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Medicine

चूहे में प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों की निगरानी

doi: 10.3791/51955 Published: October 4, 2014

Summary

इस फिल्म चूहों में प्रणालीगत और यकृत hemodynamics प्राप्त करने के लिए कैसे करें. पूरी निगरानी महत्वपूर्ण पैरामीटर, प्रणालीगत रक्तचाप, केंद्रीय शिरापरक दबाव, आम यकृत धमनी प्रवाह दर, और पोर्टल शिरा दबाव के साथ ही चूहों में पोर्टल प्रवाह दर का अधिग्रहण भी शामिल है.

Abstract

प्रायोगिक अनुसंधान में माउस मॉडल का प्रयोग यकृत शरीर विज्ञान और pathophysiological गड़बड़ी के अध्ययन के लिए भारी महत्व का है. हालांकि, माउस के छोटे आकार के लिए, माउस के लिए उपयुक्त intraoperative निगरानी प्रक्रिया की तकनीकी जानकारी शायद ही कभी वर्णित किया गया. पहले हम चूहों के लिए hemodynamic मापदंडों प्राप्त करने के लिए एक निगरानी प्रक्रिया की सूचना दी है. अब, हम चूहों में प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों के अधिग्रहण की प्रक्रिया, चूहों की तुलना में छोटे दस गुना एक प्रजाति रूपांतरित किया. इस फिल्म में जानवरों की इंस्ट्रूमेंटेशन के साथ ही चूहों में प्रणालीगत और यकृत hemodynamics का आकलन करने के लिए आवश्यक डेटा अधिग्रहण की प्रक्रिया को दर्शाता है. शरीर का तापमान, श्वसन दर और हृदय की दर सहित महत्वपूर्ण पैरामीटर, पूरी प्रक्रिया के दौरान दर्ज किए गए. प्रणालीगत hemodynamic मापदंडों मन्या धमनी दबाव (कैप) और केंद्रीय शिरापरक दबाव (CVP) से मिलकर बनता है. यकृत छिड़काव मापदंडों पोर्टल वी शामिलEin दबाव (पीवीपी), पोर्टल प्रवाह की दर के साथ ही आम यकृत धमनी (1 टेबल) के प्रवाह की दर. इंस्ट्रुमेंटेशन और डाटा अधिग्रहण सामान्य मूल्यों 1.5 घंटे के भीतर पूरा कर लिया गया रिकॉर्ड करने के लिए. प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों इस प्रक्रिया के दौरान सामान्य सीमाओं के भीतर बने रहे.

यह प्रक्रिया चुनौतीपूर्ण लेकिन संभव है. हम पहले से ही प्रयोगों clamping सामान्य चूहों में के रूप में अच्छी तरह से 70% आंशिक hepatectomy दौरान और जिगर पालि में यकृत hemodynamics का आकलन करने के लिए इस प्रक्रिया को लागू किया है. लकीर (n = 20), लकीर (6.87 ± 2.39 CMH 2 हे) से पहले की तुलना में काफी अधिक था जो CMH 2 हे (पी <0.05) 11.41 ± 2.94 था के बाद पीवीपी मतलब. प्रयोग clamping जिगर पालि के परिणाम इस निगरानी प्रक्रिया पोर्टल दबाव और पोर्टल प्रवाह की दर में छोटे परिवर्तन का पता लगाने के लिए संवेदनशील और उपयुक्त है कि संकेत दिया. अंत में, इस प्रक्रिया में एक अनुभवी माइक्रो सर्जन के हाथों में विश्वसनीय है लेकिन विस्तार को सीमित किया जाना चाहिएeriments चूहों बिल्कुल जहां जरूरत है.

Introduction

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इस वीडियो के समग्र लक्ष्य प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों प्राप्त करने के लिए एक वास्तविक समय की निगरानी प्रक्रिया को प्रदर्शित करने के लिए किया गया था. इस प्रक्रिया को विकसित करने के लिए तर्क प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों प्राप्त करने की आवश्यकता है कि चूहों में प्रयोगात्मक हस्तक्षेप के लिए अपने महान मूल्य है. प्रक्रिया ऐसी आंशिक hepatectomy, पोर्टल शिरा बंधाव और जिगर प्रत्यारोपण के रूप में, भोले जानवरों के लिए और के दौरान या किसी दिए गए hepato-पित्त प्रयोगात्मक शल्य चिकित्सा के हस्तक्षेप के बाद लागू किया जा सकता है.

कृन्तकों में यकृत hemodynamic डेटा का अधिग्रहण प्रस्तावित आक्रामक प्रक्रिया की आवश्यकता है. यकृत छिड़काव गैर invasively प्राप्त नहीं किया जा सकता है. हालांकि, प्रणालीगत रक्तचाप के अधिग्रहण के लिए विकल्प हैं. ऐसे पूंछ कफ तकनीक के रूप में 8 निगरानी तकनीक चूहों और चूहों दोनों में रक्तचाप प्राप्त करने के लिए उपयोग किया गया है. पूंछ कफ तकनीक consci में लागू किया जा सकता हैous जानवरों. रक्तचाप मापने जब, पशु एक विशिष्ट असहज स्थिति में रखा जाता है और तय होने की जरूरत है. पूंछ कफ डिवाइस के मार्गदर्शन में, निर्माता चूहों नर्वस हो जाते हैं और पूंछ में प्रचलन कम हो सकता है जो जोर देकर सकता है जो बताता है. उस परिस्थिति में, पूंछ में अधिग्रहीत परिधीय रक्तचाप केंद्रीय रक्तचाप से काफी कम हो सकता है.

पूर्ण निगरानी प्रक्रिया डाटा अधिग्रहण के लिए सेंसर की एक श्रृंखला का उपयोग कर एक एकीकृत एकाधिक चैनल पर नजर रखने के साथ प्रदर्शन किया था. रक्तचाप खुर्दबीन के नीचे सावधान microsurgical विच्छेदन और प्रदर्शन के बाद संबंधित पोत में एक कैथेटर डालने से प्राप्त हुई थी. प्रवाह दर प्रत्येक पोत के चारों ओर एक transonic प्रवाह जांच रखकर मापा गया था.

हम पहले से ही singl के लिए तुलनीय शारीरिक hemodynamic डेटा की एक व्यापक श्रृंखला में जिसके परिणामस्वरूप चूहों के लिए एक समान intraoperative निगरानी प्रक्रिया की सूचनाअन्य समूहों 7 से सूचना दी ई डेटा. इसलिए हम माउस, चूहे की तुलना में छोटे 10 गुना एक प्रजाति के लिए यह आदत डाल के लिए एक अच्छा आधार का प्रतिनिधित्व करने के लिए इस प्रक्रिया पर विचार किया. चूहे प्रक्रिया के लिए महत्वपूर्ण अंतर रक्तचाप डेटा के बजाय एक द्रव आधारित कैथेटर प्रणाली प्राप्त करने के लिए मिलर कैथेटर का इस्तेमाल होता है. प्रवाह डेटा भी transonic प्रवाह जांच, इसी चूहे वाहिकाओं के लिए की तुलना में अभी बहुत छोटे लोगों के साथ हासिल किया गया.

कारण पशु के छोटे आकार के, चूहों इंस्ट्रुमेंटेशन तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है, लेकिन संभव है. इंस्ट्रुमेंटेशन पूरा हो जाने के बाद एक पूर्वनिर्धारित सेटिंग फ़ाइल का उपयोग किया जा सकता है, डाटा अधिग्रहण और प्राथमिक जीवन डेटा विश्लेषण, सरल है. सेटिंग फ़ाइल प्रयोगों की एक श्रृंखला की शुरुआत में एक बार परिभाषित किया जा करने के लिए और संग्रहीत और बाद के सभी प्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

अब तक हम तीव्र प्रयोगों में यकृत hemodynamic प्रभाव का आकलन करने के लिए इस प्रक्रिया को लागू किया. हम सीए मापापी और पीवीपी से पहले और तुरंत 70% आंशिक hepatectomy (पीएच) के बाद और / डी clamping प्रयोगों clamping में. हम जिगर द्रव्यमान का पूरी तरह से 90% का प्रतिनिधित्व जन मंझला का संक्षिप्त (5min) clamping और बाएं पार्श्व पालि द्वारा पीछा जिगर का 20% का प्रतिनिधित्व करने का अधिकार पालि की hepato-ग्रहणी बंध clamped. डी clamping मंझला और बाएं पार्श्व पालि मुक्त कराने के द्वारा पीछा सही पालि से दबाना जारी करने के साथ शुरू कर दिया. अधिकतम clamping के समय 10 मिनट से कम था.

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Protocol

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आवास और बाहर ले गए सभी प्रक्रियाओं जर्मन पशु कल्याण कानून के अनुसार थे.

1 सेंसर अंशांकन (सेंसर अंशांकन के लिए निर्माता के निर्देशों का पालन करें)

1.1) मिलर कैथेटर अंशांकन. 30 मिनट पूर्व संतुलन के लिए (zeroing) और अंशांकन के लिए बाँझ पानी या खारा में कैथेटर की नोक पूर्व सोख.

  1. पुल एम्पलीफायर की millar1 चैनल में मिलर सेंसर कनेक्ट और पानी स्तंभ में मिलर सेंसर टिप डालें.
  2. 0 CMH 2 ओ को पानी स्तंभ मान सेट करें डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर विंडो में बढ़ाना पुल का चयन और यह शून्य. आधारभूत मूल्य 0 CMH 2 हे सेट किया जा सकता है.
  3. 20 CMH 2 ओ को पानी स्तंभ मान सेट करें डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर खिड़की प्रगति भागो, और बंद करो. बढ़ाना पुल की खिड़की में "इकाइयों" चुनें, 2 हे तदनुसार 0 और 20 CMH के आधारभूत सेट. <CMH के लिए "इकाई" समायोजितउप> 2 ओ
  4. उसी तरह से कैप को मापने के लिए millar2 जांचना (दो बेस लाइन 90 और 110 CMH 2 हे सेट).

1.2) रक्त प्रवाह जांच अंशांकन

  1. विआयनीकृत पानी की जांच रखो. Transonic प्रवाह जांच प्रणाली के साथ जांच कनेक्ट करें.
  2. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर विंडो में, इनपुट प्रवाह जांच शून्य बढ़ाना चुनें. इकाइयों को समायोजित करें.
  3. "परीक्षण चैनल" संकेत इकट्ठा करने के लिए बटन दबाएँ: संकेत 3-4 बार किया है, तो यह अच्छा संकेत है इसका मतलब है. एक अच्छा संकेत अधिग्रहण कर लिया है मामले में, प्रक्रिया को जारी रखा जा सकता है.
  4. मूल्य calibrated या नहीं किया गया है "शून्य चैनल" और पैमाने चैनल देखने के लिए बटन दबाएँ.
  5. बाद में मापने के लिए "उपाय चैनल" के लिए बटन दबाएँ.

2 सर्जिकल प्रक्रिया के लिए माउस को तैयार

  1. एक प्रेरण कक्ष में माउस प्लेस और 2 isoflurane% के साथ माउस anesthetize और0.3 मिलीग्राम / मिनट ऑक्सीजन. माउस के पैर के अंगूठे चुटकी वापसी पलटा अनुपस्थित है तो कार्रवाई की जा सकती है.
  2. बाएं गर्दन और पेट में शामिल हैं, जो शल्य चिकित्सा क्षेत्रों के फर दाढ़ी.
  3. आपरेशन टेबल पर माउस रखें और टेप का उपयोग कर यह तय कर लो. अभियान की अवधि के दौरान सूखापन को रोकने के लिए आंखों पर पशु चिकित्सक मरहम का प्रयोग करें.
  4. गर्दन के आपरेशन क्षेत्र के इष्टतम प्रदर्शन के लिए गर्दन के नीचे एक धुंध तकिया रखें.
  5. आपरेशन क्षेत्र कीटाणुरहित और केवल खुला शल्य चिकित्सा क्षेत्र छोड़ने माउस को कवर करने के लिए निष्फल gauzes जगह है.

3 महत्वपूर्ण पैरामीटर मापन

  1. Subcutaneously माउस के पंजे में ईसीजी सुई डालें.
  2. माउस के पीछे के तहत श्वसन सेंसर रखें.
  3. माउस के मलाशय में तापमान जांच रखें.
  4. रिकार्ड तापमान, ईसीजी और डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर में माउस की सांस की दर.

एस के लिए 4 गर्दन ऑपरेशनystemic हृदय निगरानी

4.1) पोत विच्छेदन

  1. गर्दन के बीच लाइन, हंसली के मध्य बिंदु, जबड़ा के कोण को पहचानें.
  2. मध्य रेखा के बाईं ओर 0.5cm है ​​जो हंसली के बीच बात करने के लिए जबड़ा के कोण से एक 2cm अनुदैर्ध्य चीरा.
  3. , अवअधोहनुज ग्रंथि काटना इसे मोड़ पर और खारा लथपथ धुंध के साथ कवर.
  4. , गले नस पहचानें इसे काटना और बाद में बंधाव और निर्धारण के लिए नस के तहत तीन 6-0 रेशम टांके जगह है.
  5. , Sternocleidomastoid पेशी पहचानें द्वितुंदी पेशी के omohyoid और पीछे पेट की बेहतर पेट से अलग, और मन्या धमनी की आसान प्रदर्शन के लिए एक प्रत्याकर्षक साथ यह पुल.
  6. कैरोटिड धमनी काटना और बाद में बंधाव और निर्धारण के लिए धमनी के तहत तीन 6-0 रेशम टांके जगह है.

4.2) कैरोटिड धमनी रक्त प्रवाह माप

  1. Transonic रखें, मन्या धमनी आसपास जांच स्थिर रखने के लिए, और अल्ट्रासाउंड जेल या खारा का उपयोग संपर्क का अनुकूलन.
  2. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग कर transonic डिवाइस के छोटे स्क्रीन पर संकेत के रूप में मन्या धमनी का रिकॉर्ड रक्त प्रवाह वेग
  3. माप पूरा करने के बाद जांच निकालें

4.3) कैरोटिड धमनी दबाव माप (कैप)

  1. कैरोटिड धमनी के बाहर का अंत ligate और उसके समीपस्थ अंत दबाना.
  2. कैरोटिड धमनी लगभग 2 फिक्सिंग टांके रखें. प्रवास सीवन के लिए 10-0 Prolene का प्रयोग करें.
  3. पोत के पूर्वकाल दीवार पर एक छोटा सा चीरा.
  4. मिलर कैथेटर डालें और पूर्व रखा sutures के साथ यह तय कर लो.
  5. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर में कैप रिकार्ड.

4.4) गले नस में रक्त के प्रवाह माप

  1. गले नस लिफ्ट और प्रवाह की दर को मापने के लिए transonic प्रवाह जांच जगह है.
  2. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर में प्रवाह की दर रिकार्ड.

4.5) केंद्रीय शिरापरक दबाव माप (CVP)

  1. गले नस के समीपस्थ अंत दबाना और बाहर का अंत ligate.
  2. पोत के पूर्वकाल दीवार पर microscissors का उपयोग कर एक छोटा सा चीरा काट दिया.
  3. तरल पदार्थ से भरे कैथेटर डालें और पूर्व रखा सिवनी लाइनों के साथ यह तय कर लो.
  4. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर में CVP रिकार्ड.

यकृत hemodynamics के अधिग्रहण के लिए 5 उदर ऑपरेशन

5.1) पोत पहचान

  1. पेट पर एक अनुप्रस्थ चीरा.
  2. बाईं ओर से आंतों Eventerate और गीला धुंध के साथ कवर किया.
  3. अवर रग कावा, पोर्टल शिरा, आम यकृत धमनी और उचित यकृत धमनी को पहचानें.
  4. पूरी निगरानी प्रक्रिया के दौरान पेट में और आंतों हर 5 मिनट की सतह पर कुछ गर्म खारा गिरा.

पोर्टल रक्त प्रवाह की 5.2) मापन

  1. पोर्टल नस काटना.
  2. प्रवाह जांच रखकर जब पोत के उठाने की सुविधा के लिए पोर्टल शिरा के तहत 6-0 रेशम रखें.
  3. पोर्टल नस के आसपास transonic प्रवाह जांच प्लेस और अपने रक्त प्रवाह की दर को मापने.
  4. पोर्टल शिरा के रक्त प्रवाह की दर रिकार्ड.

आम यकृत धमनी प्रवाह के 5.3) मापन

  1. सावधानी से आम यकृत धमनी काटना.
  2. पोत के उठाने की सुविधा के लिए पोत के चारों ओर एक 6-0 रेशम सिवनी रखें.
  3. धमनी के आसपास प्रवाह जांच रखें.
  4. अपने रक्त प्रवाह को मापने और डेटा प्राप्त.

पोर्टल नस दबाव के 5.4) माप (पीवीपी)

  1. सीधे पोर्टल नस में नालियों जो कुछ साइड शाखाओं के साथ mesenteric नस, की एक शाखा चुनें.
  2. चयनित mesenteric नस के बाहर का अंत ligate. बंधाव आंतों ट्यूब के करीब है कि सुनिश्चित करें. अपनी छोटी शाखाओं ligate
  3. 2 F प्लेसनस के आसपास 6-0 Prolene का उपयोग कर टांके ixing. इस प्रक्रिया का प्रमुख मुद्दा नस ligating जब mesenteric धमनी को छू से बचने के लिए है.
  4. पोर्टल शिरा के समीपस्थ अंत दबाना.
  5. 10-0 Prolene का उपयोग कर 2 प्रवास टांके रखें. प्रवास सिवनी ठीक mesenteric नस के संवहनी दीवार घुसना चाहिए क्योंकि कुछ रक्तस्राव हो जाएगा.
  6. एक 45 डिग्री के कोण पर तिरछा एक microscissor का उपयोग नस पर एक छोटा सा चीरा.
  7. पोर्टल नस में mesenteric नस के माध्यम से मिलर कैथेटर डालें और इसे ठीक
  8. पोर्टल नस दबाव रिकार्ड. प्रक्रिया के अंत में, संज्ञाहरण के तहत exsanguination द्वारा चूहों बलिदान.

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Representative Results

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ऐसे श्वसन दर और हृदय की दर के रूप में चूहों के महत्वपूर्ण मानदंडों को स्पष्ट रूप से चूहे की तुलना में काफी ज्यादा हैं. मीन प्रणालीगत रक्तचाप और गले नस दबाव चूहे मूल्यों के समान और मानव डेटा को भी इसी तरह के हैं.

यकृत hemodynamic डेटा स्पष्ट रूप से अलग हैं. हम 8 चूहों से सामान्य मूल्यों प्राप्त की. सामान्य चूहों में पोर्टल रक्त प्रवाह 1.6-2.3 मिलीग्राम / मिनट के बीच रहा. आम यकृत धमनी में प्रवाह 0.10 से 0.35 मिलीग्राम / मिनट तक बताया गया. सामान्य जानवरों में पोर्टल शिरा दबाव 8.09 ± 2.47 का एक मतलब मूल्य CMH 2 हे (1 टेबल) के साथ हे CMH 2 4.4-11.2 विस्तृत श्रृंखला में था. सामान्य जानवरों के छोटे समूहों का मतलब मूल्य की तुलना जब यह विस्तृत श्रृंखला छोटी लेकिन महत्वपूर्ण नहीं मतभेद पैदा हो सकती है.

हम विशेष रूप से पोर्टल दबाव में काफी परस्पर व्यक्तिगत मतभेदों मनाया बाद से, हम छोटे इंट्रा व्यक्तिगत मतभेदों इस तकनीक के साथ पता लगाया जा सकता है कि क्या परीक्षण कियाnique. हम दो अलग प्रयोगात्मक सेटिंग में इस प्रक्रिया का मूल्यांकन: आंशिक hepatectomy और जिगर पालि clamping / डी clamping. पोर्टल के दबाव से पहले और तुरंत बाद ही पशु में 70% आंशिक hepatectomy (n = 20) (= 0.001 <पी) हे CMH 2 6.87 ± 2.39 और 11.41 ± 2.94 से 2 गुना की वृद्धि हुई है (चित्रा 1). मनुष्य 7 में भी अन्य प्रजातियों 5,12 में मनाया और के रूप में इन परिणामों के एक समान श्रेणी में थे.

लकीर से पहले सामान्य पोर्टल नस दबाव और पोर्टल दबाव दो अलग समूहों (सामान्य निगरानी मापदंडों समूह से एक, 70% पीएच समूह से अन्य) से हासिल किया गया. 6.87 ± 2.39 cmh बनाम (8.09 ± 2.47 CMH 2 हे हमारे प्रयोग में मनाया के रूप में होने के कारण सामान्य चूहों में पोर्टल दबाव की विस्तृत श्रृंखला के लिए (4 CMH 2 हे 11 के लिए), जानवरों के छोटे समूहों के मूल्यों का मतलब, थोड़ा अलग हो सकता है 2 हे). डेटा का विश्लेषण हालांकि, जब हम कोई statis था कि वहाँ पायाइन दो समूहों (पी = 0.237) के बीच tically महत्वपूर्ण अंतर.

clamping / डी clamping प्रयोग प्रक्रिया पोर्टल दबाव में भी छोटे परिवर्तन लेने के लिए काफी संवेदनशील है कि प्रदर्शन करने के लिए डिजाइन किया गया था. जिगर द्रव्यमान का 20% का प्रतिनिधित्व करने का अधिकार पालि की clamping के बारे में 17% की वृद्धि हुई. मंझला के आगे clamping और बाएं पार्श्व पालि शुरू करने पोर्टल दबाव की तुलना में कम से कम 2-3 परतों की वृद्धि का कारण बना. जिगर के 70% के clamping में जिसके परिणामस्वरूप सही पालि से दबाना रिहा जब पोर्टल दबाव, शुरू करने के दबाव को धीरे धीरे लौट आए. मंझला और बाएं पार्श्व पालि (चित्रा 2 और तालिका 2) की आपूर्ति बाईं पोर्टल शिरा से दबाना हटाने जब ​​दबाव प्रारंभिक स्तर को लौट गया. नकली आपरेशन ग्रुप के मानचित्र पेट खोलने के बाद 1 के भीतर स्थिर बने रहे. तुलनीय समय बिंदु पर प्राप्त नियंत्रण समूह में चूहों के नक्शे,clamping के प्रयोग के रूप में, प्रयोगात्मक समूह के मानचित्र के साथ तुलना में कोई महत्वपूर्ण अंतर था. दोनों प्रयोगों के परिणामों से भी कम समय में 20% की भी थोड़ी इंट्रा व्यक्तिगत परिवर्तन इस प्रक्रिया के साथ पता लगाया जा सकता है कि पता चला.

गंभीर खून बह रहा है और भीड़ की तरह विशिष्ट जटिलताओं प्रक्रिया के दौरान हो सकता है. गंभीर खून की कमी महत्वपूर्ण नक्शे के कमी के साथ ही पीवीपी कारण होता है, यह जटिलता के साथ चूहों के परिणामों समाप्त किया जाना चाहिए. हम एक छोटी खुराक हेपरिन (500 यू / किग्रा) इंजेक्शन लगाने का सुझाव देते हैं, जिगर पालि clamping के प्रयोग का प्रदर्शन जब इंट्रा ऑपरेशन clamping से पहले शिरापरक भीड़ और घनास्त्रता से बचने के लिए. आम यकृत धमनी पोत उठाने और जांच रखकर जैसे निपटने पर एक क्षणिक पोत ऐंठन से गुजरना कर सकते हैं. यह जिगर का एक क्षणिक संक्षिप्त ischemia के कारण हो सकता है. सामान्य में, ऐंठन मिनट के भीतर अनायास हल हो सकती है. चा में एक छोटी नाड़ी ऐंठन एक गंभीर समस्या खड़ी नहीं हैयकृत ischemia reperfusion की चोट पर ध्यान केंद्रित जब जानवर के जीवन के लिए, लेकिन, प्रयोगात्मक परिणामों के साथ हस्तक्षेप कर सकता है.

अंत में, इस प्रक्रिया चुनौती है लेकिन संभव है. यह भी अनुभवी माइक्रो सर्जन के लिए कुछ प्रशिक्षण की आवश्यकता है. कारण पहले और एक हस्तक्षेप के बाद विभिन्न जानवरों में प्राप्त दबाव डेटा की उच्च परस्पर व्यक्तिगत परिवर्तनशीलता तुलना करने के लिए निर्णायक परिणाम के लिए नेतृत्व नहीं कर सकते हैं. इसलिए हम पहले और एक ही पशु के भीतर हस्तक्षेप के बाद डेटा प्राप्त करके तीव्र प्रयोगों में यकृत hemodynamics की लघु अवधि के नियमन का अध्ययन करने के लिए इस प्रक्रिया को सलाह देते हैं.

पैरामीटर्स स्वयं के डेटा प्राप्त पैरामीटर सूचना दी
महत्वपूर्ण पैरामीटर हार्ट दर (एन = 8) 418 ± 55 बीपीएम 389 (353-566) BPM 1
162 ± 11 बीपीएम 254 ± 28 बीपीएम 2
तापमान (एन = 8) 33.56 ± 0.54 डिग्री सेल्सियस 36.1-36.6 डिग्री सेल्सियस 11
प्रणालीगत रक्तचाप (कैप) (एन = 8) 130.54 ± 20.47 CMH 2 हे
(= 96.02 ± 15.06 एमएमएचजी)
94 ± 15 एमएमएचजी 9
केंद्रीय शिरापरक दबाव (CVP) (एन = 2) 8.90 ± 3.25 CMH 2 हे 5.9 ± 2.0 CMH 2 हे 11
यकृत hemodynamics पोर्टल नस प्रवाह (एन = 6) 2.03 ± 0.24 मिलीग्राम / मिनट 3.0 (2.5-3.1) मिलीग्राम / 1 मिनट
3.3 मिलीग्राम / मिनट 1
आम यकृत धमनी प्रवाह (एन = 6) 0.20 ± 0.09 मिलीग्राम / मिनट Fou नहीं ND
पीवीपी (एन = 8) 8.09 ± 2.47 CMH 2 हे (= 5.95 ± 1.82mmHg) 5.3 ± 1.4 सेमी खारा 3
8.7 ± 2.1 एमएमएचजी 4
4mmHg 6

. इस निगरानी प्रक्रिया टोपी का उपयोग अधिग्रहीत चूहों की तालिका 1 सामान्य प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों: मन्या धमनी दबाव; नक्शा: धमनी दबाव मतलब; CVP: केंद्रीय शिरापरक दबाव; पीवीपी: पोर्टल नस दबाव.

चित्रा 1
चित्रा 1. पीवीपी से पहले और 70% पीएच के बाद. थे पोर्टल शिरा 70% आंशिक hepatectomy पहले और बाद में दबाव (n = 20) 6.87 ± 2.39 और 11.41 ± 2.94 CMH 2 ओwww.jove.com/files/ftp_upload/51955/51955fig1highres.jpg "लक्ष्य =" _blank "> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

पैरामीटर (cmH2O) Laparotomy के बाद जिगर का 20% clamping के बाद (आरएल) जिगर के 90% clamping के बाद (आरएल + एमएल + एल एल एल) जिगर का 70% clamping के बाद (एमएल + एल एल एल) अंत में (सब clamps विज्ञप्ति)
पीवीपी - Clamping ऍक्स्प समूह (एन = 10) 9.59 ± 4.00 10.45 ± 3.89 25.78 ± 8.99 16.91 ± 9.86 11.14 ± 4.48
मीन कैप - Clamping ऍक्स्प समूह (एन = 10) 121.50 ± 18.67 95.89 ± 32.76 74.41 ± 35.35 93.88 ± 42.96 89.44 ± 44.20
मीन कैप - शाम समूह (एन = 3) 123.33 ± 12.42 121.0 ± 5.57 124.00 ± 8.66 127.33 ± 7.23 123.00 ± 8.89

. तालिका 2 hemodynamic प्रतिक्रिया clamping और विभिन्न जिगर पालियों की declamping के बाद (n = 10) आरएल: सही पालि, एमएल: (सही मंझला लोब और छोड़ दिया मंझला लोब सहित) मंझला पालि, एल एल एल: पार्श्व पालि छोड़ दिया.

चित्रा 2
Clamping और विभिन्न जिगर पालियों की declamping के बाद चित्रा 2 hemodynamic प्रतिक्रिया (पशु आईडी: ची-108) ए. पीवीपी सही मिलर कैथेटर डालने के बाद CMH 2 ओ 8.8 था 20% जिगर पालि clamping के बाद पीवीपी CMH 2 OBPVP 90% जिगर पालि clamping के बाद CMH 2 हे 17.5 के लिए गुलाब 10.8 था. सही पालि की दबाना रिहा जब सी पीवीपी हे CMH 2 10.3 की कमी हुई. D.PVP CMH 2 8.7 वापस चला गया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

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Discussion

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यकृत hemodynamics की निगरानी हेप्टोलोजी और Hepatobiliary सर्जरी में एक महत्वपूर्ण अनुसंधान उपकरण है. यकृत hemodynamic डेटा का अधिग्रहण संचार प्रणाली पर Hepatobiliary प्रक्रियाओं के प्रभाव को चिह्नित करने में मदद करता है. Vasoactive दवाओं के मूल्यांकन के अध्ययन में जरूरत के रूप में यकृत hemodynamic डेटा का अधिग्रहण भी, जैसे पोर्टल दबाव और पोर्टल प्रवाह को प्रभावित दवाओं के प्रभाव का अध्ययन करने की जरूरत है.

छोटे आकार के बावजूद, प्रणालीगत महत्वपूर्ण पैरामीटर, और यकृत hemodynamics चूहों में नजर रखी जा सकती है. निम्नानुसार प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम थे: पहला, यह संचार में शिथिलता पैदा हो सकती है जो हाइपोथर्मिया से बचने के लिए पूरी प्रक्रिया के दौरान एक वार्मिंग पैड पर जानवरों की जगह के लिए महत्वपूर्ण है. माउस के पोत दीवार बहुत नाजुक और पतली है, क्योंकि दूसरा, यह एक माउस के जहाजों विदारक जब बहुत सतर्क रहने के लिए महत्वपूर्ण है. यह वें पर कुछ वसा ऊतक हथियाने से पोत दीवार को ठीक करने के लिए सबसे अच्छा लगता हैबजाय पोत दीवार ही हथियाने की ई सतह. तीसरा, यह mesenteric नस के आसपास फिक्सिंग टांके रखकर जब धमनी की आपूर्ति आई नहीं लिए mesenteric धमनी की आकस्मिक बंधाव से बचने के लिए महत्वपूर्ण है.

हालांकि, आक्रामक सलाह तकनीक कुछ सीमाएँ हैं. पहले एक से ही अपने invasiveness है. इस निगरानी तकनीक एक शल्य चिकित्सा हस्तक्षेप की आवश्यकता है जो एक आक्रामक तरीका है. इसलिए निगरानी प्रक्रिया ही जानवरों के लिए साइड इफेक्ट हो सकता है. इसलिए, हम केवल लेकिन नहीं अस्तित्व प्रयोगों में, सामान्य जानवरों में और तीव्र प्रयोगों में hemodynamic मापदंडों प्राप्त करने के लिए इस प्रक्रिया का इस्तेमाल किया. एक अगले चरण में, हम अस्तित्व प्रयोगों में इस तकनीक का मूल्यांकन करना चाहते हैं. इस प्रक्रिया के दूसरे सीमा है कि यह पर्याप्त microsurgical अनुभव की आवश्यकता है. चूहों में hemodynamic निगरानी केवल विशेष रूप से प्रशिक्षित microsurgeons द्वारा किया जाना चाहिए. सबसे मुश्किल बराबरइस नस अत्यंत नाजुक है के बाद से इस निगरानी प्रक्रिया के टी, छोटे mesenteric नस में मिलर कैथेटर की प्रविष्टि है. हमारे हाथ में, के बारे में 10 प्रशिक्षण के संचालन से पहले तकनीकी रूप से इस प्रक्रिया माहिर एक अनुभवी microsurgeon के लिए आवश्यक थे. अनुभव सफलतापूर्वक चूहों या चूहों में 50 से अधिक संवहनी सम्मिलन (मन्या धमनी, गले नस) का प्रदर्शन होने की परिभाषित किया गया था. तीसरे सीमा इस विधि के साथ प्राप्त पोर्टल दबाव एक सामान्य पशु के लिए शारीरिक सीमा के नीचे हो सकता है. Mesenteric नस बंधाव और कैथेटर प्रविष्टि एक अनुमान के अनुसार 10% से पोर्टल शिरा में गिरती खून की कुल मात्रा को कम कर सकते हैं. हालांकि, इस शारीरिक सीमा वर्तमान में उपलब्ध उपकरणों का उपयोग कर हासिल नहीं किया जा सकता. इसी तरह, पीवीपी पर संज्ञाहरण खुद का असर 13 से बहिष्कृत नहीं किया जा सकता. सभी जानवरों को एक ही हस्तक्षेप के अधीन हैं के बाद हालांकि, संभावित त्रुटि एक व्यवस्थित त्रुटि होगी. इसलिए, डीअता व्याख्या सावधानी जानवरों के बीच पूर्ण मतभेदों पर जरूरी सापेक्ष एक जानवर के भीतर परिवर्तन और नहीं पर ध्यान केंद्रित के साथ किया जाना चाहिए.

हालांकि, कृन्तकों में आक्रामक hemodynamic निगरानी के लिए थोड़ा विकल्प हैं. गैर इनवेसिव निगरानी प्रणालीगत रक्तचाप के अधिग्रहण के लिए सीमित है. पोर्टल दबाव या पोर्टल प्रवाह चूहों में गैर invasively निर्धारित नहीं किया जा सकता है. टैलिमीटर निगरानी भी प्रणालीगत रक्तचाप के अधिग्रहण के लिए सीमित है. कोई रिपोर्ट अन्य hemodynamic मापदंडों के टैलिमीटर अधिग्रहण के संबंध पाया गया.

इस पूरे intraoperative निगरानी प्रक्रिया ऐसी जिगर छिड़काव, जिगर उत्थान और व्यापक Hepatobiliary सर्जरी के विनियमन के रूप में यकृत शारीरिक प्रक्रियाओं को समझने की जरूरत है. वास्तविक समय में intraoperatively प्रयोगशाला जानवरों के डेटा की निगरानी और इकट्ठा करने की क्षमता इस प्रकार जिगर डि के अध्ययन में एक महत्वपूर्ण अग्रिम का प्रतिनिधित्व करता हैsease और पोर्टल उच्च रक्तचाप.

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Disclosures

लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषणा.

Acknowledgments

इस शोध "वर्चुअल लिवर नेटवर्क" वित्त पोषित शिक्षा और अनुसंधान के लिए जर्मन संघीय मंत्रालय (BMBF) द्वारा समर्थित किया गया. मैं वीडियो उत्पादन और ऑडियो रिकॉर्डिंग के लिए एनीमेशन और इसाबेल Jank बनाने में उनकी मदद के लिए जेना विश्वविद्यालय अस्पताल के मीडिया केंद्र से फ्रैंक Schubert और रेने Gumpert धन्यवाद देना चाहूँगा.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PowerLab 16/30  ADInstruments PL3516
Quad Bridge Amp ADInstruments FE224 Bridge amplifier 
Animal Bio Amp ADInstruments FE136
Needle Electrodes for FE136 (3 pk) ADInstruments MLA1213
Perivascular Flowmeter Module Transonic TS420
Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB Transonic MA0.5PSB/MA1PSB
SPR-1000 Mouse Pressure Catheter Millar instruments 841-0001
fluid filled catheter  Terumo SR+DU2619PX 26G, 0.64×19mm
micro scissors F·S·L No. 14058-09
micro serrefine F·S·L No.18055-05
Micro clamps applicator F·S·L No. 18057-14
Straight micro forceps F·S·L No. 00632-11
Curved micro forceps F·S·L No. 00649-11
needle-holder F·S·L No. 12061-01
6-0 silk ethicon
6-0 prolene ethicon
7-0 prolene ethicon
10-0 prolene ethicon
Tail cut-off device  Kent Scientific www.kentscientific.com
LabChart7 ADInstruments data  analysis software 

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References

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चूहे में प्रणालीगत और यकृत hemodynamic मापदंडों की निगरानी
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Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).More

Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).

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