Summary
एक प्रक्रिया चूहों में शराब की मांग व्यवहार के नवीकरण वर्णित है ट्रिगर करने के लिए एक शराब जुड़े पर्यावरण के संदर्भ की क्षमता का अध्ययन करने के लिए.
Abstract
पर्यावरण संदर्भों में जो दुरुपयोग की दवाओं लालसा, संयमी नशा करने वालों में दवा की मांग व्यवहार और शीघ्र पतन की सुविधा कर सकते हैं कि एक व्यक्तिपरक Pavlovian वातानुकूलित प्रतिक्रिया ट्रिगर कर सकते हैं खपत होती है. हम चूहों में शराब की मांग व्यवहार पर संदर्भ के प्रभाव मध्यस्थता कि व्यवहार और तंत्रिका प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए एक प्रक्रिया विकसित किया है. स्वाद के लिए दशानुकूलन और घर पिंजरे में 15% इथेनॉल के औषधीय प्रभाव के बाद, पुरुष लंबी इवांस चूहों कंडीशनिंग कक्षों में Pavlovian भेदभाव प्रशिक्षण (पीडीटी) प्राप्त होता है. प्रत्येक दैनिक (सोमवार शुक्र) पीडीटी सत्र में, 16 परीक्षणों दो अलग 10 सेकंड श्रवण वातानुकूलित उत्तेजनाओं से प्रत्येक होते हैं. एक उत्तेजना के दौरान, सीएस +, 15% इथेनॉल के 0.2 मिलीलीटर मौखिक खपत के लिए एक तरल पदार्थ बंदरगाह में कर दिया है. दूसरे प्रोत्साहन, CS-, इथेनॉल के साथ बनती नहीं है. सत्र के पार, CS- दौरान प्रविष्टियों जबकि सीएस + वृद्धि के दौरान तरल पदार्थ पोर्ट में प्रविष्टियों, एक predi यह दर्शाता है कि एक कम स्तर पर स्थिरसीएस + और इथेनॉल के बीच ctive एसोसिएशन हासिल कर ली है. पीडीटी के दौरान प्रत्येक कक्ष, दृश्य घ्राण और स्पर्श प्रासंगिक उत्तेजनाओं की एक विशिष्ट विन्यास के साथ सुसज्जित है. पीडीटी के बाद, विलुप्त होने प्रशिक्षण अब प्रासंगिक उत्तेजनाओं की एक अलग विन्यास के साथ सुसज्जित है कि एक ही कक्ष में आयोजित किया जाता है. सीएस + और CS- से पहले के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं, लेकिन इथेनॉल सीएस + दौरान बंदरगाह प्रविष्टियों में एक क्रमिक गिरावट का कारण बनता है, जो रोक लगाई है. परीक्षण में चूहों पीडीटी संदर्भ में वापस रखा जाता है और पहले के रूप में सीएस + और CS- के साथ प्रस्तुत किया है, लेकिन इथेनॉल के बिना. इस हेरफेर CS- दौरान जवाब देने में कोई परिवर्तन के साथ भविष्य कहनेवाला सीएस + शराब के दौरान किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों की संख्या में एक मजबूत और चयनात्मक वृद्धि, हो सके. संदर्भ प्रेरित नवीकरण के रूप में निर्दिष्ट इस आशय, Pavlovian शराब संकेतों के जवाब में शराब की मांग व्यवहार को प्रोत्साहित करने के लिए शराब की खपत के साथ जुड़े संदर्भों के शक्तिशाली क्षमता दिखाता है.
Introduction
शांत शेष शराब के सेवन विकारों से पीड़ित व्यक्तियों द्वारा सामना की काफी चुनौती है. संयम, Pavlovian कंडीशनिंग के माध्यम से, मद्यपान 1,2 के साथ जुड़ा हो सकता है, जो नियमित तौर पर शराब का उपयोग के साथ कि पर्यावरण उत्तेजनाओं, के, व्यवहार मनोवैज्ञानिक और शारीरिक प्रभाव के लिए जोखिम का समय है. शराब भविष्य कहनेवाला संकेतों के संपर्क में डूबने 3,4 की सुविधा है कि शराब की मांग व्यवहार को बढ़ावा देने के कर सकते हैं, जो इस तरह के शराब तरस के रूप में वातानुकूलित प्रतिक्रियाओं, बटोर सकते हैं.
शराब की खपत के लिए नेतृत्व कि व्यवहार के टकसाली दृश्यों उत्तेजनाओं के कुछ प्रकार के नियमित शराब सेवन के औषधीय प्रभाव से ठीक पहले अनुभव किया जा करने के लिए पैदा कर सकता है. उदाहरण के लिए, दृष्टि, गंध और शराब का स्वाद मज़बूती से नशा पूर्व में होना है कि शराब का संवेदी गुण हैं. 'असतत' या 'PROXIMA के रूप में भेजा जाता है, जो इस तरह के संकेत, के अलावाएल 'cues, दवाओं नियमित रूप से भी तरस 5,6 उत्तेजित कर सकते हैं उपयोग किया जाता है, जिसमें पर्यावरण संदर्भों. दवाओं पहले इसलिए पलटा 7 के लिए एक महत्वपूर्ण ट्रिगर हो सकता है इस्तेमाल किया गया है, जिसमें शारीरिक स्थानों के लिए एक्सपोजर.
पशु मॉडलों दवा की मांग व्यवहार 8-13 पर दवा जुड़े संदर्भों का प्रभाव मध्यस्थता कि तंत्रिका तंत्र का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है. इस के साथ साथ वर्णित प्रक्रिया शराब की खपत के साथ जुड़े संदर्भों एक असतत, शराब भविष्य कहनेवाला Pavlovian क्यू द्वारा हासिल की है कि शराब की मांग व्यवहार मिलाना सकता है की जांच के लिए अनुमति देता है.
Pavlovian भेदभाव प्रशिक्षण चूहों behaviorally दो श्रवण वातानुकूलित उत्तेजनाओं, शराब के साथ रखा जाता है कि एक सीएस +, और नहीं है कि एक CS- के बीच भेद करने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है, जहां एक विशिष्ट पर्यावरण के संदर्भ में आयोजित किया जाता है. विलुप्त सत्र फिर सीएस का जवाब जहां एक अलग संदर्भ में आयोजित की जाती हैंशराब का एक परिणाम पर रोक लगाई जा रही है के रूप में + कम हो. बाद में, शराब जुड़े, Pavlovian प्रशिक्षण प्रसंग को reexposure CS- का जवाब देने में कोई परिवर्तन के साथ सीएस + द्वारा हासिल शराब की मांग व्यवहार में एक चयनात्मक वृद्धि, हो सके. हम लगातार 9,14-16 दोहराया है जो यह परिणाम, दवा संदर्भों दवा वितरण 10,13 के साथ जुड़े स्फूर्त प्रतिक्रियाओं के नवीकरण को प्रोत्साहित करने के लिए पाया गया है जिसमें वाद्य कंडीशनिंग प्रक्रियाओं से निष्कर्ष फैली हुई है.
Protocol
सभी प्रक्रियाओं Concordia विश्वविद्यालय में पशु अनुसंधान आचार समिति ने मंजूरी दे दी है और पशु की देखभाल पर कनाडा परिषद से सिफारिशों के साथ सहमत हैं.
1 पशु
- (- आगमन पर 240 ग्राम 220) पुरुष लंबी इवांस चूहों प्राप्त करते हैं.
- 7:00 पर रोशनी के साथ एक 12 घंटे प्रकाश अंधेरे चक्र पर एक तापमान (21 डिग्री सेल्सियस) और आर्द्रता (44%) नियंत्रित जानवरों की देखभाल की सुविधा में चूहों, पर बनाए रखें.
- आगमन पर जोड़ी घर में चूहों. 3 दिनों के बाद, व्यक्तिगत रूप से बीटा चिप बिस्तर, एक नायलॉन हड्डी, और मानक चूहे चाउ और पानी के लिए नि: शुल्क प्रवेश के साथ प्लास्टिक shoebox पिंजरों में घर चूहों. पानी की बोतल के अलावा, एक दूसरी बोतल के बाद नियुक्ति के लिए अनुमति देने के लिए डबल grommets है कि पिंजरे पलकों का प्रयोग करें. नोट: व्यक्तिगत रूप से जैसे ही वे जानवरों की देखभाल की सुविधा में आने के रूप में चूहे रखे जा सकते हैं.
- दैनिक चूहों को संभालने के लिए शुरू करो. नोट: एक गाइड के रूप में, से निपटने में से एक सप्ताह गड़बड़ी होने के लिए उन्हें acclimate करने के लिए आमतौर पर पर्याप्त हैऊपर cked और प्रयोगकर्ता ने संभाला.
घर पिंजरे में 2 विरामी इथेनॉल पहुंच
नोट: घर पिंजरे में आचार विरामी इथेनॉल का उपयोग चूहों प्रयोग के व्यवहार प्रशिक्षण चरण 17-19 शुरू होने से पहले इथेनॉल की physiologically प्रासंगिक मात्रा पीना होगा कि यह सुनिश्चित करने के लिए. यह हल्के या गहरे चक्र के दौरान किसी भी समय पर शुरू किया जा सकता है, हालांकि, प्रकाश चरण के दौरान इस प्रक्रिया आरंभ करें.
- प्रत्येक चूहे के लिए दो बोतलें तैयार करें.
- एक 100 मिलीलीटर की प्लास्टिक इथेनॉल की बोतल और एक 473 मिलीलीटर मानक प्लास्टिक की पानी की बोतल के रूप में सिलेंडर स्नातक की उपाधि का प्रयोग करें. कारण रिसाव और वाष्पीकरण के लिए इथेनॉल के नुकसान को कम करने के लिए, लगभग अधिकतम मात्रा क्षमता से भरा एक अपेक्षाकृत छोटे क्षमता इथेनॉल बोतल, का प्रयोग करें.
- नल के पानी में 95% इथेनॉल गिराए द्वारा किए गए 15% इथेनॉल के साथ एक बोतल भरें. नोट: अन्य इथेनॉल सांद्रता, ऐसे 10% या 20% के रूप में, 15% इथेनॉल के स्थान पर प्रयोग किया जा सकता है.
- फाईनल के पानी के साथ दूसरी बोतल करेंगे.
- प्रत्येक बोतल में, रिसाव कम करने के लिए एक गेंद असर होता है कि एक sipper ट्यूब के साथ, एक रबर डाट डालें.
- नियंत्रण पिंजरों में चूहों या बिस्तर शामिल नहीं है कि अपवाद के साथ घर पिंजरों को हूबहू इलाज दो नियंत्रण पिंजरों की स्थापना की.
- 2.1.4 - कदम 2.1.1 के रूप में निर्दिष्ट नियंत्रण पिंजरों के लिए इथेनॉल और पानी की बोतलें तैयार करें.
- (- 2.8.2 कदम 2.8.1 में वर्णित है) इथेनॉल पहुँच सत्र के पाठ्यक्रम पर हो सकता है कि spillage और / या वाष्पीकरण के लिए नियंत्रित करने के लिए नियंत्रण पिंजरों से प्राप्त उपायों का प्रयोग करें.
- सभी इथेनॉल और पानी की बोतलें वजन. सभी वजन रिकॉर्ड.
- सभी चूहों वजन. सभी वजन रिकॉर्ड.
- इथेनॉल बोतल और प्रत्येक घर पिंजरे पर पानी की बोतल रखें और एक ही समय में पिंजरे नियंत्रित करते हैं. 24 घंटे के लिए पिंजरों पर दोनों बोतलों छोड़ दें.
- 24 घंटे की अवधि के अंत में, से दोनों बोतलों को दूरएक ही समय में पिंजरों.
- सभी इथेनॉल और पानी की बोतलें वजन. सभी वजन रिकॉर्ड.
- यह 24 घंटा पहले प्रत्येक चूहे के लिए घर पिंजरे पर रखा गया था जब यह बोतल के वजन से घर पिंजरे से निकाल दिया गया जब 24 घंटे की अवधि के दौरान भस्म हो गया था कितना इथेनॉल और पानी का निर्धारण करने के लिए, प्रत्येक बोतल की वजन घटाना.
- दो नियंत्रण पिंजरों लिए एक ही है, और उसके बाद प्रत्येक तरल पदार्थ के लिए spillage की औसत राशि की गणना.
- प्रत्येक चूहे के लिए इसी इथेनॉल और पानी की खपत के उपायों से क्रमश: इथेनॉल और पानी spillage, की औसत राशि घटाना.
- ग्राम / किलोग्राम, पानी की खपत, और इथेनॉल वरीयता में इथेनॉल की खपत की गणना करने के लिए इन spillage नियंत्रित अंतर उपायों का प्रयोग करें.
- इथेनॉल खपत (ग्राम / किग्रा), पहले कुल समाधान (इथेनॉल + पानी घटकों) के घनत्व के आधार पर मात्रा (एमएल) में भस्म इथेनॉल समाधान के वजन (छ) परिवर्तित की गणना करने के लिए, के अनुसारसूत्र वॉल्यूम (एमएल) = वजन (छ) / घनत्व (छ / एमएल). नोट: समाधान के घनत्व इथेनॉल एकाग्रता के एक समारोह के रूप में अलग अलग होंगे.
- अगला, भस्म वजन (छ) इथेनॉल की उपज, प्रयुक्त विशिष्ट प्रतिशत समाधान के लिए बढ़ाया इथेनॉल का घनत्व (छ / एमएल) द्वारा खपत इथेनॉल समाधान की मात्रा (एमएल) गुणा.
- इथेनॉल खपत के ग्राम / किलो उपाय प्राप्त करने के लिए चूहे के वजन (किलो) द्वारा खपत इथेनॉल का वजन (ग्राम) विभाजित करते हैं.
- इथेनॉल पसंद की गणना करने के लिए, कुल तरल पदार्थ (इथेनॉल + पानी, एमएल) सेवन का एक प्रतिशत के रूप में इथेनॉल का सेवन (माले) व्यक्त करते हैं.
- चूहे घर पिंजरे में ही वापस पानी की बोतल लौटें. अगले 24 घंटे के लिए, पानी के लिए चूहों का उपयोग कर दे, लेकिन इथेनॉल नहीं. इसके बजाय एक इथेनॉल बोतल की, घर पिंजरे पर एक पूर्व तौला दूसरा पानी की बोतल रखें.
- 24 घंटे की अवधि के अंत में, एक ही समय में पिंजरे से दोनों पानी की बोतलों को हटा दें.
- पानी की बोतलों के दोनों सेट वजन. रिकॉर्ड सभी वीghts.
- यह कदम 2.8.1 में वर्णित के रूप में नियंत्रण पिंजरों से प्राप्त औसत spillage उपाय बाहर घटाकर, 24 घंटा पहले घर पिंजरे पर रखा गया था जब यह बोतल के वजन से घर पिंजरे से निकाल दिया गया है जब प्रत्येक बोतल की वजन घटाना - 2.8.2.
- पानी की खपत की गणना करने के लिए इन spillage नियंत्रित अंतर उपायों का प्रयोग करें.
- 2.14 के माध्यम से कदम 2.1 में वर्णित के रूप में, चूहों को इथेनॉल और पानी की बोतलें दोनों प्रदान करके फिर चक्र शुरू.
- इथेनॉल खपत के उच्च और स्थिर स्तर को प्रेरित करने के लिए कई के लिए (लगभग 12) सत्र में इस चक्र को दोहराएँ. घर पिंजरे में इथेनॉल खपत के प्रतिनिधि परिणाम (छ / किग्रा) के लिए चित्रा 1 देखें.
- एक ओर वरीयता के विकास को रोकने के लिए सत्र के पार पिंजरे ढक्कन पर इथेनॉल और पानी की बोतल के स्थानिक स्थिति वैकल्पिक.
- भर में सटीक और स्थिर इथेनॉल एकाग्रता सुनिश्चित करने के लिए प्रति सप्ताह एक बार एक ताजा इथेनॉल समाधान करेंसत्र. इस दृष्टिकोण का उपयोग समय की लंबी अवधि से अधिक इथेनॉल के वाष्पीकरण के प्रभाव को कम.
3 उपकरण
- एक हवादार, ध्वनि attenuating कक्ष के अंदर सदन प्रत्येक कंडीशनिंग चैम्बर.
- प्रत्येक कंडीशनिंग एक स्टेनलेस स्टील धातु की छड़ मंजिल के कक्ष, एक स्पष्ट polycarbonate छत, स्पष्ट polycarbonate पीछे की दीवार और सामने के दरवाजे, और एल्यूमीनियम धातु पैनल sidewalls का निर्माण.
- केंद्रीय सही धातु sidewall के आधार के पास एक तरल पदार्थ बंदरगाह स्थापित करें. पोर्ट में प्रविष्टियों का पता लगाने के लिए एक अवरक्त photocell के साथ तरल पदार्थ बंदरगाह के द्वार लैस.
- एक कुंद इत्तला दे दी सुई का उपयोग इथेनॉल युक्त एक 20 मिलीलीटर सिरिंज के लिए तरल पदार्थ बंदरगाह के पीछे से पॉलीथीन टयूबिंग कनेक्ट करें. ध्वनि attenuating कक्ष के बाहर स्थित एक सिरिंज पंप में सिरिंज रखें. Pavlovian भेदभाव प्रशिक्षण सत्र के लिए, पंप में रखने से पहले सिरिंज में इथेनॉल लोड. प्रधानमंत्री ट्यूबिंग बीवाई मैन्युअल पंप को आगे बढ़ाने, और फिर तरल पदार्थ बंदरगाह से अतिरिक्त इथेनॉल दूर पोंछ.
- बाएं sidewall पर, कक्ष की छत के पास केन्द्र में एक सफेद houselight स्थापित करें.
- एक क्लिकर (2 हर्ट्ज चक्र) और छोड़ दिया sidewall के ऊपरी बाएं कोने में स्पीकर के साथ एक सफेद शोर जनरेटर स्थापित करें.
- एक विशिष्ट संदर्भ बनाने के लिए दृश्य, घ्राण, और स्पर्श उत्तेजनाओं की एक विशिष्ट विन्यास के साथ प्रत्येक कंडीशनिंग चैम्बर कपड़े.
- दो अलग संदर्भों, प्रसंग 1 और संदर्भ के रूप में 2 अन्य आधे के रूप में कंडीशनिंग कक्षों की नामित प्रसंग 1 और प्रसंग 2 कॉन्फ़िगर आधे का उपयोग करें.
- एक पेट्री डिश में काले गत्ता छत और सामने से पैनलों और वापस कक्ष की दीवारों, (नल के पानी में गिराए नींबू तेल से बना 10% वी / वी) स्प्रे नींबू गंध जगह है और केंद्र में जगह है, प्रसंग 1 बनाने के लिए चैंबर के फर्श के नीचे एक धातु अपशिष्ट ट्रे, और धातु अनुसंधान पर एक स्पष्ट polycarbonate मंजिल पैनल डालनेआयुध डिपो मंजिल. शोषक कागज तौलिया या बेंच लाइनर के साथ बेकार ट्रे लाइन.
- प्रसंग 2 बनाने के लिए, वे साफ कर रहे हैं, ताकि एक पेट्री डिश में (नल के पानी में benzaldehyde गिराए द्वारा किए गए 10% वी / वी,) बादाम गंध स्प्रे और केन्द्र जगह, खुला कक्ष की छत और आगे और पीछे दीवारों छोड़ चैंबर के फर्श के नीचे एक धातु अपशिष्ट ट्रे, और में धातु की छड़ मंजिल पर एक छिद्रित धातु मंजिल पैनल डालें. शोषक कागज तौलिया या बेंच लाइनर के साथ बेकार ट्रे लाइन.
4 आदी होना
व्यवहार प्रशिक्षण के कमरे में चूहों आदत डालना और कंडीशनिंग कक्षों के भीतर दो संदर्भों में से प्रत्येक. प्रयोग के इस चरण के लिए, 20 मिलीलीटर सीरिंज में इथेनॉल लोड नहीं है.
- दो छोटी आदी होना सत्र में प्रयोगशाला में व्यवहार प्रशिक्षण के कमरे में जानवरों की देखभाल की सुविधा से ले जाया जा रहा है की प्रक्रिया के लिए चूहों आदत डालना.
- पहले सत्र में, चूहों लोड मैंn उनके घर पशुओं की देखभाल की सुविधा में एक चक्र गाड़ी पर पिंजरों, और प्रयोगशाला में व्यवहार प्रशिक्षण कक्ष के लिए उन्हें परिवहन. , कमरा रोशनी रोशन प्रत्येक ध्वनि attenuating कक्ष में प्रशंसकों पर बारी, कमरे से बाहर निकलें, दरवाजा बंद है, और गाड़ी पर उनके घर पिंजरों में जबकि शेष चूहों, 20 मिनट के लिए इस नए वातावरण को समायोजित करें. इस 20 मिनट की अवधि के अंत में, जानवरों की देखभाल की सुविधा के लिए चूहों वापसी.
- दूसरे सत्र में, प्रयोगशाला में व्यवहार प्रशिक्षण के कमरे में चूहों लाना. जैसा कि पहले, कमरे में रोशनी और कक्ष प्रशंसकों छोड़ दें. दरवाजा distractions को कम करने के लिए बंद कर दिया साथ, कमरे में रहते हैं, और संभाल और व्यवहार प्रशिक्षण कक्ष में प्रत्येक चूहा तौलना. वजन रिकॉर्ड, और फिर जानवरों की देखभाल की सुविधा के लिए चूहों वापसी.
- दो छोटी आदी होना सत्र में कंडीशनिंग कक्षों के लिए चूहों आदत डालना.
- , व्यवहार प्रशिक्षण के कमरे में चूहों को परिवहन प्रत्येक चूहे के वजन रिकॉर्ड,और उसके नामित कंडीशनिंग कक्ष में प्रत्येक चूहा लोड.
- पहले आदी होना सत्र में आधा प्रसंग 1 के रूप में कक्षों और संदर्भ के रूप में 2 शेष की स्थापना की.
- दूसरा आदी होना सत्र में पिछले सत्र में इस्तेमाल नहीं किया गया था कि संदर्भ के साथ प्रत्येक कक्ष की स्थापना की.
- चूहों की कि इस तरह के आधा पहला आदर्श प्रसंग 1 द्वारा पीछा किया, पहला प्रसंग 2 को उजागर कर रहे प्रसंग 2, और दूसरे आधे से पीछा किया, प्रसंग 1 को उजागर कर रहे हैं, एक counterbalanced फैशन में आदी होना सत्र आचरण में दोनों आदी होना सत्र का संचालन यदि आवश्यक हो तो वे दो दिन में फैलाया जा सकता है, हालांकि उसी दिन,.
- आदी होना सत्र के लिए, कार्यक्रम जारी किया गया है के बाद houselight 1 मिनट रोशन करने के लिए एक कंप्यूटर प्रोग्राम का उपयोग करें. एक 20 मिनट के सत्र के दौरान किए गए तरल पदार्थ बंदरगाह प्रविष्टियों की कुल संख्या रिकार्ड. सत्र के अंत में, बंद करने के लिए houselight कार्यक्रम. आदी होना सत्र के दौरान किसी भी इथेनॉल या संकेतों मौजूद नहीं है.
- उपकरण (जैसे, तल पैनलों, अपशिष्ट ट्रे, पेट्री डिश) साफ करें. अधिक जानकारी के लिए कदम 5.7 देखें.
5 Pavlovian भेदभाव ट्रेनिंग (पीडीटी)
Behaviorally ट्रेन चूहों इथेनॉल और नहीं है कि एक दूसरे श्रवण क्यू के साथ रखा जाता है कि एक श्रवण क्यू के बीच भेदभाव. प्रयोग के इस चरण के लिए, 15% इथेनॉल के साथ 20 मिलीलीटर सीरिंज भरें.
- कदम 3.3.2 और 3.3.3 में वर्णित के रूप में, एक विशिष्ट संदर्भ बनाने के लिए एक दृश्य, घ्राण की विशिष्ट विन्यास, और स्पर्श उत्तेजनाओं के साथ प्रत्येक कंडीशनिंग चैम्बर संगठन
- इथेनॉल खपत और वरीयता के आधार पर, संदर्भ 1 और एक counterbalanced फैशन में प्रसंग से 2 अन्य आधा करने के लिए चूहों के आधे निरुपित घर पिंजरे इथेनॉल का उपयोग प्रक्रिया के पिछले 2 सत्रों में औसत. शेष भाग को देखेंext प्रसंग ए नोट के रूप में पीडीटी दौरान इस्तेमाल किया: प्रत्येक चूहे ही प्रशिक्षण के इस चरण में एक संदर्भ का अनुभव होना चाहिए.
- घ्राण प्रोत्साहन प्रत्येक कंडीशनिंग चैम्बर के लिए जोड़ा जा करने के लिए पिछले प्रासंगिक उत्तेजना है कि सुनिश्चित करें. घ्राण उत्तेजना होते हैं और अलग odors के comingling कम करने के लिए चैम्बर और ध्वनि attenuating कक्ष के दरवाजे बंद करें.
- , व्यवहार प्रशिक्षण कक्ष में चूहों लाओ प्रत्येक चूहे के वजन रिकॉर्ड, और उसके नामित कंडीशनिंग कक्ष में प्रत्येक चूहा लोड.
- प्रत्येक पीडीटी सत्र के दौरान की घटनाओं के निम्नलिखित क्रम को नियंत्रित करता है कि कंप्यूटर कार्यक्रम आरंभ.
- कार्यक्रम के बाद 5 मिनट जारी की गई है, houselight रोशन.
- सफेद शोर प्रोत्साहन पेश और क्लिकर 16 बार प्रत्येक उत्तेजना. सीएस + होने के लिए इन श्रवण उत्तेजनाओं की एक निर्धारित करते हैं और अन्य दोनों संदर्भों में एक counterbalanced फैशन में, CS- हो.
- प्रत्येक सीएस + और CS- परीक्षण एल बनाओAST 10 सेकंड.
- सीएस + का पिछले 6 सेकंड के दौरान तरल पदार्थ पोर्ट में 0.2 मिलीलीटर इथेनॉल उद्धार. CS- के दौरान किसी भी इथेनॉल वितरित नहीं है.
- प्रत्येक पीडीटी सत्र औसत पर पिछले 58 मिनट बनाओ. एक चर समय 67 सेकंड समय पर सीएस + और CS- प्रत्येक प्रस्तुत करते हैं.
- 10 सेकंड सीएस अंतराल के दौरान रिकॉर्ड द्रव बंदरगाह प्रविष्टियां (सीएस प्रस्तुति के दौरान 10 सेकंड), 10 सेकंड पूर्व सीएस अंतराल (तुरंत पहले सीएस शुरुआत करने के लिए 10 सेकंड), और 10 सेकंड के बाद सीएस अंतराल (तुरंत 10 सेकंड निम्नलिखित सीएस सीएस + और CS- प्रस्तुतियों, साथ ही पूरे सत्र के लिए कुल द्रव बंदरगाह प्रविष्टियों दोनों के लिए) ऑफसेट. इसके अलावा इन अंतराल के दौरान किए गए प्रत्येक बंदरगाह प्रविष्टि की अवधि रिकॉर्ड है.
- सत्र के अंत में, houselight बंद कर देते हैं.
- , कक्षों से चूहों निकालें उनके घर पिंजरों में उन्हें वापस, और जानवरों की देखभाल की सुविधा के लिए उन्हें वापस परिवहन.
- चूहों प्रत्येक पीडीटी एस में दिया इथेनॉल के 3.2 मिलीलीटर सेवन किया है कि यह सुनिश्चित करने के लिए तरल पदार्थ बंदरगाहों की जाँचession.
- पानी की एक छोटी राशि युक्त एक 60 मिलीलीटर सिरिंज के साथ पॉलीथीन टयूबिंग के बाहर इथेनॉल फ्लश. फिर, यह सूखा है बनाना, एक दूसरे, खाली सिरिंज का उपयोग ट्यूबिंग के माध्यम से हवा के 60 मिलीग्राम से गुजरती हैं.
- उपकरण साफ करें. दैनिक सफाई के लिए, तल पैनलों, अपशिष्ट ट्रे, और पेट्री डिश धोने. एक सप्ताह में एक बार, पूरे कंडीशनिंग चैम्बर साफ. प्रयोगात्मक तंत्र में अवांछित odors को शुरू करने से बचने के लिए सुगंधित उत्पादों की सफाई का प्रयोग न करें.
- चूहों CS- बनाम सीएस + करने के लिए अपने बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं में स्थिर भेदभाव को दिखाने तक दैनिक पीडीटी सत्र जारी रखें. नोट: CS- के जवाब में किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों कम रहना चाहिए जबकि सीएस + के जवाब में किए गए पोर्ट प्रविष्टियों, सत्रों में वृद्धि करनी चाहिए. आवश्यक पीडीटी सत्र की सही संख्या एक गाइड के रूप में, पर लगभग 20 सत्रों योजना, भिन्न हो सकते हैं प्रत्युत्तर देना वातानुकूलित भेदभाव, लेकिन प्राप्त करने के.
6 विलुप्त
- प्रत्येक कंडीशनिंग चाम संगठनहिट दृश्य, घ्राण, और स्पर्श उत्तेजनाओं के साथ चूहों पीडीटी सत्र के दौरान अनुभव एक से अलग है कि एक संदर्भ बनाने के लिए. प्रसंग 1 पीडीटी में इस्तेमाल किया गया था अगर उदाहरण के लिए, विलुप्त होने के सत्र के लिए संदर्भ के रूप में 2 कक्ष कॉन्फ़िगर. प्रसंग बी के रूप में विलुप्त होने के दौरान इस्तेमाल के संदर्भ को देखें
- हूबहू पीडीटी सत्र को विलुप्त होने सत्र आयोजित, लेकिन सीएस + दौरान किसी भी इथेनॉल वितरित नहीं है.
- सीएस + और CS- पेश करने के लिए पीडीटी दौरान इस्तेमाल किया गया था कि एक ही कंप्यूटर प्रोग्राम का उपयोग करें.
- प्रयोग के चरणों में स्थिरता बनाए रखने के लिए, सिरिंज पंप में एक खाली सिरिंज लोड, और पंप चालू होने पर छोड़ दें. पॉलीथीन ट्यूबिंग विलुप्त होने सत्र से पहले इथेनॉल शामिल नहीं है सुनिश्चित करें.
- चूहों नहीं रह शो सीएस + और CS- बीच प्रत्युत्तर देना भेदभाव तक दैनिक विलुप्त होने सत्र जारी रखें. नोट: कोई विभिन्न जब तक वहाँ सीएस + के जवाब में किए गए पोर्ट प्रविष्टियों धीरे धीरे विलुप्त होने के सत्र में गिरावट चाहिएCS- के जवाब में बनाया सीएस + के जवाब में किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों और बंदरगाह प्रविष्टियों के बीच nce. भिन्न हो सकते हैं प्रत्युत्तर देना वातानुकूलित, लेकिन एक गाइड के रूप में, पर लगभग 8 सत्रों की योजना बुझाने के लिए आवश्यक विलुप्त होने सत्रों की सही संख्या.
- कदम 5.7 में वर्णित के रूप में, प्रत्येक सत्र के अंत में उपकरण साफ करें.
7 प्रसंग प्रेरित नवीकरण टेस्ट
- पीडीटी सत्र के दौरान अनुभव किया गया था कि संदर्भ बनाने के लिए दृश्य, घ्राण, और स्पर्श उत्तेजनाओं के साथ प्रत्येक कंडीशनिंग चैम्बर लैस. उदाहरण के लिए, एक दिया चूहा पीडीटी सत्र में प्रसंग 1 अनुभवी हैं, परीक्षण सत्र में संदर्भ के रूप में 1 अपने कक्ष को विन्यस्त. प्रसंग ए के रूप में नवीकरण परीक्षण के दौरान इस्तेमाल के संदर्भ को देखें
- हूबहू पीडीटी सत्र के लिए संदर्भ प्रेरित नवीकरण परीक्षण, लेकिन नवीकरण परीक्षण के दौरान किसी भी इथेनॉल वितरित नहीं है. पेश
इथेनॉल रोक सीएस + और पीडीटी सत्र के दौरान पहले की तरह CS-, लेकिन.- एक ही कंप्यूटर जनसंपर्क का प्रयोग करेंसीएस + और CS- पेश करने के लिए पीडीटी दौरान इस्तेमाल किया गया था कि ogram.
- , चरणों में स्थिरता बनाए रखने के लिए सिरिंज पंप में एक खाली सिरिंज लोड, और छोड़ने के लिए पंप पर बदल गया. पॉलीथीन ट्यूबिंग परीक्षण सत्र से पहले इथेनॉल शामिल नहीं है सुनिश्चित करें.
- Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार के संदर्भ प्रेरित नवीकरण का निरीक्षण करें. नोट: यह नवीकरण प्रभाव सीएस + और CS- के सापेक्ष CS-, के जवाब में किए गए बंदरगाह प्रविष्टि व्यवहार में कोई परिवर्तन के साथ, सीएस + के जवाब में किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों की संख्या में एक चयनात्मक वृद्धि से स्पष्ट हो जाएगा पर मनाया प्रत्युत्तर देना विलुप्त होने के प्रशिक्षण के अंत.
- कदम 5.7 में वर्णित के रूप में, सत्र के अंत में उपकरण साफ करें.
Representative Results
घर पिंजरे में विरामी इथेनॉल का उपयोग: - 12 सत्र (चित्रा 1) इथेनॉल की खपत (ग्राम / किग्रा) और घर पिंजरे में आंतरायिक इथेनॉल पहुँच के सत्र में इथेनॉल वरीयता वृद्धि हुई है, जो आम तौर पर 8 के भीतर स्थिर स्तर तक पहुंच गया. चित्र 1 में दिखाया गया डेटा सेट में, स्थिर इथेनॉल खपत घर पिंजरे इथेनॉल पहुँच के पिछले दो सत्रों में औसतन 1.33 से लेकर - व्यक्तिगत चूहों के लिए 6.44 ग्राम / किलो. ग्राम / किलो खपत plateaued है एक बार प्रयोग के घर पिंजरे इथेनॉल खपत चरण रोका जा सकता है, और चूहों सत्र के एक नंबर के लिए पीने के इस स्थिर स्तर पर बनाए रखा है.
इस चरण से डेटा का विश्लेषण करने के लिए, इथेनॉल खपत (ग्राम / किग्रा) और इथेनॉल वरीयता के लिए सत्र के भीतर विषय कारक भर में विचरण (एनोवा) के अलग दोहराया उपायों विश्लेषण आचरण.
संदर्भ प्रेरित नवीकरण प्रक्रिया के योजनाबद्ध: के प्रत्येक चरणप्रयोगात्मक प्रक्रिया (पीडीटी, विलुप्त होने, नवीकरण टेस्ट) चित्रा 2 में सचित्र है. अधिक जानकारी के लिए आंकड़ा कैप्शन देखें.
प्रतिक्रिया उपायों और डेटा विश्लेषण: नीचे वर्णित सभी व्यवहार चरणों में, सीएस + और CS- के दौरान किए गए बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं आधारभूत बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं-CS पूर्व के संदर्भ में सामान्यीकृत कर रहे हैं. सामान्यीकृत सीएस उपायों बनाने के लिए, पूर्व सीएस आधारभूत अंतराल के दौरान किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों की संख्या सीएस + और CS- की प्रस्तुतियों के दौरान किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों की संख्या से (सीएस शुरुआत करने के तुरंत पहले 10 सेकंड) घटाना. व्यवहार के संकेतक आधारभूत स्तर से ऊपर ऊंचा सीएस प्रस्तुतियों ने विशेष रूप से हासिल रूप में सामान्यीकृत सीएस + और सामान्यीकृत CS- उपायों की सेवा.
अलग दोहराया उपायों एनोवा पीडीटी और विलुप्त होने चरणों के लिए सत्र और सीएस प्रकार (CS- बनाम सीएस +) के दोहराया भीतर विषय कारकों के साथ आचरण. चरण भर में तुलना के लिए (पीडीटी, विलुप्त होने, नवीनीकृतअल टेस्ट), उपयोग डेटा पीडीटी और विलुप्त होने के पिछले दो सत्र और दोहराया उपायों एनोवा में नवीकरण परीक्षण डेटा की एक सत्र भर में औसत. कई तुलना के लिए सही कर रहे हैं कि स्वतंत्र या बनती नमूनों के लिए महत्वपूर्ण मुख्य प्रभाव और बातचीत, उपयोग पद अस्थायी टी परीक्षण पर का पालन करें. महत्व के लिए मानदंड α = 0.05 पर निर्धारित है.
पीडीटी: पीडीटी सत्र के पार सीएस + वृद्धि करने के लिए पोर्ट प्रवेश प्रतिक्रियाओं, CS- को बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं कुल मिलाकर, कम और स्थिर रहेगा जबकि. पीडीटी प्रशिक्षण के प्रारंभिक सत्र में थोड़ा बढ़ सकता है CS- तक कि बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं नोट; हालांकि, CS- के जवाब में किए गए बंदरगाह प्रविष्टियों सीएस + के जवाब में किए गए उन लोगों की तुलना में काफी कम स्तर पर स्थिर. सफल भेदभाव सीएस के दौरान बंदरगाह प्रविष्टियों में एक सांख्यिकीय महत्वपूर्ण ऊंचाई इसका सबूत + CS- (चित्रा 3) की तुलना में है. इस परिणाम Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार किया है कि इंगित करता हैएन CS- सीएस + करने के लिए स्थापित किया गया है, लेकिन नहीं.
विलुप्त: सीएस + पोर्ट प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं धीरे धीरे विलुप्त होने के सत्र में गिरावट. CS- को पोर्ट प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं विलुप्त होने सत्रों में कम और स्थिर रहते हैं. आदर्श रूप में, सीएस + और CS- को बंदरगाह प्रविष्टियों के बीच एक सांख्यिकीय महत्वपूर्ण अंतर की कमी इसका सबूत है, विलुप्त होने के प्रशिक्षण के अंत तक समाप्त कर दिया है प्रत्युत्तर देना भेदभाव. हालांकि, यह भी विलुप्त होने के प्रशिक्षण के अंत में रहते हैं, का जवाब देने के साथ भेदभाव के कुछ डिग्री के लिए असामान्य नहीं है. इस मामले में, यह विलुप्त होने प्रशिक्षण, विलुप्त होने के शुरू में सीएस + करने के लिए बंदरगाह प्रवेश प्रतिक्रियाओं से सांख्यिकीय कम कर रहे हैं और साथ ही पीडीटी के अंत में की समाप्ति पर सीएस + तक कि बंदरगाह प्रविष्टि प्रतिक्रियाओं को सत्यापित करने के लिए महत्वपूर्ण है (चित्रा 3) . परिणामों की यह पैटर्न Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार काफी बुझा दिया गया है कि इंगित करता है.
प्रसंग प्रेरित नवीकरण टेस्ट: पोर्टविलुप्त होने के प्रशिक्षण के अंत में मनाया सीएस + बंदरगाह प्रविष्टियों के सापेक्ष संदर्भ प्रेरित नवीकरण परीक्षण में सीएस + वृद्धि हुई है, के लिए प्रवेश के हिमायती हैं. CS- को बंदरगाह प्रविष्टियों अनछुए रहने के रूप में यह वृद्धि, सीएस + करने के लिए चयनात्मक है. इसके अलावा, सीएस + करने के लिए बंदरगाह प्रविष्टियों संदर्भ प्रेरित नवीकरण परीक्षण में CS- को बंदरगाह प्रविष्टियां (चित्रा 4) की तुलना में सांख्यिकीय बुलंद हैं. सीएस + बंदरगाह विलुप्त होने और परीक्षण के बीच प्रविष्टियों, साथ ही सीएस + और परीक्षण के भीतर CS- बंदरगाह प्रविष्टियों की तुलना की तुलना की सांख्यिकीय पुष्टि, परीक्षण में शराब जुड़े प्रसंग से प्रेरित Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार का एक चयनात्मक नवीकरण इंगित करता है.
इथेनॉल खपत और घर पिंजरे में आंतरायिक इथेनॉल पहुँच से प्रेरित पसंद की 1 संवर्धित चित्रा. और मीन# 177; SEM (ए) इथेनॉल की खपत (ग्राम / किग्रा) और घर पिंजरे में आंतरायिक इथेनॉल का उपयोग के 12 सत्र के पार (बी) इथेनॉल पसंद. दोनों उपायों को आम तौर पर सत्र के पार बढ़ाने के लिए और उसके बाद स्थिर. व्यक्तिगत चूहों के लिए 6.44 ग्राम / किलो - स्थिर इथेनॉल खपत 1.33 से लेकर घर पिंजरे इथेनॉल पहुँच के पिछले दो सत्रों में औसत. ये आंकड़े 15% (v / v) इथेनॉल पीने पुरुष लंबी इवांस चूहों का उपयोग कर प्राप्त किया गया.
. चित्रा 2 प्रायोगिक प्रक्रिया का एक योजनाबद्ध प्रक्रिया तीन चरणों के होते हैं: Pavlovian भेदभाव प्रशिक्षण (पीडीटी), विलुप्त होने, और संदर्भ प्रेरित नवीकरण परीक्षण. प्रत्येक पीडीटी सत्र के दौरान, चूहों इथेनॉल के वितरण और 16 परीक्षणों का संकेत है कि एक श्रवण वातानुकूलित प्रोत्साहन (सीएस +) का 16 परीक्षणों प्राप्तइथेनॉल वितरण के साथ संबद्ध नहीं है कि एक दूसरे श्रवण उत्तेजना (CS-). पीडीटी सत्र एक दृश्य, घ्राण की विशिष्ट विन्यास, और स्पर्श उत्तेजनाओं से बना, प्रसंग एक में जगह ले लो. , दृश्य घ्राण, और स्पर्श उत्तेजनाओं का एक अलग सेट से बना प्रसंग बी में आयोजित की जाती हैं जो विलुप्त होने के सत्र के दौरान, सीएस + और CS- प्रस्तुत कर रहे हैं, लेकिन इथेनॉल पर रोक लगाई है. संदर्भ प्रेरित नवीकरण परीक्षण के लिए, चूहों प्रसंग एक को लौट रहे हैं, और सीएस + और CS- इथेनॉल के बिना प्रस्तुत कर रहे हैं. यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्रा 3 अधिग्रहण और भेदभाव Pavlovian वातानुकूलित इथेनॉल के लिए जवाब. मतलब ± SEM सामान्यीकृत बंदरगाह प्रविष्टियों एम के विलुप्त होनेप्रसंग एक में और विलुप्त होने (सत्र 19-26) - पीडीटी भर सीएस + और CS- दौरान (18 सत्र 1) ADE संदर्भ बी में ये आंकड़े 10% के साथ प्रशिक्षित, पुरुष लंबी इवांस चूहों का उपयोग कर प्राप्त किया गया (वी / वी) पीडीटी दौरान सीएस + के सहयोग से प्रस्तुत किया गया था कि असुविधाजनक उत्तेजना (अमेरिका) के रूप में इथेनॉल. * पी <0.05, CS- बनाम सीएस +. चित्रा मूल चौधरी, Sahuque, और जनक (2008) में प्रकाशित. Elsevier से अनुमति के साथ इस्तेमाल किया.
चित्रा 4 प्रसंग प्रेरित प्रसंग ए डाटा में Pavlovian वातानुकूलित इथेनॉल के लिए जवाब. मीन प्रसंग एक में पीडीटी सत्र में सीएस + और CS- के दौरान किए गए ± SEM सामान्यीकृत बंदरगाह प्रविष्टियों, प्रसंग बी में विलुप्त होने के सत्र, और नवीकरण परीक्षण का नवीकरण कर रहे हैं पीडीटी और विलुप्त होने के लिए पिछले दो सत्रों से अधिक औसत; नवीकरण परीक्षण एक सत्र होता है. इनडेटा पीडीटी दौरान सीएस + के सहयोग से प्रस्तुत किया गया था कि असुविधाजनक उत्तेजना (अमेरिका) के रूप में 10% (v / v) इथेनॉल के साथ प्रशिक्षित पुरुष लंबी इवांस चूहों का उपयोग कर प्राप्त किया गया. * पी 0.05 <; ** पी <0.001, CS- बनाम सीएस +. #p <0.05, सीएस + विलुप्त होने बनाम सीएस + पीडीटी. ^ पी <0.05, सीएस + टेस्ट बनाम सीएस + विलुप्त होने. चित्रा मूल चौधरी, Sahuque, और जनक (2008) में प्रकाशित. Elsevier से अनुमति के साथ इस्तेमाल किया.
Discussion
इस प्रक्रिया के परिणाम से नियमित तौर पर शराब वितरण के साथ कि असतत पर्यावरण उत्तेजनाओं शराब की मांग व्यवहार ड्राइव करने की क्षमता हासिल कर सकते हैं कि पता चलता है. उन्होंने यह भी पूर्व उपलब्धता या शराब के अभाव के साथ जुड़े प्रासंगिक उत्तेजनाओं असतत शराब भविष्य कहनेवाला संकेतों को व्यवहार प्रतिक्रियाओं वातानुकूलित मार्गदर्शन कर सकते हैं कि प्रदर्शित करता है.
प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम
वर्तमान कार्य संदर्भों में चूहे को बाहरी हैं कि उत्तेजनाओं को शामिल. हालांकि, परीक्षण में चूहे की interoceptive राज्य भी नवीकरण 20 प्रभावित हो सकता है कि एक 'संदर्भ' का गठन कर सकते हैं. यह intracranial microinfusions या प्रणालीगत इंजेक्शन की तरह, नवीकरण परीक्षण से पहले होने और उनके interoceptive राज्य को बदल सकता है कि किसी भी प्रक्रिया के लिए चूहों आदत डालना जरूरी है. इसके अलावा, microinfusions या प्रणालीगत इंजेक्शन के लिए आदी होना विलुप्त होने और पीडीटी दोनों से पहले आयोजित किया जाना चाहिएessions, प्रयोग के एक विशिष्ट चरण के साथ जुड़े होने से ऐसी प्रक्रियाओं को रोकने के लिए.
ऐसे सीएस अवधि, सीएस अमेरिका अंतराल, और intertrial अंतराल (आईटीआई) के रूप में अस्थायी मापदंडों, लंबे कंडीशनिंग लद 21-26 की एक किस्म में प्रतिक्रिया वातानुकूलित प्रभावित करने के लिए जाने जाते हैं. इसी तरह, लौकिक मापदंडों हमारी प्रक्रिया में नवीकरण प्रभाव का अवलोकन प्रभावित कर सकते हैं. प्रोटोकॉल में निर्दिष्ट के अलावा अन्य मानकों के किसी सेट प्रयोगात्मक बड़ा जांच में उन्हें काम करने के लिए आगे बढ़ने से पहले पायलट अध्ययन में मान्य किया जाना चाहिए.
संशोधन और निवारण
पिछले अनुसंधान चूहों घर पिंजरे में उपभोग कि इथेनॉल की राशि चूहों 17,27 खरीदी कर रहे हैं जिसमें से आपूर्तिकर्ता के एक समारोह के रूप में भिन्न हो सकते हैं कि पाया गया है. प्रदायक इसलिए अध्ययन के इस चरण के लिए एक महत्वपूर्ण विचार है. इसी तरह, चूहा तनाव का चुनाव सह जाना चाहिएइथेनॉल खपत 28-31 में तनाव मतभेद की कई खबरें हैं, के रूप में ध्यान से nsidered.
एक प्रतिकूल कंडीशनिंग प्रतिमान में पहले काम चूहों की विकासात्मक उम्र एक Pavlovian वातानुकूलित डर प्रतिक्रिया 32 के नवीकरण के अवलोकन को प्रभावित करती है कि दिखाया गया है. (प्रसव के बाद सुबह 20 से कम उम्र के) बहुत युवा चूहों में एक नवीकरण प्रभाव की कमी की वजह से प्रासंगिक जानकारी 33 का बिगड़ा एन्कोडिंग के लिए होने का सुझाव दिया गया है. वर्तमान प्रक्रिया में इस्तेमाल किया जा करने के लिए चूहों का विकास उम्र इसलिए ध्यान में रखा जाना चाहिए.
10% 9,16, 15% से 14, या 20% 15 इथेनॉल समाधान घर पिंजरे इथेनॉल का उपयोग और प्रयोग के पीडीटी चरणों के दौरान इस्तेमाल किया गया जब Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार के नवीकरण देखा गया है. शोधकर्ताओं ने उनके laborator में इस प्रक्रिया की स्थापना के उद्देश्यों के लिए इथेनॉल के इन सांद्रता के किसी भी इस्तेमाल कर सकते हैंएँ.
Pavlovian भेदभाव प्रशिक्षण के अधिग्रहण के दौरान यह दिया गया था कि सभी इथेनॉल सेवन किया गया है कि यह सुनिश्चित करने के लिए प्रत्येक सत्र के बाद तरल पदार्थ बंदरगाहों की जांच जरूरी है. एक अतिरिक्त 10 के लिए कंडीशनिंग कक्षों में चूहों छोड़कर - प्रत्येक सत्र के बाद 15 मिनट के सत्र के दौरान खपत नहीं था कि किसी भी इथेनॉल की खपत को प्रोत्साहित करने के लिए जल्दी पीडीटी में किया जा सकता है. पीडीटी प्रगति के रूप में बंदरगाहों में unconsumed इथेनॉल छोड़ने चूहों की संख्या में कमी करनी चाहिए. पीडीटी चूहों के अंत तक या तो कर रहे हैं (एक) सभी इथेनॉल लेने वाली नहीं है और / या (ख) इन विषयों के अध्ययन से हटा दिया जाना चाहिए तो सीएस + का जवाब नहीं. ज्यादातर चूहों मज़बूती CS- से सीएस + करने के लिए अधिक से जवाब. हालांकि, कुछ चूहों जिससे भेदभाव के सबूत नहीं दिखा, दोनों संकेतों को उच्च स्तर पर प्रतिक्रिया हो सकती है. उच्च पीडीटी दौरान सीएस + और CS- दोनों का जवाब पता चलता है कि चूहे अध्ययन से गिरा नहीं कर रहे हैं. हमारे अनुभव में, इन विषयों उल्लेखनीय भेदभाव दिखानेपीडीटी दौरान CS- का जवाब देने के अपने उच्च स्तर तरल पदार्थ बंदरगाह में इथेनॉल की उपस्थिति द्वारा संचालित कर रहे हैं सुझाव है कि इथेनॉल के अभाव में पहले विलुप्त होने के सत्र के दौरान. इन विषयों को भी मजबूत नवीकरण प्रभाव दिखाने के लिए करते हैं.
प्रक्रिया की सीमाओं
नवीकरण परीक्षण इथेनॉल के अभाव में आयोजित किया जाता है, क्योंकि सीएस + द्वारा हासिल वातानुकूलित बंदरगाह प्रविष्टियों धीरे धीरे परीक्षण सत्र भर में कम हो जाना. इसलिए, व्यवहार की समग्र राशि प्रयोगात्मक प्रेरित परिवर्तन का आकलन किया जा सकता है के खिलाफ टेस्ट, पर उत्पन्न काफी कम है. प्रत्युत्तर देना इस कार्य में परीक्षण सत्र के अंत बनाम शुरू में अधिक हो जाता है, क्योंकि यह एक परीक्षण के द्वारा परीक्षण के आधार पर प्रतिक्रिया वातानुकूलित पर प्रयोगात्मक जोड़तोड़ के प्रभाव की जांच करने के लिए महत्वपूर्ण है.
तरल पदार्थ के गोदाम में प्रविष्टियां इस कार्य में मुख्य निर्भर उपाय प्रदान करते हैं. हालांकि, एक गलत बंदरगाह प्रविष्टि regi हो सकता हैएक जानवर अपनी मूंछ के साथ तरल पदार्थ बंदरगाह का उद्घाटन भर अवरक्त किरण को तोड़ने के लिए तरल पदार्थ गोदाम के काफी करीब है अगर stered. निराला, गलत प्रतिक्रियाओं स्पष्ट कर रहे हैं जबकि कुल बंदरगाह में एक नाटकीय वृद्धि पहले सत्र पर विषय के व्यवहार के सापेक्ष प्रविष्टियों के रूप में. जानवरों वीडियोटैपिंग संभव गलत प्रतिक्रियाओं का पता लगाने की सुविधा है, और प्रशिक्षण और परीक्षण के दौरान चूहों द्वारा प्रदर्शित व्यवहार का एक और अधिक परिष्कृत विश्लेषण के लिए अनुमति होगी.
मौजूदा / वैकल्पिक तरीकों के संबंध में तकनीक का महत्व
दवा की मांग व्यवहार के संदर्भ प्रेरित नवीकरण काफी हद तक इस तरह के एक लीवर प्रेस 8,34 या नाक 12 प्रहार के रूप में प्राथमिक निर्भर चर एक स्फूर्त प्रतिक्रिया है, जिसमें एक सहायक कंडीशनिंग काम, अध्ययन का उपयोग कर रहा है. वर्तमान प्रक्रिया में, दवा की मांग प्रतिक्रिया की प्रस्तुतियों से हासिल किया जाता है कि तरल पदार्थ बंदरगाह के लिए 'वातानुकूलित दृष्टिकोण' हैसीएस +. इस प्रतिक्रिया की संभावना पर्यावरण उत्तेजनाओं और मनुष्यों में दुरुपयोग की दवाओं के औषधीय प्रभाव के बीच संघों के गठन mediates कि सीखने की प्रक्रिया है जो Pavlovian सीखने, के माध्यम से प्राप्त कर लिया है.
भविष्य अनुप्रयोगों
इस कार्य Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार 16 के संदर्भ प्रेरित नवीकरण में शामिल कर रहे हैं कि तंत्रिका तंत्र का अध्ययन करने neuropharmacology, optogenetics और neurochemistry के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है. इसके अलावा, Pavlovian वातानुकूलित शराब की मांग व्यवहार के अधिग्रहण और विलुप्त होने को विनियमित कि व्यवहार और तंत्रिका तंत्र की जांच की जा सकती है. अन्त में, इस कार्य, मानव addi में क्यू जोखिम चिकित्सा के बाद दवा भविष्य कहनेवाला संकेतों को जेट पर पर्यावरण संदर्भों जुड़े दवा के प्रभाव को कम करने के उद्देश्य शोधों के लिए एक महत्वपूर्ण दिशा नवीकरण को रोकने सकता है कि विलुप्त होने की जोड़तोड़ का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता हैसीटीएस.
Disclosures
सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं Concordia विश्वविद्यालय पशु अनुसंधान आचार समिति ने मंजूरी दे दी है और पशु की देखभाल पर कनाडा परिषद से दिशा निर्देशों के अनुसार कर रहे थे. इस लेख के खुले उपयोग प्रकाशन मेड एसोसिएट्स इंक से प्रायोजन के द्वारा ही संभव बनाया गया था
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Heavy-duty utility cart | Rubbermaid | #4520-88 | Used to transport rats in their home cage from the colony room to the behavior room or other facilities |
| Rats, Long-Evans | Harlan | Rats weighed 220-240 g on arrival | |
| Ohaus scale | Fisher | #S402421 | For weighing rats; tare the bottom of a plastic container first, then put the rat in it to weigh it |
| Beta-chips, aspen | Harlan | #7090A | Bedding for home cage |
| Nylabone | Bio-Serv | #K3580 | Enrichment provided in the home cage |
| Autoclavable rodent chow | Agribrands, Charles River | #5075 | For feeding rats |
| Wire bar cage lid | Ancare | #R20SS2B | Custom made with two slots for bottles |
| Cage bottom | Ancare | #R20PC | To house rats |
| Stoppers | Ancare | #8.5 | Rubber stoppers to occlude opening in water bottles & graduated cylinders; goes with ball point sipper tubes |
| Ball point tubes, 1.5" length | Ancare | #TD-99 | Inserted in stoppers, enables rats to drink from water bottles and graduated cylinders |
| Water bottles | Ancare | #FSPC8HT | 473 ml (16 oz) capacity, needs to be occluded with stopper |
| Graduated cylinders, 100 ml | Fisher | #0300741 | To contain ethanol during alcohol exposure in the home cage; spouted end needs to be cut off to enable occlusion with stoppers |
| Mettler scale | Mettler Toledo | #MS6001S | For weighing water bottles and ethanol cylinders |
| Polyethylene tubing, 1/32" inner diameter, 1/32" wall thickness, 3/32" outside diameter | Fisher | #14-169-1A | To connect 20 ml ethanol syringe to fluid port |
| Needle, 18 g, 1.5" length | Fisher | #B305199 | To connect polyethylene tubing to ethanol syringes; needs to be filed |
| Syringes, 20 ml, Luer-Lok non-sterile | Fisher | #1482316J | To contain ethanol on the fluid pumps; needs to be connected to the polyethylene tubing by a 18 G 1 1/2 needle |
| Syringes, 60 ml, Luer-Lok non-sterile | Fisher | #14-820-11 | To flush polyethylene tubing after PDT sessions |
| Single speed syringe pump, 3.33 rpm | Med Associates Inc. | #ENV-018MD | To hold 20 ml ethanol syringes and deliver ethanol |
| Fluid port | Med Associates Inc. | #ENV-254-CB | To enable ethanol delivery during PDT sessions; connected to ethanol syringes with polyethylene tubing |
| Port entry infrared detector | Med Associates Inc. | #ENV-215M | Fixed on both sides of fluid port; need 2 per fluid port |
| Houselight, 28 V, 100 mA | Med Associates Inc. | #ENV-135M | Provides general lighting in conditioning chamber |
| Clicker module | Med Associates Inc. | #ENV-225SM | Auditory stimulus for conditioning chamber |
| White noise generator with speaker | Med Associates Inc. | #PHM-100 | Auditory stimulus for conditioning chamber |
| Bar floor | Med Associates Inc. | #ENV-009A-GF | To go with modular test chamber |
| Bench coat, absorbent | VWR | #89126-790 | Absorbent paper to put in metal tray, needs to be cut to fit the metal tray |
| Polycarbonate sheet, 1/8" thick, 12-5/8" x 10" | Johnston Plastics | #30102515 | To make smooth transparent floor insert used for context 1. Needs to be cut in 11.5" x 12.25" pieces |
| Aluminium sheet perforated, 0.063" thick, 48" x 96", 0.250" holes x 0.375" centers | Anica Steel | To make perforated floor insert used for context 2. Needs to be cut in 11.5" x 12.25" pieces | |
| Black cardboard, 0.053" thick, 28" x 44" | Omer DeSerres | #P1909 | To construct panels covering the ceiling, door and back wall of the conditioning chamber in context 1. Needs to be cut to size. Each chamber needs three panels measuring approximately 11.5" x 13.25". The panels can be joined by the narrower side using duct tape. |
| All-purpose strength duct tape, 1.88" x 45 yd. | Duck Tape | Adhesive material to connect the black cardboard panels used to cover the back wall, ceiling and door in context 1. | |
| Modular test chamber | Med Associates Inc. | #ENV-009A | Conditioning chamber |
| Sound attenuating cubicles | Med Associates Inc. | #ENV-200R3AM | Comes with installed 28 V DC fan (#ENV-025F) |
| Petri dish | Fisher | #08748B | Bottom only, to contain the sprayed solution that provides the odor stimulus; needs to be centered in the metal tray in conditioning chambers |
| PCI interface package | Med Associates Inc. | #DIG-700P2-R2 | Connects tabletop interface cabinet to computer; includes 1 interface card, 1 Decode card, 1 ribbon cable and 1 28 V DC power cable |
| Large tabletop cabinet and power supply | Med Associates Inc. | #SG-6510D | Used to contain the 12 cards included in the SmartCrtrl 8 Input, 16 Output package |
| SmartCtrl 8 Input, 16 Output package | Med Associates Inc. | #DIG-716P2 | Used to connect and control the devices in the conditioning chamber. The package includes all the cables, the interface module and the connection panel. |
| Med PC IV software | Med Associates Inc. | #SOF-735 | Software to run programs. Needs to be installed on the computer. |
| Monitor LG, 19" LCD | Concordia computer store | #W1942TQ-BF | Computer monitor; to go with computer running Med PC IV |
| HP Z200 tower workstation | Concordia computer store | #BZ788US#ABA | Computer on which Med PC IV is run |
| Benzaldehyde, ≥99% | Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc. | #B37-50 | Dilute in tap water for almond context odor |
| Lemon oil, cold pressed, California | Sigma Aldrich | #W262528-1KG-K | Dilute in tap water for lemon context odor |
| Ethyl alcohol, 95% | Commercial Alcohols | Dilute in tap water to desired concentration |
References
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