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Medicine

चूहे में न्यूरोपैथिक दर्द की Sciatic तंत्रिका Cuffing मॉडल

Published: July 16, 2014 doi: 10.3791/51608
Automatic Translation
1, 1,2, 1,2, 1, 1,2, 1,2,3, 1
1Institut des Neurosciences Cellulaires et Intégratives UPR3212, Centre National de la Recherche Scientifique, 2Université de Strasbourg, 3Hôpitaux Universitaires de Strasbourg

Summary

न्यूरोपैथिक दर्द somatosensory प्रणाली को प्रभावित करने के लिए एक घाव या रोग का एक परिणाम है. चूहों में न्यूरोपैथिक दर्द की "कफ मॉडल" sciatic तंत्रिका की मुख्य शाखा के चारों ओर एक पॉलीथीन कफ का आरोपण के होते हैं. यांत्रिक परपीड़ा वॉन फ्रे filaments का उपयोग कर परीक्षण किया है.

Abstract

न्यूरोपैथिक दर्द एक घाव या somatosensory प्रणाली को प्रभावित करने की बीमारी का एक परिणाम के रूप में उठता है. घायल संवेदी न्यूरॉन्स में और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के भीतर पूरे nociceptive मार्ग के साथ maladaptive परिवर्तन से इस सिंड्रोम का परिणाम है. यह आम तौर पर पुरानी है और इलाज के लिए चुनौतीपूर्ण है. न्यूरोपैथिक दर्द और उसके उपचार का अध्ययन करने के लिए, विभिन्न मॉडलों कृन्तकों में विकसित किया गया है. इन मॉडलों को इस प्रकार परिधीय तंत्रिका चोट, केंद्रीय चोटों, और चयापचय, संक्रामक या रसायन चिकित्सा संबंधी न्यूरोपैथी reproducing, ज्ञात etiologies से निकाले जाते हैं. परिधीय तंत्रिका चोट की murine मॉडल अक्सर उपयोग करने के लिए आसान है और हिंद पंजा पर nociceptive परीक्षण की अनुमति देता है जो sciatic तंत्रिका लक्ष्य. इन मॉडलों को एक संपीड़न और / या एक वर्ग पर भरोसा करते हैं. इधर, चूहों में न्यूरोपैथिक दर्द की "कफ मॉडल" के लिए विस्तृत सर्जरी प्रक्रिया में वर्णित है. इस मॉडल में, मानकीकृत लम्बाई (2 मिमी) का पीई 20 पॉलीथीन टयूबिंग की एक कफ एकतरफा मैं हैsciatic तंत्रिका की मुख्य शाखा के आसपास mplanted. यह एक लंबे समय तक चलने वाले यांत्रिक परपीड़ा लाती है यानी., वॉन फ्रे filaments का उपयोग करके मूल्यांकन किया जा सकता है कि एक सामान्य रूप से गैर nociceptive प्रोत्साहन के लिए एक nociceptive प्रतिक्रिया. विस्तृत सर्जरी और परीक्षण प्रक्रियाओं के अलावा, न्यूरोपैथिक दर्द संवेदी और anxiodepressive पहलुओं के अध्ययन के लिए न्यूरोपैथिक दर्द तंत्र,, के अध्ययन के लिए और न्यूरोपैथिक दर्द के उपचार के अध्ययन के लिए इस मॉडल का ब्याज भी चर्चा कर रहे हैं.

Introduction

न्यूरोपैथिक दर्द आम तौर पर पुरानी है और एक घाव या somatosensory प्रणाली को प्रभावित करने की बीमारी का एक परिणाम के रूप में उठता है. केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के भीतर घायल संवेदी न्यूरॉन्स में और पूरे nociceptive मार्ग के साथ maladaptive परिवर्तन इस जटिल सिंड्रोम में भाग लेते हैं. विभिन्न मॉडलों न्यूरोपैथिक दर्द और उसके उपचार 1-3 के अध्ययन के लिए कृन्तकों में विकसित किया गया है.

मधुमेह में मनाया पोलीन्यूरोपैथी, परिधीय नसों, केंद्रीय चोटों, trigeminal नसों, रसायन चिकित्सा, बाद ददहा नसों का दर्द, आदि के लिए लगातार न्यूरोपैथी के घायल होने की नकल उतार पर जाना जाता etiologies, न्यूरोपैथिक दर्द उद्देश्य के मॉडल पर आधारित विभिन्न मॉडलों की कृन्तकों में परिधीय तंत्रिका चोट sciatic तंत्रिका पर ध्यान केंद्रित. इन मॉडलों को एक संपीड़न और / या यह तंत्रिका के एक वर्ग पर निर्भर करते हैं. दरअसल, sciatic तंत्रिका रिश्तेदार आसान सर्जरी परमिट और पंजा वापसी सजगता के आधार पर परीक्षण के लिए अनुमति देता है. मोपुरानी तंत्रिका संपीड़न के dels उदाहरण के लिए शामिल हैं: पुरानी कसना चोट (सीसीआई) 4,5, 6-9 cuffing sciatic तंत्रिका, आंशिक sciatic तंत्रिका बंधाव (पीएसएल) 10, रीढ़ की हड्डी में तंत्रिका बंधाव (एसएनएल) 11, या आम peroneal तंत्रिका बंधाव 12. "बख्शा तंत्रिका चोट" (SNI) के रूप में भेजा मॉडल भी व्यापक रूप से इस्तेमाल कर रहे हैं. तीसरी शाखा 13-15 बरकरार है, जबकि वे एक तंग बंधाव और sciatic तंत्रिका की तीन टर्मिनल शाखाओं में से दो की axotomy से मिलकर. sciatic तंत्रिका जो लक्ष्य न्यूरोपैथिक दर्द के विभिन्न मॉडलों, घायल हिंद पंजा पर एक पुरानी यांत्रिक परपीड़ा (एक सामान्य रूप से गैर nociceptive प्रोत्साहन के लिए एक nociceptive प्रतिक्रिया) में परिणाम.

इधर, चूहों में न्यूरोपैथिक दर्द की "कफ मॉडल" के लिए विस्तृत सर्जरी प्रक्रिया में वर्णित है. यह sciatic तंत्रिका 6-9 की मुख्य शाखा के चारों ओर एक पॉलीथीन कफ का आरोपण में होते हैं. गुवॉन फ्रे filaments का ई का प्रयोग भी वर्णन किया गया है. इन filaments इस मॉडल में मौजूद एक लंबे समय तक चलने nociceptive लक्षण है जो यांत्रिक परपीड़ा का आकलन करने की अनुमति.

Protocol

प्रोटोकॉल "Comité डी 'éthique एन matière डी' प्रयोग ANIMALE डी स्ट्रासबर्ग" (CREMEAS) द्वारा अनुमोदित किया गया है.

पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड की 1. आधारभूत माप

  1. चूहों परीक्षण प्रक्रियाओं की शुरुआत से पहले 2 हफ्तों के लिए कम से कम 10 दिनों के लिए पशु सुविधाओं को आदत डालना करने की अनुमति दें.
  2. वॉन फ्रे परीक्षण सेट अप करने के लिए और धारा 4 में वर्णित हैं कि वॉन फ्रे प्रक्रिया को चूहों आदत डालना.
  3. सर्जरी से पहले, खंड 4.3 में वर्णित के रूप में वॉन फ्रे filaments के साथ यांत्रिक पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड का मूल्यांकन. नोट: कम से कम तीन स्थिर लगातार मूल्यों पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड के लिए प्राप्त कर रहे हैं जब तक अलग दिनों पर प्रक्रिया को दोहराएँ.
  4. इन समूहों के शुरू में पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड के लिए अलग नहीं करना है, ताकि विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों के चूहों निरुपित.

गिरफ्तार Implantati के लिए 2. सर्जरी प्रक्रियापर

  1. पशु वजन. नोट: माउस शरीर के वजन से नीचे वर्णित कफ प्रविष्टि प्रक्रिया के लिए 20 ग्राम से अधिक होना चाहिए.
  2. Ketamine (17 मिलीग्राम / एमएल) और संज्ञाहरण के लगभग 45 मिनट प्रदान करता है, जो 0.9% NaCl, में xylazine (2.5 मिलीग्राम / एमएल) के मिश्रण से 4 मिलीग्राम / किलो के एक intraperitoneal इंजेक्शन के साथ पशु anesthetize.
  3. चिमटी के साथ एक हिंद पंजा pinching द्वारा पंजा सजगता के अभाव की जाँच करें और जानवर पूरी तरह से anesthetized है कि सुनिश्चित करने के लिए आँख सजगता के अभाव की जाँच करें.
  4. एक बिजली शेवर का उपयोग कूल्हे को घुटने से दाएँ पैर दाढ़ी.
  5. एक कपास इत्तला दे दी झाड़ू के साथ आंखों को सुरक्षा नज़र तरल जेल लागू करें.
  6. अपनी बाईं ओर पशु रखें और एक छोटा सा तकिया पर सही हिंद अंग जगह है और चिपकने वाला टेप के साथ तकिया का अधिकार पिछले अंग बनाए रखें.
  7. धुंध पैड या कपास इत्तला दे दी झाड़ू का उपयोग chlorhexidine और 70% इथेनॉल के साथ सर्जरी क्षेत्र कीटाणुरहित.
  8. तर्जनी का उपयोग फीमर का पता और बनाने के एकलगभग 0.5 सेमी का चीरा, फीमर को फीमर और लगभग 1.5 मिमी पूर्वकाल के समानांतर.
  9. दो autoclaved लाठी के साथ फीमर के करीब मांसपेशियों को अलग. नोट: मांसपेशियों में कटौती न करें. आम तौर पर, मांसपेशियों की परतों किसी भी खून बह रहा है बिना आसानी से अलग और sciatic तंत्रिका फिर से दिखाई देता है. रक्तस्राव के मामले में, रक्त को अवशोषित करने के लिए एक बाँझ कपास इत्तला दे दी झाड़ू का उपयोग करें.
  10. इसकी मुख्य शाखा को बेनकाब करने के लिए sciatic तंत्रिका नीचे दो autoclaved छड़ें डालें, और एक बाँझ शारीरिक समाधान (0.9% NaCl) के साथ तंत्रिका हाइड्रेट.
  11. विभाजन पीई-20 पॉलीथीन टयूबिंग (कफ) एक उठाई इस्पात छड़ी की मदद और एक बुलडॉग क्लैंप के साथ, 0.38 मिमी आईडी / 1.09 मिमी आयुध डिपो के पूर्व तैयार बाँझ 2 मिमी खंड पकड़ो.
    1. इसे थोड़ा खुल जाएगा जो, कफ में बताया इस्पात छड़ी डालें.
    2. कफ पार्श्व खोलने का उपयोग, कफ के एक छोर पर बुलडॉग डालने और कफ के समानांतर. यह द्वारा कफ का आयोजन करेगा कि इतनी बुलडॉग (180 °) घुमाएँपार्श्व खोलने के विपरीत है उस तरफ. बुलडॉग को बंद करें और उठाई इस्पात छड़ी हटा दें. नोट: रोटेशन जोत पर कफ प्रविष्टि के लिए एक अनुकूलित स्थिति में, बुलडॉग दबाना भी आंशिक रूप से खुले कफ बनाए रखने के लिए मदद कर रहा है अनुमति देने के लिए किया जाता है. मॉडल और बुलडॉग दबाना का आकार प्रक्रिया के इस चरण के लिए महत्वपूर्ण हैं.
  12. एक दूसरे प्रयोगकर्ता तंत्रिका के तहत दो छड़ें पकड़ और धीरे चारों ओर 4 मिमी लंबी है कि sciatic तंत्रिका के एक वर्ग के लिए उपयोग की सुविधा के लिए चिपक जाती है अलग है.
  13. कूल्हे के लिए समीपस्थ है कि तंत्रिका के हिस्से के चारों ओर बुलडॉग को बाहर का है कि कफ का हिस्सा डालने से शुरू करने, sciatic तंत्रिका की मुख्य शाखा में लगभग 2 मिमी कफ डालें.
  14. ट्यूब के रूप फैलाएंगे या बदलने के बिना, सरौता के साथ अपने दो डिस्टल पक्षों पर दबाव से धीरे कफ बंद करें. इसे सही ढंग से बंद हो गया है कि यह सुनिश्चित करने के लिए कफ मुड़ें.
  15. मुंडा त्वचा की परत बुद्धि सिवनीज शल्य समुद्री मील.
  16. एक साफ घर पिंजरे में अपनी बाईं ओर माउस रखें. माउस जाग रहा है जब तक गर्मी दीपक के नीचे रखें.
  17. अतिरिक्त पानी जोड़ें और घर पिंजरे में सीधे कुछ चाउ जगह है.

नकली नियंत्रण के लिए 3. सर्जरी प्रक्रिया

  1. कदम 2.15-2.17 साथ पालन करें तो, 2.9 कदम करने के लिए कदम 2.1 से ऊपर वर्णित के रूप में एक ही सर्जरी प्रक्रिया लागू करें. नकली नियंत्रण के लिए, 2.14 कि केवल चिंता कफ प्रविष्टि के लिए कदम 2.10 न आना.

4. वॉन फ्रे परीक्षण

  1. चिकनी स्टेनलेस स्टील (1 एमएक्स 50 सेमी, वेध सीमाओं के बीच 2.5 मिमी के साथ 5 मिमी वृत्त छेद) के एक ऊंचा छिद्रित प्लेट पर, छेद के साथ स्पष्ट व्यक्ति बक्से (7 सेमी x 9 सेमी x 7 सेमी) में चूहों रखें. नोट: ऊपर से 12 चूहों समन्वित रूप से इस व्यवस्था पर परीक्षण किया जा सकता है. संचालित जानवरों सर्जरी के बाद दिन का परीक्षण किया जा सकता है. हालांकि, वसूली के 3 दिन में मनाया के बाद सर्जरी अतिसंवेदनशीलता को कम करने के लिए सिफारिश कर रहे हैंनकली नियंत्रण.
  2. जानवरों के पहले परीक्षण के लिए 15 मिनट के लिए आदत डालना करने की अनुमति दें.
  3. आरोही बलों की एक श्रृंखला में प्रत्येक हिंद पंजा के तल सतह को वॉन फ्रे filaments लागू करें. नोट: वॉन फ्रे filaments calibrated व्यास की प्लास्टिक बाल हैं. वे 5 सेमी लंबे होते हैं और हाथ से आयोजित applicators पर तय कर रहे हैं. रेशा आवेदन की गति, झुकने और आवेदन की अवधि की डिग्री इस परीक्षण 3 के साथ प्राप्त कर रहे हैं कि सीमा मूल्यों को प्रभावित कर सकते हैं. चूहों में वर्तमान प्रक्रिया के साथ, सबसे अधिक बार उपयोग किया जाता है कि filaments 0.16, 0.4, 0.6, 1, 1.4, 2, 4, 6, 8, और 10 जी रहे हैं.
    1. रेशा सिर्फ झुकता तक छोड़ दिया पंजा का तल सतह करने के लिए चुना रेशा लागू करें. प्रक्रिया 3-5 से लगातार बार दोहराएँ, और तब सही पंजा करने के लिए भी ऐसा ही. रेशा दोनों पंजे पर परीक्षण किया गया है एक बार, अगले पशु परीक्षा. नोट: अधिक संवेदनशील हो सकता है जो पंजा पार्श्व सीमाओं से बचें. उम्मीद की प्रतिक्रिया एक पंजा हैवापसी, अचानक बच निकलने या पंजा चाट. कम से कम तीन उम्मीद प्रतिक्रियाओं पांच परीक्षणों के बाहर मनाया जाता है अगर सकारात्मक रूप में प्रतिक्रिया पर विचार करें. एक दिया पंजा हमेशा तीन बार परीक्षण किया है, लेकिन चौथा और पांचवां परीक्षण किया जाता है केवल अगर 1 या 2 प्रतिक्रिया (ओं) पहले तीन टेस्ट के दौरान मनाया (थे) था. C57BL/6J चूहों में, 1.4 ग्राम रेशा के साथ पूर्व शल्य चिकित्सा परीक्षण शुरू करते हैं. सर्जरी के बाद, 0.4 ग्राम रेशा के साथ परीक्षण शुरू करते हैं. एक सकारात्मक प्रतिक्रिया पहला परीक्षण किया रेशा के साथ मनाया जाता है, कदम 4.3.2 पर (बजाय अधिक से अधिक की) कम बल का एक रेशा का परीक्षण.
    2. 4.3.1 प्रक्रिया के अनुसार अगले जानवरों के लिए एक ही फिलामेंट लागू करें. सभी जानवरों का परीक्षण कर रहे हैं, अधिक से अधिक बल के अगले रेशा के साथ पहली जानवर पर फिर से शुरू करते हैं. सभी चूहों को एक सकारात्मक प्रतिक्रिया देने के लिए जब तक प्रक्रिया दोहराएँ. नोट: टेस्ट प्रत्येक जानवर लगातार दो filaments एक सकारात्मक प्रतिक्रिया देने के लिए जब तक. पंजा बुद्धि के रूप में एक सकारात्मक प्रतिक्रिया दी है कि कम रेशा के ग्राम मूल्य पर विचारइस जानवर के लिए hdrawal सीमा.

Representative Results

मतलब ± SEM के रूप में डेटा व्यक्त कर रहे हैं. सांख्यिकीय विश्लेषण विचरण के बहु - कारक विश्लेषण (एनोवा) या प्रयोगात्मक डिजाइन के अनुसार unpaired टी परीक्षण का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया. इन विश्लेषण के लिए, शाम और कफ सर्जरी समूहों के साथ ही दवा उपचार बनाम खारा के बीच में समूह कारक के रूप में माना जाता था. जब उचित हो, दोहराया उपाय विश्लेषण समय बेशक डेटा के लिए इस्तेमाल किया गया. बाद अस्थायी तुलना डंकन परीक्षण का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया. सांख्यिकीय महत्व पी <0.05 पर माना जाता था.

ऊपर बताई गई कार्यविधियों का उपयोग करते समय, एक ipsilateral परपीड़ा में कफ आरोपण परिणाम चित्रा 1 में सचित्र के रूप में. माउस परीक्षण प्रक्रिया के आदी हो जाने के बाद, वॉन फ्रे परीक्षण में पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड के लिए मूल्यों को समय पर स्थिर बने हुए हैं और कर रहे हैं नकली पशुओं में सचित्र के रूप में, दर असल शल्य प्रक्रिया से प्रभावित नहीं. हालांकि यह होना चाहिएएक अस्थायी शल्य चिकित्सा के बाद परपीड़ा आमतौर पर शाम चूहों में देखा जा सकता है कि संतोष व्यक्त किया. ऐसे परपीड़ा मौजूद है, पंजा वापसी प्रतिक्रिया कुछ ही दिनों के बाद सर्जरी के बाद आधारभूत देता है. गिरफ्तार चूहों में, ipsilateral परपीड़ा पहले दिन के बाद सर्जरी पर पहले से ही मौजूद है और अधिक से अधिक 2 महीनों के लिए बनाए रखा है (9 देखते हैं, और चित्रा 1, F8, 344 = 29.5, पी <0.001). ऊपर वर्णित के रूप में यह वॉन फ्रे परीक्षण द्वारा मापा जाता है जब कफ प्रेरित परपीड़ा C57BL/6J चूहों में ipsilateral बनी हुई है, लेकिन अन्य स्थितियों में contralateral पंजा पर परपीड़ा की उपस्थिति भी 8 मनाया जा सकता है. आधारभूत के लिए निरपेक्ष मूल्यों C57BL/6J चूहों में 4 और 6 ग्राम के बीच आम तौर पर कर रहे हैं, लेकिन परीक्षण प्रोटोकॉल इन मूल्यों को प्रभावित कर सकता है.

Tricyclic antidepressants न्यूरोपैथिक दर्द के लिए चिकित्सीय पहली पंक्ति उपचार के बीच में हैं. इस मॉडल में, tricyclic एंटी ड्रग नोर्ट्रिप्टीलीन (5 मिलीग्राम / किग्रा, intraperitoneal, दिन में दो बार) आरचित्रा 2 में सचित्र के रूप में, इलाज के लगभग 2 हफ्तों के बाद न्यूरोपैथिक परपीड़ा elieves (F7, = 15.3 91, पी 0.001 <; बाद अस्थायी: (CuffNor = नकली)> CuffSal पी <0.001 दिनों पर 29 - 34). इस खुराक में, एंटी का कोई तीव्र एनाल्जेसिक कार्रवाई 16,17 मनाया जाता है. ऐसी दवाओं लेने के रोगियों में मौजूद है कि स्थायी दर्द से राहत की नकल करने के लिए, चूहों बल्कि बाद से सुबह दवा प्रशासन से पहले परीक्षण किया जा सकता है. इस तरह की प्रक्रिया उपचार के पिछले दिनों से primed एक लंबे समय से स्थायी प्रभाव के आकलन की अनुमति देता है. इस मामले में, यह न्यूरोपैथिक परपीड़ा की एक स्थायी राहत निरीक्षण करने के लिए उपचार के 1 से 2 सप्ताह की आवश्यकता है. इलाज बाधित है, जब एक पतन आमतौर पर 3 से 4 दिन 18 भीतर मनाया जाता है. कुछ antidepressants के बगल में, gabapentinoids न्यूरोपैथिक दर्द के लिए अन्य पहली पसंद उपचार कर रहे हैं. Gabapentin इस मॉडल 16 में एक तीव्र और अस्थायी एनाल्जेसिक कार्रवाई की है, लेकिन यह भी एक देरी और लंदन में प्रदर्शित करता है जी स्थायी (चित्रा 3, पी <0.001) औषधि प्रशासन से पहले प्रत्येक दिन पशु परीक्षण जब antiallodynic कार्रवाई. यह कार्रवाई एंटी दवाओं के साथ तुलना में तेजी है.

चित्रा 1
एक स्थिर आधार रेखा (आधारभूत ग्राफ पर बिंदु 0 में प्रतिनिधित्व किया है) प्राप्त हुई थी जब तक चूहों में न्यूरोपैथिक दर्द के कफ मॉडल में चित्रा 1. यांत्रिक पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड. वयस्क पुरुष C57BL/6J चूहों वॉन फ्रे प्रक्रिया के आदी थे. दोनों पंजे का परीक्षण किया गया. उतारा पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड (समूह प्रति n = 10) से पता चला है के रूप में गिरफ्तार कर चूहों ipsilateral यांत्रिक परपीड़ा प्रदर्शित करते हैं.

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एक tricyclic एंटी चित्रा 2. विलंबित antiallodynic कार्रवाई की. दो सप्ताह के बाद सर्जरी के बाद, चूहों समूह प्रति 0.9% NaCl या 5 मिलीग्राम / किग्रा नोर्ट्रिप्टीलीन हाइड्रोक्लोराइड (एन = 5 या 6 के साथ या तो दिन में दो बार (सुबह और शाम) intraperitoneal उपचार प्राप्त ). वॉन फ्रे परीक्षण सुबह इलाज से पहले किया गया था. इस प्रक्रिया के साथ, नोर्ट्रिप्टीलीन की देरी antiallodynic कार्रवाई उपचार के लगभग 12 दिनों की आवश्यकता है, जो मनाया जाता है.

चित्रा 3
एक gabapentinoid की चित्रा 3. Antiallodynic कार्रवाई. तीन सप्ताह के बाद सर्जरी के बाद, चूहों 0.9% NaCl या 10 मिलीग्राम / किग्रा gabapentin (समूह प्रति n = 5) के साथ या तो दिन में दो बार (सुबह और शाम) intraperitoneal उपचार प्राप्त किया. वॉन फ्रे परीक्षण सुबह इलाज से पहले किया गया थाबयान. इस प्रक्रिया के साथ, gabapentin की देरी है और स्थायी antiallodynic कार्रवाई मनाया जाता है. डाटा उपचार शुरू करने से पहले और उपचार के 6 दिन में प्रस्तुत कर रहे हैं.

Discussion

"कफ" मॉडल शुरू में sciatic तंत्रिका 6 के आसपास कई कफ के आरोपण के साथ एक मानकीकृत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य पुरानी कसना चोट प्राप्त करने के लिए चूहों में विकसित किया गया था. यह तो कुछ अनुसंधान समूहों अभी भी कई कफ प्रविष्टि 19-22 उपयोग, भले ही एक भी कफ 7,8 प्रत्यारोपण करने के लिए संशोधित किया गया था. यह तो ट्रांसजेनिक जानवर का उपयोग करने की संभावना खोला जो चूहों 9,23, के लिए अनुकूलित किया गया था. कफ आमतौर पर 2 मिमी लंबी है, लेकिन अन्य लंबाई भी चूहों 22 में इस्तेमाल किया गया है. पॉलीथीन ट्यूबिंग प्रजातियों पर निर्भर करता है: चूहों 9 में पीई-20, और चूहों में पीई-60 24,25 या पीई-90 7,8,26,27.

यांत्रिक परपीड़ा वॉन फ्रे बाल के साथ मापा जाता है. इस परीक्षण में, पंजा वापसी थ्रेसहोल्ड के लिए निरपेक्ष मूल्यों जानवर 28 या 3 झुकने रेशा की अवधि पर खड़ा है, जिस पर सतह पर निर्भर हो सकता है, लेकिन इन कारकों नहीं करतेन्यूरोपैथिक परपीड़ा का पता लगाने प्रभावित करते हैं.

"कफ" मॉडल न्यूरोपैथिक दर्द तंत्र के अध्ययन के लिए ब्याज की है. यह मेलिनकृत और unmyelinated फाइबर 6,29, और संवेदी न्यूरॉन्स, प्राथमिक afferents और रीढ़ की हड्डी में न्यूरॉन्स 19,21,22,30-35 में कार्यात्मक परिवर्तनों में morphological परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. यह glial सक्रियण और neuronal आयनों ढाल में एक केंद्रीय पारी गतिविधि में और रीढ़ की हड्डी में nociceptive न्यूरॉन्स की प्रतिक्रियाओं में और न्यूरोपैथिक परपीड़ा 24,36-38 में परिवर्तन में भाग लेने कि प्रदर्शन की अनुमति दी. opioid रिसेप्टर्स 16,42-45 की और निकोटिनिक रिसेप्टर्स 46 की ग्लूटामेट रिसेप्टर्स 7,39-41, का प्रभाव भी इस मॉडल में अध्ययन किया गया.

मॉडल की एक और ब्याज न्यूरोपैथिक दर्द, यानी., Gabapentinoids और antidepressants के मौजूदा उपचार करने के लिए अपनी प्रतिक्रिया है. नैदानिक ​​टिप्पणियों के समान: gabapentinoids एक दोनों प्रदर्शितएन उच्च खुराक में तीव्र कम समय तक चलने वाले एनाल्जेसिक कार्रवाई और inhibitors प्रासंगिक खुराक पर कोई तीव्र एनाल्जेसिक प्रभाव है इलाज, tricyclic antidepressants और चयनात्मक serotonin और noradrenaline अवरोध के कुछ ही दिनों बाद मनाया लेकिन वे राहत एक देरी निरंतर प्रदर्शन है कि एक देरी निरंतर राहत कार्रवाई 1 से 2 उपचार के सप्ताह, और चयनात्मक serotonin अवरोध करनेवाला Fluoxetine की आवश्यकता है कि कार्रवाई 16 अप्रभावी है. मॉडल रोगियों 48-51 में परीक्षण करने के लिए नई चिकित्सकीय लक्ष्य प्रकट हो सकता है जो इन उपचार 16-18,44,45,47 अंतर्निहित आणविक तंत्र, अध्ययन करने के लिए इस प्रकार उचित है.

अन्त में, मॉडल भी न्यूरोपैथिक दर्द की anxiodepressive परिणामों के अध्ययन की अनुमति देता है. चिकित्सकीय, इन परिणामों न्यूरोपैथिक दर्द के रोगियों के एक तिहाई के आसपास को प्रभावित लेकिन preclinically कम दर्द का संवेदी पहलुओं से अध्ययन कर रहे हैं. इस मॉडल में, चिंता की तरह और depres की एक समय पर निर्भर विकासनिर्णायक की तरह phenotypes मौजूद 52 है और संबंधित तंत्र इस प्रकार संबोधित किया जा सकता है.

न्यूरोपैथिक दर्द के इस माउस मॉडल में मानकीकृत कफ और प्रक्रियाओं यांत्रिक परपीड़ा के लिए कम interindividual परिवर्तनशीलता में परिणाम. आनुवंशिक रूप से संशोधित पशुओं 17,18,44-47,52, लंबे समय से स्थायी परपीड़ा का उपयोग करने की संभावना, चिकित्सकीय इस्तेमाल उपचार के लिए प्रतिक्रिया और anxiodepressive लक्षण के समय पर निर्भर विकास के विभिन्न पहलुओं के अध्ययन के लिए इस मॉडल को उपयुक्त बनाने के लिए और पहले से ही अनुसंधान के इस क्षेत्र के लिए बहुमूल्य जानकारी लाया है जो न्यूरोपैथिक दर्द और उसके उपचार के परिणामों,.

Disclosures

लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषित.

Acknowledgments

यह काम (IY के लिए) मस्तिष्क और व्यवहार रिसर्च फाउंडेशन की ओर से केंद्र में राष्ट्रीय डी ला Recherche Scientifique (अनुबंध UPR3212), स्ट्रासबर्ग विश्वविद्यालय और एक NARSAD युवा अन्वेषक अनुदान द्वारा समर्थित किया गया. प्रकाशन लागत Neurex नेटवर्क (कार्यक्रम INTERREG चतुर्थ अपर राइन) द्वारा समर्थित हैं.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PE-20 polyethylene tubing Harvard Apparatus PY2-59-8323 Splitted before surgery
Ketamine Centravet IMA004
Xylazine HCl Sigma X1251 Freshly prepared before surgery
Ocry-gel Centravet
Pliers FST 11003-12 52.5 mm straight
Bulldog clamp FST p130 18038-45
Perforated plate CTTM
von Frey filaments Bioseb NC-12775

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References

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चूहे में न्यूरोपैथिक दर्द की Sciatic तंत्रिका Cuffing मॉडल
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Yalcin, I., Megat, S., Barthas, F., Waltisperger, E., Kremer, M., Salvat, E., Barrot, M. The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice. J. Vis. Exp. (89), e51608, doi:10.3791/51608 (2014).

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