Introduction
घ्राण रोग पार्किंसंस रोग (पीडी), अल्जाइमर रोग, और हंटिंगटन रोग 1 सहित neurodegenerative विकारों के एक नंबर से जुड़ा हुआ है. पीडी में, घ्राण ग्रस्त गंध पहचान, पता लगाने, और भेदभाव में घाटे में शामिल हैं और रोगियों को 2-5 से 70-95% तक में पाए जाते हैं. ये घाटे घ्राण रोग पीडी 6-10 के प्रारंभिक दौर का संकेत हो सकता है कि यह दर्शाता है, अप करने के लिए 4 साल से पीडी के कार्डिनल मोटर लक्षण आरंभ कर सकते हैं. पीडी में घ्राण घाटे के प्रारंभिक घटना घ्राण रोग में गहरी रुचि है और इसमें शामिल अंतर्निहित तंत्र के लिए प्रेरित किया. कृन्तकों में preclinical अध्ययन में, घ्राण रोग उपन्यास चिकित्सीय रणनीतियों की चिकित्सीय क्षमता की भविष्यवाणी करने के लिए एक संवेदनशील परिणाम उपाय हो सकता है.
कई परीक्षण बनाया गया है और बड़े पैमाने पर पीडी के कृंतक मॉडल में और tes को ज्ञानेन्द्रिय impairments चिह्नित करने के लिए इस्तेमाल किया गया हैउपन्यास उपचार 11-15 की चिकित्सीय क्षमता टी. घ्राण घाटे अच्छी तरह पीडी में दर्ज हैं हालांकि, घ्राण समारोह नियमित कई मॉडल में मापा नहीं किया गया है. यह दृश्य पीडी की आनुवंशिक रूपों की खोज और पीडी बस ज्ञानेन्द्रिय समारोह से अधिक प्रभावित करने वाले एक प्रणालीगत विकार है कि अधिक स्वीकार्य धारणा के साथ हालांकि बदल रहा है. वर्तमान में, अब लक्षण वर्णन 16-24 में महक का विश्लेषण शामिल है कि पीडी और अन्य neurodegenerative विकारों के आनुवंशिक माउस मॉडल में कई अध्ययन कर रहे हैं. Neurodegenerative विकारों में घ्राण रोग की बढ़ती रुचि को देखते हुए, हम preclinical अध्ययन में neurodegeneration के उपन्यास मॉडल के रूप में अच्छी तरह से परीक्षण संभावित रोग में सुधार के उपचारों को चिह्नित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि घ्राण परीक्षणों के एक बैटरी इकट्ठा करने की मांग की. वर्तमान अध्ययन में वर्णित परीक्षण लक्षण वर्णन और preclinical अध्ययन 18,25 दोनों में इस्तेमाल किया गया है.
परीक्षण highlइस अध्ययन में ighted पार्किंसंस रोग 18 का एक बार उपयोग अल्फा synuclein overexpressing माउस मॉडल में घ्राण रोग का पता लगाने में संवेदनशील होना दिखाया गया है. वे दफन गोली परीक्षण 26,27, ब्लॉक परीक्षण 23,24,28,29 का एक रूपांतरित संस्करण है, और आदी होना / dishabituation परीक्षण 30 में शामिल हैं. यह चूहों में घ्राण समारोह के संवेदनशील उपाय कर रहे हैं कि इस अध्ययन में वर्णित परीक्षण के कई रूपांतरों रहे हैं कि नोट करना महत्वपूर्ण है, इस अध्ययन में डाला वालों परीक्षण हमारी प्रयोगशाला के साथ सबसे अधिक अनुभव है और नियमित रूप से उपयोग कर रहे हैं.
Protocol
प्रोटोकॉल के सभी चरणों को जानवरों की देखभाल का पालन करें और सिनसिनाटी विश्वविद्यालय के IACUC द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों का उपयोग करें.
1 सामान्य विचार
- यदि संभव हो, अंधेरे चक्र में उनकी सक्रिय चरण के दौरान चूहों का परीक्षण. आमतौर पर, अंधेरे चक्र में कम रोशनी और कम से कम 1 घंटा तहत परीक्षण करते हैं. अंधेरे चक्र में परीक्षण संभव नहीं है हालांकि, अगर, प्रकाश चक्र के दौरान सभी तीन टेस्ट करते हैं. चूहों उनकी नींद चक्र के दौरान परीक्षण किया जाता है जब बार सूँघने कम हो सकती है कि मन में रखो. नोट: परीक्षण नींद चक्र के दौरान प्रदर्शन किया जा सकता है जबकि चूहों दफन गोली, ब्लॉक, या सुगंधित कारतूस में कम रुचि दिखा सकते हैं.
- , बाहर घ्राण संकेतों के किसी भी प्रभाव को कम प्रत्येक परीक्षा के दौरान हर समय दस्ताने के आधार जोड़ी पहनते हैं और फिर एक माउस और प्रत्येक परीक्षण के लिए आधार जोड़ी से अधिक दस्ताने की एक साफ जोड़ी स्थान के लिए आदेश में. संदेह में, दस्ताने की एक साफ सेट पर डाल दिया जब एक सामान्य नियम के रूप में. दस्ताने की एक बॉक्स पढ़ा हैवे अक्सर बदल जाएगा क्योंकि ily उपलब्ध. नोट: हम सब जानवर से निपटने के लिए Nitrile दस्ताने का उपयोग करें.
- परीक्षा सामग्री और एक निस्संक्रामक के साथ विषयों के बीच पिंजरों सफाई / एजेंट स्टरलाइज़ भी रोग के प्रसार के लिए क्षमता को कम करने के साथ ही अवांछित घ्राण संकेतों को दूर करने के क्रम में परीक्षण के इस बैटरी में एक महत्वपूर्ण कदम है.
2 दफन गोली टेस्ट
- कम से कम दो दिन के परीक्षण से पहले, प्रत्येक माउस के वजन रिकॉर्ड और फिर भोजन शरीर के वजन के 90% तक सीमित. पहले परीक्षण के लिए और खाद्य प्रतिबंध के दौरान, प्रत्येक माउस परीक्षण के दौरान इस्तेमाल किया जाएगा छर्रों के 1-2 टुकड़े दे (जैसे, मीठा अनाज का एक टुकड़ा). चूहों भोजन के साथ neophobic हैं और वे पहले से छर्रों नहीं खाया है तो परीक्षण के दौरान गोली के लिए खोज नहीं हो सकता है क्योंकि इस कदम को छोड़ मत करो.
- सभी परीक्षा के दिनों में, कोई पानी की बोतल या फीडर बी के साथ परीक्षण के कमरे में उनके पिंजरे रखकर पूर्व परीक्षण के लिए 1 घंटे के लिए चूहों आदत डालनामें. सिर्फ एक फिल्टर ऊपर ढक्कन के साथ उनके घर पिंजरे में उन्हें घर.
- आदी होना दौरान, ~ साफ बिस्तर बिस्तर समान रूप से पिंजरे भर में वितरित किया जाता है कुछ बनाने के साथ उच्च 3 सेमी एक स्वच्छ माउस पिंजरे भरें. 5 मिनट के लिए एक टाइमर सेट.
- यह दिखाई नहीं देता है कि इतने आदी के 1 घंटे के बाद बिस्तर से नीचे 1 मीठा अनाज गोली 0.5 सेमी दफनाने.
- अपने घर पिंजरे से परीक्षण माउस निकालें परीक्षण पिंजरे के बीच में जगह है, पिंजरे पर फिल्टर ऊपर ढक्कन जगह और टाइमर शुरू.
- माउस गोली uncovers और इसे खाने के लिए शुरू होता है जब घड़ी बंद करो. दफन गोली को उजागर करने के लिए समय ध्यान दें.
- माउस 5 मिनट के भीतर गोली नहीं मिल रहा है, तो परीक्षण का अंत और कहा कि माउस के लिए 300 सेकंड के स्कोर ध्यान दें. माउस यह तक पहुँच गया तो बिस्तर के ऊपर से गोली ले जाएँ, और माउस गोली खाने के लिए अनुमति देते हैं.
- परीक्षण के बाद, अपने घर पिंजरे में माउस वापसी.
- परीक्षण पिंजरे से बिस्तर खाली और सी साफपशु कमरे की सफाई समाधान के साथ उम्र.
- दोहराएँ प्रत्येक माउस के लिए 2.4-2.9 कदम, और पहले और प्रत्येक माउस के बाद दस्ताने बदल जाते हैं.
- सभी चूहों का परीक्षण करने के बाद, उन्हें 90% शरीर के वजन में उन्हें बनाए रखने के लिए पर्याप्त भोजन दे.
- एक अपवाद के साथ परीक्षण के दिन के रूप में 1 दिन 2-5 पर उसी तरह का परीक्षण, प्रत्येक परीक्षण के लिए पिंजरे में एक अलग स्थान में गोली दफनाने.
- परीक्षण के दिन 6, सतह गोली परीक्षण करते हैं.
- सतह गोली परीक्षण के लिए, लेकिन बजाय बिस्तर के शीर्ष पर बिस्तर जगह के तहत यह गोली दफन की कसौटी पर दिन 1 के लिए एक ही प्रक्रिया का पालन करें. माउस खोजने के लिए और गोली खाना शुरू करने के लिए समय रिकॉर्ड.
3 ब्लॉक टेस्ट
- व्यक्तिगत रूप से साफ पिंजरों में चूहों को घर और प्रत्येक पिंजरे की स्थापना से पहले दस्ताने बदल रहा है, (एई लेबल) पिंजरे में 5 ब्लॉक जगह है.
- बाद में परीक्षण 24 घंटे कार्य करें. , परीक्षण क्षेत्र के लिए परीक्षण चूहों हटो पानी की बोतल और फीडर बिन हटाने, और अल जगहएल पशु की पहचान के साथ लेबल एक प्लास्टिक की थैली में बिस्तर के एक मुट्ठी के साथ पिंजरे से 5 ब्लॉकों. माउस के घर पिंजरे के शीर्ष पर सील प्लास्टिक बैग रखें.
- पहले परीक्षण के लिए 1 घंटे के लिए पानी की बोतल, फीडर बिन बिना उनके घर पिंजरे में जानवरों, और ब्लॉक आदत डालना.
- Scents पशु / ब्लॉकों के बीच विमर्श नहीं कर रहे हैं तो प्रत्येक पिंजरे के बीच दस्ताने बदलें.
- प्रत्येक पिंजरे के बीच में कम से कम 10 सेमी के साथ एक मेज पर एक दूसरे के बगल में माउस पिंजरों अप लाइन. पिंजरे (नहीं पिंजरे के लंबे पक्ष) के सामने स्पष्ट देखने में तो यह है कि एक वीडियो कैमरा स्थिति.
- 30 सेकंड के लिए टाइमर सेट और महत्वपूर्ण प्रयोग विवरण (तिथि, माउस आईडी, परीक्षण, आदि) के साथ एक कार्ड लेबल. वीडियो टेप 2-3 सेकंड के लिए लेबल.
- कि माउस की पहचान के साथ प्लास्टिक की थैली से ब्लॉक ई निकालें और वे स्पष्ट रूप से वीडियो कैमरे पर दिखाई दे रहे हैं तो पिंजरे के बीच में उन्हें जगह है. यकीन नहीं है ~ 1 सेमी ओ बनाओब्लॉकों में से प्रत्येक के बीच एफ अंतरिक्ष. पिंजरे पर फिल्टर शीर्ष पर वापस रखें. 30 सेकंड के लिए टाइमर और वीडियो टेप प्रारंभ करें.
- 30 सेकंड के बाद, रिकॉर्डिंग बंद करो और पिंजरे से ब्लॉक को हटाने और वापस प्लास्टिक की थैली में उन्हें जगह है.
- दस्ताने बदलें और फिर पहले परीक्षण के लिए इस्तेमाल किया उसी प्रक्रिया को दोहराने, अगले माउस पर चलते हैं. प्रत्येक माउस ~ 5 मिनट के एक अंतर परीक्षण अंतराल यकीन है कि वहाँ बनाने के लिए 6 परीक्षणों की कुल के लिए यह करो.
- 7 वें परीक्षण में, बजाय माउस से ए, बी, और सी ब्लॉक के संपर्क में है, इसलिए है कि एक और माउस के पिंजरे से ब्लॉक ई जोड़ने माउस के स्वयं के पिंजरे से ब्लॉक डी रखने के सिवाय परीक्षणों 1-6 के लिए एक ही प्रक्रिया का पालन अपने एक और माउस के पिंजरे से ही घर पिंजरे और ब्लॉक ई. जिसका ब्लॉक ई प्रत्येक माउस ब्लॉक ई प्रत्येक माउस के पिंजरे (जैसे, ABCE या AEBC) में रखा गया है जहां और वैकल्पिक के संपर्क में है प्रयोगशाला किताब में ध्यान दें. एक मूल cagemate से ही लिंग, लेकिन नहीं के माउस से ब्लॉक ई लो. वीआई30 सेकंड के लिए deotape.
- 7 परीक्षणों के बाद, उनके मूल cagemates साथ एक नई स्वच्छ पिंजरे में जानवरों वापसी. स्वच्छ ब्लॉक हल्के साबुन और पानी के साथ परीक्षण में इस्तेमाल किया और बाद में परीक्षण के लिए उपयोग में हवा शुष्क करने की अनुमति.
4 आदी होना / Dishabituation
- ब्लॉक परीक्षण करने के लिए एक समान तरीके से आदी होना / dishabituation परीक्षण प्रदर्शन करना लेकिन बजाय एक चूहे की गंध है कि ब्लॉक का उपयोग करने का अर्क, के विभिन्न जोड़े के साथ सुगंधित कपास पकड़े ऊतक कारतूस का उपयोग करें.
- बजाय ब्लॉक के एक एकल, unscented ऊतक कारतूस का उपयोग कर कदम 3.1-3.4 का पालन करें.
- परीक्षा कक्ष में चूहों आदत डालना.
- एक अलग कमरे में सुगंधित ऊतक कारतूस तैयार करें. एक स्वच्छ कारतूस में एक छोटे से कपास की गेंद प्लेस और फिर कपास में निकालने के 5 μl (जैसे, बादाम निकालने) जोड़ें. कि खुशबू के साथ लेबल एक समर्पित बॉक्स या बैग में कपास और जगह कारतूस शीर्ष तस्वीर.
- इसी प्रक्रिया F करोया एक दूसरे खुशबू (जैसे, सौंफ निकालने). अलग scents से निपटने के बीच दस्ताने बदलें. कपास की गेंद पूरी तरह से ऊतक कारतूस में encased है सुनिश्चित करें. नोट: कपास की गेंद से उजागर फाइबर पशु घोंसले के शिकार प्रयोजनों के बजाय खुशबू खुद के लिए कपास गेंद में रुचि नहीं करने के लिए कारण हो सकता है.
- फिर, एक पहले छह परीक्षण के लिए सुगंधित ऊतक कारतूस, और सातवें परीक्षण के लिए दूसरे सुगंधित ऊतक कारतूस का उपयोग कर कदम 3.6-3.10 का पालन करें.
वीडियोटेप के 5 विश्लेषण
- ब्लॉक और आदी होना / dishabituation परीक्षण के लिए, प्रयोगात्मक हालत के लिए एक करदाता अंधा है कि ब्लॉक के साथ नाक संपर्क के रूप में परिभाषित सूँघने के साथ, प्रत्येक ब्लॉक सूँघने बिताए समय को मापने है. अगर वांछित है, इस तरह के ट्रायल 7 और कुल गतिविधि प्रत्येक सुनवाई के दौरान (लंबाई और घर पिंजरे की चौड़ाई के साथ किए गए आंदोलनों की संख्या) के दौरान उपन्यास ब्लॉक (ई) के दृष्टिकोण के लिए समय के रूप में अन्य व्यवहार को मापने. एक सूँघने बिताए समय स्कोरD समय एक स्टॉपवॉच का उपयोग वीडियो टेप से दृष्टिकोण करने के लिए.
- इसी तरह, आदी होना / dishabituation परीक्षण के लिए, प्रयोगात्मक हालत के लिए एक करदाता अंधा कारतूस, और हरकत गतिविधि दृष्टिकोण करने के लिए कारतूस, समय सूँघने बिताए समय को मापने है.
6 सांख्यिकी
- विलंबता स्कोर विचरण की विविधता को दिखाने के लिए करते हैं गोली लगता है क्योंकि nonparametric आँकड़ों का उपयोग दफन गोली परीक्षण का विश्लेषण करें. एक मान व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग चूहों के समूहों के बीच तुलना तो दिन 3-5 भर में गोली लगाने और विलंबता औसत. इसी तरह, परीक्षण की सतह गोली भाग के लिए, जीनोटाइप तुलना करने के लिए एक मान व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग कर गोली खोजने के लिए विलंबता का विश्लेषण.
- ब्लॉक परीक्षण के लिए, ट्रायल 7 (उपन्यास सुगंधित ब्लॉक की शुरूआत) से डेटा का विश्लेषण. आमतौर पर, विचरण की विविधता के लिए खाते में nonparametric विश्लेषण रोजगार. समय में अंतर का विश्लेषण करने के लिए आदेश में वें सूँघने खर्चई उपन्यास ब्लॉक के रूप में अच्छी तरह से अलग प्रयोगात्मक समूहों के लिए ब्लॉक करने के लिए दृष्टिकोण समय के रूप में, मान व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग करें. परिचित ब्लॉक सूँघने बिताए समय को उपन्यास ब्लॉक सूँघने बिताए समय की तुलना कर Wilcoxon हस्ताक्षर किए दरजा परीक्षण का प्रयोग करें.
- आदी होना / dishabituation परीक्षण के लिए, आचरण पैरामीट्रिक परीक्षण के पिछले अध्ययनों से 20 समान 1, 6 और 7, पर विश्लेषण करती है. चूहों कोई सूँघने को थोड़ा दिखा रहे हैं, nonparametric विश्लेषण का उपयोग करें.
Representative Results
दफन गोली, ब्लॉक, और आदी होना / dishabituation परीक्षण सभी चूहों में घ्राण की अत्यधिक लाभप्रद मूल्यांकन कर रहे हैं. इन परीक्षणों का उपयोग करना, हम अल्फा synuclein overexpressing (Thy1-aSyn) 18 और Atp13a2 पीटा चूहों सहित पार्किंसंस रोग के कई आनुवंशिक माउस मॉडल में घ्राण में महत्वपूर्ण परिवर्तन पाया है. दोनों Thy1-aSyn और Atp13a2 पीटा चूहों. नियंत्रण 18 से दफन गोली खोजने के लिए लंबे समय तक ले wildtype और Atp13a2 पीटा चूहों से एकत्र 1-3 शो डेटा आंकड़े. दफन गोली परीक्षण में, Atp13a2 पीटा चूहों wildtype नियंत्रण चूहों (चित्रा 1) की तुलना में दफन गोली खोजने के लिए विलंबता वृद्धि हुई दिखा. ब्लॉक परीक्षण में wildtype और Atp13a2 पीटा चूहों दोनों अपने ही घर पिंजरे (चित्रा 2) से ब्लॉक की तुलना में एक और माउस के पिंजरे से उपन्यास ब्लॉक सूंघ. आदी होना / dishabituation परीक्षण wildtype चूहों में एक गंध को आदी होना दिखाने के और फिर एक उपन्यास गंध (चित्रा 3) शुरू की है जब सूँघने की वृद्धि हुई.
गोली परीक्षण. लेटेंसी दफन चित्रा 1 wildtype में (n = 10) और Atp13a2 KO (n = 14) उम्र के 20-27 मीटर की ऊंचाई पर गोली लगता है. * पी <0.05, मान व्हिटनी यू
चित्रा 2 ब्लॉक परीक्षण समय wildtype में ब्लॉक परीक्षण में उपन्यास ब्लॉक (ई) सूँघने (n = 10) और Atp13a2 KO (n = 12) 20 में मादा चूहों -. उम्र के 27m. ΔΔ वही जीनोटाइप से ब्लॉक ए, बी, और सी की तुलना में पी <0.01 प्रतिनिधित्व करता है. मान व्हिटनी यू
"Src =" / फ़ाइलें / ftp_upload / 51804 / 51804fig3highres.jpg "चौड़ाई =" 500 "/>
चित्रा 3 आदी होना / dishabituation परीक्षण. (= 7 एन 9 साल की उम्र मीटर) भर में 6 परीक्षणों और परीक्षण 7 पर एक उपन्यास खुशबू के साथ एक कारतूस की शुरूआत के समय wildtype चूहों में एक सुगंधित कारतूस सूँघने मतलब.
Discussion
इस अध्ययन में वर्णित परीक्षण के प्रत्येक चूहों में घ्राण समारोह के विभिन्न पहलुओं को मापने. दफन गोली परीक्षण बिस्तर के नीचे दबे मीठा अनाज की एक स्वादिष्ट टुकड़ा पता लगाने के लिए (प्रतिबंधित खाद्य, नहीं खाना वंचित) भूख की क्षमता चूहों का परीक्षण, घ्राण का भोजन प्रेरणा पहलू उपाय. ब्लॉक परीक्षण अपने स्वयं के गंध और एक सजातीय के बीच विभेद करने के लिए चूहों की क्षमता का परीक्षण, घ्राण समारोह के सामाजिक पहलू के अधिक उपाय. आदी होना / dishabituation परीक्षण, परिचित और उपन्यास अहानिकर scents के बीच विभेद करने के लिए माउस की क्षमता का आकलन. खाद्य प्रेरणा या भय में विसंगतियों नियंत्रण की तुलना उत्परिवर्ती चूहों में मनाया मतभेद में योगदान कर सकता है क्योंकि एक नए मॉडल निस्र्पक जब कई परीक्षण का उपयोग महत्वपूर्ण है. केवल ब्लॉक परीक्षण किया जाता है और एक और माउस की गंध मनाया जाता है कि ब्लॉक के सूँघने कमी आई अगर उदाहरण के लिए, यह एक olfact है स्पष्ट नहीं है किORY घाटा या कि ब्लॉक के परिहार को जन्म दे सकती है कि सजातीय को एक बढ़ाया डर प्रतिक्रिया. कई परीक्षण प्रदर्शन कर रहे हैं और घाटे सभी परीक्षणों में मनाया जाता है, यह दृढ़ता से घ्राण हानि की एक व्याख्या का समर्थन करता है. मतभेद नहीं, बल्कि दूसरों के केवल एक परीक्षण में मनाया जाता है हालांकि, अगर फिर वहाँ एक और अधिक सूक्ष्म घ्राण हानि हो सकती है लेकिन यह अन्य स्पष्टीकरण बाहर शासन करने के लिए आवश्यक हो जाएगा (यानी, बढ़ाया डर या कम खाना प्रेरणा). घ्राण समारोह चूहों का परीक्षण जब मन में रखने के लिए अतिरिक्त महत्वपूर्ण कारकों में चूहों की पृष्ठभूमि तनाव और सेक्स में शामिल हैं. विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि उपभेदों (यानी, C57BL / 6, यूके, आदि) यह पूरे प्रयोग के प्रदर्शन से पहले ही पृष्ठभूमि के wildtype चूहों में प्रत्येक प्रोटोकॉल अनुकूलन के लिए सिफारिश की है, इसलिए माउस व्यवहार पर गहरा प्रभाव हो सकता है. यह भी पुरुष घ्राण प्रणाली अधिक है क्योंकि कि पुरुष और महिला चूहों को एक दूसरे से अलग परीक्षण किया जा सिफारिश की हैestrous में एक महिला की estrous और घ्राण पता लगाने में महिलाओं के प्रति संवेदनशील ly सभी तीन टेस्ट में प्रदर्शन के साथ हस्तक्षेप कर सकता है.
कुछ कदम चूहों में घ्राण जब परीक्षण का पालन करने के लिए पूरी तरह से गंभीर हैं. यह प्रयोगकर्ता जानवरों के लिए शुरू होता है odors का जानकार होना जरूरी है. प्रक्रियाओं के लिए दस्ताने पहने हुए जानवरों के बीच दस्ताने की आवश्यक और लगातार बदलते आवश्यकता है. यह हमेशा महक परीक्षण दिनों पर कोलोन या इत्र पहनने के लिए नहीं प्रयोगकर्ता के लिए एक अच्छा अभ्यास है. प्रक्रिया के कुछ भागों अनम्य हैं, परीक्षण की वैधता या संवेदनशीलता कम करने के बिना संशोधित और अनुकूलित किया जा सकता है कि अन्य भागों रहे हैं. उदाहरण के लिए, आदी होना परीक्षणों की संख्या बढ़ाई जा सकती है या चूहों के तनाव के आधार पर जांच की जा रही कमी आई है और कितनी जल्दी वे उत्तेजनाओं को आदत डालना. इन परीक्षणों के प्रमुख सीमा है कि वे सभी के लिए प्रेरणा के कुछ फार्म द्वारा संचालित कर रहे हैं वह यह है कि यह भोजन या सामाजिक, बना रही होएक बदल प्रतिक्रिया मनाया जब यह मुश्किल पूरी तरह से एक स्पष्टीकरण के रूप में प्रेरणा में विसंगतियों बाहर शासन करने के लिए. इस परीक्षण और उत्तेजनाओं दृष्टिकोण करने के लिए समय के दौरान इस तरह की गतिविधि के रूप में अतिरिक्त पैरामीटर, विश्लेषण करके कम किया जा सकता है.
महारत हासिल कर लेंगे, परीक्षण आसानी से neurodegenerative रोग के उपन्यास माउस मॉडल के phenotype की जांच में इस्तेमाल किया जा सकता है. इसके अलावा, सर्वोच्च शक्ति है कि परीक्षण संभावित चिकित्सा परीक्षण preclinical अध्ययन में शामिल किया जा सकता है (उदाहरण के लिए रेफरी देखते हैं. 25).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cap'n Crunch | Quaker Oats | 30000065310 | |
| Wooden Blocks | Lara's Crafts | 10144 | |
| Almond Flavor Extract | Kroger | 011110664716 | |
| Anise Flavor Extract | Kroger | 011110615619 | |
| Banana Flavor Extract | Kroger | 011110669919 | |
| Coconut Flavor Extract | Kroger | 011110669889 | |
| Lemon Flavor Extract | Kroger | 011110669957 | |
| Orange Flavor Extract | Kroger | 0011110669964 | |
| Tissue Cartridges | Sigma-Aldrich | Z672122-500EA | Manufactured by Simport no: M490-2 |
| Cotton Balls | Kroger | 11110793119 | |
| Mouse Cages | Ancare | 19 x 29 x 12.7 cm | |
| Camcorder | Sony | HDR-HC9 | |
| MiniDV Tapes | Sony DVC premium | 27242523432 | 60 minute long play |
References
- Hawkes, C. Olfaction in neurodegenerative disorder. Adv. Otorhinolaryngol. 63, 133-151 (2006).
- Ward, C., Hess, W., Calne, D. Olfactory impairment in Parkinson's disease. Neurology. 33, 943-946 (1983).
- Doty, R., Stern, M., Pfeiffer, C., Gollomp, S., Hurtig, H. Bilateral olfactory dysfunction in early stage treated and untreated idiopathic Parkinson's disease. J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 55, 138-142 (1992).
- Doty, R., Deems, D., Stellar, S. Olfactory dysfunction in parkinsonism: a general deficit unrelated to neurologic signs, disease stage, or disease duration. Neurology. 38, 1237-1244 (1988).
- Tissingh, G., et al. Loss of olfaction in de novo and treated Parkinson's disease: possible implications for early diagnosis. Movement Disorders. 16 (1), 41-46 (2001).
- Montgomery, E., Baker, K., Lyons, K., Koller, W. Abnormal performance on the PD test battery by asymptomatic first-degree relatives. Neurology. 52, 757-762 (1999).
- Berendse, H., et al. Subclinical dopaminergic dysfunction in asymptomatic Parkinson's disease patients' relatives with a decreased sense of smell. Ann. Neurol. 50 (1), 34-41 (2001).
- Ponsen, M., Stoffers, D., Booij, J., van Eck-Smit, B., Wolters, E., Berendse, H. Idiopathic hyposmia as a preclinical sign of Parkinson's disease. Ann. Neurol. 56, 173-181 (2004).
- Langston, J. The Parkinson's complex: parkinsonism is just the tip of the iceberg. Ann. Neurol. 59 (4), 591-596 (2006).
- Ross, G., et al. Association of olfactory dysfunction with risk for future Parkinson's disease. Ann. Neurol. 63, 167-173 (2008).
- Fleming, S., et al. Early and progressive sensorimotor anomalies in mice overexpressing wild-type human alpha-synuclein. J. Neurosci. 24, 9434-9440 (2004).
- Fleming, S., Ekhator, O., Ghisays, V. Assessment of sensorimotor function in mouse models of Parkinson's disease. J. Vis. Exp. , e50303 (2013).
- Schallert, T., Tillerson, J. L. Intervention strategies for degeneration of DA neurons in parkinsonism: Optimizing behavioral assessment of outcome. Central Nervous System Diseases. , 131-151 (2000).
- Whishaw, I., O'Connor, W., Dunnett, S. The contributions of motor cortex, nigrostriatal dopamine and caudate-putamen to skilled forelimb use in the rat. Brain. 109 (5), 805-843 (1986).
- Schwarting, R., Huston, J. The unilateral 6-hydroxydopamine lesion model in behavioral brain research. Analysis of functional deficits, recovery and treatments. Prog Neurobiol. 49 (3), 215-266 (1996).
- Glasl, L., et al. Pink1-deficiency in mice impairs gait, olfaction and serotonergic innervation of the olfactory bulb. Experimental Neurology. 235, 214-227 (2012).
- Kim, Y., Lussier, S., Rane, A., Choi, S., Andersen, J. Inducible dopaminergic glutathione depletion in an α-synuclein transgenic mouse model results in age-related olfactory dysfunction. Neuroscience. 172, 379-386 (2011).
- Fleming, S., Tetreault, N., Mulligan, C., Huston, C., Masliah, E., Chesselet, M. Olfactory deficits in mice overexpressing human wildtype alpha-synuclein. The European Journal of Neuroscience. 28 (2), 247-256 (2008).
- Nuber, S., et al. A progressive dopaminergic phenotype associated with neurotoxic conversion of α-synuclein in BAC-transgenic rats. Brain. 136 (2), 412-432 (2013).
- Macknin, J., Higuchi, M., Lee, V., Trojanowski, J., Doty, R. Olfactory dysfunction occurs in transgenic mice overexpressing human tau protein. Brain Res. 1000, 174-178 (2004).
- Lazic, S., et al. Olfactory abnormalities in Huntington's disease: decreased plasticity in the primary olfactory cortex of R6/1 transgenic mice and reduced olfactory discrimination in patients. Brain Res. 1151, 219-226 (2007).
- Wesson, D., Wilson, D., Nixon, R. Should olfactory dysfunction be used as a biomarker of Alzheimer's disease? Expert Review of Neurotherapeutics. 10 (5), 633-635 (2010).
- Taylor, T., Caudle, W., Miller, G. VMAT2-deficient mice display nigral and extranigral pathology and motor and nonmotor symptoms of Parkinson's disease. Parkinsons Dis. 2011, 124-165 (2011).
- Tillerson, J., Caudle, W., Parent, J., Gong, C., Schallert, T., Miller, G. Olfactory discrimination deficits in mice lacking the dopamine transporter or the D2 dopamine receptor. Behav. Brain Res. 172, 97-105 (2006).
- Fleming, S., et al. A pilot trial of the microtubule-interacting peptide (NAP) in mice overexpressing alpha-synuclein shows improvement in motor function and reduction of alpha-synuclein inclusions. Mol. Cell. Neurosci. 4, 597-606 (2011).
- Crawley, J. What's Wrong with My Mouse? Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice. , Wiley-Liss. NY. (2000).
- Nathan, B., Yost, J., Litherland, M., Struble, R., Switzer, P. Olfactory function in apoE knockout mice. Behav. Brain Res. 150, 1-7 (2004).
- Spinetta, M. A simple and sensitive odor recognition test for rats and mice detects retrograde amnesia caused by ethanol or other drugs that interfere with memory consolidation. Society for Neuroscience. , Washington, D.C. (2005).
- Spinetta, M., et al. Alcohol-induced retrograde memory impairment in rats: prevention by caffeine. Psychopharmacology. 201 (3), 361-371 (2008).
- Bielsky, I., Hu, S., Szegda, K., Westphal, H., Young, L. Profound impairment in social recognition and reduction in anxiety-like behavior in vasopressin V1a receptor knockout mice. Neuropsychopharmacology. 29, 483-493 (2004).
