Summary
脑电图亩节奏评估为研究大脑活动的唯一方法，当与基于行为的检测相结合，可以是一个强大的工具，阐明社会认知方面，如模仿，在临床人群。
Abstract
脑电图（EEG）是评估和记录大脑活动的有效，高效，无创方法。鉴于良好的时间分辨率，脑电图可以用来检查与特定的行为，状态或外界刺激的神经反应。该实用程序的一个例子是镜像神经元系统（MNS）在人类通过脑电图亩节奏的检查评估。脑电图亩的节奏，从位于市中心的电极记录在8-12赫兹的频率范围内振动的活性，抑制当一个人执行时，或者干脆指出，目标导向行动。因此，已经提出，以反映MNS的活性。据推测，在镜像神经元系统（MNS）功能障碍中起着自闭症谱系障碍（ASD）的社会赤字贡献作用。该MNS然后可以通过使用脑电图亩节奏衰减为指标，对其活动进行无创检查在临床人群。所描述的普罗特OCOL提供了一个途径是观察社会的认知功能与典型的和非典型的发展，如房间隔缺损的个体理论上链接到MNS。
Introduction
脑电图（EEG）是评估和记录大脑活动的有效，高效，无创方法。作为神经元激发在大脑中，所产生的电压可以被放大，记录，并以图形方式表示。脑电图的时间分辨率允许在大脑的振荡模式，即使短暂的变化，以及大脑的响应特定刺激的分析的分析。
尽管是历史最悠久的大脑成像技术，其历史可以追溯到19 世纪后期，脑电图仍具有广泛的适用性。而功能性磁共振成像（fMRI）具有优良的空间分辨率，它具有相对较差的时间分辨率。这代表了功能磁共振成像评估的主要限制给出的令人难以置信的速度，发生在大脑的进程。脑电图有毫秒级评估电气大脑活动的能力，提供了潜在的Insight入脑的处理的各个阶段。
日新月异的技术也扩大了脑电图的适用性。在记录系统的密度的增加使得对源定位技术的发展，减轻对于空间分辨率的一些脑电图的局限性。另外，先进的系统已经减少了单个参与者建立时间显著，允许以前没有的人群，如婴幼儿及临床样品1-3,28-30的评估。
鉴于良好的时间分辨率，脑电图可以用来检查与特定的行为，状态或外界刺激的神经反应。该实用程序的一个例子是镜像神经元系统（MNS）在人体中的评估。镜像神经元最初在猴子身上发现使用单神经元记录4，证明一组神经元的反应既执行和观察电机动作。将电极在大脑中的这种直接记录方法，在人类中，只有在恶劣的临床病例中很少使用。脑电图已经提供了一种通过监测脑电图亩节奏评估MNS。在8-12赫兹范围该振荡模式已显示出减弱的EEG功率响应于执行和观察马达的动作，类似于在猴子5-7中观察到的激活模式。同样，通过经颅磁刺激（ 如额下回）刺激假定MNS脑区的脑电废除节奏万亩和8万亩脑电节律抑制与相关脑功能成像的科目9中公认的镜像神经元区域BOLD信号，提供额外的支持，这节奏索引，至少部分地，MNS活性。脑电图亩节奏评估允许的镜像神经元作为的无创性评估ivity在人。
脑电图为研究大脑活动的唯一方法，当与基于行为的检测相结合，它可以是一个强大的工具，阐明社会认知方面，如模仿，在临床人群。此外，脑电图与人群的认知或语言障碍使用的适用性允许洞察个人对他们来说，其他成像技术或行为范式可能不太成功运用的能力。所描述的协议提供了一个途径，研究社会认知功能理论上链接到镜像神经元系统中具有典型和非典型的发展，如自闭症的人。
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Protocol
以下协议坚持华盛顿大学机构审查委员会的指导方针。
1，电生理评估
- 会议的制备
- 机房准备：地方manipulandum（ 见图1），附带一个传感器，它发送一个带有时间戳标记采集软件，当它被抓住，在表中抓参与者接触木块。激活脑电信号采集软件，并开始“新的会话”（ 图S1）。
- 扣除准备：蒸馏水（1升），氯化钾（1汤匙），和婴儿洗发精（1茶匙）至104°F。温暖的解决方案泡128 - 电极致密阵列EEG系统中的温热生理盐水溶液。
- 参与者准备：确保参与者坐在舒适的大约75厘米的刺激呈现的显示器，充分考虑到视频凸轮时代。找到并用皮肤标记标记对参与者的头部顶点。通过寻找鼻根和INION和preauriculars之间的中点之间的中点的交点测量顶点。
- Net应用程序：放置于参与者的头部脑电帽使得顶点电极直接放置在顶点标记。检查的阻抗，并确保阻抗低于阈值适合该脑电系统中使用（ 图S2）。
- 开始偷拍会话。
- 录像设置：参考信号发送到顶点电极。介于0.1和100赫兹的模拟滤波，放大的信号，并进行数字化，在500采样/秒。
- 刺激呈现：目前参与者有3个条件：遵守，执行和休息，改编自Muthukumaraswamy和他的同事5开发的典范。
- 观察条件：指导学员静静地坐着看一个人抓manipulandum的视频。每次试验应持续6秒。时间的观察试验的预先录制的视频精确，以确保所观察到的把握发生在刚好3秒。任务期间，监测参与者的视觉注意力，并注明试验期间，他们不参加到后期处理过程中被丢弃的画面。
- 执行情况：指导参加者静静地右手搭略低于manipulandum坐着，一听到预先录制的听觉线索，从观察条件的视频剪辑模仿manipulandum抢。每次试验应持续6秒。确保听觉线索是通过预录的听觉轨道，它维护提出了在恰好3秒的一贯定时执行线索和试验间隔。利用上manipulandum传感器来精确记录了参与者的把握出现的时间（ 图三 ）。
- 其余条件：指示参与者坐在奎TLY眼睛睁开，被动地观察一个小十字刺激监视器上。其余条件，3分钟内连续记录脑电图。
- 对于这两种观察和执行条件的10本试验中随机块，总共每状态40的试验。确保manipulandum的形象保留在屏幕上整个观察和执行模块，包括试验间。管理其余条件在完成观察和执行情况。
- 数据处理
- 下面的数据收集，复检阻抗。注意：任何更改阻抗水平。结束采集软件记录。
- 后处理：Rereference脑电信号的平均水平。段不间断的脑电数据转换成40 6秒试验的每个条件（ 图S4）。
- 进行自动检测的神器。使用自动算法通过识别速度快平均振幅exceedin检查为移动文物分类克200μV，差分幅度平均超过100μV，并在给定的试验（ 图五 ）方差为零。
- 通过视觉检查数据，并与该会话的视频审查确认删除所有试验中沾染任何运动伪影和所有试验中沾染任何运动伪影无关的姿态把握执行条件的观测条件进行手动失真检测。排除试验与分析显著神器。放弃收购过程中被标记为未参加任何审判。检查并注意审判拒绝根据分析各组的诊断率。
- 数据分析
- 每Muthukumaraswamy 等 5段清洗试验分为2秒时代由1秒的数据的把握和1秒后同时为观察（如标注由光电）和执行（如标注由manipulandum传感器）的条件之前。段c俯身从休息状态2秒时代。
- 快速傅立叶变换（FFT）的每个片段。选择对周围的标准C3和C4的位置进行统计分析（以下Muthukumaraswamy 等 5每个半球的八个电极集群和 尼尔等人 3）（ 图2）。对于每个条件，横跨纳入试验的平均功率来计算功率谱。
- 通过一个马达动作或执行或观察，相对于所述平均功率的静止状态时，跨越8-13赫兹范围内检查平均功率计算亩衰减。使用此比例的对数来确定的衰减程度。注：负值表示执行或观察过程中的衰减，而正值表示增大。此方法考虑到可变性不同的个体，和非正常表达形式的比例值。<BR />注：该协议是使用128电极密集阵脑电图系统，网络站软件4.1版开发的。而基本步骤是横跨脑电图系统类似，采集和分析的协议可以变化。
2，样品表征
- 通过研究登记，以前的参与者列表，或者从所在地区的诊所和医生转介找出潜在的患者群体参与的范式。
- 为满足诊断标准的临床结构（ 如自闭症），并识别任何排斥性标准，如头部外伤，肿瘤，癫痫发作史，或使用抗惊厥或巴比妥类药物可能会扭曲的存在可能性屏幕潜在参与者的电生理信号。
- 通过使用金标准诊断仪器（ 如孤独症诊断访谈，重新确认患者人群的诊断状态vised（ADI-R 11）和自闭症诊断观察量表-通用（ADOS-G 12）经管专家医生下诊断和统计手册- 第 5版（DSM-5）标准13。
- 找出匹配的利益相关变量，如年龄，性别，认知能力等控件示例
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Representative Results
典型成人，儿童和婴幼儿的范式既执行和观察的行为在各种刺激和5，14-30期间一贯表现亩节奏。衰减在该频段频率一致本地化跨越中央电极（ 图3），表明这不是减少它被记录在其他的头皮区域阿尔法权力。类似地，在观察运动的衰减在这个频率被限制到观察的基于生物学的运动和抑制的是不是简单地从运动引起穿过视场，如弹跳球（ 图4）。亩抑制响应于一个事件，例如一个目标的执行或观察定向握持动作，被证明在频谱功率的降低，之后返回到基线水平（ 图5）。
已经有八个独立的研究和脑电图亩节奏和社会认知的ASD人口的汇总分析。而抑制亩于两个观察和执行行动的结果已经在正常发育的个人不断观察，对于万亩节奏在房间隔缺损的研究结果已经变量。脑电图亩节奏的初步研究31个人相比，自闭症的6-46岁的年龄到年龄和性别之间的匹配的对照组。该ASD组只在动作的执行，而不是在观察证实亩衰减。同样的模式被复制在成年男性患有ASD相比，一组年龄和智商匹配典型的同龄人，在这组万亩衰减的程度显著相关模仿能力3。同样，第三项研究未能发现人类执行的动作在5-7岁自闭症儿童在观看期间亩抑制，但在年龄和性别MATC做HED典型的同龄人32。第二项研究由奥伯曼等人 33，发现典型亩抑制13 8-12岁自闭症儿童在观察所熟悉的人（母亲）的行动显示样品中，但不是在观测所不熟悉的执行的动作人33。三项研究都未能找到与ASD组和对照组个体之间亩抑制组的差异。在观察的人的手进行操作，8-13岁的自闭症儿童，年龄和智商匹配的正常发育儿童，34或11-26岁的人有房间隔缺损和年龄，性别之间被发现亩衰减无明显差异，与智商匹配的同龄人35。
最后，贝尼尔和他的同事36发现自闭症儿童没有差异，在观察果阿符合黄金标准的诊断标准，年龄和性别匹配的同龄人上万亩衰减升执导的行动，但没有发现脑电图亩节奏和行为评估的模仿能力之间有显著关系。这表明，已观察到的EEG亩衰减的差异可能反映了模仿能力上的差异，而不是房间隔缺损36的直接结果。
这些实验表明，检查脑电图亩节奏是一个可行的工具，阐明在典型和临床人口与社会认知机制。
图1。Manipulandum。为了准确地检查一个目标导向的把握的观测和执行，参与者将被要求执行manipulandum简单的手抓住或观察模型抓manipulandum。当manipulandum被抓住，一时间锁定信号被发送到数据采集计算机后，脱机每次试验的分段。
图2。密集电极帽引线选择捕捉亩节奏的活动。
图3。衰减亩节奏的特征形貌为同时观察目标证明个体与典型的发展（雄性，年龄9.2年）定向握持动作。穆节奏衰减是反映在头皮地形如过位于中心电极减小幅度。
。在生物运动和非生物运动的11名儿童的观察图4光谱功率（平均年龄10.8年（范围= 8-15年;男3例，女8例）中的穆频率平均光谱功率（8-13赫兹）在观察生物运动（动画舞蹈家）从位于中心的电极记录的衰减相对于基线而亩电源没有在观察非生物的运动（动画球）的衰减。日志功率之比（微伏2的变换）为每个条件超过基线指示生物的运行状况通过更负功率值较大功率的降低。
图5。事件再lated光谱功率衰减。穆功率（从中央线索8-13赫兹）的执行（超过20的把握试验平均功率）和观察过程中衰减相对于基线的正常发育6岁的动作（平均功率超过30个观察试验）男性。
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Discussion
成功收购，加工和分析相关的万亩节奏和应用临床人群电数据需要1个）的脑电图方法工具的应用，2）仔细神器检测和数据还原，3）准确识别亩节奏，和4）的临床群体以及确定适当的对照组的准确表征。
适当的脑电图方法需要正常运作和集成设备，适当帽的选择和布局，信号的精确放大和时序，明确，畅通，无失真的信号，适当参考的信号，适当分段（如果事件相关）的试验，仔细计算出的功率转换，注意刺激，并且，当然，一个范式，即引起被调查的认知能力的刺激。
14中检查虽可清楚地，可靠地显示出与事件相关的分析过程中17,37。由于小信号的信噪比，神器可以在光谱功率在这种节奏轻松晦涩的变化。因此，细心的神器检测通过自动化的程序或有助于电极数据的人工调查是必要的万亩节奏的识别。在工件的量组之间的任何差异观察到的和删除必须被记录，以确保观察到组间差异并不如数据或伪像的伪像移除过程的结果。最后的脑电数据样本，在事件相关的案例分析，如在本协议中所述，必须包含神器免费试用和试验的足够数量的准确捕捉衰减的程度，或缺乏，对于一个给定的条件。
发展考虑是神经生理学的工作很重要。与mu节律的衰减已将8个月股份公司的记录，响应于所述观测的个体目标定向的动作e来成年28-29,38。重要的是，虽然本，衰减在婴儿期和儿童期观察到的程度比在成年人39-40注意到小得多。这种模式强调了在考虑对神经发育节律的影响和对发展水平相匹配对照人群为实验组的重要性。
最后，要进行这项工作在临床人群，临床人口的仔细评估是必要的，以确保组充分界定。的包容性和排他性的标准，为临床和对照组需要描述清楚，并仔细考虑。例如，使用金标准诊断仪器是建立必要的临床人群。如果没有一个明确的诊断协议，为异构临床人群，所研究的认知结构可能会有所不同千差万别内的松散定义的临床组。 TIGHT，诊断定义，减少的可能性。如果临床样本的某些亚群被排除在外，需要加以确定，因为它影响的研究结果的普遍性的。例如，在个人与ASD的研究癫痫的排除有助于清洁，可以从与包容共患癫痫个人被遮蔽的脑电信号，这种变化的结果的普遍性给予癫痫发作的高患病率与个人房间隔缺损。
上述协议提供了一个途径来检查镜像神经元系统在一个非侵入性的方式临床人群的脑电指标。它需要很少的交际能力，从而允许应用程序障人士，是无创性，易于应用，并提供了出色的分辨率，以了解有关社会认知的能力结构。
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Disclosures
作者宣称没有竞争的财务权益。
Acknowledgments
这项工作是由西蒙斯基金会（SFARI＃89638到RB）的资助。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Geodesic EEG System | EGI | N/A | Any EEG system, not only EGI based systems, is applicable for the described study |
| MATLAB software | MATLAB | N/A | Any mathematical, statistical software that can work with matrices is applicable |
| Netstation software | EGI | N/A | Any EEG acquisition software is applicable for the described study |
| Manipulandum | custom | N/A | Any object that is coregistered with data acquisition software to signal a successful grasp |
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