Debido a la conexión drástico y negativo entre la obesidad y otras comorbilidades, la investigación sobre el papel adiposo desempeña en la enfermedad y la salud en general se justifica. Se presenta un protocolo para el aislamiento y la escisión de los depósitos de tejido adiposo que permitan el estudio de tejido adiposo usando in situ y métodos in vitro.
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Artículo de método
Localización, identificación y Escisión de depósitos adiposos murino
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Resumen
Resumen
La obesidad ha aumentado drásticamente en las últimas décadas y afecta a más de un tercio de la población adulta de EE. UU. El efecto económico de la obesidad en 2005 alcanzó la asombrosa suma de 190.200 millones de dólares sólo en costos médicos directos. La obesidad es un factor de riesgo importante para una amplia gama de enfermedades. Históricamente, se sabía poco sobre el tejido adiposo y sus funciones principales y esenciales en el cuerpo. El tejido adiposo marrón y blanco son los dos tipos principales de adiposo, pero la literatura actual ha identificado un nuevo tipo de grasa llamada brite o adiposo beige. La investigación ha demostrado que los depósitos de adiposo tienen perfiles metabólicos específicos y ciertos depósitos permiten una propensión a la obesidad y otros trastornos relacionados. El objetivo de este protocolo es dotar a los investigadores de la capacidad de identificar y extirpar depósitos adiposos que permitan analizar diferentes efectos factoriales sobre el tejido adiposo; así como el papel beneficioso o perjudicial que desempeña el adiposo en las enfermedades y la salud en general. El aislamiento y la escisión de los depósitos de tejido adiposo permiten a los investigadores observar los cambios morfológicos macroscópicos, así como los cambios histológicos. El aislado adiposo también se puede utilizar para estudios moleculares para evaluar el cambio transcripcional y traslacional o para la experimentación in vitro para descubrir dianas de interés y mecanismos de acción. Esta técnica es superior a otras técnicas publicadas debido a que el diseño permite el aislamiento de múltiples depósitos con simplicidad y mínima contaminación.
Introducción
Adiposo hizo una aparición notable en la atención de los medios, debido al aumento espectacular de la obesidad durante las últimas décadas del siglo 20. La obesidad afecta actualmente a más de un tercio de los adultos y el 17% de los niños y adolescentes en los Estados Unidos (US) 1. Que abarca todos los grupos étnicos, la investigación estadística que rodea la epidemia de la obesidad se ha demostrado que los negros no hispanos tienen la tasa ajustada por edad más alta de obesidad (49,5%) en comparación con los mexicano-americanos (40,4%), los hispanos (39.1%), y no los blancos no hispanos (34,3%) 2. El efecto económico de la obesidad es también....
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Protocolo
NOTA: Todos los animales procedimientos fueron realizados con la aprobación del Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucional (IACUC) de la Universidad de Cincinnati y de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud (NIH Publication No . 85-23, revisado 1996).
1. La eutanasia y esterilizar el ratón
- Coloca el ratón en un dropbox que contiene una dosis supratheraputic de isoflurano y permitir a inhalar a efecto. Una vez que el ratón es sacrificado, retirar de la caja.
- Cervical dislocar como un segundo medio de la eutanasia.
- Esterilizar la superf....
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Resultados
Identificación y localización de inguinal adiposo subcutáneo, tejido adiposo marrón interescapular, adiposo del epidídimo visceral (Figura 1), así como el adiposo perivascular arco aórtico, la aorta torácica adiposo, tejido adiposo aórtica suprarrenal y el tejido adiposo de la aorta infrarrenal (Figura 2) se logró con éxito utilizando el método quirúrgico descrito. El examen histológico y la diferenciación entre muestras MTD y WAT fueron evaluados positivamente mediante hematoxilina y e.......
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Discusión
La obesidad puede conducir a una gran cantidad de morbilidades y la plena comprensión del papel que juega adiposo no se entiende completamente; Por lo tanto, la investigación continuada en el campo de la adiposo es necesario. Los modelos animales, específicamente modelos murinos son ideales para la investigación inicial en la progresión de las enfermedades y las pruebas de los posibles tratamientos farmacéuticos. En el uso de estos modelos, el aislamiento y la escisión precisa de los depósitos de tejido adiposo es una h.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos u otros conflictos de intereses.
Agradecimientos
Los autores no tienen agradecimientos.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Isoflurano | Med-Vet International | #RXISO-250 | |
| 70% Etanol | Fisher | 07-678-001 | |
| DMEF-12 | Sigma Aldrich | D-6421 | Calentar en baño de agua antes de colocar el pañuelo |
| 2 ml Tubos de microcentrífuga | Midsci | MCT-200-C-S | |
| Solución salina tamponada con fosfato | Sigma Aldrich | P5368-10PAK |
Referencias
- Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010. NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).
- Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index....
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Reimpresiones y permisos
