणों का उत्पादन है कि एटीआर बायोटेक के एक कर्मचारी है.
Acknowledgments
इस परियोजना के जॉन्स हॉपकिन्स विश्वविद्यालय, गेटवे ऑफ साइंस पहल के माध्यम से प्रोवोस्ट के कार्यालय के हिस्से में समर्थन किया गया था.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| LB broth | Sigma | L3022 | |
| ampicillin | Sigma | A1593-25G | |
| LB broth | Sigma | L3022 | |
| antifoam 204 | Sigma | A8311 | |
| 1 M Sodium Hydroxide | Sigma | 38215-1EA-R | |
| Reference Buffer, pH 4.00 | Sigma | B5020 | |
| Reference Buffer, pH 7.00 | Sigma | B4770 | |
| pO2 probe electrolyte | Broadley James | AS-3140-C30-0025 | |
| 0.45 micron filter | Cole Parmer | EW-02915-22 | |
| 0.22 micron filter | Cole Parmer | EW-29950-40 | |
| Luer Lock syringe, 10 mL | Cole Parmer | EW-07940-12 | |
| Minifors Bioreactor | Infors HT | B-Pack 5.0 | |
| Air Admiral air pump | Cole Parmer | EW-79202-00 | |
| 1175 PD Chilling circulator | VWR | 13721-204 |
References
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