Induzir miointimais Hiperplasia Versus aterosclerose em camundongos: uma introdução de dois modelos válidos

Summary

Este vídeo mostra dois modelos de desenvolvimento íntima placas nas artérias murino e enfatiza as diferenças de hiperplasia miointimal e aterosclerose.

Abstract

Vários modelos in vivo de roedores de laboratório para a indução de estenose da artéria foram estabelecidas para imitar as doenças que incluem a formação de placa arterial e estenose, como se observa, por exemplo, na doença cardíaca isquémica. Dois modelos do rato altamente reprodutíveis – ambos, resultando em estenose da artéria mas cada subjacentes um caminho diferente de desenvolvimento – são introduzidos aqui. Os modelos representam as duas causas mais comuns de estenose da artéria; ou seja, um modelo de mouse para cada hiperplasia miointimal e aterosclerose são mostrados. Para induzir hiperplasia miointimal, uma lesão por cateter balão da aorta abdominal é realizada. Para o desenvolvimento da placa aterosclerótica, a ApoE – / – modelo do rato, em combinação com dieta gordurosa ocidental é usado. Diferentes opções de adaptação do modelo para a medição e avaliação dos resultados são nomeados e descritos neste manuscrito. A introdução ea comparação destes dois modelos fornece informatíon para os cientistas a escolher o modelo de estenose da artéria apropriada de acordo com a questão científica perguntou.

Introduction

Em nações industrializadas doença isquêmica do coração continua a ser uma das principais causas de mortalidade ^1. As causas para a estenose da artéria coronária são múltiplas e incluem hiperplasia miointimal bem como aterosclerose, com revascularização restante da estratégia de tratamento mais comum ^2. Modelos de pesquisa que distinguem claramente entre os caminhos mecanicistas da hiperplasia da íntima e aterosclerose são essenciais para investigar o patobiológico e processos fisiopatológicos no desenvolvimento da placa arterial. Neste vídeo de dois diferentes modelos de ratinho utilizada para estudar o desenvolvimento quer de hiperplasia miointimal ou aterosclerose são introduzidos.

Hiperplasia miointimais é postulada para formar através do paradigma "resposta-a-lesão", originalmente descrito para a aterosclerose ^3. A ruptura mecânica da camada endotelial leva a uma remodelação intensa reforçada por efeitos parácrinos. Existem vários dimodelos animais fferent comummente usados ​​para estudar a hiperplasia miointimal. Alguns grupos de utilizar dispositivos de metal na aorta ascendente de ⁴ ratos. O modelo desnudamento aórtica realizada com um cateter de balão também é comumente usado em ratos de laboratório ^5,6. O modelo de hiperplasia da íntima realizada em ratos de laboratório ⁷ implementa ligadura da artéria carótida e induz lesões miointimais ^8. No nosso laboratório, o modelo de desnudação da aorta abdominal – para estudar o desenvolvimento de hiperplasia miointimal -, bem como um modelo humanizado stent ⁹ são vulgarmente utilizados. Este vídeo enfatiza que a escolha do modelo animal experimental adequado é crucial para estudos sobre os mecanismos fisiopatológicos ou de estenose arterial.

Modelos hiperplasia miointimais deve ser diferenciado de modelos aterosclerose. Para este último, a apolipoproteína E-deficiente (ApoE – / -) ratos em combinação com uma dieta ocidental são comumente usados ​​para induzir atheroscllesões eróticos ^10,11,12,13. Exemplos para a indução de ambos os tipos de doença miointimal em ratinhos são mostradas aqui, juntamente com diferentes opções de adaptação ao modelo para analisar estenose do vaso ^14.

Protocol

Todo o trabalho animal deve ser realizada de acordo com as orientações de cuidados de animais relevantes. Obter a aprovação institucional para o trabalho de animais antes do início do protocolo. 1. Miointimais Hiperplasia Modelo (A) Para o modelo de hiperplasia da íntima, comprar C57BL/6J (da série 000.664, C57BL/6J) ratos com a idade de 8 semanas, pesando aproximadamente 25 g. Os ratos domésticos para estas experiências sob condições co…

Representative Results

A Figura 1 mostra diferentes opções de análise e o estado da doença induzida por ambos os modelos. Para o modelo de hiperplasia da íntima, a análise de secções representativas em tricromo é mostrado. A partir destas secções transversais, como resultado índices I / M, a espessura máxima da placa, da espessura máxima da íntima no lúmen, obliteração luminal em por cento, bem como a área da placa pode ser medido e calculado. Para avaliar os resultados do model…

Discussion

Embora ambas as doenças resultam em sintomas semelhantes no paciente, os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento da placa e, portanto, as abordagens de tratamento são muito diferentes ^2. Em diferentes formas de estenose arterial os achados clínicos nos pacientes, bem como o cronograma de desenvolvimento da placa depende do mecanismo subjacente.

Dependendo do quadro clínico do paciente, diferentes métodos de análise da amostra devem ser realizadas ^5,15. É necess…

Materials

Name	Company	Catalog number	Comments
Thyoglycollate Broth 3%	Fluka	70157	powder
PFA 4%	Electron Microscopy Sciences	#157135S	20%
Sudan III staining solution	Sigma Aldrich	S4131	powder
mouse C57BL/6J	Jackson Laboratories	Stock # 0006664
mouse ApoE-/-	Jackson Laboratories	Stock #002052
Western Diet	Harlan Laboratories	TD.88137
hair clipper	WAHL	8786-451A ARCO SE
Forene	Abbott		Isoflurane
microsurgical clamp	Fine Science Tools	18055-04	Micro-Serrefine – 4mm
clamp applicator	Fine Science Tools	18056-14
catheter
10-0 prolene suture	Ethicon	788G
6-0 prolene suture	Ethicon	8709H
5-0 prolene suture	Ethicon	EH7229H
Rimadyl	Pfizer		Carprofen
Metacam 1.5mg/ml	Boehringer Ingelheim		Metamizol