Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

मन्या धमनी और गले नस की कैथीटेराइजेशन एक सचेत चूहे मॉडल में, सुई लेनी है और रक्त का नमूना लेना hemodynamic उपाय प्रदर्शन करने के लिए

doi: 10.3791/51881 Published: January 30, 2015

Abstract

गंभीर बीमारी का अध्ययन करने के लिए एक छोटे पशु मॉडल की सफलता, भाग में, मानव हालत अनुकरण करने के लिए मॉडल की क्षमता पर निर्भर है। बैक्टीरिया की एक ज्ञात राशि का इंट्रा-सांस की नली टीका सफलतापूर्वक तो पूति में विकसित करता है जो निमोनिया के रोगजनन को पुन: पेश करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। Hemodynamic मापदंडों की निगरानी और एंटीबायोटिक दवाओं, तरल पदार्थ और रक्त दबाव बनाए रखने के लिए दवाओं ऐसा करने के लिए, लेकिन इस मॉडल में नियमित सहायक देखभाल अनुकरण करने के लिए महत्वपूर्ण है के अर्क सहित मानक चिकित्सीय उपचार उपलब्ध कराने ताकि धमनी और शिरापरक संवहनी पहुंच दोनों की आवश्यकता है। वीडियो एक anesthetized चूहे में मन्या धमनी और आम गले नस कैथेटर दाखिल के लिए शल्य चिकित्सा तकनीक का विवरण। एक 72 घंटा वसूली की अवधि के बाद, जानवरों को फिर से anesthetized जाएगा और hemodynamic निगरानी प्रणाली के लिए प्रत्यारोपित कैथेटर जोड़ता है जो कृंतक आवास से जुड़ी एक पगहा और कुंडा सेटअप करने के लिए जुड़ा हुआ है। इस सेटअप की मुक्त आवाजाही की अनुमति देता हैलगातार तरल पदार्थ और दवाओं infusing, दबाव की निगरानी (एंटीबायोटिक दवाओं, vasopressors) और रक्त नमूने प्रदर्शन करते हुए अध्ययन के दौरान चूहा।

Introduction

चूहों की धमनी और शिरापरक कैथीटेराइजेशन लंबे अनुसंधान प्रयोगशाला में प्रयोग किया गया है। एक, दो कैथीटेराइजेशन सिस्टोलिक, डायस्टोलिक और धमनी दबाव (एमएपी) मतलब है, दिल की दर (मानव संसाधन) और केंद्रीय शिरापरक दबाव सहित hemodynamic मापदंडों की निगरानी के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है (CVP) । 3,4 इसके अलावा, इन कैथेटर मानक उपचार या संभावित उपचारों की प्रेरणा के रूप में अच्छी तरह से रक्त नमूने आगे एक बीमारी या इलाज के अंतर्निहित तंत्र का विश्लेषण करने की अनुमति देते हैं। इसलिए, एक छोटे पशु मॉडल में संवहनी उपयोग होने नैदानिक ​​प्रदर्शन उपायों और उपचार के प्रभाव के अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण है।

गंभीर बीमारी के मूल कारणों का अध्ययन करने के लिए, यह पहली बार मानव हालत अनुकरण करने के लिए एक मॉडल विकसित करने के लिए महत्वपूर्ण है। बैक्टीरिया की एक ज्ञात राशि का इंट्रा-सांस की नली टीका सफलतापूर्वक निमोनिया के रोगजनन, तो पूति में विकसित करता है जो एक गंभीर फेफड़े के संक्रमण को पुन: पेश करने के लिए इस्तेमाल किया गया है।3, 5 hemodynamic उपायों की निगरानी और मानक चिकित्सीय उपचार उपलब्ध कराने दिनचर्या सहायक देखभाल अनुकरण करने के लिए महत्वपूर्ण है। स्टैंडर्ड चिकित्सीय उपचार अंतर्निहित संक्रमण और तरल पदार्थ और vasopressors के प्रशासन समाशोधन में एड्स जो एंटीबायोटिक दवाओं के अर्क शामिल है, दो उपचारों रक्तचाप बनाए रखने के लिए सेप्टिक रोगियों में कार्यरत हैं। 5-7 संवहनी का उपयोग, हम अध्ययन जब विशेष रूप से पेटेंट कैथेटर का आरोपण विशेष रूप से महत्वपूर्ण है पूति के लिए अनुसंधानात्मक उपचारों।

कई सालों के लिए, कृन्तकों के लिए मानक चिकित्सीय उपचार के प्रशासन के लिए क्षमता प्रत्यारोपण कैथेटर और सही ढंग से समय के साथ छोटी मात्रा देने के लिए अर्क प्रौद्योगिकी की क्षमता के निर्माण के लिए आवश्यक गुणों के साथ सामग्री की उपलब्धता के द्वारा ही सीमित था। इसके अलावा, एक विशिष्ट hemodynamic माप की सतत निगरानी के जवाब में एक प्रेरणा को गति प्रदान करने की क्षमता एक सुसंगत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य स्टैंड के लिए अनुमति देता हैबड़ा नमूना का उपयोग कर कृंतक अध्ययन के विशिष्ट आकार जब एआरडी उपचार मॉडल। 8, 9 इन तकनीकी सीमाओं सामग्री और सटीक हार्डवेयर में hemodynamic मापदंडों की निगरानी करते हुए एक साथ दिनचर्या उपचारों प्रदान करने के लिए है, लेकिन पर काबू पाने के लिए किया गया है, धमनियों और शिराओं संवहनी पहुंच दोनों उपलब्ध होना चाहिए।

वीडियो एक anesthetized चूहे में मन्या धमनी और आम गले नस कैथेटर दाखिल के लिए शल्य चिकित्सा तकनीक का विवरण। एक 72 घंटा वसूली की अवधि के बाद, जानवरों को फिर से anesthetized जाएगा और hemodynamic निगरानी प्रणाली के लिए प्रत्यारोपित कैथेटर कनेक्ट किया कृंतक आवास से जुड़ी एक पगहा और कुंडा सेटअप करने के लिए जुड़ा हुआ है। अध्ययन के दौरान, प्रणाली एक द्रव निषेचन के लिए अनुमति देता है एक निश्चित निषेचन दर पर एक निश्चित मात्रा पहुंचाने या किसी दिए गए दबाव रेंज बनाए रखने के लिए पता लगाया मतलब धमनी दबाव के आधार पर एक प्रेरणा दर बचाता है कि एक स्वचालित प्रणाली या तो पर आधारित है। तरल पदार्थ संचार व्यवस्थाप्रोग्रामेबल सिरिंज डाटा अधिग्रहण प्रणाली के डिजिटल outputs के साथ कि इंटरफ़ेस पंप और एमएपी की निगरानी सॉफ्टवेयर के द्वारा नियंत्रित कर रहे हैं का उपयोग करता है। दबाव की निगरानी के तरल पदार्थ और vasopressors infusing, और जानवरों में हेरफेर करने के लिए बिना रक्त नमूने प्रदर्शन करते हुए पगहा और कुंडा सेटअप अध्ययन के दौरान चूहे की मुक्त आवाजाही की अनुमति देता है। 24 instrumented जानवरों की निगरानी करने के लिए विस्तार हार्डवेयर के साथ (हमारे सेटअप में) 2 कैथेटर प्रत्येक के साथ करने के लिए 12 instrumented जानवरों के एक साथ निगरानी प्रत्येक प्रयोग में कई स्तरीकृत समूहों के अध्ययन के लिए लचीलेपन का एक बड़ा सौदा करने के लिए अनुमति देता है।

इस कैथीटेराइजेशन प्रक्रिया अप करने के लिए 11 दिनों के लिए निगरानी, ​​नमूने और उपचार के लिए संवहनी पहुँच की आवश्यकता के समान कृंतक मॉडल का उपयोग करने वाले अनुसंधान सुविधाओं के लिए फायदेमंद हो सकता है। इस प्रक्रिया पर विचार कर अनुसंधान सुविधा तो इन जानवरों को बनाए रखने developin के लिए कृन्तकों के साथ अनुभव और एक उचित संरचना का समर्थन किया हैजी इन कौशल (भोले चूहे, कैथेटर घटकों और तकनीकी लागत सहित) कम से कम $ 50 के लिए अधिक से अधिक $ 180 से catheterized चूहा प्रति कुल लागत को कम करने और शेड्यूलिंग लचीलापन बढ़ रही है, एक महत्वपूर्ण लागत बचत प्रदान कर सकते हैं (भोले चूहों कंपनी वितरण कार्यक्रम बनाम आसानी से उपलब्ध हैं का) चूहों प्रत्यारोपित किया। इस प्रक्रिया की सफलता catheterizations प्रदर्शन कर व्यक्ति के कौशल पर निर्भर है। इस प्रक्रिया में कुशल बनने के लिए आवश्यक प्रशिक्षण पशु> 90% की जिसके परिणामस्वरूप कैथेटर प्रत्यक्षता दर के साथ 20 से 40 चूहों से लेकर है।

Protocol

नीचे वर्णित प्रक्रियाओं के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान में नैदानिक ​​केंद्र के पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित एक प्रोटोकॉल के हिस्से के रूप में प्रदर्शन किया गया।

सर्जरी के लिए 1. तैयारी

  1. गैस कैथेटर और उपकरणों बाँझ।

2. कैथेटर की तैयारी

  1. प्रत्यक्षता सुनिश्चित करने और रिसाव से बचने के लिए heparinized ग्लिसरॉल (250 आइयू हेपरिन / 1 मिलीलीटर ग्लिसरॉल) के साथ कैथेटर फ्लश। Heparinized ग्लिसरॉल बनाए रखने के लिए एक धातु डाट (20 गा, 15 मिमी) के साथ कैथेटर के अंत में प्लग करें।

3. सड़न रोकनेवाला कार्य केंद्र तैयार करें

  1. कार्य केंद्र और साधन ट्रे स्प्रे करने के लिए 70% शराब का प्रयोग करें। ट्रे पर ऑपरेटिंग मेज और साधन ट्रे और जगह उपकरणों को कवर करने के लिए एक बाँझ कपड़ा का प्रयोग करें।

4. सर्जरी के लिए चूहे की तैयारी

  1. प्लेस चूहे व्यक्तिगत रूप से एक Lucite कक्ष में और एक संवेदनाहारी को बेनकाब; isoflurane (3-5%) मिश्रणबेहोश तक ऑक्सीजन के साथ एड। चैम्बर से चूहे निकालें और गर्दन के पूर्वकाल और कूल्हों क्षेत्रों से फर दाढ़ी। आंखों को चिकनाई मरहम लागू करें।

5. कैथेटर आरोपण

  1. उदर की स्थिति में एक गर्म शल्य मेज पर anesthetized चूहे (पैर की अंगुली चुटकी द्वारा की पुष्टि की) रखें; (; 3.5 isoflurane%) सहज respirations साथ संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए नाक शंकु में अपनी नाक जगह है। धीरे शल्य चिकित्सा के क्षेत्र Betadine और 70% शराब के उपयोग बारी 3 बार हाथ धोने। एक शल्य कैंची का उपयोग कर scapulae बीच एक 0.5 सेमी midline के त्वचा चीरा बनाओ।
  2. पृष्ठीय स्थिति में चूहे का स्थान बदलें; धीरे रबर बैंड का उपयोग कर तालिका के प्रत्येक पक्ष को पैरों को नियंत्रित; संज्ञाहरण बनाए रखें। थोड़ा बेहतर प्रदर्शन के लिए hyperextend करने के लिए गर्दन के तहत दो लुढ़का बाँझ 4x4 धुंध रखें। एक स्केलपेल का उपयोग हंसली के स्तर पर गर्दन के midline के 2 सेमी उदर ग्रीवा त्वचा चीरा सही बनाओ।

6. अधिकारगले नस कैथीटेराइजेशन

  1. एक hemostat का उपयोग करना, दो टूक, सही गले नस काटना कल्पना और पोत के एक 5 मिमी खंड को अलग-थलग करने के लिए लार और लसीका ऊतकों को अलग। 4-0 रेशम सीवन का उपयोग, पोत के प्रदर्शन को अधिकतम करने के लिए जहाज के दोनों कपाल और दुम सिरों पर एक ढीला टाई जगह है। एक सूक्ष्म शल्य कैंची पर्याप्त एक चीरा बड़े बनाने का उपयोग कर दो संयुक्ताक्षर के बीच पोत के साथ लाइन में, कैथेटर के पास है और पोत के आसपास कपाल संयुक्ताक्षर टाई करने के लिए।
  2. माइक्रो विदारक हुक और संदंश की सहायता से दिल की ओर पोत में शिरापरक कैथेटर डालें और पु 3F खंड के सभी बर्तन में है जब तक कैथेटर अग्रिम। पोत को कैथेटर को सुरक्षित करने के कपाल और दुम सिरों पर संयुक्ताक्षर का प्रयोग करें।

7. वाम मन्या धमनी कैथीटेराइजेशन

  1. एक hemostat का उपयोग करना, दो टूक छोड़ दिया मन्या धमनी का पर्दाफाश करने अनुलंबीय omohyoid पेशी काटना और मैंपोत के एक 5mm खंड solate। पूरी तरह से धमनी से अलग किया जाता है (सफेद रंग) वेगस तंत्रिका सुनिश्चित करें। ध्यान रखना चूरे या तंत्रिका तोड़ने के लिए नहीं।
  2. 4-0 रेशम सीवन का उपयोग, पोत की दुम छोर पर एक ढीला टाई जगह पोत के कपाल अंत टाई और चीरा निम्न रक्त के प्रवाह को रोकने के लिए सिवनी से ऊपर दुमदारी एक बुलडॉग दबाना जगह है। एक सूक्ष्म शल्य कैंची का प्रयोग, काफी बड़े एक चीरा, दो संयुक्ताक्षर के बीच पोत के साथ लाइन में, कैथेटर पारित करने के लिए बनाते हैं। माइक्रो विदारक हुक और संदंश की सहायता से दिल की ओर धमनी कैथेटर डालें।
  3. तंग बुलडॉग क्लैंप हटाने से पहले पोत के अंदर कैथेटर के हिस्से को धारण करने के लिए ताला बिना एक चिकनी सुई धारक का प्रयोग करें। कैथेटर की पूरी पु 2 एफ खंड तक धीरे धीरे सुई धारक ढीला पोत में है, जबकि संदंश की एक जोड़ी के साथ कैथेटर अग्रिम। सुरक्षित करने के लिए कैथेटर और पोत के आसपास ढीला दुम संयुक्ताक्षर टाई, लेकिन इतना tigh के नहींके रूप में टी, कैथेटर रोक देना।

8. सुरंग वापस subcutaneously कान के पीछे और scapulae के बीच चीरा के माध्यम से एक 5 सेमी ट्यूब एक सीधे Hemostat का उपयोग करना। ट्यूब के माध्यम से कैथेटर अमल में और ट्यूब निकालें।

9. प्लेस में exteriorized कैथेटर को सुरक्षित करने के लिए 4-0 सिल्क sutures के साथ तीन स्टेनलेस स्टील घाव क्लिप के साथ उदर चीरा, और पृष्ठीय चीरा बंद।

10 शल्य चिकित्सा के बाद की निगरानी और देखभाल

  1. कैथीटेराइजेशन के बाद, संज्ञाहरण समाप्त करने और सेल्यूलोज बिस्तर के साथ एक पिंजरे में पार्श्व decubitus स्थिति में चूहे की वसूली। फिर एक बार दैनिक कम से कम 4 घंटे के लिए या दर्द के कोई संकेत नहीं दिखा, जब तक 2 घंटे के अंतराल पर चूहों को ध्यान से देखें और। चूहे दर्द या संकट के संकेत से पता चलता है कि अगर Ketoprofen [5 मिलीग्राम / किग्रा, चमड़े के नीचे इंजेक्शन (वर्ग)] दीजिए तुरंत प्रक्रिया और हर 12 घंटे के बाद। हमारे अनुभव में, कोई चूहों पहल निम्नलिखित दर्द के लिए अतिरिक्त analgesia के लिए आवश्यक हैएल इंजेक्शन। एनलजेसिया की अतिरिक्त खुराक लेने के लिए विचार के प्रकाश में लाना होगा कि मनाया लक्षण नहीं बल्कि सीमित करने के लिए शामिल हैं; असामान्य मुद्रा; वृद्धि श्वसन दर, चीरा साइट की अपव्ययी / ungroomed, संक्रमण / सूजन, आंखों का निर्वहन, piloerection में / कमी ("नुकीला haircoat"), श्रव्य या स्पर्श उत्तेजनाओं के जवाब में गतिविधि में कमी।
    नोट: चूहे अध्ययन में नामांकित किया जाएगा पूर्व कैथीटेराइजेशन वजन से> 10 ग्राम हासिल है कि 72 घंटे के लिए बरामद किया।

Hemodynamic सिस्टम के लिए 11 कनेक्शन

  1. वसूली के बाद, अध्ययन में स्वस्थ चूहों (वजन> 10 ग्राम) दाखिला लिया। Lucite कक्ष में चूहों प्लेस और के रूप में पहले से वर्णित anesthetize।
  2. बाँझ hemostat, माइक्रो संदंश, संलग्न कुंद सुई के साथ एक मिलीलीटर सीरिंज के साथ शल्य मेज पर बाँझ कपड़ा रखें।
    नोट: hemostat के सुझावों कैथेटर को होने वाले नुकसान से बचने के लिए रबर के साथ कवर किया जाना चाहिए। एक शल्य चिकित्सा पर anesthetized चूहे रखेंनाक शंकु में उदर स्थिति और जगह नाक में मेज सहज respirations साथ संज्ञाहरण (3-5%) बनाए रखने के लिए।
  3. क्लैंप धमनी और बस धातु प्लग पिन नीचे रबर छाया हुआ hemostats की एक जोड़ी का उपयोग शिरापरक कैथेटर। कैथेटर के अंत में धातु पिन को हटाने और संलग्न एक कुंद सुई के साथ हेपरिन खारा से भरा एक 1 मिलीलीटर सिरिंज संलग्न करने के लिए संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करें। बदले में, hemostats को हटाने और कैथेटर पेटेंट हैं सुनिश्चित करने के लिए 0.1 मिलीलीटर वापस ले लें।
  4. , कैथेटर पुन दबाना सुई को हटाने और shoebox पिंजरे के शीर्ष पर (हेपरिन खारा के साथ पहले से प्लावित) है कि एक कुंडा से जुड़ा है और सीमित एक लंबे समय तक कैथेटर को यह अंत देते हैं। डाटा अधिग्रहण और रिकॉर्डिंग, नमूने, या निषेचन के लिए transducers के लिए इन कैथेटर कनेक्ट करें।
    नोट: सभी कैथेटर उनके पिंजरे में गति की एक जानवर की पूरी रेंज अनुमति देने के लिए काफी लंबे समय कुंडलित वसंत conduits के साथ संरक्षित कर रहे हैं।
  5. कैथेटर कनेक्शन, संज्ञाहरण समाप्त के बाद औरसेलूलोज बिस्तर के साथ एक पिंजरे में sternal स्थिति में जानवरों की वसूली। मैन्युअल रूप से 0.05 मिलीलीटर हेपरिन खारा (50 आइयू / एमएल) के जानवरों के नियमित आकलन के साथ शामिल किया है, जो 24 घंटे के लिए हर एक मानव संसाधन के साथ लाइनों फ्लश, धमनी कैथेटर प्रत्यक्षता बनाए रखने के लिए।

12. रक्त का नमूना लेना, दबाव की निगरानी एवं औषधि प्रशासन

  1. खाली सिरिंज संलग्न कैथेटर धमनी और 0.6 मिलीलीटर इनलाइन फ्लश वापस लेने से जुड़ा पानी निकलने की टोंटी करने के लिए। , नमूना सिरिंज संलग्न नमूना लेते हैं, और 0.7 मिलीलीटर heparinized खारा फ्लश द्वारा पीछा 0.6 मिलीलीटर इनलाइन फ्लश वापसी।
  2. का प्रयोग डाटा अधिग्रहण हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर रिकॉर्ड मानचित्र और दिल की दर लगातार मापने के लिए और करने के लिए।
  3. शिरापरक कैथेटर को स्वचालित दवा वितरण प्रणाली (कहते हैं) से कनेक्ट करें।
    नोट: कहते हैं vasopressor लगाने की दर सामान्य शारीरिक सीमा के भीतर बनाए रखा दबावों को पता चला मैप पर आधारित (उच्च कम, या 0 खुराक) समायोजित करता है।

Representative Results

नाड़ी दबाव में परिवर्तन hemodynamic waveforms के द्वारा प्रतिनिधित्व विद्युत संकेतों में तरल पदार्थ भरा कैथेटर के माध्यम से (चित्रा 1) फैलता है और परिवर्तित कर रहे हैं (आंकड़े 2, 3)। संवहनी उपयोग के बिना, इन उपायों नहीं बनाया जा सकता है। Waveforms के वास्तविक समय स्ट्रीमिंग आधार हरा करने के लिए एक हरा पर परिवर्तन (चित्रा 2) का पता लगाने और विश्लेषण के लिए अनुमति देता है। Waveforms के समय के पैमाने संपीड़ित एक लंबी अवधि (दिन मिनट) से अधिक होती है कि परिवर्तन vasopressor अर्क दरों में परिवर्तन के साथ सहसंबद्ध किया जा सकता है (चित्रा 3, ऊपरी चार waveforms) (चित्रा 3, कम 4 तरंग) बढ़ाता के लिए अनुमति देता है।

चित्रा 1
चित्रा 1. कैथेटर डिजाइन: धमनी और शिरापरक कैथेटर पु, polyurethane के घटकों का विवरण;। पीई, पालीइथाइलीन (खंड लंबाई) यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 2
चित्रा 7 सेकंड पर 4 ठेठ कृन्तकों सात दिनों के बाद कैथीटेराइजेशन 2. वास्तविक समय नक्शा waveforms। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 3
एक घंटा से अधिक चार ठेठ कृन्तकों (ऊपरी चार waveforms) 7 दिनों के बाद कैथीटेराइजेशन चित्रा 3. समय-संकुचित एमएपी waveforms। एमएपी (कम चार waveforms) का औसत है, जब कि मूल्य ट्रिगर करने के लिए प्रयोग किया जाता है कहते हैं उच्च (<90 एमएमएचजी) , कम (<100 एमएमएचजी) या बंद (> 110) आसव पम्प से प्रवाह प्रतिक्रिया। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Discussion

सही रूप में इस प्रकार नाड़ी का उपयोग की आवश्यकता होती है, hemodynamic निगरानी प्रदर्शन करने की क्षमता बीमारी का एक नैदानिक ​​मॉडल के लिए चिकित्सकीय दृष्टिकोण जरूरी जांच। पूति के हमारे मॉडल में, धमनी कैथीटेराइजेशन प्रणालीगत दबाव की निगरानी प्रदान करता है और शिरापरक कैथीटेराइजेशन मानक नैदानिक ​​चिकित्सा के आवेदन के लिए अनुमति देता है। पूति के लिए मानक चिकित्सा एंटीबायोटिक दवाओं के अर्क वांछित सीमा के भीतर धमनी दबाव बनाए रखने के लिए जीवाणु संक्रमण और तरल पदार्थ और vasopressors के अर्क के इलाज के लिए भी शामिल है। दोनों कैथेटर रक्त नमूना लेने के लिए किया जाता है। इस डिजाइन में, प्रोग्राम निषेचन के आवेदन धमनी के दबाव का मतलब यह वास्तविक समय के आधार पर vasopressor निषेचन दर की स्वचालित ट्रिगर के साथ पंप मेडिकल स्टाफ से और पूर्व नैदानिक ​​सेटिंग बनाता में मार्गदर्शन अनुमापन की आवश्यकता है जो नैदानिक ​​सेटिंग पर एक अग्रिम है जानवरों की बड़ी संख्या के अध्ययन के लिए यह संभव उपचार के साधन का प्रयोग करते हैं।

। एक में कंठ शिरापरक कैथेटर की गुम; e_content "> कुछ जटिलताओं मॉडल के विकास में जल्दी अनुभवी थे ये आंशिक धमनी और कस भर से शिरापरक कैथेटर, PU2 और PU3 घटकों पर संबंधों, (1-2%) दोनों का रोड़ा शामिल 2 एल / मिनट की ओ 2 प्रवाह की दर के साथ isoflurane एकाग्रता 2-3.5% रखने के द्वारा हल कर वसूली (कोई फेफड़े थक्का या अन्य अंग क्षति स्पष्ट) के बाद अस्पष्टीकृत अचानक मौत, (1-2%), छोटी शाखा, (<1%) । नकसीर, स्थानीय संक्रमण और आत्म प्रवृत्त नुकसान के अन्य आम शल्य जटिलताओं नहीं मनाया गया। एक बार शल्य चिकित्सा प्रवीणता प्राप्त कर ली है, प्रत्येक प्रक्रिया में कोई अधिक से अधिक 15 मिनट में पूरा किया जा करने में सक्षम होना चाहिए। एक स्वस्थ वसूली के रूप में मापा सफलता की दर और पेटेंट कैथेटर, में "हो सकता है कि एक असफल कैथेटर के लिए डेटा की हानि और जरूरत जानवरों की कुल संख्या और खाते को कम से कम एक बार पूरी तरह से प्रशिक्षित किया। एक अतिरिक्त पशु प्रत्येक अध्ययन में शामिल है 90% से अधिक की उम्मीद की जा सकती हैजटिलताओं के कारण ही संलयन "या मृत्यु दर।

इस प्रक्रिया में सबसे महत्वपूर्ण कदम कैथेटर के डिजाइन और स्थान है। सामग्री भी आसानी से crimping के बिना पोत दीवार में छेद करने के लिए तो नहीं के रूप नोक पर नरम होने की जरूरत है। कैथेटर के शरीर में stiffer पर्याप्त पोत में अग्रिम करने में सक्षम होने के लिए और जगह में सुरक्षित किया जा (टिप से अधिक) हो गया है। एक जुड़ा धमनी कैथेटर और 2 अलग व्यास ट्यूबिंग के लिए जुड़े हुए हैं कि ट्यूबिंग के 3 व्यास से पता चलता है शिरापरक कैथेटर के लिए। इन घटकों नोक पर कैथेटर व्यास को कम करने के लिए एक दूसरे के भीतर खिसक कर रहे हैं और बनाए रखा है पोत या दिल में कैथेटर की नियुक्ति सुनिश्चित करने के लिए जोड़ा एंकर के साथ साथ चिपका रहे हैं।

एक बार बरामद किया और कुंडा और तार से जुड़ा है, मानचित्र और CVP waveforms के चित्रा 2 में प्रतिनिधित्व डेटा के समान दिखाई देनी चाहिए। धमनी कैथेटर patenc बनाए रखने के लिएनिगरानी के दौरान वाई, एक घंटा हेपरिन खारा फ्लश (0.05 मिलीग्राम) किया जाना चाहिए। निरंतर प्रेरणा शिरापरक कैथेटर प्रत्यक्षता बनाए रखता है। लाइन कनेक्शन और फ्लश के दौरान करीब ध्यान लाइन में कोई हवाई बुलबुले हैं बीमा करने के लिए भुगतान किया जाना चाहिए। ≥0.1ml के एक हवाई बुलबुले फेफड़े, मस्तिष्क या अन्य अंगों में एक दिल का आवेश में परिणाम कर सकते हैं। Hemodynamic waveforms दर्ज की गई और अध्ययन के पाठ्यक्रम पर विश्लेषण कर रहे हैं। एक्स अक्ष में समय जब compressing, चित्रा 3 एक घंटा के पाठ्यक्रम पर मानचित्र और CVP में परिवर्तन के साथ ही दर और vasopressor निषेचन के प्रभाव में परिवर्तन को दर्शाता है।

प्रक्रिया कई संभावित सीमाएं हैं। हमारे अध्ययन में, कैथेटर अप करने के लिए 11 दिनों के लिए पेटेंट रहते हैं। यह कैथेटर इस अवधि से परे पेटेंट रहेगा कितनी देर तक अज्ञात है। के रूप में वर्णित कैथेटर को फिट करने के लिए, मोटे तौर पर कृंतक वजन के साथ संबद्ध है, जो एक न्यूनतम नाड़ी आकार, वहाँ है, इस अध्ययन में दाखिला लिया जानवरों की आवश्यकता से अधिक होना करने के लिए200 ग्राम। एक छोटे कैथेटर व्यास का उपयोग प्रत्यक्षता को कम करने के लिए प्रवाह प्रतिरोध को बढ़ाने में नतीजा होगा। केंद्रीय शिरापरक दबाव उपायों बनना अध्ययन की अवधि के दौरान आकार और विकास के लिए खाते में पर्याप्त आलिंद में सटीक कैथेटर नियुक्ति की आवश्यकता है और एक चुनौती हो सकती है।

एक बार में महारत हासिल है, धमनी और नाड़ी कैथीटेराइजेशन इंस्ट्रूमेंटेशन के दौरान किसी भी दर्द और संकट को कम करने के लिए या एक बार बरामद हैंडलिंग, जबकि तरल पदार्थ या उपचारों के hemodynamic निगरानी, ​​रक्त नमूने, और निषेचन की आवश्यकता होती है कृंतक मॉडल की एक विस्तृत विविधता के लिए आधार प्रदान कर सकते हैं। वास्तव में, ऊरु नस के पिछले जौव प्रकाशन 10 का वर्णन कैथीटेराइजेशन के साथ संयोजन के रूप में, हम सफलतापूर्वक तीन प्रत्यारोपित कैथेटर के साथ इस मॉडल का प्रदर्शन किया है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Straight micro dissecting forceps Roboz RS-8102 surgical instrument
Delicate straight hemostatic forceps Roboz RS-7114 surgical instrument
Delicate curved hemostatic forceps Miltex  7-4 surgical instrument
Serrefine curved, very delicate micro clamp Roboz RS-5471 surgical instrument
Micro dissecting hook Miltex 19-220 surgical instrument
Angled on edge micro dissecting spring scissor Roboz RS-5618 surgical instrument
Light operating scissor Roboz RS-6750 surgical instrument
Scalpel handle and blade (#10) Cincinnati Surgical RS-9843 surgical instrument
Pack of 4-0 silk suture with curved needle Ethicon FS-2 surgical instrument
Straight micro suturing needle holder Roboz RS-6410 surgical instrument
Wound clip Stoelting 59027 surgical instrument
Sterile gauze 2"x2"  Dynarex 3362 consumable
Gauze 4"x4"  Covidien 2556 consumable
Anesthesia vaporizer Surgivet V703001 equipment
Lucite box Custom equipment
Isoflurane Baxter equipment
Downdraft Table Airscience equipment
Table top surgical platform Custom equipment
Arterial Catheter Custom - Scientific Commodities Inc. consumable
Venous Catheter Custom - Scientific Commodities Inc. consumable
Data acquisition system ADInstruments Powerlab 16/30 equipment
Data analysis software ADInstruments LabChart v7.3 equipment
Programmable infusion pumps Harvard Apparatus PHD Ultra equipment

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Buckingham, R. E. Indwelling catheters for direct recording of arterial blood pressure and intravenous injection of drugs in the conscious rat. J Pharm. Pharmacol. 28, (5), 459-461 (1976).
  2. Buckle, J. W., Nathaniels, P. W. Proceedings: A dual catheter system for the simultaneous infusion and sampling of the vascular system of the unrestrained rat. J. Physiol. 242, (2), 55P-56P (1974).
  3. Solomon, S. B., et al. Effective dosing of lipid A analogue E5564 in rats depends on the timing of treatment and the route of Escherichia coli infection. J. Infect. Dis. 193, (5), 634-644 (2006).
  4. Cui, X., et al. Bacillus anthracis cell wall produces injurious inflammation but paradoxically decreases the lethality of anthrax lethal toxin in a rat model. Intensive Care Med. 36, (1), 148-156 (2010).
  5. Quezado, Z. M., Natanson, C. Systemic hemodynamic abnormalities and vasopressor therapy in sepsis and septic shock. Am. J. Kidney Dis. 20, (3), 214-222 (1992).
  6. Perdue, P. W., Kazarian, K. K., Nevola, J., Law, W. R., Williams, T. The use of local and systemic antibiotics in rat fecal peritonitis. J. Surg. Res. 57, (3), 360-365 (1994).
  7. Qiu, P., et al. The individual survival benefits of tumor necrosis factor soluble receptor and fluid administration are not additive in a rat sepsis model. Intensive Care Med. 37, (10), 1688-1695 (2011).
  8. Cui, X., et al. Severity of sepsis alters the effects of superoxide anion inhibition in a rat sepsis model. J. Appl. Physiol. 97, (4), 1349-1357 (2004).
  9. Karzai, W., et al. Protection with antibody to tumor necrosis factor differs with similarly lethal Escherichia coli versus Staphylococcus aureus pneumonia in rats. Anesthesiology. 99, (1), 81-89 (2003).
  10. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements. J. Vis. Exp. (59), e3496 (2012).
मन्या धमनी और गले नस की कैथीटेराइजेशन एक सचेत चूहे मॉडल में, सुई लेनी है और रक्त का नमूना लेना hemodynamic उपाय प्रदर्शन करने के लिए
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Feng, J., Fitz, Y., Li, Y., Fernandez, M., Cortes Puch, I., Wang, D., Pazniokas, S., Bucher, B., Cui, X., Solomon, S. B. Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model. J. Vis. Exp. (95), e51881, doi:10.3791/51881 (2015).More

Feng, J., Fitz, Y., Li, Y., Fernandez, M., Cortes Puch, I., Wang, D., Pazniokas, S., Bucher, B., Cui, X., Solomon, S. B. Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model. J. Vis. Exp. (95), e51881, doi:10.3791/51881 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter