Protocol
وتمت الموافقة على جميع الإجراءات والبروتوكولات من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي من جامعة إلينوي في شيكاغو. وصف التجارب هنا حادة التجارب غير البقاء على قيد الحياة، ولم يكن هناك استخدام مرهم العين. صيانة ظروف معقمة يحدث فقط عندما يتم غسل الأدوات الجراحية مع الايثانول 70٪ في DiH 2 O. وقعت التضحية من الفئران في نهاية التجربة عن طريق جرعة زائدة من الكيتامين IV / زيلازين.
1. إعداد الآلات والكيماويات
- إعداد محلول المخزون من 0.05 M من 5-HT حمض الهيدروكلوريك في برنامج تلفزيوني. ثم تمييع الأسهم مع PBS إلى النهائي تركيز 5-HT من 0.203 ملم.
- تمييع الدرونابينول في زيت السمسم في تركيز 20 ميكروغرام / ميكرولتر.
- قطع 20 سم طول من البولي إثيلين (PE) -50 أنابيب (ID 0.58 مم، OD 0.965 مم). في واحدة من نهاية الأنبوب، وقطع رأس شطبة باستخدام مقص، وعند نهاية مربع أخرى، اضافة الى وجود 23 ز الإبرة. ربط هذا ز 23 إبرة إلى 1 ملحقنة، وملء هذا الامر مع 0.3 مل من 50 ش / مل الهيبارين.
- قطع أربع قطع من 4-0 مضفر خيط الحرير وتعيين إلى الجانب.
- تعقيم مقص جراحي، 2 منحني ملقط غريف، و 3 المشابك الصغيرة مع 70٪ من الإيثانول في diH 2 O.
2. قسطرة الوريد فخذي
يتم تعديل بروتوكول للقسطرة من جيسبيرسن وآخرون 21
- تخدير الفئران سبراغ داولي مع داخل الصفاق (IP) الكيتامين / زيلازين (100 ملغ / كلغ: 10 مغ / كغ). قرصة إصبع القدم من الفئران ومراقبة أي حركة لتأكيد المستوى المناسب من التخدير. حلق الجانب البطني من الفخذ الأيسر، والجانب البطني من الرقبة. إذا لزم الأمر من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية المحلية، وتطبيق مرهم العين لمنع جفاف.
- الفئران آمن في موقف ضعيف على لوحة العمليات الجراحية. استخدام مقص جراحي لخفض بعيدا الجلد في الفخذ الخلفية اليسرى.
- باستخدام ملقط، والسلوك dissectio كليلةن من العضلات السطحية لفضح الوريد الفخذي. استخدام ملقط لفصل الوريد من الشريان الفخذي، ووضع 2 المواضيع حول الوريد الفخذي.
- استخدام ملقط غريف منحنية لسحب ما يصل الوريد لوقف تدفق الدم. باستخدام حقنة إبرة 22 G، ثقب الوريد الفخذي ومن ثم إدراج نهاية مشطوف من أنابيب PE-50 في الوريد.
- معرفة ما اذا كان تم إدراج أنابيب PE-50 بشكل صحيح من قبل التراجع المكبس من حقنة. ينبغي أن ينظر إلى الدم دخول أنابيب PE-50. التعادل 2 عقدة حول الوريد وPE-50 الأنابيب باستخدام الخيوط 2.
3. الناجم عن 5-HT توقف التنفس أثناء عبر IV تسريب
- وضع قياس الضغط كهرضغطية حول فأر لقياس التنفس.
- تغيير إعدادات مستوى التضخيم من مكبر للصوت مكبر للصوت الإلكترونية عن طريق برنامج على جهاز الكمبيوتر: لتضخيم (100X) ومرشح تمرير النطاق (1-10 هرتز) إشارات الجهاز التنفسي تم الحصول عليها من قياس الضغط، ومجموعة "فلتر highpas" في & #8220، AC @ 1 هرتز "و" تصفية (فلترة) أم بي "في" 10 هرتز "، وتعيين التضخيم عن طريق إدخال" 10 "من أجل" كسب الأولي "و" 100 "ل" إجمالي ربح ".
- تغيير إعدادات لمعدل أخذ العينات من خلال فتح "الإدخال التناظرية" عبر برنامج تسجيل على الكمبيوتر. لرقمنة (500 معدل أخذ العينات هرتز) باستخدام تحويل التناظرية إلى الرقمية، "عينة" في "1،000 هرتز" و "تخطي" كل نقطة تسجيل الأخرى التي "1" (المعدل الفعلي أخذ العينات 500 هرتز)، ومن ثم تسجيل إشارة باستخدام برنامج تسجيل.
- إزالة حقنة 1 مل من القسطرة وتضاف 500 ميكرولتر الزجاج الدقة حقنة مليئة 0.203 ملي من 5-HT في القسطرة.
- وضع 500 ميكرولتر الزجاج الدقة الحقنة في مضخة التسريب. ضخ 12.5 ميكروغرام / كغ لكل 350 ميكرولتر / كغ من محلول 5-HT بمعدل 63 مل / ساعة. أداء دفعات متعددة ومراقبة انقطاع النفس عند الفئران، التي ينظر إليها علىسا وقفة في التنفس (≥ 2.5 ثانية) في إشارات الجهاز التنفسي المسجلة على شاشة الحاسوب.
- قبل الشروع في عملية جراحية في العنق، ومراقبة نمط التنفس والتحقق من وجود الألم المنعكس من قرصة أخمص قدميه في الفئران. إذا تنفس غير منتظم، أو إذا كان هناك رد فعل الألم من قرصة أخمص قدميه وادارة IP الكيتامين / زيلازين (100 ملغ / كغ: 5 ملغ / كلغ) ومن ثم إعادة تأكيد المستوى المناسب من التخدير.
4. الرقبة جراحة لفضح العقداء العقد
- الفئران آمن في موقف ضعيف على لوحة العمليات الجراحية. اجراء خفض طولية خط الوسط باستخدام مقص جراحي في الرقبة.
- عن طريق تشريح حادة على platysma العضلات (باستخدام 2 المشابك الصغيرة للحفاظ على هذه العضلة واضح من موقع الجراحية)، فضح القصية اللامية الكتفية اللامية والعضلات. فصل هذه العضلات لفضح الشريان السباتي الداخلي وأحد فروعها، وهو الشريان الجناحي.
- مراقبة العصب المبهم لأنه يمتد على طول الشريان السباتي الداخلي ومن ثم على طول عشر البريد جناحية الشريان. نلاحظ كيف العصب المبهم والشريان الجناحي، جنبا إلى جنب مع العصب اللساني البلعومي (العصب القحفي التاسع) والعصب الشوكي الإكسسوارات (العصب القحفي الحادي عشر)، أدخل الخلفي الثقبة تمزقه في قاعدة الجمجمة.
- لاحظ أنه يتم عرض العقدة العقداء باعتباره تورم العصب المبهم الحق قبل أن يدخل الخلفي تمزقه الثقبة. تلاحظ أيضا أن البلعوم والعصب الحنجري فروع تؤتي ثمارها الجوانب الأمامية والخلفية، على التوالي، من العقدة العقداء. 5
- باستخدام ملقط غريف، فصل العصب المبهم من الشرايين، ووضع قطعة من الخيط حول العصب المبهم. وضع المشبك على موضوع لتطبيق التوتر طفيف على العصب المبهم، وتنظيف العقدة العقداء من أي نوع من الأنسجة الضامة لتوفير مقاومة أقل عند حقن.
- تكرار انقطاع النفس التي يسببها 5-HT-كما جاء في المادة 3 للتأكد من عدم وجود ضرر وقد تم إلى العقد عقدي.
- ملء 10 ميكرولتر الدقة gastight الزجاج حقنة اضافته مع 28 غرام نصف بوصة حقنة إبرة مصنوعة خصيصا مع 35 ° مشطوف الحافة مع 5 ميكرولتر من الدرونابينول في زيت السمسم.
- وضع المشبك الصغير على موضوع لتطبيق التوتر طفيف على العصب المبهم، وثقب العقداء أخذ العقدة الحرص على عدم ثقب من خلال ذلك. خفض الحقنة ببطء (≥ 60 ثانية) لحقن محتويات الحقنة. لاحظ أن بعض محتويات حقنة سوف يتسرب من العقدة.
- توقف التنفس أثناء الناجم عن 5-HT تكرار كما جاء في القسم 3.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
يمثل الرقم 1 عينة تسجيل التنفس في الفئران التي لديها ضخ 5-HT للحث على توقف التنفس أثناء قبل وبعد حقن العقد intranodose من الدرونابينول. 5-HT ينشط 5-HT 3 المستقبلات على العقد العقيدي التي تساهم في رد الفعل بيزولد-ياريش من بطء القلب، انخفاض ضغط الدم، وتوقف التنفس أثناء. 11،17-19 الحقن العقد Intranodose من الدرونابينول تنشيط مستقبلات CB المثبطة، أو ينظم allosterically 5-HT 3 المستقبلات التي تمنع الإثارة التي يسببها 5-HT-العصب المبهم. 16،17،20،22 قبل (الشكل 1، لوحة العليا) وبعد (الشكل 1، لوحة المتوسطة) ضخ جراحة العنق من 5-HT (الشكل 1 ، المتهم من قبل الخط الأحمر) يتسبب استجابة انقطاع التنفس ينظر إليه على أنه قلة الحركة البطن يقاس قياس الضغط كهرضغطية. بعد الحقن العقد intranodose من الدرونابينول (الشكل 1، لوحة أسفل)، لم IV 5-HT ضخ لا يثيراستجابة انقطاع التنفس. بعد حقن زيت السمسم (لا تظهر البيانات) في العقد العقيدي من الفئران السيطرة على السيارة، أثار IV 5-HT ضخ استجابة انقطاع التنفس مماثلة لخطوط الأساس (17).
الشكل 1: عينة التسجيلات من التجارب توقف التنفس أثناء الحادة 5-HT-indudced قبل وبعد 100 ميكروغرام الدرونابينول في 5 حقن النفط ميكرولتر السمسم في العقد العقيدي للأعصاب المبهم أخذت 17 التسجيلات الجهاز التنفسي قبل الجراحة (اللوحة العلوية)، بعد عملية جراحية ( لوحة المتوسطة)، وبعد حقن العقد العقداء (اللوحة السفلية). خط أحمر يدل IV 5-HT ضخ للحث على انقطاع النفس. بعد حقن زيت السمسم (لا تظهر البيانات) في العقد العقيدي من الفئران السيطرة على السيارة، أثار IV 5-HT ضخ استجابة انقطاع التنفس مماثلة لخطوط الأساس. لقد تم تعديل هذا الرقم 17 من كاليك وآخرون (17).AU = وحدات التعسفي. RESP = الجهاز التنفسي.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
الخطوات الحاسمة للحقن الناجح لنوروشيميكالس في العقد العقيدي هي: 1) تحديد وتنظيف النسيج الضام قبالة العقد عقدي. 2) تؤكد على سلامة العقد عقدي قبل الحقن. 3) وباستخدام إبرة قياس صغيرة لحقن بدقة إلى، ولكن ليس تماما من خلال ثقب، والعقد عقدي.
العصب المبهم يعصب العديد من الأجهزة في الرقبة والبطن، والمرحلات المعلومات الهامة مثل معدل ضربات القلب وضغط الدم، وتهيج القصبي الرئوي، وانتفاخ المعدة والأمعاء إلى الجهاز العصبي المركزي. في العقد العقيدي من العصب المبهم تحتوي على مجموعة متنوعة من مستقبلات للأحماض الأمينية، وأحاديات الأمين، نيوروببتيد، ونوروشيميكالس أخرى. 1 Intranodose الحقن العقد من نوروشيميكالس لتلك المستقبلات تعديل نشاط العصب المبهم تم القيام به من قبل، 16،17 وتمثل نموذج تجريبي ممتاز لتوضيح pharmacologi الطرفيةآثار كال على العصب المبهم التي يمكن تعديل أمراض مثل توقف التنفس أثناء النوم، مرض الجزر المعدي المريئي، أو السعال المزمن. 2-4
لفضح العقد العقيدي، ويجري جراحة الرقبة ويتم فصل عضلات الرقبة لفضح الشريان السباتي الداخلي. وينظر الأعصاب المبهم تعمل على طول الشريان السباتي الداخلي والشرايين جناحية. توجد أجسام الخلايا للأعصاب المبهم أحادية القطب في كثير العقد والعقد الصخري، التي ينظر إليها على أنها تورم الأعصاب المبهم قبل دخول الجمجمة في مؤخرة تمزقه foramens. 5
التلاعب في العقد العقيدي مهمة بقدر أن العقد العقيدي والأعصاب المبهم لا تلف أثناء الجراحة. تقنية جراحية غير لائق والخام يمكن أن تلحق الضرر العقد العقيدي وفروع العصب، جنبا إلى جنب مع الأوعية الدموية، والأعصاب القحفية الأخرى. في هذا البروتوكول، لتحقيق الاستقرار في العصب المبهم، ونحن نقدم توتر طفيف على vaguالصورة العصبية عن طريق خيط الحرير تعلق على مقطع الجزئي. وهذا يتيح لنا لتنظيف كاف أي النسيج الضام التي قد تجعل الأمر أكثر صعوبة لحقن في العقدة العقداء. وعلاوة على ذلك، نؤكد أن العقد العقداء سليمة قبل الشروع في الحقن عن طريق حفز توقف التنفس أثناء بنسبة 5-HT الحقن في الوريد. لحقن في العقدة العقداء، استخدمنا مقياس صغير غير مكلف (28 G، OD 362 ميكرون) الإبر تعلق على حقنة زجاجية الدقة. منذ عمق الحقن لمنع ثقب خلال العقد عقدي كان مصدر قلق، والعرف النصائح مشطوف من المحاقن مع زاوية عمودية أكثر من 35 درجة. وهذا يختلف من تقنيات Microinjection الأخرى التي تستخدم بال micropipettes الزجاج 8-10،14-16 وميزة بال micropipettes الزجاج هي قطر الحافة أصغر؛ ومع ذلك، هناك خطر كسر غيض أثناء إجراء بسبب هشاشة من الزجاج. وعلاوة على ذلك، هناك حاجة إلى معدات باهظة الثمن لسحب ممص مكروى الزجاج، والتي قد تمتلك ليس كل مختبر. الإبر مصنوعة خصيصا لها أي خطر من كسر، وعلى الرغم من أنها كانت من أكبر قطرها (362 ميكرون) 17 مقارنة بال micropipettes الزجاج (20-100 ميكرولتر)، كانت لا تزال 8،9،14-16 الإبر صغيرة بما يكفي لالعقد العقيدي الحقن. وعلاوة على ذلك، كانت هذه الإبر التي يعاد استخدامها للعديد من التجارب وكانت كبيرة نفقة أقل من المعدات المستخدمة لسحب بال micropipettes.
نظرا لحجم الإبر المخصصة المستخدمة للحقن في العقد العقيدي، من المهم لتقييم الضرر، إن وجدت، إلى العقد عقدي. طريقة واحدة لتقييم الأضرار التي لحقت العقد العقيدي هو من خلال تجهيز النسيجي والمجهري من العقد عقدي. 6-9،13،15 طريقة ثانية، والذي يستخدم في هذا البروتوكول، لتقييم وظيفة ناقل متعلق بالاعصاب هو المقارنة بين نتائج الكهربية أو السلوكية بين وقد ثبت مجموعات حقن التجريبية والضابطة. الحقن 14-17 الدرونابينول لتخفيف 5-HT-الناجم عن توقف التنفس أثناء مقارنة جontrol الحقن، 17 مما يدل على أنه إذا كان هناك بعض الضرر من أكبر الإبر قطرها العرف، كان لا يزال هناك ما يكفي من خلايا العقد العصبية العقداء الوظيفية التي تم مستعمل من قبل الدرونابينول. وبالمثل، قياس مدى انتشار للميكرولتر 5 من الدرونابينول في زيت ليس من الضروري منذ كانت النتائج الفنية (أي انقطاع النفس) ومقياس مهم من هذا البروتوكول. وقد تم اختيار حجم المستخدمة في هذا البروتوكول لضمان نشر واسعة من الحل حقنها في العقد عقدي. في بروتوكولات أخرى مماثلة، حقن كانت أحجام لا تختلف بشكل مفرط وتراوحت 0،1-3 ميكرولتر. 8،9،14-16 كان مدى انتشار الدرونابينول من النفط يكفي لتخفيف 5-HT-الناجم عن توقف التنفس أثناء 17
تعديلات على هذا البروتوكول ممكنة. أولا، إذا منع الأضرار التي لحقت العقد العقيدي هو ضرورة، والإبر مقياس أصغر (أصغر 33 G) يمكن استخدامها في هذا البروتوكول. ويعتبر العيب إلى استخدام غاو أصغرالإبر جنرال الكتريك هي: 1) أنها لا يمكن كسرها بسهولة أو عازمة. 2) أنها القطر الداخلي صغير جدا للسماح لحقن سوائل لزجة مثل زيت السمسم. وعلاوة على ذلك، إذا حقن الموقع العمق مهم، والمزيد من الإبر زاوية عمودية (تصل إلى 45 درجة) يمكن شراؤها. ومع ذلك، فإن زاوية عمودية المزيد من جعل الأمر أكثر صعوبة لثقب العقد عقدي. خلال حقن العقد العقيدي، وتعديل التوتر من العصب المبهم يمكن تغيير عن طريق وضع المشابك الصغيرة من مختلف الأحجام. إذا تلف الأعصاب المبهم / العقد عقدي يحتاج إلى منعها، ثم استخدام المشابك الصغيرة أصغر مثالية. وأخيرا، حقن السوائل التي تحتوي على نوروشيميكالس يمكن تعديلها عن طريق حجم وتركيز السائل المحقون. في هذا البروتوكول، وكان 5 ميكرولتر أكثر من كافية لتشبع العقد عقدي.
وجود قيود الرئيسي من هذا البروتوكول هو إمكانية ثقب خلال العقد عقدي. إذا حدث هذا، ثم إعادة تأكيد على سلامة العقد SHO العقيديULD يتعين القيام به. واذا تأكد من سلامة العقد العقيدي، ثم يمكن تكرار الحقن العقد عقدي. ومع ذلك، إذا كان هناك شك في سلامة العقد العقيدي، ينبغي أن يستكمل ثم تجربة مع فأر جديد (17).
تنوع المستقبلات على العقد عقدي يمكن أن تزيد أو تثبط نشاط العصب وارد. وتشير أدلة متزايدة على أن وارد أبدا النشاط يلعب دورا مهما في الأمراض البشرية. ويوفر 2-4،23 هذا البروتوكول وسيلة غير مكلفة من الإدارة المحلية من نوروشيميكالس إلى العقد عقدي لدراسة تأثيرها على النشاط العصبي وارد.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
وأيد هذه الدراسة من قبل المعاهد الوطنية للصحة (المنحة 1UM1HL112856).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 5-HT HCl | MP Biomedicals | 215376591 | 12.5 µg/kg per 350 µl/kg |
| Dronabinol (Marinol) 10 mg Capsules (80 µg/µl) | AbbVie | NDC 0051-0023-21 | Dilute with sesame oil to 20 µg/µl |
| Sesame Oil | Sigma-Aldrich | S3547 | |
| Intramedic Polyethylene-50 | BD | 427411 | Ordered from VWR (Cat. # 63019-047) |
| Graefe Forceps | Roboz | RS-5138 | Two are needed |
| Johns Hopkins Bulldog Clamp | Roboz | RS-7441 | Three are needed |
| Piezoelectric Strain Gauge | Ambu | 813255-100 | |
| Data Acquisition USB Subsystems | DataWave Technologies | ||
| Sciworks Experimenter Software | |||
| CyberAmp | Axon Instruments | ||
| Syringe, 500 µl, Model 1750 TLL | Hamilton Company | 81220 | |
| Syringe, 10 µl, Model 1801 RN | 7659-01 | ||
| Needle, 28 G, Small Hub RN | 7803-02 | Point Style 4, Angle 35, Length 0.5 in |
References
- Zhuo, H., Ichikawa, H., Helke, C. J. Neurochemistry of the nodose ganglion. Prog. Neurobiol. 52 (2), 79-107 (1997).
- Carley, D. W., Radulovacki, M. Pharmacology of vagal afferent influences on disordered breathing during sleep. Respir. Physiol. Neurobiol. 164 (1-2), 197-203 (2008).
- Kuo, P., Holloway, R. H. Beyond acid suppression: new pharmacologic approaches for treatment of GERD. Curr. Gastroenterol. Rep. 12 (3), 175-180 (2010).
- Maher, S. A., Dubuis, E. D., Belvisi, M. G. G-protein coupled receptors regulating cough. Curr. Opin. Pharmacol. 11 (3), 248-253 (2011).
- Greene, E. C. Anatomy of the rat. , Hafner. (1963).
- Li, Y., Wu, X., Zhou, S., Owyang, C. Low-affinity CCK-A receptors are coexpressed with leptin receptors in rat nodose ganglia: implications for leptin as a regulator of short-term satiety. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 300 (2), 217-227 (1152).
- Powley, T. L., et al. Vagal afferent innervation of the lower esophageal sphincter. Auton. Neurosci. 177 (2), 129-142 (2013).
- Neuhuber, W. L. Sensory vagal innervation of the rat esophagus and cardia: a light and electron microscopic anterograde tracing study. J. Auton. Nerv. Syst. 20, 243-255 (1987).
- Rogers, R. C., Nasse, J. S., Hermann, G. E. Live-cell imaging methods for the study of vagal afferents within the nucleus of the solitary tract. J. Neurosci. Methods. 150 (1), 47-58 (2006).
- Wan, S., et al. Presynaptic melanocortin-4 receptors on vagal afferent fibers modulate the excitability of rat nucleus tractus solitarius neurons. J. Neurosci. 28 (19), 4957-4966 (2008).
- Verberne, A. J., Lewis, S. J., Jarrott, B., Louis, W. J. Bezold-Jarisch reflex is inhibited by excitotoxin-induced destruction of vagal primary afferent neurons. Eur. J. Pharmacol. 139 (3), 365-367 (1987).
- Lewis, S. J., et al. Excitotoxin-induced degeneration of rat vagal afferent neurons. Neuroscience. 34 (2), 331-339 (1990).
- Wallick, D. W., Dunlap, M. E., Stuesse, S. S., Thames, M. D. Denervation of vagal cardiopulmonary receptors by injection of kainic acid into the nodose ganglia in dogs. Auton. Neurosci. 102 (1-2), 85-89 (2002).
- Muroi, Y., et al. Selective inhibition of vagal afferent nerve pathways regulating cough using Nav 1.7 shRNA silencing in guinea pig nodose ganglia. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 304 (11), 1017-1023 (2011).
- Kollarik, M., et al. Transgene expression and effective gene silencing in vagal afferent neurons in vivo using recombinant adeno-associated virus vectors. J. Physiol. 588 (21), 4303-4315 (2010).
- Zhang, Z., Zhang, C., Zhou, M., Xu, F. Activation of opioid mu-receptors, but not delta- or kappa-receptors, switches pulmonary C-fiber-mediated rapid shallow breathing into an apnea in anesthetized rats). Respir. Physiol. Neurobiol. 183 (3), 211-217 (2012).
- Calik, M. W., Radulovacki, M., Carley, D. W. Intranodose ganglion injections of dronabinol attenuate serotonin-induced apnea in Sprague-Dawley rat. Respir. Physiol. Neurobiol. 190, 20-24 (2014).
- Yoshioka, M., Goda, Y., Togashi, H., Matsumoto, M., Saito, H. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine-induced apnea in the rat. J. Pharmacol. Exp. Ther. 260 (2), 917-924 (1992).
- Kopczynska, B., Szereda-Przestaszewska, M. 5HT2 and 5HT3 receptors' contribution to modeling of post-serotonin respiratory pattern in cats. Life Sci. 75 (19), 2281-2290 (2004).
- Fan, P. Cannabinoid agonists inhibit the activation of 5-HT3 receptors in rat nodose ganglion neurons. J. Neurophysiol. 73 (2), 907-910 (1995).
- Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J. Vis. Exp. (59), (2012).
- Barann, M., et al. Direct inhibition by cannabinoids of human 5-HT3A receptors: probable involvement of an allosteric modulatory site. Br. J. Pharmacol. 137 (5), 589-596 (2002).
- Bonaz, B., Picq, C., Sinniger, V., Mayol, J. F., Clarencon, D. Vagus nerve stimulation: from epilepsy to the cholinergic anti-inflammatory pathway. Neurogastroenterol. Motil. 25 (3), 208-221 (2013).
