Summary
Protocol
פרוטוקול לנתיחה השחלה תסיסנית
- פיד זבובים עם 1-2 ימים לפני שמרים לנתח אותם לפטם את השחלות.
- לטשטש את הזבובים באמצעות פחמן דו חמצני בזרם.
- בעזרת פינצטה, בחר זבוב הנקבה.
- להטביע את הנקבה לעוף לתוך 1X PBS.
- תפוס את הזבוב על החזה התחתון עם פינצטה.
- טאג בעדינות על הבטן התחתונה עם זוג נוסף של פינצטה עד האיברים הפנימיים בבטן חשופים.
- חפש זוג של השחלות לנתק אותו איברים אחרים (למשל את המעיים).
- ניסתה להפריד ovarioles (אם השחלות הן לשמש immunostaining או הכלאה באתרו).
- שמור השחלות קר כקרח 1X PBS בעוד לנתח את הזבוב הבא.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
כאן אנו להדגים שיטה לנתח השחלות תסיסנית. כפי שיטת culturing סוגי תאים שונים שקיימים השחלה תסיסנית טרם הוגדר, זה שיטה מהירה כדי להשיג את רקמת השחלה תסיסנית. בעיקרו של דבר, אנו מראים כי לנתח תסיסנית השחלות כרוך פשוטה שניים או שלושה שלבים בהליך. לאחר טיפול של אלה השחלות גזור תלויים הניסויים במורד הזרם כי יבוצעו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
