Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

Overvåking av systemisk og lever Hemodynamiske parametre i Mus

doi: 10.3791/51955 Published: October 4, 2014

Summary

Denne filmen viser hvordan du skaffe systemiske og lever hemodynamics hos mus. Hele overvåking omfatter kjøp av vitale parametre, systemisk blodtrykk, sentralt venetrykk, felles leverpulsåren flow rate, og portal vene press samt portalen strømningshastighet hos mus.

Abstract

Bruk av musemodeller i eksperimentell forskning er av enorm betydning for studiet av lever fysiologi og patofysiologiske forstyrrelser. Imidlertid, på grunn av den lille størrelsen på mus, tekniske detaljer av intraoperativ overvåkingsprosedyre som er egnet for mus var sjelden beskrevet. Tidligere har vi rapportert en overvåkings prosedyre for å oppnå hemodynamiske parametre for rotter. Nå, vi tilpasset prosedyren for å skaffe systemiske og lever hemodynamiske parametre i mus, en art ti ganger mindre enn rotter. Denne film viser instrumentering av dyrene, så vel som datainnsamlingsprosessen er nødvendig for å vurdere systemiske og hepatiske hemodynamikk i mus. Viktige parametere, inkludert kroppstemperatur, respirasjonsfrekvens og hjertefrekvensen ble registrert gjennom hele prosedyren. Systemiske hemodynamiske parametere består av arteria carotis trykk (CAP) og sentralt venetrykk (CVP). Lever perfusjon parametrene inkluderer portal vEin trykk (PVP), portal strømningshastighet, så vel som strømningshastigheten for den felles leverpulsåren (tabell 1). Instrumentering og datainnsamling for å registrere normale verdier ble fullført i løpet av 1,5 time. Systemiske og lever hemodynamiske parametere holdt seg innenfor normalområdet i løpet av denne prosedyren.

Denne prosedyren er utfordrende, men gjennomførbart. Vi har allerede anvendt denne fremgangsmåte for å vurdere lever hemodynamikk i normale mus så vel som under 70% partiell hepatektomi og i leverlappen klem eksperimenter. Midlere PVP etter reseksjon (n = 20), var 11,41 ± 2,94 CMH 2 O som var signifikant høyere (p <0,05) enn før reseksjon (6,87 ± 2,39 2 O CMH). Resultatene av leverlappen klem eksperimentet indikerte at denne overvåkingsprosedyren er sensitiv og passende for å detektere små forandringer i trykk og portal portal strømningshastighet. I konklusjonen, er denne prosedyren pålitelig i hendene på en erfaren mikro-kirurg, men bør begrenses til experiments hvor mus er absolutt nødvendig.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Det overordnede målet med denne videoen var å vise et sanntids overvåking prosedyre for å anskaffe systemiske og lever hemodynamiske parametre. Begrunnelsen for å utvikle denne prosedyren er dens stor verdi for eksperimentelle intervensjoner i mus som krever å få systemiske og lever hemodynamiske parametre. Fremgangsmåten kan anvendes på naive dyr, og i løpet av eller etter at et gitt hepato-biliær eksperimentelle kirurgiske inngrep, slik som partiell hepatektomi, portvenen ligering og levertransplantasjon.

Oppkjøp av lever hemodynamiske data hos gnagere krever den foreslåtte inngrep. Lever perfusjon kan ikke oppnås ikke-invasiv. Men det finnes alternativer for kjøp av systemisk blodtrykk. Overvåkingsteknikker slik som hale mansjetten teknikk 8 har blitt benyttet for å skaffe blodtrykk hos både rotter og mus. Halen mansjetten teknikken kan bli anvendt i conscilige dyr. Ved måling av blodtrykket, må dyret som skal plasseres og festes i en bestemt ukomfortabel stilling. I manuell av halen-cuff enhet, sier produsenten at mus kan bli nervøs og stresset som kan redusere sirkulasjonen i halen. Under denne omstendighet kan det perifere blodtrykket ervervet i halen være mye lavere enn det sentrale blodtrykk.

Hele overvåkningsprosedyren ble utført med et integrert multippel-kanal måleren ved hjelp av en rekke sensorer for datainnsamling. Blodtrykket ble oppnådd ved innføring av et kateter inn i den respektive fartøy etter nøye mikro disseksjon og eksponering under mikroskopet. Strømningshastigheten ble målt ved å plassere en tran strømningsprobe omkring hvert fartøy.

Vi har allerede rapportert en lignende intraoperativ overvåking prosedyre for rotter som resulterer i en omfattende serie av fysiologiske hemodynamiske data kan sammenlignes med SINGLdata som rapporteres fra andre grupper 7. Derfor vurderte vi denne prosedyren for å representere et godt grunnlag for å tilpasse den til mus, en art 10 ganger mindre enn rotter. Den viktigste forskjellen på rotte fremgangsmåte er bruken av Millar kateter for å skaffe blodtrykkdata i stedet for en væske-basert katetersystem. Flowdata ble også kjøpt med TRANSONIC flyt sonder, bare mye mindre enn for tilsvarende rotte fartøy.

På grunn av den lille størrelsen av dyret, er instrumentering av mus teknisk krevende, men mulig. Så snart instrumenteringen er fullført, er datainnsamling og primær liv dataanalyse enkel, siden en forhåndsbestemt innstilling filen kan brukes. Innstillingen filen er definert en gang ved begynnelsen av en serie forsøk, og kan lagres og brukes for alle påfølgende eksperimenter.

Hittil har vi brukt denne fremgangsmåten for å vurdere lever hemodynamiske effektene i akutte eksperimenter. Vi målte CAP og PVP før og umiddelbart etter 70% delvis hepatectomy (PH) og i klem / de-klem eksperimenter. Vi har fastklemt på hepato-duodenal ligament av høyre lapp som representerer 20% av levermasse, etterfulgt av kort (5 min) fastspenning av median og venstre side lobe som representerer totalt 90% av levermassen. De-klem startet med å frigjøre klemmen fra høyre lapp etterfulgt av frigjøring av median og venstre side lobe. Maximal klem tid var under 10 min.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bolig og alle prosedyrer utført var i samsvar med tysk Animal Welfare lovgivning.

1. Sensorer Kalibrering (Følg produsentens instruksjoner for Sensorer Calibration)

1.1) Millar kateter kalibrering. Pre-suge tuppen av kateteret i sterilt vann eller saltoppløsning i 30 min før balansere (nullstilling) og kalibrering.

  1. Koble Millar sensoren til millar1 kanal bro forsterker og sett millar sensortuppen inn i vannsøylen.
  2. Innstilt verdi vannsøylen til 0 CMH 2 O. I dataanalyse programvare vinduet, velger bro forsterke og null den. Baselineverdien 0 CMH 2 O kan stilles.
  3. Innstilt verdi vannsøylen til 20 CMH 2 O. Kjør dataanalyse programvare vindu fremgang, og stoppe. Velg "enheter" i vinduet på brua forsterke, sette baseline fra 0 og 20 CMH 2 O tilsvarende. Juster "enhet" til CMH <sub> 2 O.
  4. Kalibrere millar2 for måling av CAP på samme måte (satt to grunnlinje 90 og 110 CMH 2 O).

1.2) Blodstrømmen probekalibreringsinformasjon

  1. Sett sonden i avionisert vann. Koble sonden med tran strømningsprobe system.
  2. I dataanalyse programvare vinduet, velger Input forsterke å nullstille strømningsprobe. Juster enhetene.
  3. Trykk på knappen for å "teste kanal" for å samle signalet: hvis signalet har 3-4 barer, betyr det at signalet er bra. I tilfelle et godt signal er ervervet, kan fremgangsmåten fortsettes.
  4. Trykk på knappen for å "null kanal" og skala kanal for å se om verdien er kalibrert eller ikke.
  5. Trykk på knappen for å "måle kanal" for senere måling.

2. Klargjør mus for den kirurgiske prosedyren

  1. Plasser musen i induksjonsovn kammer og bedøve mus med 2% isofluran og0,3 ml / min oksygen. Operasjonen kan utføres hvis tå-pinch tilbaketrekking refleks av musen er fraværende.
  2. Barbere pelsen av kirurgiske områder, som inkluderer venstre nakke og buk.
  3. Plasser musen på operasjonsbordet og fikse det ved hjelp av kassetter. Bruk dyrlege salve på øynene for å hindre tørrhet under operasjonen perioden.
  4. Plasser et gasbind pute under nakken for optimal eksponering av operasjonen innen halsen.
  5. Desinfiser drift feltet og plassere steriliserte gauzes å dekke mus bare forlater operasjonsområdet åpent.

3. viktige parametere Måling

  1. Sett EKG nåler subkutant i potene av musen.
  2. Plasser åndedrettsføler i henhold til baksiden av mus.
  3. Plasser temperatursonde inn i endetarmen på musen.
  4. Record temperatur, EKG og respirasjonsfrekvens av musen i dataanalyse programvare.

4. Neck Operasjon for Systemic Cardiovascular Monitoring

4.1) Fartøy disseksjon

  1. Identifiser den midterste linjen av halsen, midterste punktet krageben, vinkelen på kjeven.
  2. Lag en 2cm langsgående snitt fra vinkelen på kjeven til den midterste punktet krageben som er 0,5 cm til venstre side av midtlinjen.
  3. Dissekere submandibular kjertel, snu det og dekke det med saltvann gjennomvåt gasbind.
  4. Identifiser halsvenen, dissekere den og legger tre 6-0 silke suturer under vene for senere ligation og fiksering.
  5. Identifiser sternocleidomastoideus muskelen, skille det fra den overlegne magen av omohyoid og posterior digastric muskel, og trekk den med en retractor for enkel eksponering av halspulsåren.
  6. Dissekere halspulsåren og plassere tre 6-0 silke suturer under såre for senere ligation og fiksering.

4.2) carotisar blodstrømsmåling

  1. Plasser transondere rundt halspulsåren, holde det stabilt, og optimalisere kontakten ved hjelp av ultralyd gel eller saltvann.
  2. Record blodstrømningshastighet av halspulsåren som angitt på den lille skjermen på den tran enheten ved hjelp av dataanalyse programvare
  3. Fjern sonden etter endt måling

4.3) halspulsåren trykkmåling (CAP)

  1. Ligere den distale enden av halspulsåren og klemme sin proksimale ende.
  2. Plasser to feste sting rundt halspulsåren. Bruk 10-0 prolen for oppholdet sutur.
  3. Lag et lite snitt i den fremre vegg av beholderen.
  4. Sett Millar kateter og fikse det med pre-plassert suturer.
  5. Noter CAP i dataanalyse programvare.

4.4) halsveneblodstrømsmåling

  1. Løft vena jugularis og plassere den transtrømnings sonden for å måle strømningshastigheten.
  2. Spill strømningshastigheten i dataanalyse programvare.

4.5) sentralt venetrykkmåling (CVP)

  1. Spenn den proksimale enden av halsvenen og ligere den distale ende.
  2. Skjær et lite innsnitt ved hjelp microscissors på den fremre vegg av beholderen.
  3. Sett væskefylt kateter og fikse det med pre-plassert sutur linjer.
  4. Noter CVP i dataanalyse programvare.

5. Abdominal Operasjon for Kjøp av Lever Hemodynamics

5.1) skipsidentifikasjon

  1. Lag en tverrgående snitt på magen.
  2. Eventerate tarmen til venstre side og dekk med våt gasbind.
  3. Identifisere den nedre vena cava, portvenen, den felles leverpulsåren og riktig leverpulsåren.
  4. Avle litt varmt saltvann i magen og på overflaten av tarmen hver 5 min under hele overvåkingsprosedyren.

5.2) Måling av portal blodstrøm

  1. Dissekere portvenen.
  2. Plasser 6-0 silke under portvenen for å lette løfting av fartøyet ved å plassere strømnings-probe.
  3. Plasser tran strømningsprobe rundt portvenen og måle blodmengde.
  4. Spill blodstrømningshastighet på portvenen.

5.3) Måling av Common leverpulsåren flyt

  1. Dissekere felles leverpulsåren forsiktig.
  2. Plasser en 6-0 silke sutur rundt fartøyet for å lette løfting av fartøyet.
  3. Plasser strømningsprobe omkring arterien.
  4. Måle blodstrøm og tilegne seg data.

5.4) Måling av portal vene trykk (PVP)

  1. Velg en gren av mesenteriske vene med få sidegreiner, som drenerer rett inn i portvenen.
  2. Ligere den distale enden av den valgte mesenteriske vene. Kontroller at ligation er nær intestinalsonden. Ligate sine små greiner
  3. Plasser to fblanding suturer ved hjelp av 6-0 prolen rundt venen. Hovedpoenget med denne prosedyren er å unngå å berøre mesenteriske arterien når liga venen.
  4. Spenn den proksimale enden av portvenen.
  5. Place 2 Stay sting ved hjelp 10-0 prolen. Noen blødning vil oppstå ettersom opphold sutur bør trenge inn i den vaskulære veggen av den fine mesenteriske vene.
  6. Lag et lite snitt på venen ved hjelp av en skrått microscissor ved en 45 graders vinkel.
  7. Sett Millar kateteret gjennom mesenteriske blodåre inn i portvenen og fikse det
  8. Spill portvenen press. På slutten av prosedyren, ofre musene ved blodtapping under anestesi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Viktige parametere i mus som respirasjonsfrekvens og hjertefrekvens er selvsagt mye høyere enn i rotter. Gjennomsnittlig systemisk blodtrykk og vena jugularis trykket er lik rotte-verdier og med lik den humane data.

Lever hemodynamiske data er åpenbart annerledes. Vi innhentet normale verdier fra 8 mus. Portal blodstrøm i normal mus varierte fra 1,6 til 2,3 ml / min. Strømning i den felles leverpulsåren varierte 0,10 til 0,35 ml / min. Portal vene trykket i normale dyr var i det brede spekter 4,4 til 11,2 CMH 2 O med en middelverdi på 8,09 ± 2,47 CMH 2 O (tabell 1). Denne rekke kan føre til at små, men ikke signifikante forskjeller ved sammenligning av den midlere verdi av små grupper av normale dyr.

Siden vi har observert betydelige interindividuelle forskjeller spesielt i portalen press, testet vi om små intra-individuelle forskjeller kunne påvises med denne technique. Vi har evaluert denne prosedyren i to ulike eksperimentelle innstillinger: delvis hepatectomy og lever lapp klem / de-klem. Portal trykk før og umiddelbart etter at 70% partiell hepatektomi (n = 20) i samme dyr (figur 1) økt med 2 ganger fra 6,87 ± 2,39 og 11,41 ± 2,94 CMH 2 O (P = <0,001). Disse resultatene var i et lignende område, som observert i andre arter 5,12 og også i mennesker 7.

Normal portvenen press og portal trykk før reseksjon ble kjøpt fra to forskjellige grupper (én fra normal overvåkingsparametere gruppe, den andre fra 70% PH gruppe). På grunn av det store omfanget av portal trykk i normal mus (4-11 CMH 2 O), kan gjennomsnittsverdiene av små grupper av dyr være litt annerledes, som observert i vårt eksperiment (8.09 ± 2.47 CMH 2 O versus 6.87 ± 2.39 CMH 2 O). Men når analysere data, fant vi at det var ingen statistisk signifikant forskjell mellom disse to gruppene (P = 0,237).

Klem / de-klem eksperiment ble utformet for å demonstrere at fremgangsmåten er følsom nok til å plukke opp og med mindre endringer i portalen trykket. Klemming av høyre lapp som representerer 20% av leveren masse resulterte i en økning på ca 17%. Ytterligere klem av medianen og venstre side lobe forårsaket en økning på minst 2-3 folder i forhold til utgangsportalen trykk. Portal trykket gradvis returnert til utgangstrykket, når frigjøre klemmen fra høyre lapp som resulterer i fastspenning av 70% av leveren. Trykket returneres til startnivået ved fjerning av klemmen fra venstre portalvenen forsyne median og venstre sidelapp (figur 2 og tabell 2). Kartet over humbug drift gruppen holdt seg stabil innenfor 1t etter åpning magen. MAP av musene i kontrollgruppen, oppnådd ved sammenlignbare tidspunktetsom i klem eksperimentet, hadde ingen signifikant forskjell sammenlignet med kartet for den eksperimentelle gruppe. Resultatene av begge forsøk viste at selv små intra-individuelle forandringer på mindre enn 20% kunne påvises med denne fremgangsmåten.

Typiske komplikasjoner som alvorlig blødning og lunger kan oppstå under prosedyren. Siden alvorlig blodtap ville føre til betydelig reduksjon av MAP, så vel som PVP, bør resultatene fra mus med denne komplikasjon bli eliminert. For å unngå venøs lunger og trombose når du utfører leveren lobe klem eksperiment, foreslår vi å injisere en liten dose heparin (500 U / kg) intraoperativt før klem. Vanlige leverpulsåren kan gjennomgå en forbigående fartøy spasme ved håndtering av for eksempel å løfte fartøyet og plassere proben. Dette kan føre til en forbigående kort iskemi av leveren. Generelt kan krampe løse spontant i løpet av minutter. En kort vaskulær krampe i CHA ikke utgjør en alvorlig problemfor livet til dyret, men kan virke forstyrrende på eksperimentelle resultater, ved å fokusere på lever iskemi reperfusjonsskade.

I konklusjonen, er denne prosedyren utfordrende, men gjennomførbart. Det krever litt trening, selv for erfarne mikro kirurger. På grunn av høy interindividuell variasjon sammenligning av trykkdata innhentet i forskjellige dyr før og etter en intervensjon kan ikke føre til konkluderende resultater. Derfor anbefaler vi denne prosedyren for å studere kortsiktig regulering av lever hemodynamics i akutte eksperimenter ved å kjøpe data før og etter inngrep innenfor samme dyr.

Parametere Egne data innhentet Parametere rapporterte
Vitale parametre Hjertefrekvens (n ​​= 8) 418 ± 55 BPM 389 (353-566) BPM en
162 ± 11 BPM 254 ± 28 BPM 2
Temperatur (n = 8) 33.56 ± 0.54 ° C 36,1 til 36,6 ° C 11
Systemisk blodtrykk (CAP) (n = 8) 130,54 ± 20.47 CMH 2 O
(= 96,02 ± 15,06 mmHg)
94 ± 15 mmHg 9
Sentralt venetrykk (CVP) (n = 2) 8.90 ± 3.25 CMH 2 O 5.9 ± 2.0 CMH 2 O 11
Lever hemodynamics Portal blodåre flow (n = 6) 2,03 ± 0,24 ml / min 3.0 (2.5 til 3.1) ml / min 1
3,3 ml / min 1
Vanlige leverpulsåren flow (n = 6) 0.20 ± 0.09 ml / min Ikke fou nd
PVP (n = 8) 8.09 ± 2.47 CMH 2 O (= 5.95 ± 1.82mmHg) 5.3 ± 1.4 cm saltvann 3
8,7 ± 2,1 mmHg 4
4mmHg 6

Tabell 1. Normal systemiske og lever hemodynamiske parametre av mus ervervet ved hjelp av denne overvåkingsprosedyren CAP:. Carotisar press; KART: bety arterietrykk; CVP: sentralt venetrykk; PVP: portal vene press.

Figur 1
Figur 1 PVP. Før og etter 70% PH. Portal blodåre trykk før og etter 70% delvis hepatectomy (n = 20) var 6.87 ± 2.39 og 11.41 ± 2.94 CMH 2 O.www.jove.com/files/ftp_upload/51955/51955fig1highres.jpg "target =" _blank "> Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Parametere (cm H2O) Etter laparotomi Etter fastspenning 20% ​​av lever (RL) Etter fastspenning 90% av leveren (RL + ML + LLL) Etter fastspenning 70% av leveren (ML + LLL) På slutten (løslate alle klemmer)
PVP - Spenn exp gruppen (n = 10) 9.59 ± 4.00 10.45 ± 3.89 25.78 ± 8.99 16.91 ± 9.86 11.14 ± 4.48
Mean CAP - Klem exp gruppen (n = 10) 121.50 ± 18,67 95,89 ± 32.76 74.41 ± 35.35 93.88 ± 42.96 89.44 ± 44.20
Mean CAP - Sham gruppen (n = 3) 123,33 ± 12.42 121,0 ± 5.57 124.00 ± 8.66 127.33 ± 7.23 123.00 ± 8.89

. Tabell 2. Hemodynamic respons etter klem og declamping forskjellige lever lapper (n = 10) RL: høyre lapp, ML: median lobe (inkludert riktig median lapp og venstre median lobe), LLL: venstre lateral lapp.

Figur 2
Figur 2. Hemodynamic respons etter klem og declamping forskjellige lever lapper (animalsk ID: CHI-108) A.. PVP rett etter innsetting av millar kateter var 8,8 CMH 2 O. PVP etter klem 20% lever lapp var 10,8 CMH 2 OBPVP steg til 17,5 CMH 2 O etter klem 90% lever lapp. C. PVP redusert til 10,3 CMH 2 O når lanserer klemmen høyre lapp. D.PVP gikk tilbake til 8,7 CMH 2 Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Overvåking av lever hemodynamics er et viktig forskningsverktøy i hepatology og hepatobiliære kirurgi. Oppkjøp av lever hemodynamiske data bidrar til å karakterisere effekten av galle prosedyrer på sirkulasjonssystemet. Oppkjøp av lever hemodynamiske data er også nødvendig for å studere effekten av legemidler som påvirker portal trykk og portal flyt, f.eks, som trengs i studier som evaluerte vasoaktive medikamenter.

Til tross for den lille størrelsen, kan de vitale parametre, systemiske og lever hemodynamics overvåkes i mus. De kritiske trinnene i protokollen var som følger: For det første er det viktig å plassere dyret på en varmepute under hele fremgangsmåten for å unngå nedkjøling som kan føre til sirkulasjonssvikt. For det andre er det viktig å være svært forsiktig når dissekere karene i en mus, siden åreveggen av musen er svært skjøre og tynne. Det synes best å fikse åreveggen ved å flytte litt fettvev på the overflaten i stedet for å gripe tak i åreveggen selv. For det tredje er det viktig å unngå utilsiktet ligation av mesenteriske åren for ikke å svekke den arterielle tilførselen når du plasserer feste sting rundt mesenteriske blodåre.

Imidlertid har invasiv mentoring teknikken noen begrensninger. Den første er dens invasivitet av seg selv. Denne overvåkingen teknikken er en invasiv metode, som krever et kirurgisk inngrep. Derfor overvåkningsfremgangsmåten i seg selv kan forårsake bivirkninger for dyrene. Derfor har vi bare brukt denne fremgangsmåten for å skaffe hemodynamiske parametre i normale dyr og i akutte eksperimenter, men ikke i overlevelse eksperimenter. I neste omgang ønsker vi å evaluere denne teknikken i overlevelse eksperimenter. Den andre begrensning med denne prosedyren er at det krever betydelig mikro erfaring. Hemodynamisk overvåkning i mus bør kun utføres av spesielt trente microsurgeons. Det vanskeligste part av denne overvåkingsprosedyren er innsetting av Millar kateter i den lille mesenteriske vene, siden denne vene er ekstremt skjøre. I våre hender, ble ca 10 opplæring operasjoner som trengs for en erfaren microsurgeon før teknisk mestre denne prosedyren. Erfaring ble definert for å ha vellykket utført mer enn 50 vaskulær anastomose (halspulsåren, halspulsåren) i rotter eller mus. Den tredje begrensning er at portalen trykket oppnådd med denne metoden kan være under fysiologiske området for en normal dyr. Mesenteriske vene ligering og kateterinnføring kan redusere det totale volum av blod som trenger inn i portvenen med anslagsvis 10%. Men dette kan fysiologiske området ikke bli kjøpt ved hjelp av de tilgjengelige enhetene. På samme måte kan virkningen av anestesi seg på PVP ikke utelukkes 13. Imidlertid, siden alle dyrene blir utsatt for den samme inngrep, vil den potensielle feil være en systematisk feil. Derfor data tolkning bør gjøres med forsiktighet fokus på relative endringer innenfor et dyr og ikke nødvendigvis på absolutte forskjeller mellom dyr.

Men det er lite alternativer til invasiv hemodynamisk overvåking hos gnagere. Non-invasiv monitorering er begrenset til kjøp av systemisk blodtrykk. Portal press eller portal flyt kan ikke bestemmes ikke-invasiv i mus. Telemetrisk overvåking er også begrenset til kjøp av systemisk blodtrykk. Ingen rapporter ble funnet i forbindelse med telemetrisk oppkjøp av andre hemodynamiske parametre.

Denne fullintraoperativ overvåking prosedyren er nødvendig for å forstå lever fysiologiske prosesser som regulering av leverperfusjon, lever regenerering og hepatobiliær kirurgi grundig. Evnen til å overvåke og samle inn data for forsøksdyr intraoperativt i sanntid representerer således et betydelig fremskritt i studiet av leveren diSease og portal hypertensjon.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende økonomiske interesser.

Acknowledgments

Denne forskningen ble støttet av den tyske føderale Departementet for utdanning og forskning (BMBF) finansiert "Virtual Liver Network". Jeg vil gjerne takke Frank Schubert og Rene Gumpert fra media sentrum av Jena universitetssykehus for deres hjelp i å produsere video og skape animasjon og Isabel Jank for opptak av lyd.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PowerLab 16/30  ADInstruments PL3516
Quad Bridge Amp ADInstruments FE224 Bridge amplifier 
Animal Bio Amp ADInstruments FE136
Needle Electrodes for FE136 (3 pk) ADInstruments MLA1213
Perivascular Flowmeter Module Transonic TS420
Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB Transonic MA0.5PSB/MA1PSB
SPR-1000 Mouse Pressure Catheter Millar instruments 841-0001
fluid filled catheter  Terumo SR+DU2619PX 26G, 0.64×19mm
micro scissors F·S·L No. 14058-09
micro serrefine F·S·L No.18055-05
Micro clamps applicator F·S·L No. 18057-14
Straight micro forceps F·S·L No. 00632-11
Curved micro forceps F·S·L No. 00649-11
needle-holder F·S·L No. 12061-01
6-0 silk ethicon
6-0 prolene ethicon
7-0 prolene ethicon
10-0 prolene ethicon
Tail cut-off device  Kent Scientific www.kentscientific.com
LabChart7 ADInstruments data  analysis software 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33, (10), 2332-2338 (2005).
  2. Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25, (6), 725-731 (2001).
  3. Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
  4. Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89, (1), 13-16 (2003).
  5. Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29, (6), 733-739 (2008).
  6. Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89, (4), 251-263 (2008).
  7. Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44, (3), 254-263 (2010).
  8. Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25, (5), 1111-1115 (1995).
  9. Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587, (Pt 4), 745-752 (2009).
  10. Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89, (1), 60-64 (1986).
  11. Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293, (1), H534-H540 (2007).
  12. Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35, (3), 220-225 (2005).
  13. Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34, (1), 16-25 (2014).
Overvåking av systemisk og lever Hemodynamiske parametre i Mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).More

Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter