Summary
I det følgende eksperiment beskriver vi en protokol for spor frygt condition i mus. Denne type af associativ hukommelse omfatter et spor periode, adskiller neutral stimulus og ubetinget stimulus.
Abstract
I dette forsøg viser vi en teknik til at måle indlæring og hukommelse. I spor frygt condition-protokol, der præsenteres her er der fem parringer mellem en neutral stimulus og en ubetinget stimulus. Der er en 20 sek spor periode, der adskiller hver konditionering retssag. På den følgende dag frysning måles under præsentationen af den betinget stimulus (CS) og spor periode. På den tredje dag er der en 8 min test til måling af kontekstuelle hukommelse. De repræsentative resultater er fra mus, der blev præsenteret med den afskrækningsmiddel ubetinget stimulus (chok) sammenlignet med mus, der modtog tone præsentationer uden ubetinget stimulus. Trace frygt condition held har været anvendt til at opdage subtile indlæring og hukommelse underskud og forbedringer i mus, der ikke findes med andre frygt condition metoder. Denne type af frygt conditioning menes at være afhængig af forbindelser mellem den mediale præfrontale cortex og hippocampus. Et aktuelt polemik, om denne metode menes at være amygdala-uafhængig. Derfor er en anden konditionering test frygt er nødvendig for at undersøge amygdala-afhængige indlæring og hukommelse effekter, såsom gennem forsinkelsen frygt condition.
Introduction
I frygt condition en neutral stimulus (NS) er parret med et afskrækningsmiddel ubetinget stimulus (US). NS er normalt en tone og bliver en betinget stimulus (CS) ved gentagne parringer med USA. CS kan derefter fremkalde en betinget respons (CR), såsom frysning, i fravær af aversiv USA. Et almindeligt brugt frygt condition protokollen er forsinkelse condition. I denne protokol debut af NS og USA er sammenhængende eller med en vis overlapning i stimulus præsentation. Selvom forsinkelse frygt condition er en af de mest almindeligt anvendte typer af tidsmæssige associative condition, er der flere andre typer af associative conditioning tidsmæssige arrangementer: simultan condition, tilbagestående condition, and trace conditioning 1. I spor frygt condition er en stimulus-fri interval mellem NS og USA på flere sekunder resulterer i en "trace" periode.
Flere studier har rapporteret underskudsi spor frygt condition når neurotoksiske læsioner er produceret i de strukturer, der input til hippocampus 2-5 eller når farmakologiske midler anvendes til at blokere receptor funktion i hippocampus. Læsion til hippocampus resultater i underskud i spor condition og kontekstuelle condition, men ikke forhindrer forsinkelse frygt condition 8. Der er flere fordele ved at bruge spor frygt condition. Frygten condition protokol kan nås i løbet af en tre-dages testperiode og giver mulighed for hippocampus-afhængig hukommelse, der er ikke er rumligt afhængig. Trace frygt conditioning kan anvendes som en supplerende test af Morris water maze, nye testobjektet anerkendelse eller andre maze test i undersøge hippocampus-afhængig hukommelse.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Musene, der anvendes i det følgende eksperiment blev genereret og huse på Baylor University ved en omgivende temperatur på 22 ° C, med en 14 timers lys og 10 timers mørke (20:00 til 06:00 timer) døgnets cyklus. Musene blev givet ad libitum adgang til mad og vand. Alle procedurer til de mus var i overensstemmelse med National Institutes of Health retningslinjer for pasning og anvendelse af forsøgsdyr og dyret protokollen blev godkendt af Baylor University Animal Care og brug Udvalg.
Oversigt
Sporet betinget frygt opgave er baseret på procedurer, der beskrives af Wiltgen og kolleger 9.
1.. Udarbejdelse af udstyr
Frygten konditioneringsapparat kammer (26 cm x 22 cm x 18 cm) består af to sider, der er acryl, to sider, der er af metal, og et gittergulv bund, som bruges til at levere et mildt stød i foden. Afprøvningen kammer er husd på en sund svækket kammer. Kammeret er også let tætte for at forhindre uden lys påvirke bevægelsesdetektering software.
- Kalibrere chok niveauer lysniveauer og lyd intensitet niveauer for afprøvning kammer. Måle baggrundsniveauet af testkammeret. Baggrundsstøjen i dette kammer er 65 dB. Brug en sund meter for at måle dette niveau. Måleren bør sættes til 70 dB, indstillet til C, og til påvisning indstilling langsomt.
- Kalibrer chok niveau til 0,5 mA. Brug en ekstern kalibrering enhed til korrekt kalibrere chok (se Materialer tabel). Den interne måling af chok generatoren er ikke korrekt. Chok generator administrerer en kodet stød, som ikke kan måles nøjagtigt ved en standard amperemeter.
- Placer en føring på et af risten og placere de andre bly 3 eller 4 barer forbi. Brug chok generator til at administrere stød. Juster chok niveau indtil det korrekte niveau er nået. Gør dette for each frygter konditioneringskammeret.
- Luk døren til kammeret ved måling af lysniveauet af kammeret. Kalibrer lysniveauet til ca 1,0. Dette er en specifik for FreezeFrame software, der anvendes i dette forsøg nummer. En ekstern lysmåler vil læse dette som 2 lux. Lyset kan justeres ved at flytte placeringen af huset lys eller ved at justere kondensatoren linsen. Sørg for at stramme stilleskruerne for linsen efter justering.
- Kalibrer lyden decibel-niveau til 85 dB. Brug en ekstern decibel meter inde i test buret for at kalibrere decibel-niveau (se Materialer tabel). Lyden præsenteres vil være en 2.700 Hz tone. Bemærk: Hvis du bruger mus ældre end 6 måneder gammel, kan det være bedre at bruge hvid støj da ældre mus kan have hørelse underskud.
- Efter, at apparatet er klar tage de emner, en særskilt bedrift rum. Bemærk: Du må ikke huse musen i samme rum som test værelse.
- Label the hale af de mus, der vil blive afprøvet med henblik på afprøvning. Det er bedst at reducere overdreven håndtering før testning. Alternativt kan haler mærkes dagen før forsøget for at reducere håndtering af stress. Når musene er blevet mærket tillade dem at akklimatisere sig til rummet i 30 min. Har ekstra rene bure til boliger musene efter afprøvning er afsluttet.
2. Trace Conditioning Dag 1
- Fjern hver mus fra buret og placere dem i individuelle bure til transport til frygten konditioneringskammeret. Brug rent sengetøj til hvert bur. Placer en seddel på overførsel bur til at holde orden på mus teste korrekt. Bemærk: Hvis musene enkeltvis er opstaldet så kan de transporteres i deres hjem bur.
- Anbring musen i afprøvningen kammer og luk døren. Start programmet.
- På uddannelsen dag, tillade mus for at undersøge kammer til 3 min. Den software, så præsenterer en 20 sek tone (85 dB, 2.700 Hz) to dyret. Efter et spor periode på 20 sek et mildt shock (2 sek, 0,5 mA) indgives til dyret.
- Optag reaktion af emnet for at bekræfte, at de har modtaget de afskrækningsmiddel stimuli ved at se videoen. En 200 sek inter-retssagen interval adskiller de 5 conditioning forsøg. Hvert forsøg består af en 20 sek tone efterfulgt af en 20 sek forsinkelse derefter et chok.
- Efter test er afsluttet, så dyret kan forblive i afprøvningen kammer i 1 min, før du fjerner det fra test bur.
- Placer dyret tilbage i overførslen bur og returnere det til dets hjem bur. Hvis der er yderligere mus i deres hjem bur så individuelt huse musen indtil alle mus komplet test. Dette vil reducere den belastning den anden mus, der ikke er blevet testet. En alternativ løsning ville være at enkeltvis huse alle mus en uge før test for at mindske påvirkningen af kontinuerligt at fjerne mus fra et bur.
- Rengør test kammer med 30% isopropanol efter ØKh dyr testes.
- Gentag trin 2,2-2,7 for alle mus i test kohorten.
- Retur alle mus til deres koloni plads efter den sidste mus i kohorten er blevet testet.
3. Trace Frygt Conditioning Dag 2: Trace Memory Test
- Trace memory test vil forekomme på dag 2.. I denne protokol er der 3 tone præsentationer. Placer mus i en ny kontekst for spor konditionering test.
- Forbered software til at køre et program med en 2 min baseline-periode efterfulgt af tre 20 sek tone præsentationer. Der er sa 220 sek ITI mellem hver tone præsentation.
- For den nye kontekst tilstand placere klar akryl indsatse på gulvet af kammeret til at ændre form, tekstur og farve af konditioneringskammeret.
- Skift lugt i kammeret ved at placere vanille ekstrakt i en vejer båd under gulvet indsatsen.
- Rengør kammer med 70% ethanol i stedet for 30% isopropanol. Bemærk: Dette vil hjælpeat skabe en ny kontekst.
- Bring mus Staldlokaler og ometikettering deres haler til prøvning, hvis det er nødvendigt.
- Forbered nye kontekst transfer bure ved at erstatte sengetøj med strimlet papir. Bemærk: Dette vil bidrage til at skabe en ny kontekst.
- Placer musene i testkammeret derefter starte programmet. Rengør kammeret med 70% ethanol efter afprøvning er afsluttet.
- Retur musene til deres hjem bur efter spor condition er afsluttet. Retur alle mus til deres koloni værelse, når alle mus er blevet testet.
4.. Trace Frygt Conditioning Dag 3: kontekstuel Memory Test
- På den tredje dag udføres kontekstuel condition. Forbered software til at køre et program til at optage frysning adfærd i 8 min.
- Rengør kammeret med 30% isopropanol før testning og efter afprøvning hver mus. Konteksten bør være identisk med dag 1. Transferfristerne bure bør være den samme som i dag 1.
- Placer hver mus i testkammeret derefter starte programmet. Rengør kammeret med 30% isopropanol efter afprøvning er afsluttet.
- Retur alle mus til deres koloni værelse, når afsluttet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For de repræsentative resultater præsenterer vi data fra kontrol C57BL/6J voksne mus, der fik de neutrale stimulus bindinger med ubetinget stimulus (chok tilstand) sammenlignet med mus, der fik den neutrale stimulus, men ikke fik det ubetinget stimulus (ingen chok tilstand). Det er vigtigt at køre denne betingelse, når først oprettelsen af denne adfærdsmæssige test for at afgøre, om den protokol er blevet udført korrekt.
Dataene i figur 1 repræsenterer uddannelse dag C57BL/6J-mus i spor frygt conditioning test. Det er generelt ikke nødvendigt at sammenligne grupperne på tværs af alle forhold under uddannelsen dagen. Men det er nyttigt at undersøge basisperioden at vurdere, om der er begyndende forskelle i baseline. Vi har ikke observere eventuelle forskelle i indefrysning niveauer i den hidtidige tilstand t (1,10) = 0,6, p = 0,56. Dette viser, at der ikke er nogen indledende forskelle i frysning leveauer. Der er generelt lavt frysepunkt niveauer forsøgene tidlig undervisning, men der er en stigning i frysning adfærd over konditionering parring forsøg. Når vi udført en blandet model ANOVA, der analyserede forskelle mellem Stød og Stød tilstand end de 16 perioder, vi fandt en primær effekt af gruppe F (1,10) = 60,3, p <0,001. Der var en væsentligste virkning af gruppe F (1,10) = 215,9, p <0,001, og en gruppe af tid interaktion F (1,10) = 133,9, p <0,001. Analysen viser, at der var en signifikans forskel i køb mellem de to grupper.
Dataene for figur 2 illustrerer adfærd frysning mellem de mus, der havde tone shock bindinger (Shock Tilstand) og mus, der fik den samme procedure, uden chok parring (Stød Condition) på tværs af de 5 tone conditioning forsøg. Musene i Shock Tilstand dannede en forening mellem tone chok bindinger i spor frygt condition. En blandetDesign ANOVA blev anvendt til at undersøge den vigtigste effekt af læring for gruppe F (1, 10) = 83,48, p <0,001. Der var også en vigtig effekt af konditionering forsøg (tid) F (3,30) = 24,83, p <0,001, og gruppe interaktion X tid F (3,30) = 4,7, p <0,01. Da der var en gruppe interaktion x tidspunkt var separate t-test pr tidspunkt udført for at undersøge forskel mellem grupperne på hvert tidspunkt. Separate t-test afslører signifikant forskel mellem grupperne ved baseline t (1,10) = 6,8, p <0,001; tone t (1,10) = 8,6, p <0,001; trace periode t (1,10) = 5,3 , p <0,001, og i den inter-retssagen interval t (1,10) = 5,1, p <0,001. For tonen spor periode, og den inter-retssagen interval data blev i gennemsnit på tværs af de tre præsentationer. Dataene viser, at spor konditionering eksperimentet succes produceret forskelle i læring på spor condition-protokollen.
Dataene for Figur 3 demonstrerer freezning adfærd mellem de mus, der havde tone chok bindinger (Shock Tilstand) og mus, der fik den samme procedure, uden chok parring (Stød Condition) i forbindelse med betingelse. Konteksten tilstand test blev præsenteret 48 timer efter spor condition er implementeret. Musene i Shock Betingelse havde betydeligt mere frysning den oprindelige sammenhæng i end Stød Betingelse mus F (1,10) = 12,5, p <0,01. Der var også en vigtig effekt af tid F (7,70) = 5,5, p <0,001, men der var ingen interaktion mellem tid og gruppe F (7,70) = 0,78, p = 0,61. Dataene viser, at spor konditionering eksperimentet succes produceret kontekstuelle læring, da CS blev parret med en USA i spor frygt condition.
Figur 1.Data fra træning dagen af spor frygt condition. De sorte søjler repræsenterer data fra mus, der fik den afskrækningsmiddel ubetinget stimulus (chok). De røde søjler repræsenterer mus, der ikke får den afskrækningsmiddel ubetinget stimulus (ingen stød), men modtaget tone stimuli. Søjlerne repræsenterer gennemsnit ± standardfejl af middelværdien (SEM) procent frysning for mus i løbet af træningsdag.
Figur 2.. Data fra mus i tone test efter spor frygt condition. Den mus, der fik den ubetinget stimulus (Shock betingelse) havde mere frysning sammenlignet med mus, der ikke modtager chok (Stød Condition) i grundforløbet, tone, spore, og intertrial interval (ITI). Bjælkerne repræsenterer middelværdien± standard error af middelværdien (SEM) procent frysning for mus under tone test. Astericks (***) indikerer en signifikant gruppe forskel (p <0,001).
Figur 3. Data fra testet i forbindelse test efter spor frygt conditioning mus. Den mus, der fik chok havde mere frysning i forhold til mus i Stød betingelse i forbindelse testbetingelse over 8 min forsøget. Datapunkter repræsenterer middelværdien ± standardfejl på middelværdien (SEM) procent frysning for mus i forbindelse test. Astericks (***) indikerer en signifikant gruppe forskel (p <0,001).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Der har været flere undersøgelser, der har belyst de neurale kredsløb, der ligger til grund for spor frygt condition. Trace frygt condition menes at involvere CA1 af hippocampus 12-14. Der er også tegn på, at den mediale præfrontale cortex (mPFC) spiller en stor rolle i spor eye-blink condition 15 og mPFC har vist sig at være involveret i spor frygt condition. En undersøgelse viste, at mPFC neuroner give vedvarende aktivitet i spor periode, hvilket giver en struktur, der kan opretholde hukommelsen under spor intervallet 17.
Ved at undersøge den rolle, mPFC er det muligt at undersøge den tid linje af molekylære begivenheder i dannelse af en associativ hukommelse. Runyan m.fl. 16. Fandt, at hæmme den ekstracellulære signal-reguleret kinase (ERK) i mPFC forstyrret hukommelse opbevaring, men ikke forstyrre hukommelse kodning. Endvidere vil en stigning i phosphorylated ERK i den præfrontale cortex blev rapporteret tidligere end i hippocampus. Da ERK menes at være involveret i langtidshukommelsen kan mPFC være en kritisk struktur er involveret i opretholdelsen af langtidshukommelsen. Andre undersøgelser kunne undersøge, hvilken rolle andre signalveje i langtidshukommelsen og samspillet mellem mPFC og hippocampus.
En anden brug af spor frygt condition er i at undersøge subtile hippocampus afhængige indlæring og hukommelse ændringer. Genetiske manipulationer, der reducerer GABAergic hæmning forbedre spor condition uden at ændre forsinkelse frygt condition. En anden undersøgelse viste, at spor frygt conditioning blev forbedret kun i hunmus, som manglede den GABAA δ subunit 9. En separat undersøgelse viste, at spor frygt condition er forbedret i mus, der mangler GABAA α4 22. Derfor spore frygt condition kan være nyttigt at undersøge subtile hippocampus-afhængig indlæring og hukommelse forbedringer or underskud. Trace conditioning kan være følsom nok til at påvise virkningen af neurosteroider på GABAeric aktivitet svarer til, hvad der er fundet ved hjælp af en kontekstuel frygt conditioning protokol 23. Dette kan være en vigtig overvejelse i forbindelse med behandlingen indlæring og hukommelse underskud i en knockout eller transgene mus, hvor der anvendes mandlige og kvindelige mus.
Selv om der er masser af beviser for, at spor frygt condition kan være nyttigt at undersøge, hvilken rolle den mPFC og hippocampus, der er en vis uenighed om, hvorvidt spor frygt condition er amygdala-uafhængig. I en rapport, de udførte en dobbelt dissociation undersøgelse for at undersøge bidraget fra amygdala og hippocampus til at spore og forsinke frygt condition 24. Når de inaktiverede amygdala af GABAA agonist muscimol der var værdiforringelse i kontekstuelle og forsinkelse condition uden at forstyrre erhvervelse eller konsolidering af spor frygt condition. Inaktivering af the dorsal hippocampus forringet spor condition og kontekstuelle hukommelse uden at forringe forsinkelse frygt condition. Selvom disse resultater støtter, at spor frygt condition kræver ikke amygdala har andre undersøgelser fundet modstridende resultater 25-27. Kwapis et al. 25. fandt, at konsolidering af forsinkelse og spore frygt condition er forstyrret af infusion af proteinsynteseinhibitoren anisomysin i den basolaterale amygdala. Selvom disse papirer synes at modsige hinanden er der flere proceduremæssige forskelle, der skal tages i betragtning, når du udfører spor frygt condition.
Ved behandlingen spor frygt condition er det vigtigt at overveje en række eksperimentelle parametre. Den ene er den type dyr til brug i denne type af associative condition. Undersøgelsen fra Kwapis et al. 25 anvendte rotter og Raybuck og Lattal 24 undersøgelse anvendte mus, så derkan være artsforskelle i neurocircuitry der ligger til grund spor frygt condition. Beskrevet i dette dokument protokollen er beregnet til mus. Denne protokol kan bruges til rotter eller andre arter, men valideringsundersøgelser, der bruger en dobbelt dissociation eksperimentelle design at inaktivere amygdala og hippocampus skal udføres for at afgøre gyldigheden i andre dyr.
En anden overvejelse er antallet af spor condition forsøg i den træningsdag. Det kan være, at flere eller færre conditioning forsøg kan påvirke hvilke neurale strukturer rekrutteres i spor frygt condition. I denne protokol blev brugt fem conditioning forsøg. Hvis der tilføjes yderligere condition forsøg så der kunne være ekstra aktivering af andre neurale strukturer, der bliver rekrutteret med yderligere fodboldmesterskaber. Desuden kan spor periode forlænges eller afkortes, hvis antallet af parringer skal ændres. Der er imidlertid tegn på, at Short sporstoffer intervaller ikke engagere hippocampus og kan producere resultater, der ligner forsinke frygt condition, som ikke har nogen intervallet mellem præsentationen af CS og USA. Derfor et spor interval der spænder fra 15-20 sek er blevet rapporteret i flere undersøgelser at engagere hippocampus. En anden ændring kunne være styrken af ubetinget stimulus. I den protokol, der præsenteres her chokket var sat til 0,5 mA. Hvis der er behov for yderligere bindinger chok niveauet kunne sænkes til 0,3 mA. Hvis der er behov færre stød, så chok niveau kunne sættes til 0,7 mA. En højere chok niveau end 0,7 mA bør undgås.
Når du udfører valideringsundersøgelser for hippocampus-afhængig spor condition en overvejelse er, når den neurale struktur er inaktiveret. Det har vist sig, at alternative kredsløb kan anvendes i kontekstuel frygt condition, der ikke udnytter hippocampus, når det er inaktiveret før træning. Derfor timingen af inaktivering af different neurale strukturer under trace condition er en vigtig overvejelse.
En anden vigtig overvejelse for frygt conditioning eksperimenter er basisniveauet. Basisniveauet er vigtigt at rapportere, da mange undersøgelser trække baseline niveauer fra niveauerne af frost under tone præsentationen 32 eller trække de grundlæggende niveauer fra det inter-retssagen interval 33. Disse manipulationer har den underliggende antagelse, at de grundlæggende niveauer er de samme på tværs af grupper. Imidlertid er der rapporteret en positiv sammenhæng mellem baseline frygt niveauer og tone frygt niveauer 34. Papiret af Jacobs et al. 34. beskriver flere strategier for at reducere baseline niveauer, og hvordan at redegøre for baseline niveauer under frygt condition. Disse er vigtige overvejelser, når anvendelse af forholdet metode frysning i tone condition i forhold til baseline-niveauer ved hjælp af subtraktion metode, eller ved brug af the baseline kovariat metode til at tage højde for forskelle i baseline-niveau.
Når først oprettelse frygt condition, en anden vigtig kontrol er brugen af en uparret kontrolgruppe. Den uparrede kontrolgruppe kan bestå af en forsøgsopstilling, hvor der er tilfældige intervaller mellem præsentationen af CS og USA. En anden tilgang kan være, hvor CS og USA præsenteres på forskellige dage 29. Den uparrede kontrolgruppe er nyttigt at bestemme nonassociative effekter såsom sensibilisering nyhed stress, pseudoconditioning og andre faktorer, der kan bidrage til frysning adfærd. Smith et al. 29, beskriver anvendelsen af forskellige typer af sporstoffer fear conditioning protokoller, og hvordan de kan optimeres for at reducere nonassociative virkninger i tre forskellige stammer af mus. Disse er vigtige overvejelser, når optimering af frygt condition i mus.
Trace frygt condition tilbyder Several fordele, der kan supplere resultaterne i forsinkelse frygt condition og rumlig læring. Dog skal man være opmærksom på, at valget af gnaver, antal af spor condition forsøg og timing af kredsløb manipulation væsentligt kan ændre udfaldet og fortolkningen af resultaterne. En anden begrænsning er, at det er kontroversiel, om spor frygt conditioning kan anvendes til at undersøge amygdala-afhængig indlæring. Dette kan være en begrænsning, når først at undersøge effekten af en behandling eller en knockout dyr. Med hensyn til strategi ville det være bedst at først bruge en forsinkelse frygtede condition-protokol, der kan undersøge amygdala-afhængige indlæring og hukommelse og kontekstuel-condition, som er hippocampus-afhængig. Man kan derefter bruge en anden kohorte af emner til yderligere at undersøge indlæring og hukommelse forskelle i spor frygt condition.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde er støttet af en bevilling Baylor University Forskningsråd og fra en forskningsbevilling fra Epilepsi Foundation.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| FreezeFrame | Coulbourn | ||
| 30% Isopropanol | Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30% | ||
| 70% Ethanol | |||
| Amp-meter | Med-Associates | ENV-420 | Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only) |
| Digital Sound Level Meter | 33-2055 | ||
| Vanilla Extract | McCormick Pure Vanilla Extract | ||
| Sticky Notes | Post-it | 3 in x 3 in |
References
- Powell, R. A., Honey, P. L., Symbaluk, D. G. Introduction to learning and behavior. , 4th ed, Wadsworth Cengage Learning. Forthcoming.
- Tsaltas, E., Preston, G. C., Gray, J. A. The effects of dorsal bundle lesions on serial and trace conditioning. Behav. Brain Res. 10, 361-374 (1983).
- McAlonan, G. M., Dawson, G. R., Wilkinson, L. O., Robbins, T. W., Everitt, B. J. The effects of AMPA-induced lesions of the medial septum and vertical limb nucleus of the diagonal band of Broca on spatial delayed non-matching to sample and spatial learning in the water maze. Eur. J. Neurosci. 7, 1034-1049 (1995).
- Chowdhury, N., Quinn, J. J., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus involvement in trace fear conditioning with long, but not short, trace intervals in mice. Behav. Neurosci. 119, 1396-1402 (2005).
- Quinn, J. J., Oommen, S. S., Morrison, G. E., Fanselow, M. S. Post-training excitotoxic lesions of the dorsal hippocampus attenuate forward trace, backward trace, and delay fear conditioning in a temporally specific manner. Hippocampus. 12, 495-504 (2002).
- Misane, I., et al. Time-dependent involvement of the dorsal hippocampus in trace fear conditioning in mice. Hippocampus. 15, 418-426 (2005).
- Quinn, J. J., Loya, F., Ma, Q. D., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus NMDA receptors differentially mediate trace and contextual fear conditioning. Hippocampus. 15, 665-674 (2005).
- McEchron, M. D., Bouwmeester, H., Tseng, W., Weiss, C., Disterhoft, J. F. Hippocampectomy disrupts auditory trace fear conditioning and contextual fear conditioning in the rat. Hippocampus. 8, 638-646 (1998).
- Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Ferguson, C., Homanics, G. E., Fanselow, M. S. Trace fear conditioning is enhanced in mice lacking the delta subunit of the GABAA receptor. Learn. Mem. 12, 327-333 (2005).
- Davis, R. R., et al. Genetic basis for susceptibility to noise-induced hearing loss in mice. Hear. Res. 155, 82-90 (2001).
- Zheng, Q. Y., Johnson, K. R., Erway, L. C. Assessment of hearing in 80 inbred strains of mice by ABR threshold analyses. Hear. Res. 130, 94-107 (1999).
- Moyer, J. R., Thompson, L. T., Disterhoft, J. F. Trace eyeblink conditioning increases CA1 excitability in a transient and learning-specific manner. 16, 5536-5546 (1996).
- Leuner, B., Falduto, J., Shors, T. J. Associative memory formation increases the observation of dendritic spines in the hippocampus. J. Neurosci. 23, 659-665 (2003).
- McEchron, M. D., Disterhoft, J. F. Hippocampal encoding of non-spatial trace conditioning. Hippocampus. 9, 385-396 (1999).
- McLaughlin, J., Skaggs, H., Churchwell, J., Powell, D. A. Medial prefrontal cortex and pavlovian conditioning: trace versus delay conditioning. Behav. Neurosci. 116, 37-47 (2002).
- Runyan, J. D., Moore, A. N., Dash, P. K. A role for prefrontal cortex in memory storage for trace fear conditioning. J. Neurosci. 24, 1288-1295 (2004).
- Gilmartin, M. R., McEchron, M. D. Single neurons in the medial prefrontal cortex of the rat exhibit tonic and phasic coding during trace fear conditioning. Behav. Neurosci. 119, 1496-1510 (2005).
- Crow, T., Xue-Bian, J. J., Siddiqi, V., Kang, Y., Neary, J. T. Phosphorylation of mitogen-activated protein kinase by one-trial and multi-trial classical conditioning. J. Neurosci. 18, 3480-3487 (1998).
- Martin, K. C., et al. MAP kinase translocates into the nucleus of the presynaptic cell and is required for long-term facilitation in Aplysia. Neuron. 18, 899-912 (1997).
- Crestani, F., et al. Trace fear conditioning involves hippocampal alpha5 GABA(A) receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 8980-8985 (2002).
- Crestani, F., et al. Decreased GABAA-receptor clustering results in enhanced anxiety and a bias for threat cues. Nat. Neurosci. 2, 833-839 (1999).
- Moore, M. D., et al. Trace and contextual fear conditioning is enhanced in mice lacking the alpha4 subunit of the GABA(A) receptor. Neurobiol. Learn. Mem. 93, 383-387 (2010).
- Cushman, J. D., Moore, M. D., Jacobs, N. S., Olsen, R. W., Fanselow, M. S. Behavioral pharmacogenetic analysis on the role of the alpha4 GABA(A) receptor subunit in the ethanol-mediated impairment of hippocampus-dependent contextual learning. Alcohol Clin. Exp. Res. 35, 1948-1959 (2011).
- Raybuck, J. D., Lattal, K. M. Double dissociation of amygdala and hippocampal contributions to trace and delay fear conditioning. PLoS ONE. 6, (2011).
- Kwapis, J. L., Jarome, T. J., Schiff, J. C., Helmstetter, F. J. Memory consolidation in both trace and delay fear conditioning is disrupted by intra-amygdala infusion of the protein synthesis inhibitor anisomycin. Learn. Mem. 18, 728-732 (2011).
- Gilmartin, M. R., Kwapis, J. L., Helmstetter, F. J. Trace and contextual fear conditioning are impaired following unilateral microinjection of muscimol in the ventral hippocampus or amygdala, but not the medial prefrontal cortex. Neurobiol. Learn. Mem. 97, 452-464 (2012).
- Baysinger, A. N., Kent, B. A., Brown, T. H. Muscarinic receptors in amygdala control trace fear conditioning. PLoS ONE. 7, (2012).
- Wanisch, K., Tang, J., Mederer, A., Wotjak, C. T. Trace fear conditioning depends on NMDA receptor activation and protein synthesis within the dorsal hippocampus of mice. Behav. Brain. 157, 63-69 (2005).
- Smith, D. R., Gallagher, M., Stanton, M. E. Genetic background differences and nonassociative effects in mouse trace fear conditioning. Learn. Mem. 14, 597-605 (2007).
- Rudy, J. W., O'Reilly, R. C. Contextual fear conditioning, conjunctive representations, pattern completion, and the hippocampus. Behav. Neurosci. 113, 867-880 (1999).
- Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Anagnostaras, S. G., Sage, J. R., Fanselow, M. S. Context fear learning in the absence of the hippocampus. J. Neurosci. 26, 5484-5491 (2006).
- Reijmers, L. G., Perkins, B. L., Matsuo, N., Mayford, M. Localization of a stable neural correlate of associative memory. Science. 317, 1230-1233 (2007).
- Huerta, P. T., Sun, L. D., Wilson, M. A., Tonegawa, S. Formation of temporal memory requires NMDA receptors within CA1 pyramidal neurons. Neuron. 25, 473-480 (2000).
- Jacobs, N. S., Cushman, J. D., Fanselow, M. S. The accurate measurement of fear memory in Pavlovian conditioning: Resolving the baseline issue. J. Neurosci. Methods. 190, 235-239 (2010).
