Summary
이 영화는 생쥐의 조직 및 간 혈류 역학을 취득하는 방법을 보여줍니다. 전체의 모니터링은 중요한 파라미터, 전신 혈압, 중심 정맥압, 간동맥 유량 및 포털 정맥 압력뿐만 아니라 마우스에서 포털 유량의 획득을 포함한다.
Abstract
실험적 연구의 마우스 모델의 사용은 생리학 및 병리학 적 간 장해에 대한 막대한 연구 중요하다. 그러나, 마우스의 작은 크기로, 마우스에 적합한 수술 모니터링 절차의 기술적 상세 설명은 거의 없었다. 이전에 우리는 쥐에 대한 혈역학 적 매개 변수를 얻을 수있는 모니터링 절차를보고있다. 이제, 우리는 생쥐에서 체계적이고 간 혈역학 적 파라미터를 획득하는 절차, 쥐보다 작은 열이 배 종 적응. 이 필름은 동물의 계측뿐만 아니라 마우스에서 전신성 및 간 혈류 역학을 평가하는 데 필요한 데이터 수집 프로세스를 설명한다. 체온, 호흡과 심장 박동을 포함하여 중요한 매개 변수는 전체 과정에 걸쳐 기록되었다. 전신 혈역학은 경동맥 동맥 압력 (CAP) 및 중심 정맥압 (CVP)로 구성되어 있습니다. 간 관류 매개 포털 V를 포함EIN 압력 (PVP), 포털 유량뿐만 아니라 간동맥 (표 1)의 유량. 계측 및 데이터 수집은 일반 값은 1.5 시간 이내에 완료되었다 기록합니다. 전신 및 간 혈역학이 절차를 수행하는 동안 정상 범위 내에서 유지했다.
이 절차는 도전 만 가능하다. 우리는 이미 실험을 클램핑 정상 마우스뿐만 아니라 70 % 부분 간 절제술시 간 엽에서 간 혈류 역학을 평가하기 위해이 절차를 적용했습니다. 절제 (N = 20), 절제 (6.87 ± 2.39 CMH 2 O) 이전보다 유의하게 높았다 CMH이 O (P <0.05) 11.41 ± 2.94 후 PVP를 의미한다. 실험 클램핑 간 로브의 결과는이 모니터링 절차는 포털 압력과 포털 유량의 작은 변화를 검출하기위한 민감하고 적합한 것으로 나타났다. 결론적으로,이 절차는 숙련 된 마이크로 외과 의사의 손에 신뢰할 수 있지만 특급으로 제한해야eriments 마우스는 절대적으로 어디 필요합니다.
Introduction
이 동영상의 전반적인 목적은 전신 및 간 혈역학 파라미터를 획득하기위한 실시간 모니터링 절차를 입증하는 것이었다. 이 절차를 개발하기위한 이론적 근거는 체계적이고 간 혈류 역학적 매개 변수를 얻는 필요로 쥐 실험 개입에 대한 가장 큰 값입니다. 절차는 부분 간 절제술, 포털 정맥 결찰 및 간 이식으로, 순진한 동물과 중 또는 주어진 간담 담도 실험적인 수술 적 치료 후 적용 할 수 있습니다.
설치류 간 혈역학 데이터의 수집은 제안 침략 절차가 필요합니다. 간 관류 비 침습적으로 얻을 수 없다. 그러나, 전신 혈압의 획득을위한 대안이있다. 이러한 꼬리 커프 기법 8로서 모니터링 기술은 래트 및 마우스 모두에서 혈압을 획득에 이용되어왔다. 꼬리 커프 기술은 consci에 적용 할 수 있습니다OU에 동물. 혈압을 측정 할 때, 동물은 특정 불편한 위치에 배치되어 고정 될 필요가있다. 꼬리 즉석 기기의 사용 설명서에서, 제조자는 마우스 긴장되고 꼬리의 순환을 감소 할 수있는 스트레스를 수 있다는 것을 말한다. 그 상황에서, 꼬리에서 취득한 말초 혈압 중앙 혈압보다 훨씬 낮을 수있다.
전체 모니터링 절차는 데이터 수집을위한 일련의 센서를 이용하여 통합 된 다중 - 채널 모니터를 수행 하였다. 혈압 현미경 조심 미세 해부 및 노출 후 각 용기 내에 카테터를 삽입하여 얻었다. 유량은 각 용기 주위 천음속 유동 탐침을 배치하여 측정 하였다.
우리는 이미 자장에 비교 생리 학적 혈역학 데이터의 포괄적 인 일련의 결과로 쥐를 위해 유사한 수술 모니터링 절차를보고다른 그룹 7에서보고 된 전자 데이터입니다. 따라서 우리는 마우스, 쥐보다 작은 10 배 종에 적응하기위한 좋은 기초를 표현하기 위해이 절차를 고려했다. 쥐 절차 주요 차이점은 혈압 데이터 대신에 유체 도관 기반 시스템을 취득 밀라 카테터의 사용이다. 데이터 흐름은 또한 천음속 유동 프로브 대응 쥐 혈관보다 단지 더 작은 것들로 획득 하였다.
때문에 동물의 작은 크기로, 마우스의 계측 기술적 도전하지만 가능하다. 계측이 완료되면 미리 정의 된 설정 파일이 사용될 수 있기 때문에, 데이터 수집 및 기본 수명 데이터의 분석은 간단하다. 설정 파일은 일련의 실험의 시작시에 한 번만 정의 될 저장 및 모든 후속 실험에 사용될 수있다.
지금까지 우리는 급성 실험에서 간 혈류 역학적 효과를 평가하기 위해이 절차를 적용했다. 우리는 CA를 측정P와 PVP 전에 즉시 70 % 부분 간 절제술 (PH) 후 및 / 드 클램핑 실험을 클램핑한다. 우리는 간 질량의 완전히 90 %를 나타내는 질량 중간의 개요 (5 분) 클램핑과 왼쪽 측면 엽 다음에 간 20 %를 나타내는 우엽의 간담 - 십이지장 인대를 고정. 드 - 클램핑은 중간과 왼쪽 측면 로브를 해제 한 다음 오른쪽 엽에서 클램프를 해제와 함께 시작했다. 클램핑 최대 시간은 10 분 미만이었다.
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Protocol
주택 및 수행 모든 절차는 독일어 동물 복지 규정에 따라했다.
1 센서 교정 (센서 교정에 대한 제조업체의 지침에 따라)
1.1) 밀라 카테터 교정. 30 분 전에 균형을 위해 (제로) 및 교정에 대한 멸균 생리 식염수에 카테터의 끝을 미리 담가.
- 브리지 앰프의 millar1 채널에 밀라 센서를 연결하고 물 열에 밀라 센서 팁을 삽입합니다.
- 0 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창에서 증폭 브리지를 선택하고 그것을 제로. 기준값 0 CMH 2 O가 설정 될 수있다.
- 20 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창 진행을 실행하고 중지합니다. 증폭 브리지의 창에서 "단위"를 선택,이 O에 따라 0과 20 CMH의 기준을 설정합니다. <CMH에 "장치를"조정서브> 2 O.
- 동일한 방식으로 CAP 측정 millar2를 보정 (베이스 라인이 90, 110 CMH이 O을 설정).
1.2) 혈류 프로브 교정
- 탈 이온수로 프로브를 넣습니다. 천음속 흐름 프로브 시스템과 프로브를 연결합니다.
- 데이터 분석 소프트웨어 창에서 입력이 플로우 프로브를 제로로 증폭 선택. 단위를 조정합니다.
- "테스트 채널"신호를 수집하기 위해 버튼을 누르면 : 신호가 3-4 막대가있는 경우,이 신호가 좋은 것을 의미한다. 좋은 신호를 얻는 경우에, 절차는 계속 될 수있다.
- 값이 교정되었는지의 여부를 "제로 채널"및 규모의 채널을보고 버튼을 누릅니다.
- 나중에 측정 용 "측정 채널"에있는 버튼을 누릅니다.
2 수술을 위해 마우스를 준비합니다
- 유도 챔버에 마우스를 넣고 2 % 이소 플루 란으로 마취하고 마우스0.3 ㎖ / 분의 산소. 마우스의 발가락 핀치 금단 휘어진이 존재하지 않는 경우는 연산이 수행 될 수있다.
- 왼쪽 목과 복부를 포함 외과 영역의 털을 면도.
- 작업 테이블에 마우스를 놓고 테이프를 사용하여 고정한다. 작업 기간 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용합니다.
- 목의 동작 필드의 최적의 노출을 목 아래에 거즈 쿠션을 배치합니다.
- 작업 필드를 소독 만 열어 수술 부위를 떠나 마우스를 충당하기 위해 멸균 거즈를 배치합니다.
3 바이탈 파라미터 측정
- 피하 마우스의 발에 ECG 바늘을 삽입합니다.
- 마우스의 뒷면에서 호흡 센서를 놓습니다.
- 마우스의 직장에 온도 프로브를 놓습니다.
- 기록 온도, ECG 및 데이터 분석 소프트웨어에 마우스 호흡.
S에 대한 4 목 운영ystemic 심장 혈관 모니터링
4.1) 선박 해부
- 목의 중간 라인, 쇄골의 중간 점, 하악의 각도를 확인합니다.
- 중간 라인의 왼쪽에 0.5cm 정도입니다 쇄골의 중간 지점에 하악의 각도에서 2cm 세로 절개를합니다.
- , 악하선을 해부 뒤집 식염수 적신 거즈로 덮어.
- , 경정맥을 확인을 해부하고 나중에 결찰 및 고정 용 정맥에서 세 6-0 실크 봉합사를 배치합니다.
- , 목 빗근 근육을 확인 digastric 근육의 omohyoid 후방 배의 우수한 배에서 분리하고, 경동맥 쉽게 노출 트랙터로 당깁니다.
- 경동맥을 해부하고 나중에 결찰 및 고정 용 동맥에서 세 6-0 실크 봉합사를 배치합니다.
4.2) 경동맥 혈류 측정
- 천음속 배치, 경동맥 주위 프로빙 안정을 유지하고, 초음파 겔 또는 식염수를 사용하여 접촉을 최적화.
- 데이터 분석 소프트웨어를 사용 천음속 장치의 작은 스크린에 표시된 바와 경동맥 기록 혈류 속도
- 측정을 마친 후 프로브를 제거
4.3) 경동맥 압력 측정 (CAP)
- 경동맥을 결찰 말단부 및 근위 단부 클램프.
- 경동맥 주변이 고정 봉합을 놓습니다. 숙박 봉합에 10-0 prolene을 사용합니다.
- 선박의 앞쪽 벽에 작은 절개를합니다.
- 밀라 카테터를 삽입하고 사전 배치 봉합사로 고정한다.
- 데이터 분석 소프트웨어의 CAP를 기록합니다.
4.4) 경정맥 혈류 측정
- 경정맥 리프트 및 유량을 측정하는 유량 천음속 프로브를 배치했다.
- 데이터 분석 소프트웨어의 유량을 기록한다.
4.5) 중심 정맥 압력 측정 (CVP)
- 경정맥의 근위 단부 클램프와 선단부를 결찰.
- 선박의 앞쪽 벽에 microscissors를 사용하여 작은 절개를 잘라.
- 유체 가득한 카테터를 삽입하고 사전 배치 봉합 라인을 수정합니다.
- 데이터 분석 소프트웨어의 CVP를 기록합니다.
간 혈류 역학의 취득을위한 5 복부 운영
5.1) 선박 식별
- 복부에 횡 절개를합니다.
- 왼쪽으로 장을 Eventerate 젖은 거즈 커버.
- 하대 정맥, 문맥, 간동맥 적절한 간동맥을 확인합니다.
- 전체 모니터링 절차를 수행하는 동안 복부와 장마다 5 분의 표면에 약간의 따뜻한 식염수를 삭제합니다.
포털 혈류 5.2) 측정
- 문맥을 해부하다.
- 플로우 프로브를 배치 할 때 용기의 승강을 용이하게하기 위해 문맥 하에서 6-0 실크를 배치했다.
- 문맥 주위 천음속 유동 탐침을 놓고 그 혈류 속도를 측정한다.
- 문맥의 혈류 속도를 기록한다.
일반적인 간동맥의 흐름 5.3) 측정
- 조심스럽게 간동맥을 해부하다.
- 선박의 해제를 용이하게하기 위해 혈관 주위에 한 6-0 실크 봉합사를 놓습니다.
- 동맥 주위의 흐름 프로브를 놓습니다.
- 그것의 혈류량을 측정하고 데이터를 획득.
문맥 압력 5.4) 측정 (PVP)
- 바로 포털 정맥에 배수 몇 가지 측면 분기 장간막 정맥의 한 지점을 선택합니다.
- 선택된 장간막 정맥의 선단부를 결찰. 결찰이 장 관에 가까운 있는지 확인합니다. 작은 가지를 결찰
- 이 F를 배치정맥 주위에 6-0 prolene을을 사용하여 봉합을 ixing. 이 절차의 핵심은 혈관을 결찰 할 때 장간막 동맥에 손이 닿지 않도록하는 것입니다.
- 문맥의 근위 단부 클램프.
- 10-0 prolene을을 사용하여이 숙박 봉합을 놓습니다. 숙박 봉합이 잘 장간막 정맥의 혈관 벽을 통과해야하기 때문에 약간의 출혈이 발생합니다.
- 45도 각도로 비스듬하게 microscissor를 사용하여 정맥에 작은 절개를합니다.
- 포털 정맥에 장간막 정맥을 통해 밀라 카테터를 삽입하고 그것을 해결
- 간문맥의 압력을 기록한다. 프로 시저의 끝에서, 마취 하에서 일어난 과다 출혈로 생쥐를 희생.
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Representative Results
이러한 호흡과 심장 박동으로 마우스의 중요한 매개 변수는 분명히 쥐보다 훨씬 더 높다. 평균 전신 혈압과 경정맥 압력은 쥐 값과 유사한 인간 데이터에도 유사하다.
간 혈류 역학 데이터는 분명히 다르다. 우리는 8 생쥐에서 정상 값을 얻을. 정상 마우스에서 포털 혈류는 1.6-2.3 ㎖ / 분 사이이었다. 간동맥에 흐름은 0.10에서 0.35 ㎖ / 분였다. 정상 동물 간문맥 압력은 8.09 ± 2.47의 평균값 CMH 2 O (표 1)와 O 2 CMH 4.4-11.2 넓은 범위에 있었다. 정상 동물의 작은 그룹의 평균값을 비교할 때 넓은 범위 작지만 유의하지 차이가 발생할 수있다.
우리는 특히 포털 압력에 상당한 개체 간 차이를 관찰하기 때문에, 우리는 작은 내 개인차가이 기술로 검출 될 수 있는지 여부를 테스트nique. 우리는 두 개의 서로 다른 실험 설정에서이 절차를 평가 : 부분 간 절제술과 간 로브 클램핑 / 디 클램핑. 포털 압력 전과 직후 같은 동물의 70 % 부분 간 절제술 (N = 20) (= P <0.001) O CMH이 6.87 ± 2.39 및 11.41 ± 2.94에서 2 배 증가 (그림 1). 인간 7에서 다른 종 5,12 관찰하고 이러한 결과는 유사한 범위에 있었다.
절제 전 일반 포털 정맥의 압력과 포털 압력이 서로 다른 그룹 (일반 모니터링 매개 변수 그룹에서 하나, 70 % PH 그룹에서 기타)로부터 획득 하였다. 6.87 ± 2.39 CMH 대 (8.09 ± 2.47 CMH 2 O 우리의 실험에서 관찰 정상적인 생쥐에서 포털 압력의 넓은 범위 (4 CMH 2 O 11), 동물의 작은 그룹의 평균 값은 약간 다를 수 있습니다 2 O). 데이터를 분석 할 때 그러나, 우리는 더 statis 없었다 발견이들 두 군 (P = 0.237) 사이 학적으로 유의 한 차이.
클램핑 / 디 클램핑 실험 절차는 포털 압력이 더 작은 변경 사항을 충분히 민감하다는 것을 보여주기 위해 설계되었습니다. 간 질량의 20 %를 나타내는 오른쪽 로브의 클램핑은 약 17 % 증가의 결과. 중간의 추가 클램핑 및 왼쪽 측면 로브는 시작 포털 압력에 비해 적어도 2 ~ 3 겹의 증가를 일으키는 원인이되었다. 간 70 %의 클램핑 결과 오른쪽 로브로부터 클램프 해제시 포털 압력은 시작 압력으로 점차적으로 돌려 보냈다. 중앙값과 왼쪽 측면 로브 (도 2 및 표 2)을 공급하는 좌측 문맥에서 클램프를 제거 할 때의 압력은 초기 수준으로 돌아왔다. 가짜 작업 그룹의 MAP는 복부를 연 후 1 시간 내에 안정적으로 유지. 비교 시점에서 얻은 대조군 마우스의 MAP,클램핑 실험에서와 같이, 실험군의 MAP에 비해 유의 한 차이가 없었다. 두 실험의 결과는 20 % 미만의 경우에도 작은 인트라 개별 변경은이 순서로 검출 할 수있는 것으로 나타났다.
심각한 출혈 및 혼잡 등의 일반적인 합병증 절차를 수행하는 동안 발생할 수 있습니다. 심한 출혈 MAP 상당한 감소뿐만 아니라 PVP를 일으킬 것이기 때문에, 이러한 합병증으로 생쥐의 결과를 제거한다. 우리는 작은 용량의 헤파린 (500 U / kg)을 주입하는 것이 좋습니다, 간 로브 클램핑 실험을 수행 할 때 내부에 작동 클램핑 전에 정맥 울혈 및 혈전을 방지합니다. 일반적인 간동맥은 선박을 올리고 프로브를 배치하는 등의 처리에 일시적인 혈관 경련을받을 수 있습니다. 이것은 간 과도 간단한 국소 빈혈이 발생할 수 있습니다. 일반적으로, 경련 분 이내에 자연적으로 해결할 수 있습니다. CHA의 짧은 혈관 경련은 심각한 문제를 포즈되지간 허혈 재관류 손상에 초점을 때 동물의 삶에 있지만, 실험 결과를 방해 할 수 있습니다.
결론적으로,이 절차는 도전하지만 가능하다. 심지어 경험 마이크로 외과 의사에 대한 몇 가지 훈련이 필요합니다. 때문에 이전과 개입 후 다른 동물에서 얻어진 압력 데이터의 높은 간 약간의 차이 비교에 결정적인 결과를 가져올 수 없습니다. 그러므로 우리는 이전과 같은 동물 내에서 개입 한 후 데이터를 수집하여 급성 실험에서 간 혈류 역학의 단기 조정을 연구하기 위해이 절차를 권장합니다.
| 매개 변수 | 자신의 데이터를 얻을 | 매개 변수보고 | |
| 바이탈 파라미터 | 심박수 (N = 8) | 418 ± 55 BPM | 389 (353-566) BPM 1 |
| 162 ± 11 BPM | 254 ± 28 BPM이 | ||
| 온도 (N = 8) | 33.56 ± 0.54 ° C | 36.1-36.6 ° C (11) | |
| 전신 혈압 (CAP) (N = 8) | 130.54 ± 20.47 CMH이 O (= 96.02 ± 15.06 mmHg로) | 94 ± 15 mmHg로 구 | |
| 중앙 정맥압 (CVP) (N = 2) | 8.90 ± 3.25 CMH이 O | 5.9 ± 2.0 CMH이 O (11) | |
| 간 혈류 역학 | 포털 정맥 흐름 (N = 6) | 2.03 ± 0.24 ㎖ / 분 | 3.0 (2.5-3.1) ㎖ / 1 min으로 |
| 3.3 ㎖ / 분 1 | |||
| 일반적인 간동맥 흐름 (N = 6) | 0.20 ± 0.09 ㎖ / 분 | fou 없음 차 | |
| PVP (N = 8) | 8.09 ± 2.47 CMH이 O (= 5.95 ± 1.82mmHg) | 5.3 ± 1.4 cm 식염수 3 | |
| 8.7 ± 2.1 mmHg로 사 | |||
| 4mmHg 6 | |||
.이 모니터링 절차 CAP 사용하여 획득 한 쥐의 표 1 정상 조직과 간 혈역학 : 경동맥 동맥 압력을; MAP는 : 동맥 압력을 의미; CVP : 중심 정맥 압력; PVP : 포털 정맥의 압력.
그림 1. PVP 전 70 % PH 후.했다 포털 정맥 70 % 부분 간 절제술 전후의 압력 (N = 20) 6.87 ± 2.39 및 11.41 ± 2.94 CMH 2 O.www.jove.com/files/ftp_upload/51955/51955fig1highres.jpg "대상 ="_ 빈 ">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 매개 변수 (cmH2O) | 개복술 후 | 간암의 20 %를 클램핑 후 (RL) | 간 90 %를 클램핑 후 (RL + ML + LLL) | 간 70 %의 클램핑 후 (ML + LLL) | 마지막에 (모든 클램프를 해제) |
| PVP - 클램핑 전문가 그룹 (N = 10) | 9.59 ± 4.00 | 10.45 ± 3.89 | 25.78 ± 8.99 | 16.91 ± 9.86 | 11.14 ± 4.48 |
| 평균 CAP - 클램핑 특급 그룹 (N = 10) | 121.50 ± 18.67 | 95.89 ± 32.76 | 74.41 ± 35.35 | 93.88 ± 42.96 | 89.44 ± 44.20 |
| 평균 CAP - 샴 그룹 (N = 3) | 123.33 ± 12.42 | 121.0 ± 5.57 | 124.00 ± 8.66 | 127.33 ± 7.23 | 123.00 ± 8.89 |
. 표 2 혈역학 적 반응 클램핑 및 다른 간 엽 (叶)의 declamping 후 (N = 10) RL : 우엽, ML : (오른쪽 중간 엽과 왼쪽 중간 엽 포함) 중간 엽은 평생 학습은 : 측면 로브를 떠났다.
클램핑 및 다른 간 엽 (叶)의 declamping 후 그림 2 혈역학 적 응답 (동물 ID : CHI-108) A.. PVP 바로 밀라 카테터를 삽입 한 후 CMH 2 O. 8.8이었다 20 % 간 엽 클램핑 후 PVP는 CMH이 OBPVP이 90 % 간 엽을 체결 한 후 CMH 2 O 17.5로 상승 10.8이었다. 우엽의 클램프를 해제 할 때 C. PVP는 O CMH이 10.3로 감소했다. D.PVP는 CMH이 8.7로 다시 갔다 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
간 혈류 역학의 모니터링은 간 장학 및 간담도 수술에서 중요한 연구 도구입니다. 간 혈역학 데이터 취득 순환계에 간담 절차의 효과를 특성화하는 데 도움. 혈관 활성 약물을 평가하는 연구에서 필요에 따라 간 혈역학 데이터의 수집은, 예를 들면 포털 압력과 포털 흐름에 영향을 미치는 약물의 효과를 연구 할 필요가있다.
작은 크기에도 불구하고, 전신 중요한 매개 변수, 간 혈류 역학은 생쥐에서 모니터링 할 수 있습니다. 다음 프로토콜 내의 중요한 단계가 있었다 : 첫째, 순환 부전의 원인이 저체온증을 피하기 위해 전체 공정 중에 온난화 패드에 동물을 배치하는 것이 중요하다. 마우스의 혈관 벽이 매우 깨지기 쉬운 얇은 때문에 둘째, 마우스의 혈관을 해부 할 때 매우 신중해야 할 중요합니다. 이 일에 약간의 지방 조직을 잡아 혈관 벽을 해결하기 위해 가장 좋은 것 같다대신 혈관 벽 자체를 잡는의 전자 표면. 셋째, 장간막 정맥 주위 정착 봉합사를 걸 때 동맥 공급을 저해하지 않는 장간막 동맥 결찰 실수를 방지하는 것이 중요하다.
그러나, 침략 멘토링 기술에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 첫번째는 그 자체로 침윤된다. 이 모니터링 기술은 수술 적 치료를 필요로하는 침습적 방법이다. 따라서 모니터링 절차 자체는 동물에 대한 부작용을 일으킬 수 있습니다. 따라서, 우리는하지만 생존 실험에서 정상 동물에서 급성 실험에서 혈역학 적 파라미터를 취득하려면이 절차를 사용했다. 다음 단계에서, 우리는 생존 실험에서이 기술을 평가합니다. 이 절차의 두번째 제한은 미세 상당한 경험을 필요로한다는 것이다. 생쥐의 혈역학 적 감시는 특별히 훈련 된 microsurgeons 수행해야합니다. 가장 어려운 파이 정맥이 매우 취약하기 때문에이 모니터링 절차의 t는 작은 장간막 정맥의 밀라 카테터의 삽입이다. 우리의 손에 약 10 교육 작업은 이전에 기술적으로이 과정을 마스터 링 경험 microsurgeon 필요했다. 경험이 성공적으로 쥐나 생쥐에서 50 개 이상의 혈관 문합 (경동맥, 경정맥)을 수행 한의 정의 하였다. 세 번째 한계는이 방법으로 얻어진 포털 압력이 정상 동물에 대한 생리 학적 범위 미만이 될 수 있다는 것이다. 장간막 정맥 결찰 및 카테터 삽입은 10 %로 추정 간문맥으로 배출 혈액의 전체 부피를 감소시킬 수있다. 그러나, 이러한 생리적 인 범위는 현재 사용 가능한 장치를 사용하여 획득 될 수 없다. 마찬가지로, PVP에서 마취 자체의 효과 (13)를 배제 할 수 없다. 모든 동물이 동일한 조작을 실시하기 때문에, 잠재적 오류 계통 오차 것이다. 따라서, DATA의 해석은주의가 동물 사이의 절대적인 차이에 반드시 상대 동물 내에서 변화와하지에 초점을 수행해야합니다.
그러나, 설치류의 침입 혈역학 적 감시가 거의 대안이있다. 비 침습적 모니터링은 전신 혈압의 취득에 한정된다. 포털 압력이나 포털 흐름은 마우스에서 비 침습적으로 측정 될 수 없다. 원격 측정 모니터링은 전신 혈압의 취득에 한정된다. 어떤 보고서는 다른 혈역학 적 파라미터의 원격 측정 인수에 관한 찾을 수 없습니다.
이 전체 수술 모니터링 절차는 예컨대 간 관류, 간 재생 종합적 간담 수술의 규제로서 간 생리적 과정을 이해하는 데 필요하다. 실시간으로 수술 중 실험 동물의 데이터를 모니터링하고 수집하는 능력은 이와 간 디 연구에서 상당한 진보를 나타낸다sease 및 포털 고혈압.
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Disclosures
저자는 그들이 더 경쟁 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.
Acknowledgments
이 연구는 "가상 간 네트워크"투자 교육 및 연구를위한 독일 연방 Ministery (BMBF)에 의해 지원되었다. 나는 비디오를 생산 및 오디오를 기록하는 애니메이션과 이사벨 Jank을 만드는 그들의 도움에 대한 예나 대학 병원의 미디어 센터에서 프랭크 슈베르트 르네 Gumpert 감사드립니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
References
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