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Behavior

Attentional सेट स्थानांतरण कार्य: चूहे में संज्ञानात्मक लचीलापन का एक उपाय

Published: February 4, 2015 doi: 10.3791/51944

Summary

इस प्रोटोकॉल के लक्ष्य को इस तरह के चूहों में प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स की मध्यस्थता संज्ञानात्मक लचीलापन आकलन करने के लिए कार्य (AST) के स्थानांतरण attentional सेट के रूप में एक व्यवहार परख प्रदर्शन करना है।

Introduction

कार्य (AST) के स्थानांतरण attentional सेट पहले 1,2 एक दशक से अधिक चूहों में ध्यान और संज्ञानात्मक लचीलापन का एक उपाय के रूप में विकसित किया गया था। AST के मानव और गैर मानव प्राइमेट 3,4 में संज्ञानात्मक रोग की पहचान के लिए प्रयोग किया जाता है जो कैम्ब्रिज Neuropsychological टेस्ट स्वचालित बैटरी (Cantab) की extradimensional / intradimensional घटक के बाद मॉडलिंग की है। सरल नियमों सीखने की क्षमता बरकरार है, जबकि सीखने में घाटा (नियम, neuropsychiatric विकारों (यानी, एक प्रकार का पागलपन, जुनूनी बाध्यकारी विकार, अवसाद) की एक किस्म से पीड़ित रोगियों में पाए जाते हैं neurodegenerative विकारों को बदल दिया है जब एक प्रतिक्रिया को संशोधित करने के लिए यानी, पार्किंसंस रोग) और पूर्व ललाट प्रांतस्था से 5 घावों के साथ रोगियों में। आम तौर पर, इन रोगियों संज्ञानात्मक लचीलापन में घाटा होने के रूप में वर्णित हैं। अनुरूप घाटे गैर मानव प्राइमेट और कृन्तकों जब घावों टी दोनों में दिखाया गया हैप्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स ओ 1,6-8 प्रेरित किया गया है। ये घाटे संज्ञानात्मक दृढ़ता के एक राज्य या attentional सेट शिफ्ट करने के लिए एक बिगड़ा क्षमता का संकेत मिलता है।

एक विषय के नियमों का एक सेट अप्रासंगिक संकेतों से प्रासंगिक अंतर करने के क्रम में जटिल उत्तेजनाओं को लागू किया जा सकता है कि सीखता है जब एक attentional समूह का गठन किया गया है। उदाहरण के लिए, AST में, जानवरों के माध्यम के साथ एक खाद्य इनाम बाँधना द्वारा, एक अप्रासंगिक क्यू (यानी, गंध) ध्यान देना और प्रासंगिक क्यू (यानी, खुदाई माध्यम) का जवाब और अनदेखी करने के लिए सीखना होगा। मध्यम और गंध परिवर्तन खुदाई के प्रकार, लेकिन मध्यम और इनाम के बीच बनती एसोसिएशन बनी हुई है, जहां इस एसोसिएशन फिर बाद कार्यों में मजबूत बनाया है। इस प्रबलित नियम एक संज्ञानात्मक सेट रूपों। उलटा और अतिरिक्त आयामी पारी: संज्ञानात्मक लचीलापन की AST के प्रोटोकॉल उपाय पहलुओं के भीतर दो चरणों। उलटा मंच, एक dimensio भीतर पहले से नकारात्मक उत्तेजनाओं मेंएन (इस उदाहरण में मध्यम) पिछले चरण से सकारात्मक उत्तेजनाओं की अनदेखी करने के लिए पशु को चुनौती दी है, जो अब सकारात्मक है। लगा कि खुदाई मध्यम पिछले चरण में सकारात्मक उत्तेजनाओं था और अगर उदाहरण के लिए, कागज अब रिवर्स सच है, नकारात्मक उत्तेजनाओं था। यह यह attentional सेट बनाए रखना चाहिए कि में जानवर लचीलापन चुनौतियों (यानी, मध्यम प्रासंगिक आयाम है) नियम बदलकर एक आयाम के भीतर प्रोत्साहन और इनाम जोड़ी के लिए सीखा है। एक attentional सेट के गठन अप्रासंगिक आयाम (इस उदाहरण में गंध) प्रासंगिक आयाम हो जाता है जब अतिरिक्त आयामी पारी स्तर पर चुनौती दी है। पहले से सीखा नियम का उपयोग कर एक निरंतर पसंद से संकेत के रूप में एक perseverative प्रतिक्रिया, या तो चरण में संज्ञानात्मक लचीलापन में एक घाटे को दर्शाता है।

गैर मानव प्राइमेट और कृन्तकों दोनों में घाव पढ़ाई perf करने की क्षमता के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स के विशिष्ट क्षेत्रों से पता चला हैAST के 1,9 के विशेष चरणों ORM। Orbitofrontal प्रांतस्था (ओएफसी) के घावों, प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स (पीएफसी) के एक उपप्रदेश, AST के 8 पर सीखने उत्क्रमण में घाटे के लिए प्रेरित करने के लिए दिखाया गया है। इसके अतिरिक्त, अतिरिक्त आयामी पारी प्रदर्शन में विशिष्ट कठिनाइयों को औसत दर्जे का प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स (MPFC) का नेतृत्व करने के घावों।

AST का उपयोग करते हुए कई अध्ययनों चूहों और गैर मानव प्राइमेट में प्रदर्शन किया गया है, जबकि अपेक्षाकृत कुछ चूहों में संज्ञानात्मक समारोह के एक उपाय के रूप में AST उपयोग किया है। चूहों में आनुवांशिक गड़बड़ी की आसानी, और, विकारों की एक किस्म का अध्ययन अनुकूल और चूहों में इस व्यवहार उपाय मान्य करने में प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स समारोह को मापने के लिए महत्वपूर्ण जरूरत को देखते हुए पीएफसी में शिथिलता के साथ जुड़े रोगों पर अनुसंधान के लिए एक महत्वपूर्ण इसके अतिरिक्त है। यहाँ विस्तृत प्रोटोकॉल चूहों में आवेदन के लिए अनुकूलित है और उस Birrell और ब्राउन एक से प्रक्रिया के एक संशोधन माउस specifi के कई को दर्शाता हैपहले से 2,6,10-13 सूचित किया गया है कि सी रूपांतरों।

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Protocol

नोट: इस अध्ययन में प्रयुक्त जानवर इष्टतम परिणामों के लिए उम्र के 4 और 6 महीने के बीच पुरुष C57BL / 6J चूहों हैं। चूहे आसानी से सक्रिय (काला) के चरण के दौरान उन्हें परीक्षण के क्रम में एक रिवर्स प्रकाश चक्र पर रखा जाता है। व्यवहार आवास से अलग एक कमरे में किया जाता है, तो चूहों परीक्षण के कमरे के लिए निम्न परिवहन acclimate करने के लिए कम से कम एक घंटा अनुमति दी जाती है। व्यवहार परीक्षण नेत्रहीन परीक्षण सत्र की निगरानी के लिए अभी भी प्रयोगकर्ता पर्याप्त रोशनी की अनुमति देता है, जबकि संभव के रूप में छोटे चूहों की सामान्य गतिविधि के लिए व्यवधान को कम से कम लाल बत्ती की शर्तों के तहत किया जाता है।

नोट: इस के साथ साथ वर्णित प्रयोगात्मक प्रक्रिया के सभी पहलुओं प्रयोगशाला पशु की देखभाल और उपयोग, 8 संस्करण (एनआरसी) के लिए गाइड के साथ समझौते में बाहर किए गए और टेक्सास स्वास्थ्य विज्ञान विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया सैन एंटोनियो पर केंद्र।

  1. चीनी मिट्टी ramekins भर (गैर झरझरा, 1.5 "गहराई एक्स 2.5 'व्यास), भीतरी रिम के लिए (लगभग एक मध्यम खुदाई के साथ" नीचे से); फिल्टर पेपर दौर आधे में कटौती और ramekin के वापस अंदर करने के लिए टेप (चित्रा 1 ए)
  2. दशानुकूलन, प्रशिक्षण और परीक्षण चरणों के लिए लगभग 20 मिलीग्राम टुकड़ों में, हनी अखरोट या चीनी लेपित किस्मों - हल्के मीठा सूखा नाश्ता अनाज (खाद्य इनाम) तोड़ो।
  3. एक attentional सेट कार्य स्थानांतरण (AST) के चैम्बर (चित्रा 1 बी) बनाओ: ट्रेन acclimate और अलग-अलग कक्षों में प्रत्येक माउस का परीक्षण; कम से कम 8 कक्षों के उत्पादन की सलाह देते हैं।
    1. एक 12 "एक्स 8" एक्स 7 "AST के चैम्बर निर्माण; 70% इथेनॉल के साथ आसानी से साफ है कि अपारदर्शी सफेद एक्रिलिक से बने दीवारों और शुरू गेट। गिलोटिन शैली, हटाने योग्य शुरू फाटक एक प्रतीक्षा क्षेत्र (5 "एक्स 8") और परीक्षण क्षेत्र (7 "एक्स 8") में चैम्बर अलग करती है।
    2. एक साफ़ 5 शामिल करें221, समान रूप से परीक्षण क्षेत्र के दो पहलू है कि अलग X7 "हटाने योग्य विभाजन; तीन कटौती ¼ "व्यास छेद विभाजन के नीचे के हिस्से में एक स्थान दिया गया है, का उपयोग सूँघने अनुमति देने के लिए" विभाजन (चित्रा 1C) के सामने से "के अलावा और 1।

2. प्रक्रिया अवलोकन (चित्रा 2)

  1. पहले AST के लिए, घर चूहों को अलग-अलग है और उन्हें कम से कम एक सप्ताह के लिए एक रिवर्स प्रकाश चक्र को समायोजित करने के लिए अनुमति देते हैं।
  2. Acclimate, ट्रेन और अलग-अलग परीक्षण कक्षों में प्रत्येक जानवर का परीक्षण करें। परीक्षण के अंतिम दिन खत्म होने के बाद एक माउस और 70% इथेनॉल के साथ साफ करने के लिए प्रत्येक कक्ष निरुपित। इस 'घर-पिंजरे "या' स्व 'की तरह चैम्बर गंध बनाकर परीक्षण के दौरान तनाव कम कर देंगे।
  3. खुशबू फैलने के लिए अनुमति देने के लिए दो दिन पहले परीक्षण के लिए परीक्षण के बर्तन खुशबू; चूहों के एक बहुत मजबूत गंध है कि बर्तन में खुदाई नहीं होगा। एक 25 जी सुई के साथ एक सिरिंज का प्रयोग, का लगभग 0.1 मिलीलीटर जोड़नेफिल्टर पेपर के शीर्ष करने के लिए आवश्यक तेल।

3. हैंडलिंग (दिन 1-8)

  1. खाद्य प्रतिबंध के पहले दिन करने से पहले 8 दिन शुरू होने वाले चूहों संभाल लेना। इस परीक्षण के दौरान संभालने के साथ जुड़े तनाव कम हो जाएगा।
  2. वजन और हैंडलिंग का रिकार्ड शरीर के वजन प्रत्येक दिन है। प्रति दिन प्रत्येक माउस 2-3 मिनट संभाल लेना।
  3. कई प्रयोगकर्ताओं चूहों का एक सेट परीक्षण में शामिल हो रहे हैं, तो प्रत्येक प्रयोगकर्ता के प्रयोगकर्ताओं के साथ परिचय बढ़ाने के लिए और तनाव और चिंता प्रशिक्षण या परीक्षण दिनों पर अनुभवी कम करने के लिए से निपटने की प्रक्रिया में भाग लेता है कि सुनिश्चित करते हैं।
  4. परीक्षण की अवधि के दौरान हैंडलिंग और रिकॉर्डिंग भार जारी रखें।

4. खाद्य प्रतिबंध (दिन 9-12)

  1. 4 दिन पहले दशानुकूलन की शुरुआत करने के लिए शुरू, एक प्रतिबंधित आहार पर जगह चूहों उनके मुक्त खिला शरीर के वजन के 80-85% से कम चूहों बनाए रखने के लिए। दिन प्रति माउस प्रति भोजन की 1 ग्राम दीजिए। शरीर के वजन से नीचे गिरता हैवे उचित सीमा पर लौटने के लिए जब तक निर्धारित सीमा प्रति दिन 2 ग्राम दे।
  2. चूहों के परीक्षण के बर्तन के लिए acclimate करने के लिए अनुमति देने के लिए प्रत्येक घर पिंजरे के मोर्चे पर दो ramekins रखें। ये एक खाद्य इनाम के लिए खुदाई करने के लिए माउस को प्रशिक्षित करने के लिए इस्तेमाल एक ही धब्बे होते हैं।
  3. चार दिनों के लिए प्रत्येक दिन ramekins में भोजन की 2 ग्राम और खाद्य इनाम (प्रत्येक में अनाज का आधा टुकड़ा) का एक टुकड़ा जोड़ें।
  4. व्यवहार खाद्य प्रतिबंध के दिन एक पर शुरुआत, चूहे रखे जाते हैं, जिसमें एक से एक अलग कमरे में प्रदर्शन किया जा रहा है, प्रति दिन कम से कम एक घंटा के लिए परीक्षण के कमरे के लिए परिवहन चूहों से पहले आवास के कमरे की ओर लौटने की अनुमति देने के लिए उन्हें परीक्षण के कमरे में acclimate करने के लिए।
  5. खाद्य प्रतिबंध के अंतिम दिन पर, दशानुकूलन के शुरू होने से पहले, घर पिंजरे बिस्तर बदल जाते हैं। पिंजरे बिस्तर परीक्षण प्रशिक्षण और परीक्षण (जब तक बिल्कुल आवश्यक) के दौरान तनाव या चिंता का अनुभव कम करने के लिए पूर्ण होने के बाद फिर से जब तक बदला नहीं जाएगा।
  6. रखनापरीक्षण के अंत तक खाद्य प्रतिबंध पर चूहों। दिनों 13-17 पर, (भोजन गोली की आम तौर पर <1G) भस्म भोजन इनाम की राशि के एक अनुमान के आधार पर दशानुकूलन, प्रशिक्षण, या परीक्षण के बाद चूहों खाना दे।

5. Acclimation (दिन 13-14)

  1. दो दिन पूर्व प्रशिक्षण की शुरुआत करने के लिए शुरू, लाल बत्ती के नीचे काले चक्र के दौरान दशानुकूलन प्रदर्शन करते हैं।
  2. चैम्बर में घर पिंजरे से गंदे बिस्तर की एक छोटी राशि बिखरा हुआ है, यह एक परिचित "घर ​​के पिंजरे" या परीक्षण के चैम्बर के लिए 'स्व' गंध को शुरू करने से एक नए माहौल में होने का तनाव कम हो जाएगा (एक ही कक्ष होगा प्रशिक्षण और परीक्षण) की अवधि के लिए एक माउस के लिए प्रयोग किया जाता है।
  3. चैंबर के इंतजार कर क्षेत्र में पानी के साथ एक साफ ramekin रखें; वे पानी के लिए पहुँच नहीं है अगर चूहों को खाने के लिए नहीं करते हैं।
  4. ~ 20 (एक खाद्य इनाम के साथ परीक्षण के क्षेत्र में खाद्य प्रतिबंध के लिए इस्तेमाल किया गया है कि दो ramekins रखेंप्रत्येक में मिलीग्राम अनाज टुकड़ा)।
  5. इंतजार कर क्षेत्र में माउस रखें; शुरू होने से फाटक को हटाने और माउस एक घंटा के लिए कक्ष का पता लगाने के लिए अनुमति देते हैं।
  6. लगातार परीक्षण क्षेत्र और अक्सर बर्तन पता लगाने के लिए चूहों को प्रोत्साहित करने के क्रम में खाली ramekins के लिए खाद्य पुरस्कार (~ 20 मिलीग्राम अनाज टुकड़ा) जोड़ें।
  7. प्रयोगकर्ता की उपस्थिति परीक्षण के दौरान एक जोड़ा तनाव नहीं है कि इतनी माउस दशानुकूलन अवधि के दौरान प्रयोगकर्ता देख सकते हैं कि सुनिश्चित करें।

6. ट्रेनिंग (15 दिन)

  1. इंतजार कर क्षेत्र में माउस रखें।
  2. प्रत्येक परीक्षण के क्षेत्र में, एक भोजन इनाम (~ 20 मिलीग्राम अनाज टुकड़ा) युक्त, खाली हो जाओ और शुरू गेट उठा। माउस 3 मिनट के दोनों खाद्य पुरस्कार को पुनः प्राप्त करने की अनुमति दें। इस चरण में कई बार दोहराएँ।
  3. धीरे-धीरे बाद के परीक्षणों में बर्तन के लिए चूरा / माउस पिंजरे बिस्तर जोड़ें। त्रिकोणीय समाप्त होने से पहले प्रत्येक बर्तन से खाद्य इनाम पुनः प्राप्त करने के लिए 3 मिनट माउस की अनुमति देंअल। माउस प्रत्येक बर्तन से खाद्य इनाम पुनः प्राप्त हो जाने के बाद, अगली सुनवाई के लिए आगे बढ़ें। माउस भोजन इनाम आंशिक रूप से कवर किया जाता है एक बार खुदाई में प्रयास नहीं करता है, संकेत, (यानी, भोजन इनाम के क्षेत्र पर अनाज धूल छिड़क खाद्य इनाम के क्षेत्र पर बुरादा में एक दांतेदार बनाना बनाने उपलब्ध कराई के हिस्से को उजागर किया जा सकता है खाद्य इनाम)।
  4. खाद्य इनाम पूरी तरह से कवर किया और माउस मज़बूती से खाद्य इनाम खोजने के लिए एक पूर्ण बर्तन में खुदाई करने की क्षमता को दर्शाता है जब तक प्रत्येक परीक्षण के बाद चूरा / बिस्तर जोड़कर आगे बढ़ें।
  5. एक माउस मज़बूती से प्रशिक्षण की शुरुआत की 2 घंटे के भीतर एक पूर्ण बर्तन में एक खाद्य इनाम प्राप्त करने की क्षमता का प्रदर्शन नहीं किया है, प्रशिक्षण के दूसरे दिन जारी है। खाद्य प्रतिबंध पर माउस बनाए रखें और इस प्रक्रिया के अगले दिन दोहराएँ।
  6. माउस, लगातार दो दिनों के बाद एक खाद्य इनाम के लिए खुदाई प्रयोग के शेष से बाहर है, और एक के रूप में व्याख्या करने में विफल रहता है तो विस्तार में "खुदाई करने में विफल रहा है"erimental रिकॉर्ड है।

7. परीक्षण (दिन 16-17):

  1. एक दिन पर, सरल भेदभाव (एसडी), यौगिक भेदभाव (सीडी), उलटा (आर 1), और अंतर-आयामी पारी (आईडीएस) की परीक्षा।
  2. (; वैकल्पिक आर 2), अतिरिक्त आयामी पारी (ईडीएस) दो दिन पर, अंतर-आयामी पारी 2 (IDS2), अंतर-आयामी पारी 3 (IDS3), उलट दो परीक्षा।
  3. जोड़ी मीडिया और scents के रूप में तालिका 1 में दिखाया गया है।
  4. परीक्षण के दिन पर से निपटने के समय, चूहों की वजह से भूख को परीक्षण के दौरान ध्यान की कमी से बचने के लिए एक खाद्य इनाम देते हैं। परीक्षण के दिन के अंत तक इस बिंदु से, सही विकल्प के लिए पुरस्कार के अलावा किसी भी भोजन उपलब्ध कराने के लिए नहीं है।
  5. संदंश (बर्तन के बीच scents के प्रसार को सीमित करता है) का उपयोग कर परीक्षण के शुरू में, एक सही विकल्प इंगित करता है कि बर्तन में भोजन इनाम का एक टुकड़ा रखें। खाद्य इनाम पूरी तरह से मीडिया (चित्रा 3 देखें) द्वारा कवर किया जाना चाहिए। अनाज धूल ओ छिड़क, खाद्य इनाम से एक खुशबू क्यू से बचने के लिएचरण की शुरुआत में देखें सभी बर्तन।
  6. शुरू होने से गेट बंद कर दिया साथ इंतजार कर क्षेत्र में माउस रखें। परीक्षण के चैम्बर के दोनों तरफ बर्तन रखें। शुरू होने से फाटक निकाल दिया जाता है और टाइमर शुरू कर दिया है जब परीक्षण शुरू होता है। एक विकल्प बनाने के लिए परीक्षण प्रति प्रत्येक माउस तीन मिनट की अनुमति दें। माउस प्रत्येक परीक्षण के लिए एक चुनाव किया जब तक (सही या गलत) चुनाव और समय रिकॉर्ड।
    ध्यान दें: एक "विकल्प" या तो बर्तन में खुदाई करने के लिए एक प्रयास ने संकेत दिया है। माउस मीडिया विस्थापित और यह भोजन इनाम को उजागर करने के लिए मीडिया का भोजन इनाम या विस्थापित काफी खोजने के लिए बनाता है अंतरिक्ष में काफी दूर तक अपनी नाक poked गया है अगर एक डीआईजी केवल एक विकल्प के रूप में दर्ज की गई है। एक माउस तीन मिनट के भीतर एक विकल्प नहीं किया है, तो यह कोई विकल्प नहीं है (गलत) के रूप में दर्ज की गई है।
  7. एक विकल्प या तो बर्तन के लिए बनाया गया है, परीक्षण के चैम्बर से नहीं चुना गया था कि पॉट को हटा दें। एक सही चुनाव किया गया था, तो माउस में वापस माउस रखने से पहले भोजन इनाम खत्म करने की अनुमतिइंतज़ार क्षेत्र। एक गलत चुनाव किया जाता है, तो माउस इंतजार कर क्षेत्र के लिए माउस लौटने से पहले कि चुनाव के लिए कोई भोजन इनाम चलता है कि वहाँ के लिए बर्तन का पता लगाने के लिए अनुमति देते हैं।
  8. प्रत्येक परीक्षण के अंत में, पीठ इंतजार कर क्षेत्र में माउस जगह और शुरू फाटक की जगह।
  9. माउस लगातार AST के अगले चरण के लिए अग्रिम 8 सही परीक्षणों की कसौटी को पूरा करती है कि सुनिश्चित करें। एक माउस 50 परीक्षणों के भीतर लगातार आठ सही विकल्प प्राप्त नहीं होता है, तो यह उस अवस्था में विफल रहता है और परीक्षण पूरा करने के लिए पर स्थानांतरित नहीं कर सकते। 6 लगातार कोई विकल्प (एक विकल्प के बिना 3 मिनट) भाग लेने के लिए एक विफलता है और अगले चरण के लिए पर चलती से माउस पर प्रतिबंध लगाता है।

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Representative Results

इस परीक्षा में ठेठ निर्भर उपाय मानदंड (या 8 सही लगातार विकल्प) को पूरा करने के लिए मंच प्रति परीक्षणों की संख्या है। चित्रा -4 ए AST का उपयोग कर इलाज C57BL / 6J में प्रत्येक चरण में कसौटी को पूरा करने के लिए परीक्षणों की औसत संख्या से पता चलता है। चूहों प्रासंगिक क्यू आयाम (गंध या मीडिया) पर एक attentional सेट फार्म के रूप में, लगातार intradimensional पारियों में कसौटी को पूरा करने के परीक्षणों में कमी के संकेत के रूप प्रदर्शन में सुधार होगा, और उलट चरणों और extradimensional पारी को पूरा करने के लिए अतिरिक्त परीक्षणों की आवश्यकता होगी कसौटी। यह हम गंध प्रासंगिक है अगर कसौटी करने के लिए परीक्षणों की एक वृद्धि की संख्या में सरल भेदभाव चरण में कुछ अंतर मनाया परिलक्षित होता है के रूप में दो प्रासंगिक आयाम (यानी, मीडिया या गंध) में से प्रत्येक पर शुरू कि पशुओं की संख्या counterbalance करने के लिए महत्वपूर्ण है क्यू (4B चित्रा)। परीक्षणों एसडी स्तर पर कसौटी तक पहुँचने के लिए यदि वें के बीच काफी अलग हैंई दो प्रासंगिक क्यू आयाम (यानी, मीडिया 4B चित्रा में भी उतना ही प्रासंगिक है जब बेहतर प्रदर्शन), बाद के चरणों के दौरान प्रत्येक माउस के लिए प्रदर्शन डेटा सरल भेदभाव चरण के दौरान अपने प्रदर्शन के लिए सामान्यीकृत किया जा सकता है। चित्रा 4C में सचित्र रूप में, यह सामान्य बनाने के कदम के शुरू में प्रासंगिक क्यू सीखने के साथ जुड़े परिवर्तनशीलता कम कर देता है और बाद में आईडीएस स्तरों पर बेहतर प्रदर्शन के दृश्य को बढ़ाता है। ~ 20 चूहों के समूह आकार सामान्य बनाने के बिना कच्चे डेटा के विश्लेषण की अनुमति के लिए पर्याप्त हो जाएगा। महत्वपूर्ण बात है, परीक्षणों में एक उल्लेखनीय वृद्धि इंगित करता है पिछले intradimentional पारियों को extradimentional पारी रिश्तेदार के दौरान कसौटी को पूरा करने के लिए परीक्षण वैधता (चित्रा 4D और 4E) का एक महत्वपूर्ण नियंत्रण उपाय है। प्रवर्तन निदेशालय पारी चरण से पहले, चूहों इनाम का पता लगाने के क्रम में एक भी प्रासंगिक क्यू आयाम (गंध या मीडिया) पर ध्यान देना सीखो। एक पूर्वोत्तर के लिए स्विचप्रासंगिक क्यू आयाम डब्ल्यू, कि एक आईडी / प्रवर्तन निदेशालय की पाली में जिसके परिणामस्वरूप कसौटी तक पहुँचने के लिए और अधिक परीक्षणों की आवश्यकता चाहिए, पहले से अप्रासंगिक हो गया था। दिलचस्प है, कच्चे डेटा भीतर आईडी / प्रवर्तन निदेशालय पारी का विश्लेषण IDS2 और प्रवर्तन निदेशालय (चित्रा 4D) के बीच कसौटी तक पहुँचने के लिए, और (<डेटा नहीं दिखाया गया है, पी 0.1) IDS3 और प्रवर्तन निदेशालय के बीच वृद्धि की ओर प्रवृत्ति के लिए परीक्षण में एक उल्लेखनीय वृद्धि का पता चला और मतलब परीक्षणों के बीच वृद्धि प्रवर्तन निदेशालय (नहीं दिखाया डेटा) की तुलना में IDS2 और IDS3 की कसौटी तक पहुँचने के लिए। डेटा एसडी चरण (चित्रा 4E) में प्रदर्शन के लिए सामान्यीकृत थे जब दिलचस्प है, एक महत्वपूर्ण आईडी / प्रवर्तन निदेशालय पारी प्रवर्तन निदेशालय की तुलना में IDS2 और IDS3 दोनों के बीच स्पष्ट किया गया था।

यह नियंत्रण चूहों के लगभग 70-80% पूरे कार्य (20-30% बाहर ड्रॉप दर) पूरा हो जाएगा कि उम्मीद है। वैकल्पिक निर्भर उपायों, कार्य के प्रत्येक चरण के रूप में मापा (हम इस चूहों के बीच अत्यधिक चर हो पाया है, हालांकि) एक विकल्प बनाने के लिए औसत विलंबता शामिलउत्क्रमण पर "सेट-नुकसान" त्रुटियों और अतिरिक्त आयामी पारी चरणों की त्रुटियों और संख्या की कुल संख्या एक गलत चुनाव किया गया था टाइम्स की संख्या तीन या अधिक लगातार सही विकल्प के रूप में निम्नलिखित Lapiz-Bluhm एट अल। 14 द्वारा परिभाषित के रूप में। "सेट-नुकसान" त्रुटियों की संख्या में वृद्धि एक perseverative व्यवहार संकेत हो सकता है। इसके अतिरिक्त, चूहे आम तौर पर कम से कम 30 मिनट (चित्रा 5) में परीक्षण के प्रत्येक चरण पूरा, और प्रत्येक चरण में बिताए समय की अवधि कसौटी तक पहुँचने के लिए परीक्षण का एक समारोह है।

, यहाँ ओएफसी या चूहों में mPFC को न्यूरोटौक्सिक घावों विस्तृत रूप में एक समान प्रतिमान का उपयोग कर पिछले एक अध्ययन में इस परीक्षण के उपयोग को सत्यापित करने में कार्यात्मक घाटे का निर्धारण करने के लिए, क्रमशः उत्क्रमण और अतिरिक्त आयामी पारी चरणों में प्रदर्शन ख़राब करने के लिए दिखाया गया चूहा और गैर मानव प्राइमेट studies11 रूप में एक ही क्षेत्रों के। जबकि इस aforementioned अध्ययन वी में कार्यों के अनुक्रमकि यहाँ दिखाया गया है करने के लिए मेष राशि थोड़ा, यह उन चरणों में कसौटी करने के लिए परीक्षणों की संख्या में वृद्धि के रूप में परिलक्षित ओएफसी और mPFC में घावों या घाटा भी, R1 और ईडीएस पर बिगड़ा प्रदर्शन में परिणाम होगा कि उम्मीद है। ।

मंच प्रासंगिक उदाहरण प्रासंगिक उदाहरण
सरल भेदभाव (एसडी) मध्यम फेल्ट (+) कागज (-) गंध जायफल (+) दौनी (-)
यौगिक भेदभाव (सीडी) मध्यम फेल्ट (+) / जायफल पेपर (-) / दौनी गंध जायफल (+) / महसूस दौनी (-) / कागज
फेल्ट (+) / दौनी पेपर (-) / जायफल जायफल (+) / कागज दौनी (-) / महसूस
उलटा 1 (आर 1) मध्यम पेपर (+) / दौनी फेल्ट (-) / जायफल गंध दौनी (+) / कागज जायफल (-) / महसूस
पेपर (+) / जायफल फेल्ट (-) / दौनी दौनी (+) / महसूस जायफल (-) / कागज
Intradimensional शिफ्ट (आईडीएस) मध्यम पोम पोम्स सेक्विन (-) / लौंग गंध </ टीडी> दालचीनी (+) / pompoms लौंग (-) / सेक्विन
(+) / दालचीनी
Pompoms (+) / लौंग सेक्विन (-) / दालचीनी दालचीनी (+) / सेक्विन लौंग (-) / pompoms
IDS2 मध्यम पाइप सफ़ाइ करने वाले गुगली आँखें (-) / अदरक गंध लाल अजवायन के फूल (+) / Pipecleaners अदरक (-) / गुगली आँखें
(+) / लाल थाइम
Pipecleaners (+) / अदरक गुगली आँखें (-) / लाल थाइम लाल अजवायन के फूल (+) / गुगली आँखें जिंजर (-)
IDS3 मध्यम रिबन (+) / वेनिला धातु स्ट्रिप्स (-) / नींबू गंध वेनिला (+) / रिबन नींबू (-) / धातुई स्ट्रिप्स
रिबन (+) / नींबू धातु स्ट्रिप्स (-) / वेनिला वेनिला (+) / धातुई स्ट्रिप्स नींबू (-) / रिबन
आर 2 मध्यम धातु स्ट्रिप्स (+) / वेनिला रिबन (-) / नींबू गंध नींबू (+) / रिबन वेनिला (-) / धातुई स्ट्रिप्स
धातु स्ट्रिप्स (+) / नींबू रिबन (-) / वेनिला नींबू (+) / धातु एलआईसी स्ट्रिप्स वेनिला (-) / रिबन
Extradimensional शिफ्ट (ईडीएस) गंध गुच्छ (+) / राफिया सौंफ (-) / फोम मध्यम राफिया (+) / Citronella फोम (-) / Anise
गुच्छ (+) / फोम सौंफ (-) / राफिया राफिया (+) / Anise फोम (-) / Citronella

इन संयोजनों में तालिका 1. उदाहरण गंध और खुदाई माध्यम के संयोजन। Scents और खुदाई मीडिया इस अध्ययन में पुष्टि की गई है। इन विशिष्ट संयोजन का उपयोग कर प्राप्त प्रतिनिधि परिणाम चित्रा 2 में दिखाया जाता है।

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चित्रा 1. AST के परीक्षण के चैम्बर। (ए) के चित्र और ramekin और फिल्टर पेपर नियुक्ति के उदाहरण के आयाम। चूहों और (सी) विभाजन के भीतर छेद की नियुक्ति illustrating परीक्षण के चैम्बर के एक तीन आयामी चित्र के लिए अनुकूलित AST के परीक्षण कक्ष (बी) चित्र।

चित्र 2
चित्रा 2. मध्यम खुदाई। माल सूची (ii.-xi.) में विस्तृत रूप में इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल मध्यम जोड़े खुदाई के उदाहरण हैं। बर्तन मध्यम खुदाई के साथ भीतर रिम को लगभग भर रहे हैं।

चित्र तीन
परीक्षण के लिए 3. इस समय चित्रा।

चित्रा 4 AST में चित्रा 4. C57BL / 6J प्रदर्शन। (ए) के परीक्षणों की औसत संख्या पुरुष C57BL / 6J चूहों के लिए AST में कसौटी को पूरा करने के लिए। डाटा ± SEM के मतलब का प्रतिनिधित्व (एन = 22 चूहों / समूह), मंच का मुख्य प्रभाव के लिए पी = .013। (बी) के विशिष्ट प्रारंभिक प्रासंगिक क्यू आयामों के लिए एसडी स्तर पर कसौटी तक पहुँचने के लिए परीक्षणों की औसत संख्या। डाटा ± SEM (एन = 22 चूहों / समूह) मतलब प्रतिनिधित्व करते हैं, * पी ​​= एसडी चरण में प्रत्येक माउस के व्यक्तिगत प्रदर्शन का एक प्रतिशत के रूप में प्रतिनिधित्व 0.01। (सी) सामान्यीकृत डेटा। डेटा (22 चूहों / समूह एन =), मंच का मुख्य प्रभाव के लिए पी = 0.06। परीक्षणों में (डी) आईडी / प्रवर्तन निदेशालय पारी IDS2 और प्रवर्तन निदेशालय के बीच कसौटी तक पहुँचने के लिए ± SEM के मतलब का प्रतिनिधित्व करते हैं। डाटा ± SEM (एन = 22 चूहों / समूह) मतलब प्रतिनिधित्व करते हैं, * पी ​​= IDS3 और प्रवर्तन निदेशालय के बीच सामान्यीकृत डेटा में 0.03। (ई) आईडी / प्रवर्तन निदेशालय पाली। डाटा ± SEM (एन = 22 चूहों / समूह), * पी = 0.012 मतलब का प्रतिनिधित्व करते हैं।

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Discussion

पीएफसी द्वारा मध्यस्थता संज्ञानात्मक लचीलापन में घाटा तंत्रिका विज्ञान और neuropsychiatric विकारों की एक किस्म के साथ जुड़े एक महत्वपूर्ण विकलांगता का प्रतिनिधित्व करते हैं, और परिणाम है और इन विकारों से पीड़ित व्यक्तियों के जीवन की गुणवत्ता पर एक बड़ा प्रभाव हो सकता है। चूहों के लिए उपयोग में AST के अनुकूलन कॉर्टिकल मध्यस्थता संज्ञानात्मक रोग प्रीफ्रंटल के लिए युग्मित रोगों में आनुवंशिक आधार की जांच करने के लिए महत्वपूर्ण है। हम ऊपर वर्णित विधि एक विशिष्ट संज्ञानात्मक घाटे, संज्ञानात्मक लचीलापन की एक विश्वसनीय उपाय है कि पाया, और बारीकी से चूहों और गैर मानव प्राइमेट में इस कार्य का उपयोग कर प्राप्त परिणामों का अनुमान लगाती है। वर्णित विधि चूहों और चूहों के रूप में अच्छी तरह से हमारे संस्थान में विशेषज्ञों की सलाह और मार्गदर्शन में पहले से वर्णित प्रोटोकॉल का एक व्यापक सर्वेक्षण का परिणाम है।

चूहों में इसी तरह के कार्यों का उपयोग करते हुए पिछली रिपोर्टों के साथ यद्यपि, इस तरह के एक व्यवहार माप की अनुकूलन क्षमता का प्रदर्शन किया हैकई निरंतर 2,6,11। Colacicco एट अल। एक चार दिन की अवधि 11 से अधिक परीक्षण फैल जो 2 करने के लिए प्रति दिन परीक्षण किया भेदभाव, की संख्या सीमित है। यह लगातार परीक्षण के दिन पर पहले से सीखा उत्तेजनाओं जोड़े के repetitions शामिल थे। जबकि प्रभावी, यहाँ प्रस्तुत प्रोटोकॉल विकसित करने के उद्देश्य परीक्षण अवधि की अवधि को कम करने और क्षमता को अधिकतम करने के लिए है। यहाँ, हम एक दो दिन की अवधि के लिए परीक्षण की सीमा और पहले से सीखा उत्तेजनाओं जोड़े की पुनरावृत्ति को समाप्त। पिछले शोधकर्ताओं ने चूहों एक attentional सेट फार्म और वे Effortful प्रत्युत्तर देना बनाए रखना होगा, जिसमें एक छोटी सी 'testability की खिड़की "प्रदर्शन करने के लिए overtraining की आवश्यकता होती है कि उल्लेख किया है। हमारी प्रोटोकॉल भी शुरू में प्रासंगिक क्यू आयाम भीतर intradimensional पारी पर मामूली overtraining के शामिल है। चित्रा 4C में सामान्यीकृत डेटा का मूल्यांकन है, खासकर जब यह एक और अधिक स्पष्ट घाटा duri प्रदर्शन कर सकते हैं हमारे प्रोटोकॉल में परीक्षण चूहों कि प्रतीत होता है(तुरंत पूर्ववर्ती चरण के सापेक्ष) दूसरे intradimensional उलट एनजी। इस अवलोकन चूहों भी एक आईडी / प्रवर्तन निदेशालय पारी का प्रदर्शन के रूप में, एक attentional सेट के गठन को सुनिश्चित करने के क्रम में overtraining की धारणा के अनुरूप है। चूहों 2 घंटे के एक औसत सत्र लंबाई शामिल है जो हमारे प्रोटोकॉल (चित्रा 5), में Effortful प्रदर्शन को बनाए रखने के रूप में क्यों एक संभावना के कारण एक रिवर्स प्रकाश चक्र का उपयोग करने के लिए हो सकता है। हम अंधेरे (जाग्रत) चक्र के पहले चार घंटे के दौरान लाल प्रकाश परिस्थितियों में एक अलग और समर्पित परीक्षण के कमरे में व्यवहार का परीक्षण किया। हालांकि, इस पद्धति पांडुलिपि के दायरे से बाहर व्यवस्थित परीक्षण चूहों AST के प्रदर्शन करने के लिए जारी रहेगा, जिसमें अवधि में योगदान है, और घ्राण भेदभाव में घाटे संदेह कर रहे हैं, तो prescreening वैकल्पिक के रूप में परीक्षण करने से पहले warranted जा सकता है क्या कारकों का निर्धारण करने की आवश्यकता होगी गंध से मुक्त तरीके में सूचना दी गई है।

इसके अतिरिक्त, के दौरानप्रारंभिक विधि विकास, हम (8-12 सप्ताह पुराने) युवा वयस्क चूहों में अधिक से अधिक परिवर्तनशीलता कि थोड़ा पुराने 4-6 महीने पुराने चूहों के साथ प्रदर्शन की खोज की। हम खाद्य प्रतिबंध प्रोटोकॉल एक क्लासिक neurodevelopment अर्थ में, और अधिक परिपक्व चूहों, और जब तक अलग से भी चूहों से बढ़ रहा है को प्रभावित करता है अटकलें हैं कि, माउस मस्तिष्क पूरी तरह से 6 सप्ताह के द्वारा विकसित माना जाता है, यह संभव है कि वयस्क परिपक्वता और जल्दी वयस्कता के लिए किशोर से संक्रमण है कि युवा चूहों में प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स उलझाना AST के प्रदर्शन के भीतर अन्तर्ग्रथनी remodeling के। हालांकि, इन आकर्षक सवालों का पता लगाया जा रह है।

चूहों में AST के प्रोटोकॉल के अन्य रूपों रन नहीं कर रहे हैं प्रत्येक चरण की शुरुआत में परीक्षण के एक नामित संख्या (आमतौर पर 4), जिसका अर्थ है "मुक्त" परीक्षणों में शामिल हैं, और जानवर इनाम लिया गया है जब तक दोनों बर्तन पता लगाने के लिए अनुमति दी है। यहाँ विस्तृत प्रोटोकॉल किसी भी "मुक्त" परीक्षणों को शामिल नहीं करता। इसके अलावा, हम requireme सेटएनटीएस और इस जानवर को सही मायने में शासन सीखा है कि क्या एक प्रभावी सूचक ने पाया है कि (पहले कसौटी को पूरा करने के लिए 8/10 परीक्षणों वर्णित बजाय कसौटी को आठ लगातार सही परीक्षण) कसौटी अधिक कड़े मिलने के लिए। गार्नर एट अल। एक आईडी निम्नलिखित overtraining की अवधि (यानी, एक अतिरिक्त 50 परीक्षण के लिए पहले से प्रासंगिक उत्तेजनाओं की प्रस्तुति) काफी ईडीएस 2 में कसौटी करने के लिए परीक्षणों कि वृद्धि देखी गई। यहाँ, हम Bissonette एट अल। 6 के साथ समझौते में, "overtrain" और प्रासंगिक आयाम पर एक attentional सेट के गठन को सुनिश्चित करने के प्रयास में, कई इंट्रा-आयामी पाली शामिल हैं। इसके अतिरिक्त, गार्नर एट अल। लगभग एक घंटा (या जब माउस अब कोई प्रतिक्रिया व्यक्त) 2, हम C57BL6 / जम्मू चूहों पर्याप्त रूप से और मज़बूती से नियंत्रण के लिए (लगभग एक दो घंटा अवधि के भीतर प्रत्येक दिन उन्हें प्रस्तुत सभी चार चरणों के माध्यम से प्रगति ने पाया है कि जबकि करने के लिए सीमित परीक्षण सत्रचूहों)। प्रदर्शन की व्याख्या जब प्रयोगात्मक समूहों के बीच मोटर की क्षमता में संभावित मतभेद विचार किया जाना चाहिए, हालांकि। हमारी प्रक्रिया के परीक्षण के पूरा होने के माध्यम से निपटने में शुरू से ही प्रत्येक जानवर के लिए 17 दिन का समय और श्रम निवेश प्रतिबंधित करता है। यह एक व्यक्तिगत प्रयोगकर्ता कोई और अधिक से अधिक 2 एक एकल प्रयोगकर्ता के कम से कम 6 पर परीक्षण पूरा करने की क्षमता देता है, जो (इस व्यक्ति प्रयोगकर्ता की क्षमता और अनुभव के आधार पर संशोधित किया जा सकता है) के लिए एक ही दिन में परीक्षण चूहों की संख्या सीमित की सिफारिश की है प्रति सप्ताह चूहों। मोटर समारोह हल्का बिगड़ा हुआ है, प्रत्येक परीक्षण की लंबाई सही जवाब देने में, नहीं गति जवाब देने के रूप में, कुंजी निर्भर चर रहा है, बढ़ाया जा सकता है।

दृश्य भेदभाव हाल ही में कृन्तकों में उपयोग के लिए अनुकूलित किया गया है गैर मानव प्राइमेट में संज्ञानात्मक प्रदर्शन का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है कि उन लोगों के लिए समान मानदंड, और गंध और मध्यम discriminatio के लिए एक विकल्प के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता हैएन कार्यों यहाँ का वर्णन किया। घ्राण भेदभाव में महत्वपूर्ण मतभेद चूहों की प्रयोगात्मक समूहों के बीच मौजूद हैं, अगर यह दृष्टिकोण आवश्यक हो सकता है। Brigman एट अल। चूहों को आसानी से एक आईडी और प्रवर्तन निदेशालय पारी प्रतिमान 15 में यौगिक दृश्य उत्तेजनाओं विचार दिखाया है। बेहतर यह स्वचालित विधि मानव और गैर मानव प्राइमेट में प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स में शिथिलता का अध्ययन करने के लिए नियोजित परीक्षण का प्रतिनिधित्व करता है, वहीं आवश्यक स्फूर्त कक्षों और टचस्क्रीन की लागत चूहों में इस स्वचालित परीक्षण निषेधात्मक किया जा सकता करने के लिए।

यह व्यवहार प्रत्येक माउस, यानी, आदी होना, प्रशिक्षण के लिए के रूप में लगातार संभव के रूप में प्रदर्शन किया और परीक्षण प्रत्येक जानवर के लिए दिन के एक ही समय में किया जाना चाहिए कि सिफारिश की है। जानवरों के लिए ले जाया जा रहे हैं इसके अलावा, अगर व्यवहार कक्ष आदि के कारण बेकाबू यातायात प्रवाह, गंध परिचय करने के लिए समस्याग्रस्त साझा / समुदाय अंतरिक्ष का इस्तेमाल कर रही है, प्रयोग के दौरान अपरिवर्तित रहना चाहिएएक दूरदराज के व्यवहार के कमरे में एक आवास के कमरे (यहाँ मामला है) से, एक ही मार्ग हर बार लिया जाना चाहिए। व्यवहार कमरे प्रयोगकर्ता और जानवरों के परीक्षण की प्रक्रिया के दौरान परेशान नहीं किया जाएगा, जहां एक क्षेत्र में होना चाहिए। कई प्रयोगकर्ताओं के कमरे से एक ही कमरे, प्रवेश और निकास में कार्य प्रदर्शन कर रहे हैं के रूप में परीक्षण के दौरान पशु का तनाव या चिंता में वृद्धि हो सकती है, जो किसी भी जोर शोर या व्यवधान से बचने के लिए संभव के रूप में सीमित किया जाना चाहिए। इसके अतिरिक्त, प्रयोगकर्ताओं को दूर करने और जितना संभव हो कम शोर और व्यवधान पैदा करने के लिए इतनी के रूप में और चैम्बर के बाहर शुरू गेट के साथ ही बर्तन की जगह में सावधान रहना चाहिए। चूहों में प्रदर्शन प्रयोगों AST के प्रदर्शन विभिन्न तनाव से बाधित हो सकता है कि प्रदर्शन किया है।

बर्तन की scenting प्रत्येक सप्ताह प्रदर्शन किया और उसी दिन प्रत्येक सप्ताह पर, कम से कम दो दिन पहले पहला परीक्षण के दिन के लिए किया जाना चाहिए। यह बर्तन एक अच्छी तरह से उतारना में सुगंधित कर रहे हैं सिफारिश की है किपरीक्षण किया जा रहा है जहां क्षेत्र के बाहर ilated क्षेत्र (जैसे अलग प्रयोगशाला, दालान, धूआं हुड)। इस scents के पार संक्रमण से बचने में मदद मिलेगी और परीक्षण का हिस्सा नहीं हैं कि scents के साथ चूहों को भ्रमित करने से बचना होगा। साथ ही, पहले और परीक्षण के दौरान, भेदभाव से पशु विचलित हो सकता है, जो मजबूत scents (यानी, तुरंत पहले परीक्षण, मजबूत इत्र / दुर्गन्ध, आदि के लिए गम या कॉफी की खपत) के aforementioned कारण से बचा जाना चाहिए। प्रयोगकर्ताओं इस प्रोटोकॉल में वर्णित है से वैकल्पिक खुदाई माध्यम का उपयोग करने के लिए इच्छा चाहिए, यह मध्यम यहाँ वर्णित है कि इसी तरह घनत्व और वजन (माउस पर्याप्त रूप से खुदाई करने के लिए अत्यधिक वजन / घनत्व यह कठिन बना देता है) का हो सिफारिश की है। उदाहरण के लिए, हम चूहों तरफ पुश करने के लिए वे कठिन थे क्योंकि छोटे प्लास्टिक की माला उपयुक्त नहीं थे। साथ ही, किसी भी एक बहुत मजबूत गंध के साथ मीडिया (उदा।, रबर स्ट्रिप्स और कुछ प्लास्टयह scents का परीक्षण किया जा रहा पता लगाने की क्षमता के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं के रूप में आईसी सामग्री) उपयुक्त नहीं है।

प्रशिक्षण और एक व्यक्ति माउस के परीक्षण के लिए एक एकल प्रयोगकर्ता के द्वारा किया जाना चाहिए, हालांकि दशानुकूलन जब तक वे से निपटने में भाग लिया है, के रूप में किसी भी प्रयोगकर्ता के द्वारा किया जा सकता है। सभी बर्तन पशु चरणों के बीच इंतजार कर क्षेत्र में है समय की राशि की सीमा के रूप में तो पहुंच के भीतर हो जाना चाहिए प्रत्येक दिन प्रदर्शन चार चरणों में इस्तेमाल किया जाएगा। यह प्रत्येक कार्य पर माउस का ध्यान बनाए रखने में मदद मिलेगी। परीक्षण शुरू हो गया है एक बार इसके अलावा, यह (यानी, प्रत्येक परीक्षण के दिन के लिए सभी चार चरणों उत्तराधिकार में पूरा किया जाना चाहिए) परीक्षण के उस दिन के लिए कार्यों के पूरा होने तक बंद करने के लिए महत्वपूर्ण नहीं है।

अंत में, यहाँ वर्णित प्रोटोकॉल विवरण सहित चूहों में प्रीफ्रंटल कॉर्टिकल निर्भर संज्ञानात्मक समारोह, को मापने के लिए AST के प्रभावी उपयोग के लिए विस्तृत पद्धति निर्देश प्रदान करता हैडेटा विश्लेषण और संभावित निरंतर की। माउस AST के तरीकों की एक किस्म, प्राथमिक साहित्य में अपनी अलग प्रक्रियात्मक विस्तार के साथ प्रत्येक रिपोर्ट कर रहे हैं। शोधकर्ताओं ने अपने वैज्ञानिक प्रदर्शनों की सूची में इस शक्तिशाली व्यवहार परख शामिल करने के लिए प्रयास करने के लिए दोनों पाठ आधारित और दृश्य सूचना के अद्वितीय युग्मन विशेष रूप से उपयोगी हो जाएगा।

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Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की।

Acknowledgments

इस शोध translational विज्ञान आगे बढ़ाने के लिए राष्ट्रीय केंद्र से अनुदान R01-MH090127, मानसिक स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान से P30-MH089868 और पुरस्कार संख्या UL1TR001120 द्वारा समर्थित किया गया। सामग्री केवल लेखकों की जिम्मेदारी है और जरूरी एच या NCATS की आधिकारिक विचारों का प्रतिनिधित्व नहीं करता है। इसके अतिरिक्त, हम कृतज्ञता जल्दी पद्धति के विकास का मार्गदर्शन में अपने मूल्यवान विशेषज्ञता के लिए डॉ डेविड Morilak स्वीकार करना चाहते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Testing Chamber Fabricated in-house, specifications can be found in protocol
3 oz. Ramekins BIA Cordon Bleu 900002S12 Purchased on amazon.com
Essential Oils: Fronteir Natural Products Co-Op Purchased on http://www.frontiercoop.com/prodlist.php?ct=anpceoeo
Clove Bud 191114
Red Thyme 191140
Lemon 190810
Cinnamon Leaf 191111
Rosemary 191133
Citronella Java 191112
Vanilla in jojoba oil 191231
Anise Seed 191102
Ginger 191121
Nutmeg 191161
Filter Paper, 9.0 cm diameter VWR International 28310-048 Purchased on https://us.vwr.com/
Digging Media
Raffia Ashland 8 oz Raffia Purchased on http://www.michaels.com/
Cut into 1/2" to 1" strips
Green Felt Creatology Basic Felt Forest/Dark Green 36 in x 36 in  Purchased on http://www.michaels.com/
cut into 1 cm x 1 cm squares
Brown foam Creatology Fun Foam 18 x 12 in sheets (light brown/tan) Purchased on http://www.michaels.com/
cut into 1/2 cm x 2 cm rectangles
Crepe paper (yellow) Celebrate It Paper Crinkle 4 oz yellow jumbo Purchased on http://www.michaels.com/
Cut into 1/2" to 1" strips
Ribbon (turqoise) Celebrate It Wide Ribbon 4 in x 10 yd 100% polyester  Purchased on http://www.michaels.com/
cut into 1 cm x 1 cm squares
Metallic  Celebrate It Metallic Crinkle Gold 2 oz Purchased on http://www.michaels.com/
Cut into 1/2" to 1" strips
Googly Eyes, 4 mm ME4144 Purchased on http://factorydirectcraft.com/index.php
Black Sequins, 3 mm 8780BK
Pink Pom Poms, 1/4 inch 1018221
Pipe Cleaners, red 108430
Bedding material/sawdust Obtained from in-house animal resources
Timer Control Company 5000 Purchased on http://www.control3.com/5000p.htm
Lightly sweetened dry breakfast cereal loops HEB  Honey nut toasted oats used in the protocol described, any lightly sweet coated breakfast cereal is recommended

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References

  1. Birrell, J. M., Brown, V. J. Medial frontal cortex mediates perceptual attentional set shifting in the rat. J Neurosci. 20 (11), 4320-4324 (2000).
  2. Garner, J. P., Thogerson, C. M., Wurbel, H., Murray, J. D., Mench, J. A. Animal neuropsychology: validation of the Intra-Dimensional Extra-Dimensional set shifting task for mice. Behav Brain Res. 173 (1), 53-61 (2006).
  3. Nagahara, A. H., Bernot, T., Tuszynski, M. H. Age-related cognitive deficits in rhesus monkeys mirror human deficits on an automated test battery. Neurobiol Aging. 31 (6), 1020-1031 (2010).
  4. Rock, P. L., Roiser, J. P., Riedel, W. J., Blackwell, S. Cognitive impairment in depression: a systematic review and meta-analysis. Psychol Med. , 1-12 (2013).
  5. Stuss, D. T., et al. Wisconsin Card Sorting Test performance in patients with focal frontal and posterior brain damage: effects of lesion location and test structure on separable cognitive processes. Neuropsychologia. 38 (4), 388-402 (2000).
  6. Bissonette, G. B., et al. Double dissociation of the effects of medial and orbital prefrontal cortical lesions on attentional and affective shifts in mice. J Neurosci. 28 (44), 11124-11130 (2008).
  7. Chase, E. A., Tait, D. S., Brown, V. J. Lesions of the orbital prefrontal cortex impair the formation of attentional set in rats. Eur J Neurosci. 36 (3), 2368-2375 (2012).
  8. McAlonan, K., Brown, V. J. Orbital prefrontal cortex mediates reversal learning and not attentional set shifting in the rat. Behav Brain Res. 146 (1-2), 97-103 (2003).
  9. Dias, R., Robbins, T. W., Roberts, A. C. Primate analogue of the Wisconsin Card Sorting Test: effects of excitotoxic lesions of the prefrontal cortex in the marmoset. Behav Neurosci. 110 (5), 872-886 (1996).
  10. Bissonette, G. B., Powell, E. M. Reversal learning and attentional set-shifting in mice. Neuropharmacology. 62 (3), 1168-1174 (2012).
  11. Colacicco, G., Welzl, H., Lipp, H. P., Wurbel, H. Attentional set-shifting in mice: modification of a rat paradigm, and evidence for strain-dependent variation. Behav Brain Res. 132 (1), 95-102 (2002).
  12. Kos, T., Nikiforuk, A., Rafa, D., Popik, P. The effects of NMDA receptor antagonists on attentional set-shifting task performance in mice. Psychopharmacology (Berl). 214 (4), 911-921 (2011).
  13. Tait, D. S., Chase, E. A., Brown, V. J. Attentional Set-Shifting in Rodents: a Review of Behavioural Methods and Pharmacological Results. Curr Pharm Des. , (2013).
  14. Lapiz-Bluhm, M. D., et al. Behavioural assays to model cognitive and affective dimensions of depression and anxiety in rats. J Neuroendocrinol. 20 (10), 1115-1137 (2008).
  15. Brigman, J. L., Bussey, T. J., Saksida, L. M., Rothblat, L. A. Discrimination of multidimensional visual stimuli by mice: intra- and extradimensional shifts. Behav Neurosci. 119 (3), 839-842 (2005).

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व्यवहार अंक 96 संज्ञानात्मक लचीलापन प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स व्यवहार ध्यान माउस neuropsychiatric लक्षण संज्ञानात्मक रोग
Attentional सेट स्थानांतरण कार्य: चूहे में संज्ञानात्मक लचीलापन का एक उपाय
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Heisler, J. M., Morales, J.,More

Heisler, J. M., Morales, J., Donegan, J. J., Jett, J. D., Redus, L., O'Connor, J. C. The Attentional Set Shifting Task: A Measure of Cognitive Flexibility in Mice. J. Vis. Exp. (96), e51944, doi:10.3791/51944 (2015).

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