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Methodenartikel

Murine Ileocolische Darmresektion mit primärer Anastomose

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DOI:

10.3791/52106

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29. Oktober 2014

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Ileokolische Resektion wird häufig bei verschiedenen menschlichen Krankheiten durchgeführt; es ist jedoch wenig über den Einfluss der Darmresektion auf chirurgische Erkrankungen bekannt. Dieser Artikel enthält Anweisungen zur Durchführung des Verfahrens bei Mäusen mit hohem Erfolg und bietet ein Mittel, um die Auswirkungen der ileokolischen Resektion in Krankheitsmodellen zu untersuchen.

Zusammenfassung

Darmresektionen sind häufig zur Behandlung von Erkrankungen des Magen-Darm-Trakts erforderlich, wobei Morbus Crohn und Darmkrebs zwei häufige Beispiele sind. Trotz der Häufigkeit dieser Verfahren besteht nach wie vor eine erhebliche Wissenslücke bei der Beschreibung der inhärenten Auswirkungen der Darmresektion auf die Physiologie des Wirts und die Pathophysiologie der Krankheit. Dieser Artikel enthält detaillierte Anweisungen für eine ileokolische Resektion mit primärer End-to-End-Anastomose bei Mäusen sowie wesentliche Aspekte der perioperativen Versorgung zur Maximierung des postoperativen Erfolgs. Bei genauer Befolgung führt dieses Verfahren zu einer Langzeitüberlebensrate von 95 %, ohne Gedeihstörungen und minimiert postoperative Komplikationen wie Darmverschluss und Anastomosenleck. Die technischen Herausforderungen bei der Durchführung des Verfahrens an Mäusen sind ein Hindernis für seine breite Anwendung in der Forschung. Die in diesem Artikel beschriebenen Fähigkeiten können ohne chirurgische Vorkenntnisse erworben werden. Sobald das murine ileokolische Resektionsverfahren beherrscht wird, wird es ein reproduzierbares Werkzeug zur Untersuchung der Auswirkungen der Darmresektion in Modellen menschlicher Krankheiten bieten.

Einleitung

Ileokolische Resektion (ICR) ist ein gängiges Verfahren, das sowohl in Notsituationen als auch in elektiven Situationen für eine Vielzahl von Krankheiten durchgeführt wird. Morbus Crohn und Dickdarmkrebs sind die beiden häufigsten Indikationen für ICR. Bei beiden Erkrankungen stellt das Wiederauftreten im Darm an der Operationsstelle ein großes klinisches Problem dar. Die Lokalrezidivraten bei Dickdarmkrebs bleiben selbst bei den aggressivsten Resektionen ein Problem1. Nach ICR bei Morbus Crohn tritt die Erkrankung am häufigsten (in bis zu 80%) im neoterminalen Ileum 1 Jahr nach der Operation wieder auf2. Angesichts der Auswirkungen dieser beiden....

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Protokoll

Tiernutzung Protokolle wurden von der Health Science Animal Care und Verwenden Ausschuss an der Universität von Alberta genehmigt.

1. Herstellung der Instrumente, Tiere und Operative-Setup

  1. Übertragen Tieren zu einem neuen, sauberen Käfig abwesend aller feste Nahrung 24 Stunden vor dem Eingriff. Sie können den freien Zugang zu Wasser und flüssige Diät ad lib bis zum Zeitpunkt des Verfahrens.
  2. Autoklav alle für das Verfahren erforderlichen Instrumente. Saubere Arbeitsfläche und Narkosenasenkegel mit 70% Ethanol.
  3. Richten Sie die Arbeitsfläche mit Operationsmikroskop, Narkosegerät und Zubehör in einer Weise, die ....

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Ergebnisse

Sterblichkeit und Gewichtsveränderung nach der OP.
Die Sterblichkeitsraten folgenden ICR in 129S1 Wildtyp-Mäusen in der Regel ~ 5%. Die häufigste Ursache der Moral ist Darmverschluss an der Anastomose. Andere Todesursachen gehören Anastomoseninsuffizienz und interne Hernie, die zu Verstopfung Darm.

Gewichtsverlust kann bis zu 14 Tage nach der Operation zu sehen ist, ist jedoch im allgemeinen nicht signifikant. Mäuse sind in der Regel präoperativen Gewicht komplett wieder von po.......

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Diskussion

Die murine ICR ist ein leistungsfähiges Modell, das verwendet werden kann, um die Auswirkungen der Operation bei Darmerkrankungen zu untersuchen. Dieser Artikel beschreibt ein Verfahren zur Durchführung ICR bei Mäusen mit einer Erfolgsquote von 95% und keine Probleme mit Gedeihstörungen wie durch stabile Gewichte reflektiert bis zu 28 Tage nach dem Eingriff. Die wichtigsten Herausforderungen für die erfolgreiche ICR gehören die Vermeidung Darm Hindernisse an der Anastomose und Anastomosen Lecks.

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts offenzulegen

Danksagungen

Wir möchten uns bei den finanziellen Beiträgen des Canadian Surgical Research Fund, des Edmonton Civic Employees Research Assistance Fund und des Alberta IBD Consortium durch einen Zuschuss von Alberta Innovates bedanken.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
LD101 flüssiges Nagetierfuttertestdiet.com
0,9 % NaClBaxterFKE1324Injektionsqualität Kochsalzlösung
OperationsmikroskopZiess
Isofluran AnästhesieverdampferHarvard Apparat34-0483
IsofluranAbbott 05260-05
GlasplatteFür Bedienoberfläche
Wattestäbchen
Micro Castroviejo Nadelhalter, gebogenWorld Precision Instruments503377
Castroviejo gerade SchereWorld Precision Instruments555530S
PräparierschereWorld Precision Instruments15922
Verbandszange x 2World Precision Instruments500363
5-0 Seide vorgeschnittene NähteEthiconA182HFür die Gefäßligatur
8-0 Prolene auf BV130-5 NadelEthicon8732HFür Anastomose
3-0 Seide auf FS-2 NadelnEthicon8665GFür den Bauchwandverschluss
VaselineVaseline
10 ml SpritzeBD biosciences
Povidon-Jod 7,5 % chirurgisch Scrubbetadine.com
Wärmelampen
Buprenorphin 0,3 mg/mlReckitt Benckiser Healthcare Ltd. PL36699/0006

Referenzen

  1. Hallet, J., Zih, F. S., Lemke, M., Milot, L., Smith, A. J., Wong, C. S. Neo-adjuvant chemoradiotherapy and multivisceral resection to optimize R0 resection of locally recurrent adherent colon cancer. European Journal of Surgical Oncology. 40 (6), (2014).
  2. Rutgeerts, P., Geboes, K., Vantrappen, G.

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Nachdrucke und Genehmigungen

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