Inducing Myointimal Hyperplasi Versus Åreforkalkning i Mus: En introduksjon av to gyldige modeller

Summary

Denne videoen viser to modeller av intimal plakk utvikling i murine arterier og understreker forskjellene i myointimal hyperplasi og åreforkalkning.

Abstract

Forskjellige in vivo-gnagerlaboratoriemodeller for induksjon av arteriestenose er blitt etablert for å etterligne sykdommer som inkluderer arteriell plaque dannelse og stenose, som observert for eksempel ischemisk hjertesykdom. To svært reproduserbare musemodeller – både som resulterer i arteriestenose men hver underliggende en annen vei for utvikling – er innført her. Modellene representerer de to vanligste årsakene til nyrearteriestenose; nemlig en musemodell for hver myointimal hyperplasia, og aterosklerose er vist. Å indusere myointimal hyperplasi, er et ballongkateter skade av abdominal aorta utført. For utviklingen av aterosklerotisk plakk, til ApoE – / – er musemodellen i kombinasjon med western fet diett anvendes. Ulike modelltilpassede alternativer for måling og evaluering av resultatene er navngitt og beskrevet i dette manuskriptet. Innføringen og sammenligning av disse to modellene gir information for forskere å velge riktig arteriestenose modell i henhold til den vitenskapelige spørsmål spurt.

Introduction

I industrialiserte land iskemisk hjertesykdom er fortsatt en ledende dødsårsak ^en. Årsakene til koronar stenose er mangfoldige og omfatter myointimal hyperplasia samt aterosklerose, med revaskularisering rester den vanligste behandlingsstrategi ^to. Forskningsmodeller som klart skiller mellom de mekanistiske veier av intimal hyperplasi og aterosklerose er viktig å undersøke pathobiological og patofysiologiske prosesser i arteriell plakk utvikling. I denne video to forskjellige musemodeller som brukes til å studere enten utvikling av myointimal hyperplasia, eller aterosklerose er innført.

Myointimal hyperplasia er postulert å danne via "respons-til-skade" paradigme opprinnelig beskrevet for aterosklerose ^tre. Den mekaniske forstyrrelse av endoteliale sjikt fører til en intens ombygging forsterket av parakrine effekter. Det er flere different dyremodeller som vanligvis brukes til å studere myointimal hyperplasia. Noen grupper bruker metall enheter i stigende aorta av rotter ^fire. Den aorta denudation modellen utføres med et ballongkateter blir også ofte brukt i laboratorierotter ^5,6. Den intimal hyperplasia modell utført i laboratoriet mus ⁷ implementerer ligation av halspulsåren og induserer myointimal lesjoner ^åtte. I vårt laboratorium, abdominal aorta-modell denudation – for å studere utviklingen av myointimal hyperplasia – så vel som et humanisert stent restenosis modell ⁹ blir ofte brukt. Denne videoen understreker at det å velge riktig eksperimentell dyremodell er avgjørende for mekanistiske eller pathophysiologic studier av arteriell stenose.

Myointimal hyperplasi modeller må skilles fra aterosklerose modeller. For sistnevnte, apolipoprotein E-mangel (ApoE – / -) er mus i kombinasjon med vestlig kosthold som vanligvis brukes til å indusere atherosclerotiske lesjoner ^10,11,12,13. Eksempler for induksjon av begge disse typer av myointimal sykdom hos mus er vist her, sammen med forskjellige modell innrettet muligheter for å analysere fartøy stenose ^14..

Protocol

Alle dyr arbeid skal utføres i henhold til gjeldende retningslinjer dyr omsorg. Skaff institusjonell godkjenning for dyr arbeid før begynnelsen protokollen. En. Myointimal Hyperplasi Modell (A) For intimal hyperplasia modell, kjøpe C57BL/6J (Stock nummer 000664, C57BL/6J) mus i en alder av 8 uker som veier ca 25 g. Hus mus for disse eksperimentene henhold konvensjonelle forhold; mate mus standard mus chow og gi vann ad libitum. …

Representative Results

Figur 1 viser ulike analysemuligheter og den induserte sykdomstilstand for begge modellene. For intimal hyperplasia modell, er analysen av representative tverrsnitt i Trikrom farging vist. Fra disse tverrsnitt, kan resultatene som I / M-forhold, maksimal plakktykkelse, maksimal intimal tykkelse i lumen, luminal utslettelse i prosent, samt plakkområdet måles og beregnes. For å vurdere resultatet av aterosklerose modell, kan alle metoder som er nevnt ovenfor brukes. I tille…

Discussion

Selv om begge sykdommene gi lignende symptomer hos pasienten, de underliggende mekanismene for plakk utvikling og dermed de behandlingsmetoder er svært forskjellige ^to. I forskjellige former av arteriell stenose de kliniske funn i pasienter så vel som den tidslengde for utvikling av plaque, avhenger av den underliggende mekanisme.

Avhengig av de kliniske funn hos pasienten, må ulike fremgangsmåter for analyse av prøver utføres ^5,15. Det er nødvendig å tilpasse a…

Materials

Name	Company	Catalog number	Comments
Thyoglycollate Broth 3%	Fluka	70157	powder
PFA 4%	Electron Microscopy Sciences	#157135S	20%
Sudan III staining solution	Sigma Aldrich	S4131	powder
mouse C57BL/6J	Jackson Laboratories	Stock # 0006664
mouse ApoE-/-	Jackson Laboratories	Stock #002052
Western Diet	Harlan Laboratories	TD.88137
hair clipper	WAHL	8786-451A ARCO SE
Forene	Abbott		Isoflurane
microsurgical clamp	Fine Science Tools	18055-04	Micro-Serrefine – 4mm
clamp applicator	Fine Science Tools	18056-14
catheter
10-0 prolene suture	Ethicon	788G
6-0 prolene suture	Ethicon	8709H
5-0 prolene suture	Ethicon	EH7229H
Rimadyl	Pfizer		Carprofen
Metacam 1.5mg/ml	Boehringer Ingelheim		Metamizol