Summary
Protocol
Protokoll för Drosophila äggstock dissektion
- Feed flugor med jäst 1-2 dagar före dissekera dem att göda upp äggstockarna.
- Bedöva flyger med hjälp av ström koldioxid.
- Med hjälp av en pincett, välj en kvinnlig fluga.
- Sänk den kvinnliga flyga in 1X PBS.
- Ta flugan vid sin nedre thorax med en pincett.
- Dra försiktigt i den nedre delen av buken med en annan pincett tills de inre organen i buken är utsatta för.
- Leta efter par av äggstockarna och ta loss den från andra organ (t.ex. tarmarna).
- Reta isär ovarioles (om äggstockarna ska användas för immunfärgning eller in situ hybridisering).
- Håll äggstockarna i iskallt 1X PBS samtidigt dissekera nästa flyga.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Här visar vi en metod för att dissekera äggstockarna i Drosophila. Som metod för odling av olika celltyper som finns i Drosophila äggstocken ännu har definierats, är detta en snabb metod för att få Drosophila äggstocksvävnad. I huvudsak visar vi att dissekera Drosophila äggstockarna innebär en enkel två eller tre steg. Efterföljande hantering av dessa dissekerade äggstockarna beror på den efterföljande experiment som ska utföras.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
