Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Telafi Akciğer Büyüme Fare Pnömonektomi Modeli

Published: December 17, 2014 doi: 10.3791/52294

Introduction

akciğerin başlıca fonksiyonu, bir organizmaya ve atmosfer arasındaki oksijen ve karbon dioksit değişimi sağlamaktır. İnsanlarda, doğumsal ve edinsel koşulları bir dizi bozulmuş akciğer fonksiyonu ile sonuçlanan azalmış akciğer yüzey alanına yol açar. Yani, akciğer - örneğin inhale kortikosteroidler, bronkodilatör, ek oksijen, ve kronik mekanik ventilasyon gibi tedavilerin bir ev sahibi engelli akciğer fonksiyonu 1-3 sonuçlarını hafifletmek için kullanılmasına rağmen, bu koşullar için ideal bir tedavi fonksiyonel akciğer dokusunun yeniden büyümesini teşvik ediyorum yenilenmesi.

Memeli doku rejenerasyonu iyi belgelenmiştir. Afrika Dikenli Fare skar oluşumu 4 olmaksızın cildin geniş alanlar yeniden yapabilirsiniz. İnsanlarda distal falanks yaralanma veya ampütasyon 5-7 aşağıdaki yeniden yapabilirsiniz. Aşağıdaki pnömonektomi (PNX), telafi akciğer büyümesi yapmak, 9 fare, sıçan 8 oluşurgs 10, ve 11 insanlarda. Tanım olarak, telafi akciğer büyümesi ilişkili mikrosirkülasyon 12 genişlemesi ile bu genişlemiş hava sahasındaki mevcut hava sahasındaki değil sadece genişleme, ancak yeniden bölümlenmenin içerir. Gen ifadesi analizi bu modeli akciğer gelişimi 13 sinyalizasyon olaylar birçok özetlediği olduğunu göstermiştir. Dört hafta, fare PNX sonra, alveol yüzey alanının ve sahte işlemden geçirilmiş hayvan 14 edilene eşdeğerdir. Bu yazıda, fare pNX ve sahte PNX prosedürlerini açıklar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

NOT: Hayvan kullanım bildirimi: Bu çalışmada tüm işlemler onay ve Cincinnati Çocuk Hastanesi Kurumsal Hayvan Kullanımı ve Bakımı Komitesi (IACUC) yönergeleri takip gerçekleştirilmiştir. Sekiz hafta yaşında C57BL / 6J erkek fareleri, Jackson Laboratories'den (Bar Harbor, ME) elde edilir ve kullanımdan önce bir hafta boyunca ortama alışmaları sağlandı. Cerrahi kadar, hayvanlar patojen madde içermeyen bir yere yerleştirilmesi ve otoklavlanmıştır yemi ve süzüldü suyu ad libdium sağlandı. Her fare kafesi özel hava ve su ile sağlanan ve odalar 12 saat gece-gündüz döngüsü tutuldu. Cerrahi işlemden sonra, fareler, süzüldü üstleri ile kafeslerde muhafaza otoklavlanmış yemi farelere istenildiği kadar mesafede, ve bir su şişesinden su süzüldü sağlandı.

Araçların 1. Hazırlık

  1. Ataç ve işaretçilerine kullanılarak 6 cilt Ekartörleri olun. Büküm kağıt pim Shanks üzerine ataç doğruldu, lbir ucunda bir 5 cm'lik tek bir çelik tel eave ve telin ucunda tek bir 0.5 cm'lik bir "U" şekilli bir kancayı olun.
  2. Plastik wrap kullanarak bazı 15 x 15 cm kare cerrahi perdeler olun. Fare başına bir pansuman hazırlayın. Her şal arasında bir kağıt kule koyun.
  3. 12 x 12 inç mantar fayans, gazlı bez ve pamuklu çubuklar bir yığını ile birlikte tüm cerrahi aletler sterilize.

2. Fare Hazırlama

  1. % 2 izofluran ile anestezi neden olur. Hayvan tartılır.
  2. Özel cerrahi hazırlık alanında elektrik tıraş sol toraks ve boyun alanı tıraş.
  3. Farenin gözlerine yapay gözyaşı merhemi bir damla uygulayın.
  4. Klorheksidin ve izopropil alkol ile boyun ve sol toraks arındırın. Iki kez daha tekrarlayın.

3. Fare Oro-trakeal entübasyon ve Mekanik Ventilasyon

  1. Steril olmayan bir cerrahi teknisyen yerde önceden ısıtılmış cerrahi alanında fare sırtüstü var.
  2. Pençe tutam yanıt eksikliği belgeleyerek anestezi derinliği onaylayın.
  3. Cerrahi kıyafetleri, maske, şapka ve ellerini yıkama ve donning sonra, steril cerrahi eldiven yok.
  4. Dökümlü ve aseptik teknik kullanılarak sonra, gırtlak maruz ön orta boyun üzerinde 1 cm'lik dikey kesi yapmak. Hafif kavisli, tırtıklı 10 cm forseps ile kayış kasları geri çekin ve düz makas ucu ile kayış kasları yayarak gırtlak ve trakea maruz.
  5. Oral orta trakea (Şekil 1A) içine 22 G künt uçlu angiocatheter yerleştirin ve görsel yerleştirme (Şekil 1B) onaylayın. Anestezi koruyun ve kemirgen ventilatör ile (inme başına 225 ul; min başına 200 Stokes)% 1-3 izofluran kullanarak havalandırın. 15 cm H2O bir basınç sınırını ayrılmadan

4. Fare Pnömonektomi

  1. Farenin arka bakacak sağ lateral dekübit pozisyonunda fare LayOperatör (sol taraf yukarı). Steril örtü olarak kendi kendine kapanan plastik wrap kullanın. Drape ile kesme, 4. ve 5. interkostal aralıktan kaburga 2 cm uzunluğunda kesilmiş paralel hale getirmek için künt uçlu kavisli makas kullanın. Kör uç kavisli makas yerleştirin ve alttaki kaburga ve interkostal kasların uzak cildi teşrih.
  2. Bir kare 1.5 x 1.5 cm cerrahi pencere (Şekil 2A) maruz dört toplayıcıları ile cildi geri çekin. Mantar kuruluna Ekartörleri sabitleyin.
  3. Kavisli bir forseps kullanarak kaburga aşağı incelemek ve göğüs boşluğu girmek için kavisli bir forseps bir ucunu kullanın.
  4. Künt ucu mikro-makas kullanarak, göğüs boşluğu girmek için alt bıçak kullanın. Ters yönde kaburga ve tekrarı arasında 0,5 cm'lik kesi yapmak.
  5. Kalan iki Ekartörleri kullanarak, ön-arka eksen ve mantar pano (Şekil 2B) Retraktörler güvenli olarak toraks açın.
  6. <Sol pulmoner arter ve bronş (Şekil 3A, B) maruz kadar sol elinde kavisli künt uçlu forseps kullanarak li> torakotomi ile yanal ve inferior sol akciğer üst kısmını sol akciğer kavramak ve yerinden.
  7. Avuç aplikatör ve avuç (Şekil 3C) uzak işaret kavisli ucu gövdesi ile sağ elinde yüklü titanyum vasküler mikroklip aplikatör Holding, sol arka yönü eğrilik boyunca toraks içine aplikatör ucu kaydırın Akciğer ve bronşları sol ve pulmoner arter (Şekil 3D) klip.
  8. Aplikatör çıkarın ama geri sol akciğer tutun. Sağ eli ile künt ucu mikro-makas kavrayın ve klibe bronşları ve pulmoner arter distalinde kesilir ve sol akciğer (Şekil 3E) çıkarın.
  9. Kaburga Ekartörleri çıkarın.
  10. İncisi aşağı cilt 1 cm kadar çimdik kavisli künt forseps kullanındeğil, diyafram seviyesinden ve deri yoluyla ve sol göğüs boşluğunda (Şekil 4A, B) 24 G angiocatheter yerleştirin.
  11. Göğüs boşluğu kapatmak için 4 th yaklaşık iki kesintiye sütür ve 5 inci kaburga yerleştirmek için 5-0 prolen sütür kullanın.
  12. Cilt Ekartörleri çıkarın. Kesi uzunluğu boyunca cildi yaklaştığı ve cilt kapalı tutkal forseps iki takım kullanın.
  13. Angiocatheter 3 ml'lik luer-lock şırınga bağlayın ve nazik vakum uygulayarak ve angiocatheter çekerek artık havayı çıkartın.
  14. Boyun kesi daha önce olduğu gibi forseps iki takım kullanılarak kapalı Tutkal.

5. Fare Sham Pnömonektomi

  1. "Fare Pnömonektomi" protokolde belirtildiği gibi sol akciğer Açığa. Sol göğüs boşluğuna hava girmesini sağlamak için kavisli künt forseps ile göğüs kafesini kaldırın (Şekil 5A, B).
  2. Sol tho içine 24 G angiocatheter yerleştirinSol akciğerin kesmemeye özen yukarıdaki gibi Toraks boşluğu.
  3. 5-0 prolen sütür kullanarak ve akciğer (Şekil 5C) delinme dikkatli olmak, 3. / 4 th içine dikiş materyali iki uzunlukları ve 5. / 6. kaburga aralar (Şekil 5D) yerleştirin. Sol akciğer herniasyonu risklerini azaltmak için ipe önce dikiş materyali her iki uzunlukları yerleştirin. İki kesintiye dikiş (Şekil 5E) yapmak için sütür materyali bağlayın.
  4. Torasik kesi üzerindeki deriyi Tutkal, angiocatheter ile artık havayı kaldırmak ve yukarıdaki gibi boyun kesi tutkal.

6. Resüsitasyon, Analjezi ve Kurtarma

  1. Izofluran kapatın ve buprenorfın 0.1 mg / kg yönetmek ve serum fizyolojik subkutan 0.5 ml.
  2. Spontan solunum frekanslarında devam zaman, endotrakeal tüp kaldırmak.
  3. Tekrar ayaktan kadar fareyi gözlemleyin. Tipik resum YürüyüşEndotrakeal tüp çıkarılmasından sonra birkaç dakika es.
  4. / N O kurtarmak için bir 27 ° C inkübatör (nemlendirilmiş,% 25 oksijen) fare yerleştirin.
    NOT: Biz ameliyat sonrası ilk 24 saat için kafes katta su ile ıslatılmış yem birkaç topakları yerleştirin.
  5. Ameliyat sonrası, günde iki kez, üç gün boyunca intraperitonal enjeksiyon ile buprenorfin, 0.1 mg / kg uygulayın. Hayvanları tutarken cerrahi siteyi açmak için özen gösterin.

7. Fare İzleme

  1. Ameliyat sonrası 1, 3, 5 ve 7 gün sonra fareler tartılır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

. Hem PNX ve sahte pnömonektomi için% 100 - pNX ve Sham fare ağırlıkları bir arsa Şekil 6'da verilmiştir Bizim ellerde, hayatta sürekli 95. Sağ akciğer-yetişir yeniden bu model ve beklenen zaman ders, biz Gibney ark. 15 ve Wang ve ark yazmaları okuyucuyu bakın nasıl açıklamaları için. 14

Birkaç ortak tuzaklar başarıyla fare PNX ve fare sahte pnömonektomi prosedürleri gerçekleştirmek için kaçınılmalıdır.

Endotrakeal Entübasyon: fare PNX tekniği öğrenme Birçok araştırmacı entübasyonu zorluk. Fare gırtlak ön ve endotrakeal kateter vokal kord geçti gerekir olarak kateter yemek borusuna geçmesi için, bu kolaydır. Şekil 1A'da gösterildiği gibi, küt uçlu bir kateter Curva aşağıdaki mümkün anterior olarak açılı olmalıdırsonra orta hat boyunca dilin Ture ve hafifçe basınç ile trakea içine geçti. Orta trakeal kateter pozisyonu görsel (Şekil 1B) teyit edilmelidir. Endotrakeal yerleştirme hafifçe yan kateter yan hareketli ve trakea hareketi için gözlemleyerek teyit edilebilir. Uygun konumlandırma bilateral göğüs artış gözlenmesi ile teyit edilir. Alternatif bir teknik aşağıda anlatılmıştır.

Cerrahi Alan Oluşturma: ikinci ortak hatadır yeterli torakotomi penceresi oluşturmak için başarısızlıktır. Şekil 2A ve 2B gösterildiği gibi, torakotomi penceresi sol pulmoner arter yeterli görselleştirme ve sol ana kök bronşunu izin için yeterince büyük ve posterior olmalıdır. deneyimsiz operatör yaygın kolayca sol akciğeri geri çekin ve sol hilusu erişmek için onun torakotomi, çok küçük, çok ön, ya da çok kalitesiz yapacaktır.

Vasküler Klip Applicatitarih: Doğru damar klibi uygulamak için başarısızlık eksanginasyonunun neden olur. Hilusta Uygun kimlik kritik (Şekil 3A) 'dir. Kavisli uygulama ucunun gövdesi içinde klip aplikatör tutucusundan ayrılmış, Şekil 3B ve 3C'de gösterildiği gibi,, klipin uç klip uygulayıcının ucu ve klibin gövde ile aynı hizada olduğu . Aplikatör kolunun Nazik kapatma klibi kapanacak. Klip yönde herhangi bir değişiklik yetersiz klip kapatılmasına neden olabilir; Bir klip aplikatörden yerinden olur bu nedenle, yeni bir klip yüklü olmalıdır. Klibe hilum proksimal gözyaşı değil şekilde Aynı şekilde, sol akciğerde çekiş nazik olmalıdır. uygulayıcının kavisli ucu sol hilusu (Şekil 3D) bağlanması için sol akciğer üstün yönü eğrisini takip etmelidir. Yaygın bir hata özofagus bağ olduğunu. Şekil 3E'de gösterildiği gibi,

Sham pNX sırasında Sol Akciğer Yaralanması kaçınmak: Deneyimli ve deneyimsiz operatörlerin Muhtemelen en yaygın tuzak sahte pNX sırasında akciğer hasarı bırakılır. Şekil 5'te gösterildiği gibi, operatör dikiş iğnesi ile akciğer delinme veya fıtıklaşmış akciğer sıkışmasını sağlamak için torakotomi kapatılması sırasında dikkatli olmak gerekir. Bu toplayıcı, hava tahliyesi için 24 G angiocatheter ve dikiş (Şekil 5A-D) yerleştirirken kaburga kaldırmak için önemlidir. Torakotomi kapatılması sırasında, sattlerinde önce dikiş ipliklerini her iki yerleştirerek akciğer yakalanması (Şekil 5E) riskini en aza indirir. Yaygın dört sahte prosedürleri yapacak Laboratuvarımız ardından dört PNX biz sol akciğer zarar gereken bir PNX fare içine sahte fare dönüştürebilirsiniz böylece. Bu tüm grupların kalan sol göğüs hava tahliye yerine unutulmamalıdır. Bizim bilgimize göre, hiçbir veri ve artık hava tahliye olmadan pNX karşılaştıran var.

Uygulama ve deneyimi ile, hem PNX ve sahte işlemleri tek oturumda yapılacak iki düzine fare ameliyatları kadar izin veren 10 dakika içinde sağlanmalıdır.

Şekil 1,
1. Fare Endotrakeal entübasyonunu Şekil. (A) Oral-trakeal kateter orta hat ve öne doğru gırtlak gelişmiş ve açılı olduğu gibi dilini bastırmak için kullanılan olmalıdır. (B) orta trakea kateterin doğru konumlandırma görsel teyit edilmelidir."Target =" _ blank "> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız.

Şekil 2,
2. Fare Torakotomi Şekil. Altta yatan göğüs kafesinden insizyon ve deri yayımlanmasından sonra (A), 1.5 x 1.5 cm cerrahi pencere 4. ve 5 torakotomi oluşturulduktan sonra 4. ve 5. interkostal alanı merkezli. (B) oluşturulur inci kaburga interkostal boşluk, Retraktörler akciğer görselleştirmek için kullanılır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,

Şekil 3. Pnömonektomi. (A) Sol l ung sol hilusu (beyaz ok) ortaya çıkarmak için torakotomi ile kavisli bir forseps ile kavradı ve kaldırdı. (B) vasküler klip damar klip uygulayıcının ve kavisli aplikatör ucu içinde ucu ile aynı hizada oturmak gerekir. (C) aplikatör kavisli ucu uzak palmiye açılı sağ elin avuç boyunca oturan aplikatör gövdesi ile parmak inci sağ başparmak ve 4 ile tutulmalıdır. (D), sol üst lob eğrisi, damar klip ardından Sol hilusta uygulanır. (E) Sol pNX aşağıdaki görüldüğü gibi, (beyaz oklar arasında) özefagus. (damar klip beyaz kutu ile belirtilen) sol hilusta için posterior bulunan büyük halini görmek için buraya tıklayınız Bu rakam.

es / ftp_upload / 52294 / 52294fig4highres.jpg "/>
Hava Tahliye için angiocatheter Şekil 4. Yerleştirme. (A) anjiyokateter ucu cildi deler. (B) anjiyokateter göğüs boşluğuna diyaframın üstüne eklenir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 5,
5. Fare Sham pnömonektomiyi Şekil. Sahte prosedürü sırasında (A), yerleştirme retraktörü önce kaburga kenarına kaldırma akciğer hasarı riskini en aza indirir. (B) onlar pNX için olduğu gibi retraktörler yerinde bırakılmalıdır. (C) göğüs kafesinin alt kenarı 24 G angiocatheter yerleştirerek aşırı toraks kapatılması ve ardından artık hava aspire kullanıldığında yukarı kaldırılması gerekircilt ing. (D) göğüs kafesi de dikiş yerleştirme için kaldırılmalıdır. (E) ipe önce torakotomi sitesi üzerinden sütür iki ipliklerini yerleştirerek, akciğer sıkışması riski minimize edilmiştir. tıklayınız daha büyük bir versiyonunu görmek için Bu rakam.

Şekil 6,
Şekil 6. Beklenen Kilo Kaybı. Grup başına beş fare kullanarak, biz 24 saat cerrahi sonrası, PNX fareler 1.5 g (% 7.2) ortalama kaybedersiniz, ve sahte fareler 1.1 g (% 5.2) ortalama kaybedersiniz gösterdi. Her iki grup postoperatif 3. günde preoperatif kilo kazanmak.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Biz bugüne kadar bildirilen fare PNX ve fare sahte PNX prosedürleri en detaylı açıklamasını sağladı. Biz prosedürü öğrenme araştırmacılar sık ​​karşılaştıkları ortak tuzaklar birkaç okuyucu farkında yaptık, ve biz bu tuzaklar karşısında azaltmak için laboratuvar tarafından geliştirilen çeşitli teknikler belirttiğimiz. Bu modeli kullanan diğer laboratuvarlar diğer bir teknik değişiklikler geliştirilen veya farklı enstrümanlar kullanmak olabilir. Teknikleri farklılıkları değerlendirirken, bireysel araştırmacılar bu farklılıklar önemli ölçüde deney sonuçlarını etkileyebilecek olup olmadığını karar vermeniz gerekir.

telafi akciğer büyüme fare PNX modeli akciğer onarım ve yenilenme diğer hayvan modelleri üzerinde birçok avantajı vardır. transgenik fareler kullanılabilir yapmak soy izleme çok sayıda, aşırı ifadesi, gen ve en laboratuarlar 16 elde hedefli gen silme deneylerinin genel. İkincisi, moralveoler yeniden büyümesini ölçülmesi için phometric teknikleri 17 çok iyi tanımlanmıştır. Üçüncüsü, bu modeli benimseyen maliyeti ılımlı. Bu işlemler gerektiren tek özel ekipman vasküler klip uygulamaları ve künt ucu Cohan-Vannas yaylı makas olduğunu. Tüm diğer ekipmanlar yaygın bir fare cerrahi çekirdek tesisi ile bir fare cerrahi kit veya kullanılabilir sağlanacaktır. Dördüncü, tecrübesi ile, fare PNX ve sahte PNX prosedürleri nispeten hızlı birçok ameliyatları için izin aynı gün yapılacak. Son olarak, diğer hayvan modellerinde, mütevazı konut ihtiyaçlarına göre fare küçük boyutlu, ve onlar da yetiştirilmiş olabilir hangi ile kolaylığı diğer hayvan modellerinde daha korumak için fare modeli kolaylaştırır.

Akciğer rejenerasyon diğer modellere göre fare PNX modeline birkaç dezavantajları da vardır. Fare telafi akciğer büyüme streç 18 üzerine büyük ölçüde bağımlı iken, telafi akciğer büyümekyüksek memelilerde inci streç ve artmış pulmoner kan akımı 19 hem bağlıdır. Insan akciğer rejenerasyon bu yüksek memelilerin rejeneratif mekanizmalarına olasılıkla daha benzer olduğundan, araştırmacı insan doğrudan fare bulguları extrapolating dikkatli olmalıdır. Fare solunum mekaniği insan solunum mekaniği farklıdır. İnsanlarda, son nefes verme herhangi bir hava akışı var olduğu bir ara ile eşlik eder. İnsanlarda son ekshalasyonun anda, akciğer işe düşük uyum göğüs kafesinin radyal traksiyon tarafından yapılmaktadır. Fare solunum döngüsü nedeniyle eksik ekzalasyona hava hapsi küçük bir miktarda sonuçlanan bu ekspiratuar duraklama yoksun. Fare çok daha yüksek uyum göğüs kafesi sahip olduğundan, akciğer işe 20 tutar bu hava hapsi olduğunu. fare modeli üçüncü dezavantajı anatomisidir. Fare tek bir sol akciğer lobu olduğundan diğer olduğu gibi, kısmi sol PNX mümkün değildirtürler.

Birkaç ortak tuzaklar başarıyla fare pNX ve sahte işlemleri gerçekleştirmek için pek çok kritik kavşak noktası kaçınılmalıdır. Bu kritik kavşak noktası endotrakeal entübasyon, cerrahi alan oluşturulması, damar klip uygulaması, ve sahte ameliyat sırasında sol akciğer hasarının önlenmesidir.

Bu cerrahi prosedürleri hayatta başarısız herhangi farelerin nekropsi gelecekte cerrahi tekniklerin geliştirilmesi esastır. Aşağıda, biz birkaç ortak zorlukları gidermek ve başarının daha büyük bir derecesi verebilir alternatif teknikler sağlar.

Başarısızlık Başarıyla Trakea Cannulate için: Diğer laboratuvarlar, doğrudan görüntüleme 21 ihtiyacını ortadan kaldırır oro-entübasyon için süspansiyon ve trans-trakeal aydınlatma kullanmaktadır.

Zorluk hilusta görselleştirme: Büyük, düzgün yerleştirilmiş torakotomi pencere oluşturma gerekli iSol hilusu görselleştirmek için n emri. Prosedür görselleştirme yetersiz veya vasküler klip aplikatörlerin yerleştirilmesi için yeterli alan var sırasında ise, torakotomi uzatılması gerektiğini ve retraktörler yeniden konumlandırılmış. Bu işlem sırasında kan hiçbir havuzu olmamalıdır. Varsa, araştırmacı o sol akciğerde çok fazla gerginlik yerleştirerek ve sol pulmoner arter yırtılması olup olmadığını belirlemek gerekir.

Sol Akciğer Temizleme sonra kanama: Bu işlem sırasında küçük kanama olmamalıdır. Bir yanlış yüklenmiş veya uygulanan damar klip kanama en sık nedenidir ve sol pulmoner arter kanama ile bir fare ötenazi edilmelidir. Kanama, bu tip oluşursa, damar klibin ve firmanın uygulama uygun yükleme, uygulama sırasında bile basınç tekrar prosedürü başlamadan önce teyit edilmelidir. Aynı şekilde, sol göğüste kan bulgusu ile postoperatif ölümYanlış damar klip uygulaması nedeniyle büyük olasılıkla. Bizim damar klip tekniği bir alternatif ipek sütür ile bağ olduğunu.

Sham Cerrahisi Sırasında Sol Akciğer Hasarı: Birçok yönden, sahte prosedürü PNX prosedürü daha cerrahi beceri yüksek derecede gerektirir. Sol akciğer cerrahi bölgeye altında 24 G angiocatheter yerleştirilmesi sırasında, ya da torakotomi kapatılması sırasında, torakotomi sırasında yaralanan edilebilir. Deneysel ihtiyacına bağlı olarak, sahte ameliyat geçiren farelerin PNX dönüştürülebilir. Sol akciğer hasarı diğer potansiyel nedeni torakotomi sitesi kapatılması sırasında fıtıklaşmış sol akciğerin hapsetme olduğunu. Sol akciğer hasarı ile sahte fareler ötenazi ya da cerrahi prosedür pNX değişti sahip olmalıdır ya.

Kurtarma sonra Solunum Sıkıntısı: derlenme sonra solunum sıkıntısı nedeniyle travmatik entübasyon, yetersiz ağrı kontrolü, ya da unreco için glottisin şişme gelebilirgnized akciğer hasarı. Genel olarak, ilave ağrı kesici ilaç olarak verilmesi ile giderilebilir sıkıntı sürece, hayvanlar öldürüldü olmalıdır ve tespit neden olur. Çoklu entübasyon girişimleri glottik veya subglottik ilham ile sonuçtaki zorluk ile şişme neden olabilir. Glottis hipofarenks ayrılır sonra nekropsi üzerine patent glottik girişi eksikliği anlaşılacaktır. Endotrakeal kanül için alternatif yaklaşımlar yukarıda tarif edilmiştir. Yetersiz ağrı kontrolü ağrı kesici ilave dozları ile ele alınabilir. Yukarıda belirtildiği gibi, sahte bir cerrahi prosedür öğrenirken, istenmeyen sol akciğer hasarı yaygındır ve tanınmayan eğer, solunum sıkıntısı ve deneysel sonuçların değişime yol açabilir.

Aşırı Kilo Kaybı ve Dehidrasyon: ameliyat sonrası aşırı kilo kaybı veya dehidratasyon deneyim Fareler bir bağlanan yemek borusu, yetersiz ağrı kontrolü, ya da beslemek ya da içmek için bir yetersizlik olabilir. yemek borusu j yatıyorust sol hilusta posterior ve yemek borusu ligasyonu herhangi susuz fare şüphe edilmelidir. Yetersiz ağrı kontrolü piloerection, artan saldırganlık, ya da azaltılmış ambulasyon ile farelerde şüphe edilmelidir. torakotomi Ameliyat sonrası ilk gün kafes çatı askıya yiyecek ve su ulaşmasını fareler önleyebilirsiniz. Yemek ve anestezi kurtarma sonra içmem Fareler sadece daha zayıf ve susuz olacak. Biz ameliyat sonrası 24 saat kafesin zeminine nemlendirilmiş gıda yerleştirerek öneririz.

Sonuç olarak, telafi akciğer büyüme fare pnömonektomi modeli akciğer rejenerasyon altında yatan mekanizmaların tanıtılması için değerli bir modeldir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
6 inch Vascular clip applicator Teleflex Medical (WECK) 137062
Horizon small titanium red clip Teleflex Medical (WECK) 1201
Narrow pattern 12 cm curved forceps Fine Science Tools 11003-12
Curved serrated 10 cm Graefe forceps Fine Science Tools 11052-10
Castroviejo needle holder Fine Science Tools 12565-14
Straight 9 cm Strabismus scissors (blunt tip) Fine Science Tools 14075-09
Straight 8.5 cm hardened fine scissors Fine Science Tools 14090-09
Straight, blunt tip Cohan-Vannas spring scissors Fine Science Tools 15000-12
Skin glue Gluture 32046
22 G Angiocatheter
24 G Angiocatheter
3 ml Luer lock syringe
4 Short retractors
2 Long retractors
5-0 Prolene on curved cutting needle Ethicon 8698G
0.5 ml Syringe on 27 G needle
Normal saline
Buprenorphine
Press-n-Seal wrap Glad Products Company
12 x 12 inch Cork board stack Office Depot
70% Ethanol
Betadine
Mouse ventilator Hugo Sachs Elektronnik Minivent Type 845
Isoflurane vaporizer OHMEDA Excel 210 SE
Artificial tear ointment Puralube NDC: 17033-211-38

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Strueby, L., Thebaud, B. Advances in bronchopulmonary dysplasia. Expert review of respiratory medicine. , (2014).
  2. Donn, S. M., Sinha, S. K. Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia. Seminars in fetal & neonatal medicine. 14, 332 (2009).
  3. Molen, T., Miravitlles, M., Kocks, J. W. COPD management: role of symptom assessment in routine clinical practice. International journal of chronic obstructive pulmonary disease. 8, 461-471 (2013).
  4. Seifert, A. W., et al. Skin shedding and tissue regeneration in African spiny mice (Acomys). Nature. 489, 561-565 (2012).
  5. Vidal, P., Dickson, M. G. Regeneration of the distal phalanx. A case report. Journal of hand surgery. 18, 230-233 (1993).
  6. Potter, P. C., Levine, M. H. Bone Regeneration Following Chronic Suppurative Osteitis of the Distal Phalanx. Annals of surgery. 80, 728-729 (1924).
  7. McKim, L. H. Regeneration of the Distal Phalanx. Canadian Medical Association journal. 26, 549-550 (1932).
  8. Brown, L. M., Rannels, S. R., Rannels, D. E. Implications of post-pneumonectomy compensatory lung growth in pulmonary physiology and disease. Respir Res. 2, 340-347 (2001).
  9. Holder, N. Regeneration and compensatory growth. British medical bulletin. 37, 227-232 (1981).
  10. Hsia, C. C. Lessons from a canine model of compensatory lung growth. Curr Top Dev Biol. 64, 17-32 (2004).
  11. Butler, J. P., et al. Evidence for adult lung growth in humans. N Engl J Med. 367, 244-247 (2012).
  12. Konerding, M. A., et al. Spatial dependence of alveolar angiogenesis in post-pneumonectomy lung growth. Angiogenesis. 15, 23-32 (2012).
  13. Kho, A. T., Liu, K., Visner, G., Martin, T., Boudreault, F. Identification of dedifferentiation and redevelopment phases during postpneumonectomy lung growth. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, 542-554 (2013).
  14. Wang, W., Nguyen, N. M., Guo, J., Longitudinal Woods, J. C. Noninvasive Monitoring of Compensatory Lung Growth in Mice after Pneumonectomy via (3)He and (1)H Magnetic Resonance Imaging. Am J Respir Cell Mol Biol. 49, 697-703 (2013).
  15. Gibney, B. C., et al. Detection of murine post-pneumonectomy lung regeneration by 18FDG PET imaging. EJNMMI research. 2, 48 (2012).
  16. Rawlins, E. L., Perl, A. K. The a'MAZE'ing world of lung-specific transgenic mice. Am J Respir Cell Mol Biol. 46, 269-282 (2012).
  17. Ochs, M., Muhlfeld, C. Quantitative microscopy of the lung: a problem-based approach. Part 1: basic principles of lung stereology. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L15-22 (2013).
  18. Ysasi, A. B., et al. Effect of unilateral diaphragmatic paralysis on postpneumonectomy lung growth. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L439-445 (2013).
  19. Dane, D. M., Yilmaz, C., Estrera, A. S., Hsia, C. C. Separating in vivo mechanical stimuli for postpneumonectomy compensation: physiological assessment. Journal of applied physiology. 114, 99-106 (2013).
  20. Mortola, J. P., Magnante, D., Saetta, M. Expiratory pattern of newborn mammals. Journal of applied physiology. 58, 528-533 (1985).
  21. MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. Journal of applied physiology. 106, 984-987 (2009).

Tags

Tıp Sayı 94 pnömonektomi Telafi Edici Akciğer Büyüme Akciğer Hasarı Akciğer Onarım Fare Cerrahisi Alveolarization
Telafi Akciğer Büyüme Fare Pnömonektomi Modeli
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Liu, S., Cimprich, J., Varisco, B.More

Liu, S., Cimprich, J., Varisco, B. M. Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth. J. Vis. Exp. (94), e52294, doi:10.3791/52294 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter